《动物细胞融合与单克隆抗体》

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,生物 选修,3,现代生物科技专题,1,专题,2,细胞工程,2,2.2.2,动物细胞融合与单克隆抗体,一、动物细胞融合：,2,、原理：,膜具有一定的流动性,1,、概念：,选修,3P.52,动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,3,诱导方式,物理法,化学法,生物法：,灭活的病毒,仙台病毒,紫外线,丧失感染性,（不感染细胞）,保留融合活性,（诱导细胞融合）,3,、过程：,（与植物细胞融合的基本原理相同）,4,细胞完成融合的标志：,细胞核融合为一个核,5,4,、动物细胞融合与植物细胞杂交的主要区别：,促融剂不同：,植物,：主要是聚乙二醇（,PEG）,动物,：除,PEG,外，还有灭活的病毒,植物细胞融合过程中，首先要除去细胞壁，制备原生质体；而动物细胞无细胞壁，可直接诱导融合,见,步步高,P.216,表,6,5,、动物细胞融合的应用：,制备单克隆抗体,7,主要用于制备,单克隆抗体,获得杂种植株,用途,物理、化学方法,（同左）,灭活的病毒,物理（离心、振动,、,电刺激）,化学（聚乙二醇）,诱导方法,使细胞分散后诱,导细胞融合,去除细胞壁后诱,导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性,、,植物细胞全能性,原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物、动物细胞融合的比较,8,二、单克隆抗体：,其由何种细胞产生？,主要分布在哪里？,如何得到抗体？,提问,？,9,抗原,动物体内,抗体,刺激,效应,B,细胞,不仅产量低、纯度低而且制备的抗体特异性差，灵敏度低,抗原不纯,抗体不纯,筛选单一的效应,B,细胞,（但不能在体外大量增殖产生大量的抗体）,抗原,动物体内,抗体,刺激,效应,B,细胞,10,1,、单克隆抗体的制备：,获得杂交瘤细胞,动物细胞培养,提取单克隆抗体,将抗原注入小鼠体内获得效应,B,淋巴细胞,效应,B,淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,筛选能够产生所需抗体的细胞群,再在培养液或小鼠腹腔中培养,从培养液或小鼠腹水中提取,11,B BB,B,瘤,瘤瘤 瘤,细胞融合后培养液中有几种细胞,筛选杂种细胞,已知细胞合成,DNA,有,D,和,S,两条途径，其中,D,途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条,DNA,合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有,S,途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加,PEG,促融，获得杂种细胞。,12,在整个制备的过程中要经过几次筛选,？,筛选得到杂交瘤细胞，,筛选先在多孔培养板上，在每孔只有,一个杂交瘤细胞,下培养筛选出特异抗体的细胞群,13,2、单克隆抗体的应用,:,应用,:,疾病的诊断、治疗和预防。,优点,:,特异性强、灵敏度高。,实例,:,各种癌症、肝炎病毒、,SARS,病毒、细菌 及血吸虫等数百种疾病的诊断；,在疾病治疗方面，单克隆抗体犹如人体卫士,能识别,“,自己,”,与,“,异己,”,，一旦发现 致病因素便与之结合将其杀死。,若在单抗上带上抗癌药物制成,“,生物导弹,”,，将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。,14,