单克隆抗体课件

,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,1,单克隆抗体,生物导弹,3,教学内容,单克隆抗体的发现,单克隆抗体的概念,单克隆抗体的制备,单克隆抗体的应用,4,多克隆抗体的概念,5,传统,抗血清的交叉反,应,专一性反应,沒有反應,交叉反应,+,-,+,1 2 3,Ag A,x y z,Ag B,1,2 0,Ag A,1,2,3,1,2,3,1,2,3,6,单克隆抗体技术发现以及原理,1975,年,Kohler,和,Milstein,首先报道，用细胞杂交技术，使经绵羊红细胞,(SRBC),免疫的小鼠的脾细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合，并由此创建了第一个,B,细胞杂交瘤细胞株，获得了,抗,SRBC,的单克隆抗体,。这是免疫学，乃至医学史上的一个里程碑。,概述,2002,年,发明单克隆抗体技术,Nobel Prize in 1984,发明单克隆抗体技术,Nobel Prize in 1984,2002,年,8,单克隆抗体的相关概念,杂交细胞：,在诱导物的作用下同一细胞或不同细胞间的融合，融合的细胞具有双亲本细胞的染色体和全部或部分特性。,杂交瘤细胞：,B,淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后产生的杂交细胞。,单克隆抗体,单克隆抗体是将,产生抗体的细胞,与,骨髓瘤细胞,融合，通过,有限稀释法,及,克隆化,使杂交瘤细胞成为纯一的,单克隆细胞系,而生产的。,由于这种抗体是针对,一个抗原决定簇,的抗体，又是单一的,B,淋巴细胞克隆产生的，因此称为单克隆抗体。它是,结构和特异性完全相同的高纯度抗体,。,抗,体,-,a,-,b,-,c,-,d,-,a -b -c -d,抗原決定基,BALB/c,a,b,b,c,d,传统抗体,(抗血清) 是所有抗,体,的混和,脾,脏产生各种,B,細胞,免,疫前要先,把抗原作,成乳,剂,免,疫,抗原,采,血,后,可得,传统,抗血清,已建立之小鼠,骨髓癌,细,胞株,由脾,脏,收集,B,細胞,抗原通常有多,个,抗原決定基,免,疫,后,的脾,脏,约,在,两,月內,注射五到八次,Ag X,单克隆抗体的制备过程,TK,-,HGPRT,-,-,d,细,胞融合,-,a,-,b,-,c,-,d,Ag,X,Ag,X,ELISA,HAT,筛选,PEG Cell fusion,Hybridoma cells,融合瘤,细,胞,（,Subcloning,）,(,确,定只有一,种细,胞),d,d,a,b,c,d,a,b,c,d,+,+,+,+,+,+,+,-,X,-,d,-,c,-,b,-,a,+,-,-,d,NS-1,骨,髓,癌,细,胞,B cell,脾,细,胞,分株培,养筛选,筛选,单,抗,传统抗体,(抗血清),试验专,一性,对,抗,原,的,反,应,无,法,分,辨,完,全,不,同,d,旧,有抗原,d,新的抗原,单克隆抗体的制备过程,单克隆抗体制备过程,一、抗原与动物免疫,二、细胞融合,三、,杂交瘤细胞的筛选,四、特异抗体的筛选,五、单克隆抗体的大量制备,先免后合，两筛两得,14,优点,和常规抗血清相比,1.,特异性强,：单克隆抗体是针对抗原分子表面抗原决定簇的，有人称为,“,单特异性,”,。它是研究生物大分子和细胞表面细微结构以及诊断治疗疾病的有力工具。,2.,可大量生产，容易标准化,：一旦获得,1,株杂交瘤细胞株，就可以无限制地反复制备出相同特异性的单克隆抗体。由于来自同一株细胞，很容易标准化。,3.,用不纯的抗原，可以制备出纯的单克隆抗体。用这种抗体又可以,提纯抗原,。,因为具有上述特点，单克隆抗体应用,范围很广，几乎渗透到生物医学的每一个领域,，在生物医学研究，临床医学，军事医学和工业生产上都有重要的实用意义。,抗,体,是,对,其抗原有,极强专,一性 的,魔,弹,或 巡弋,飞弹,研 究,以,免,疫,转,印法,检测,特定抗原,，,蛋白质的提纯,检 验,以,ELISA,侦测,特定,病原体,治 疗,以毒素,连结,抗体攻,击,病,变,細胞,，,肿瘤的导向治疗,，放射免疫显像技术,FDA,批准了,46,种单克隆抗体药物上市,2002,年,29,亿美元,2011,年,500,亿美元,2015,年,680,亿美元,思考题,1.,单克隆抗体是来自谁？如果直接给人注射，会有什么反应？,2.,查找出至少,3,种单克隆抗体药物及其适应症？,参考资料,