临床微生物标本的采集与运送

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,临床微生物标本的采集与运送,1.,给临床感染的诊断提供实验室的依据,2.,给临床抗感染治疗提供参考,3.,临床流行病学的调查,微生物检验的一个重要功能就是进行细菌耐药监测，以指导临床合理使用抗生素，并制定合理的经验用药方案。,临床微生物检验的主要功能,但就目前的现状，要实现上述的功能存在很大的问题,1.分离的病原菌的耐药谱不能真正代表病原菌的耐药谱，很多敏感的病原菌没有做培养或没有取到感染部位的标本；,2.目前的分离的病原菌的耐药率是远远高于真正的耐药率，目前统计的病原菌耐药率的利用价值很低，所以在制定经验用药方案时缺乏合理的依据。,解决方案,1.提高病原微生物的送检率，强调在使用抗生素之前采集标本；,2.提高送检标本的质量；,3.提高实验室的检测能力。,期待明年的耐药数据能真正反映我院病原菌的分布和耐药情况，可以用作经验选药的依据。,实验结果的影响因素,检验前因素,检验中因素,检验后因素,常见微生物标本的正确采集,血液和骨髓的采集,;,痰标本的采集,;,咽拭子标本的采集,;,尿液标本的采集,;,脓、创伤感染标本的采集,;,穿刺液标本的采集,;,粪便标本的采集,;,血液和骨髓的采集,采血的时机？,采血的方法？,正确的采血量应该是多少,?,血培养阴/阳性有什么临床意义？,什么情况需要做血培养,有不明原因的发热、体温过低等症状；,怀疑有菌血症或脓毒症如休克、寒颤等;,严重的局部感染；,呼吸频率加快等。,采集血培养标本的最佳时间？,1.,有发热等症状时；,2.,在使用抗生素的情况下；,3.,怀疑有亚急性心内膜炎时。,病例,:,女性患者，怀疑为亚急性心内膜炎入院，入院后当天连续送三次血培养均为阴性，但临床上有明显的脓毒血症症状。微生物室注意到三次血培养的抽血时间为,4pm,6pm,和,9pm,，与主管医生沟通后，建议两小时内连续送三次血培养。结果第二批血培养中有二次为阳性，均培养出草绿色链球菌。,亚急性心内膜炎,怀疑有亚急性心内膜炎或导管相关性菌血症时：,12小时内采集三份血标本,正确的采血方法,采血时的皮肤消毒推荐采用三步消毒法：,1.,首先用,70%,酒精擦拭静脉穿刺部位待,30,秒钟以上。,2.,然后用一根碘酊或碘伏棉签消毒皮肤（,1%,2%,碘酊,30,秒或,10%,碘伏消毒,60,秒），从穿刺点向外以,1.5cm,2cm,直径画圈进行消毒。,3.,最后用,70%,酒精脱碘。,注意对碘过敏的患者，只能用,70%,酒精消毒，消毒,60,秒钟，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。,血养瓶消毒程序：,1, 用,70%,酒精或碘溶液,(,不要使用碘,),消毒血培养瓶橡皮塞子。,2, 酒精作用约,60,秒。,3, 在血液注入血培养瓶之前,用无菌纱布清除橡皮塞子表面剩余的酒精,然后注入血液。,正确的采血量应该是多少,?,血培养应采集多少次,1.推荐24,h,内连续采集三次血培养标本；,一次血培养约可以检出72的血流感染，二次约可检出约93，三次约可检出约97；,2.如果培养48,h,以后为阴性，若临床怀疑为菌血症的应在24,h,内再连续采集三次血培养标本；,3.不主张每天采集血培养标本。,血培养阳,/,阴性的临床意义,1.,培养出革兰阴性菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌等时，多数可以确认为病原菌；,2.,培养出凝固酶阴性葡萄球菌、草绿色链球菌、芽胞杆菌等时，感染？污染？,解决方案,需多次多部位,/,天 采血。,24,小时内连续采集三次血培养标本。,采集血培养标本方面存在的问题,1.采血的量不太准确，很多培养采血量远远超量；,2.采血的时机不够准确，采血时机与体温变化的关系不太熟悉；,3.采集标本的次数和频率不太准确，很多医生喜欢每天采集一次或仅采集一次；,什么情况需要采集骨髓标本,1.,疑为细菌性或真菌性骨髓炎的患者；,2.,疑为伤寒感染的患者；,痰标本的采集,要求采集肺深部的痰液，不要唾液。,一般采用自然咳痰法，但以气管镜采集法标本质量最好。,自然咳痰法 ；,气管镜采集法；,小儿取痰法；,导管尖送检；,下呼吸道标本,所有病人的下呼吸道标本应在采集后立即送至微生物室，并于,1,小时内接种,室温下放置,1h,会降低肺炎链球菌、流感嗜血杆菌的分离率而定植于上呼吸道的非致病菌则会过度生长,下呼吸道标本勿放冰箱或运输时勿置于冰块中,痰涂片检查是否标本合格,痰肉眼观察,:,记录标本外观 唾液、带血、粘液样、水样、脓性的、粘液脓性、脓性粘液样,显微镜检查：取脓性部分涂在玻片上,作革兰染色,.,低倍视野下看涂片，记录,5,个视野,下,平均细胞数。,痰涂片的判定,分类,WBC,鳞状上皮细胞,6 25 25 25 10-25,3 25 25,2 10-25 25,1 25,分类中,1,3,类不做培养，要求重新留取标本；,4,、,5,类为合格标本；,6,类为气管穿刺液时，如未见白细胞，,而鳞状上皮细胞,10/,低倍，亦应重新留取标本。,痰标本采集存在的问题,1.痰标本的合格程度偏低，一般痰标本的合格率不到40%；,2.,标本的转运时间过长，很多标本送到实验室已经超过2小时。,咽拭子标本的采集,标本采集应在用药前，最好在清晨，嘱患者用清水漱口，由检查者将舌向外拉，使悬雍垂向外牵引，将咽拭子超过舌根到达咽后壁或悬雍垂的后侧，在咽部肉眼见明显发红或有假膜处局部反复涂抹棉拭,(,注意不要碰着口腔粘膜,),，放入无菌试管内立即送检。,尿液标本的采集,中段尿采集法,导尿法,膀胱穿刺取尿法,留尿法,尿液标本采集存在的问题,1.随机尿代替中段尿送检，特别是门诊病人；,2.部份标本存在污染情况；,3.部份插管患者采集了尿袋中的尿液；,4.标本中的转运时间过长。,脓、创伤感染标本的采集,首先用无菌生理盐水拭净病灶表面的污染杂菌。对已破溃的脓肿用无菌的棉拭子取深部的脓液和分泌物；未破溃的脓肿消毒皮肤后，用无菌注射器抽取脓液及分泌物立即送检。如深部脓肿在送需氧培养的同时应考虑送厌氧培养，厌氧培养标本应隔绝空气立即送检。当创伤出血时，敷用药物,2h,以内及烧伤在,12h,内不应采集标本，此时获得阳性结果的机会很少。,穿刺液标本的采集,应在患者用药之前或停药,1-2d,后进行穿刺，标本应立即送检或保存于,4,冰箱。脑脊液标本应保温（,25-37,），抽,2ml,直接注入小儿瓶中,同时再另抽,1-2ml,于无菌容器同时送检并立即送检。,粪便标本的采集,自然排便采集法,直肠拭子采集法,有腹泻的病人，在送培养标本的同时可以送细菌涂片检查。抗生素相关性腹泻性腹泻，培养是阴性，但涂片检查却可以看到细菌比例失调，涂片临床意义大于培养。,生殖道标本采集,（一）送检指征,1.,男性泌尿系统表现,尿急、尿频、尿痛,尿道分泌物增多,会阴部疼痛及阴囊疼痛,性功能障碍,泌尿生殖器畸形和缺损,女性泌尿系统表现,分泌物增多及性状异常,尿道口搔痒及脓性分泌物流畅,下腹疼痛,月经失调,阴道出血,外阴搔痒,外阴或阴道疼痛,性功能障碍,（二）标本采集,生殖器官标本包括子宫颈、阴道、前列腺；男性及女性外生殖器的分泌物及经血等。应根据感染的部位和可能的病原体决定用于病原学诊断的标本种类、采集部位和采集方法等。阴道、子宫颈及前列腺等分泌物应由医师采集，收集于无菌试管内送检。,尿道分泌物,1.,女性尿道：患者排尿,1,小时后采集，首先拭去尿道口的渗出物；再用拭子通过阴道，靠着耻骨联合，按摩尿道，采集分泌物；如未获得分泌物，清洗外尿道，用灭菌纱布或棉球擦拭，用泌尿生殖道拭子插入尿道,2,4cm,，旋转拭子,2,秒。,2.,男性尿道：用泌尿生殖道拭子插入尿道腔,2,4cm,，旋转拭子，至少停留,20,秒，而使之容易吸收。,阴道分泌物,擦除过多的分泌物和排出液，用无菌棉拭子采取阴道口内,4,厘米内侧壁或后穹窿处分泌物，如果需要涂片，需再用一个拭子。,男性前列腺,用前列腺按摩法采集前列腺液。清洗尿道口，冲洗尿道膀胱，从肛门用手指按摩前列腺，使前列腺液溢出，用无菌容器收集。无肉眼可见脓液时，可用灭菌拭子轻轻伸入前尿道内，旋转拭子采集标本。,注意事项,1.,生殖器是开放性器官，标本采集过程中应严格遵,循无菌操作规程以减少杂菌污染。,2.,由于阴道正常菌群的存在而使细菌的分离鉴定,受到干扰，所以在采集女性生殖道标本时应注意尽,量减少或避免正常菌群的污染。,3.,疑有宫腔感染，如遇产妇需行剖宫产，待胎儿,娩出后取宫腔分泌物，并同时取婴儿耳拭子一同送,检。,4.,沙眼衣原体和病毒均在宿主细胞内繁殖，取材,时拭子应在病变部位（移行上皮处稍内）停留十几,秒钟，并采集尽可能多的上皮细胞。,5.,生殖道感染厌氧菌也较多见，疑有厌氧菌感染时，标本采集和运送应避免与氧气接触，最佳方法是床边采样，直接接种至厌氧装置内。,6.,淋病奈瑟菌检查时，取材的深度一定要够，因为淋球菌好发于柱状上皮细胞而不是复层鳞状上皮细胞。不论男女尿道及子宫颈均需用拭子插入尿道及子宫颈,3cm,深转动并停留,10-30s,取样送检。,7.,淋病奈瑟菌抵抗力低，对外环境变化颇为敏感，对寒冷和干燥抵抗力很弱。因此，为了保证培养有足够的成功率，取材后要尽快送检，立即接种，标本离体时间越短越好。,微生物培养还应注意的问题,1.培养阳性的分离菌不一定是真的病原菌，特别从有菌部位来的，如痰标本；,2.无菌部位培养出来的病原菌应当连续监测，若病原菌发生改变或治疗效果不佳时应考虑更换抗生素；,3.细菌的耐药性在治疗过程中可以会发生改变，要注意观察是否有耐药性的变迁。,医院感染的防治,医院感染,(nosocomial infections),：也称为医院内感染，是指在患者在住院期间获得的感染。,医院感染的基本条件：感染源、传播途径和易感人群。,减少医院感染的发生的常见措施：,1.,勤洗手；,2.,注意隔离感染患者；,3.,物品和环境的消毒；,如果一个病房内连续出现多起患者感染相同或相似病原微生物时，应高度注意是否有物品或环境污染,。,谢谢！,