shmt的电泳制备

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,项目四：,shmt,的电泳制备,任务,1.shmt,的电泳制备方案制定,SHMT,的分离制备,原理,：,利用溶液中带有不同量的电荷的阳离子或阴离子，在外加电场中以不同的迁移速度向电极移动，而达到分离目的的分析方法,。,电泳方案,：,聚丙烯酰胺凝胶电泳,操作准备,样品处理,：超声波破碎大肠杆菌。,管型盘状电泳,电泳槽,：盘状电泳槽国内有很多单位生产，也可因地制宜，自己制造，槽大多为圆筒形,(,图,9),，也有长方形的，上、下槽分别接铂金丝电极，要注意电极到各胶管的距离相等，以保持各凝胶管的电场一致。,电泳仪,：国内生产的型号很多，如北京六一仪器厂的,DYY-,型，电压在,0,600v,内任意调节，电流输出,0,100mA,，这类电泳仪比较恰当。,玻璃管：,选择粗细均一的圆玻璃管，内径,5,7mm,左右，管长,70,100mm,。管口用金刚砂磨平，电泳管的清洁很重要，需浸入,10%,重铬酸盐,-,硫酸溶液中清洗，再用蒸馏水彻底淋洗干净，在管中滴入丙酮而后干燥备用。,聚胶架：,普通试管架式样，有机玻璃制成，架的孔洞内装一乳胶管，要求乳胶管孔内径与玻璃管外径相同或略小。,微量注射器或微量进样器,：加样时，由于需样品量极小，作定量分析时要求样品量准确，因此最好用,25.50,或,100l,的微量进样器加样，也可用,50,或,100l,加液器代用。,普通注射器,：主要用于灌胶和剥胶，,20,30ml,，附加,10,号不锈钢长针头,(,约,10cm,长,),。,其他,：日光台灯，,PH,计，恒温水浴，烧杯，容量瓶，量筒，试管，漏斗，滤纸，电炉，电子天平等。,试剂,甲叉双丙烯酰胺,(,Bis,),；丙烯酰胺,(,Acr,),；四甲基乙二胺,(TEMED),；过硫酸铵；核黄素,(VB2),；三羟甲基氨基甲烷,(,Tris,),；蔗糖；甘氨酸；盐酸等。,分离胶的制备,浓缩胶的制备,待分离样品的准备,加样,电泳,脱色,染色,操作方法,结束！,