人教选修3《动物细胞培养和核移植技术》ppt课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2.2,动物细胞工程,2.2.1,动物细胞培养和核移植技术,一、动物细胞培养,动物细胞培养（,animal cell culture,）就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成,单个细胞,，然后，放在适宜的培养基中让这些细胞,生长,和,增值,。,那么，动物细胞培养的过程是怎样的呢？,培养时又需要哪些条件呢？,一、动物细胞培养,动物细胞培养的过程,取组织块,剪碎组织,用酶，处理组织,细胞悬浮液,原代培养,传代培养,胰蛋白酶或胶原蛋白酶，使之分散成单个细胞,用培养液稀释制成细胞悬浮液,一、动物细胞培养,动物细胞培养的过程,取样组织,剪碎组织,酶处理组织,制成悬浮液,原代培养,定义：动物组织经酶解消化后的初次培养。,细胞贴壁,：悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上。,接触抑制,：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象,一、动物细胞培养,动物细胞培养的过程,取样组织,剪碎组织,酶处理组织,制成悬浮液,原代培养,传代培养,贴壁细胞重新用胰蛋白酶处理，然后,分瓶培养,，让细胞继续增殖。,一般传至,10,代后就不易传下去了。,一般来说，,10-50,代时增殖逐渐减慢，以至于完全停止，这部分细胞核型可能会发生变化。,目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为,10,代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。,如若继续传代培养，少数细胞由于发生突变获得不死性，朝着癌细胞的方向发展。,一、动物细胞培养,动物细胞培养的条件,无菌无毒的环境,营养,温度和,pH,气体环境,一、动物细胞培养,动物细胞培养的条件,无菌无毒的环境,首先，保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境，即对培养液、培养用具进行无菌处理。,通常在培养液中添加一定量的抗生素，防止污染。,此外，定期更换培养液，清除代谢产物，防止有害代谢产物积累对细胞自身造成危害。,一、动物细胞培养,动物细胞培养的条件,无菌无毒的环境,营养,细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同,合成培养基（糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等）按所需种类和数量严格配置，并加血清、血浆等天然成分。,一、动物细胞培养,动物细胞培养的条件,无菌无毒的环境,营养,温度和,pH,一般与动物体温相近,36.5 0.5,为宜,多数细胞生存的,pH,为,7.2-7.4,一、动物细胞培养,动物细胞培养的条件,无菌无毒的环境,营养,温度和,pH,气体环境,O,2,和,CO,2,，维持细胞代谢和,pH,混合气体培养箱,95%,空气加,5%CO,2,一、动物细胞培养,动物细胞培养技术的应用,提取免疫活性物质，病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等,基因工程的受体细胞,检测有毒物质，判断某物质的毒性,培养正常细胞或病变细胞，用于生理、病理、药理研究,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,植物细胞,动物细胞,植物细胞全能性,组织培养,植物体,？,？,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,体细胞核移植（,nuclear transfer,）是将动物的一个细胞的,细胞核,，移入一个已经去掉细胞核的,卵母细胞,中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。,哺乳动物核移植,胚胎细胞核移植（容易）,体细胞核移植（较难）,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,体细胞核移植的过程,详见教材,48,页图,2-21,体细胞核移植过程流程图,1,、为何要对,M,中期的次级卵母细胞去核？,2,、为何将供体细胞而不是供体细胞的核注入去核卵母细胞？,3,、诱导两细胞融合的方法是什么？,4,、激活受体细胞的方法是什么？,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,体细胞核移植技术的应用前景,畜牧业,医药卫生,其他领域,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,体细胞核移植技术的应用前景,畜牧业,加速家畜遗传改良，促进优良畜群繁育,保护濒危物种，增加濒危物种存活数量,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,体细胞核移植技术的应用前景,畜牧业,医药卫生,转基因克隆动物可作为生物反应器，生产要用蛋白；,转基因克隆动物细胞、组织、器官可作为异种移植的供体；,人的核移植胚胎干细胞经诱导分化，形成相应的组织、器官，用于组织器官移植,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,体细胞核移植技术的应用前景,畜牧业,医药卫生,其他领域,克隆动物和克隆细胞，可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程；,用克隆动物做疾病模型，能使人们更好的追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病。,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,体细胞核移植技术存在的问题,成功率低,产下的克隆动物占移植克隆胚胎的比率平均不到,10%,。,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,体细胞核移植技术存在的问题,成功率低,技术环节有待改进,健康问题,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,体细胞核移植技术存在的问题,成功率低,技术环节有待改进,健康问题,遗传和生理缺陷,体型过大、异常肥胖、发育困难、脏器缺陷、免疫失调等,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,体细胞核移植技术存在的问题,成功率低,技术环节有待改进,健康问题,遗传和生理缺陷,安全性问题存在争议,