第9章-化脓性球菌

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,细菌学各论,刘斌波,武汉大学基础医学院微生物学教研室,9/12/2024,1,细菌学各论怎样学？,生物学性状,内,容,致病性,免疫性,微生物学检查方法,防治原则,治疗方面,预防方面,标本,涂片染色镜检,分离培养,鉴定,致病物质,所致疾病,致病机制,免疫的特点,形态与染色,培养和生化反应,抗原构造,分类或分型,抵抗力,9/12/2024,2,第9章,化 脓 性 球 菌,9/12/2024,3,概 述,按革兰染色分二类：,G,：葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌等,G,：脑膜炎双球菌、淋球菌等,其中对人类具有致病性球菌,病原性球菌,9/12/2024,4,共性：,形态：球形或类球形,结构：无鞭毛，无芽胞,致病性：,主要引起化脓性炎症化脓性细菌（pyogenic bacteria),对药物的敏感性：对青霉素、磺胺 类药物敏感,9/12/2024,5,第一节,葡萄球菌属,（Staphylococcus）,9/12/2024,6,一、生物学性状,（一）形态与染色：,球形，多呈葡萄串状排列。无鞭毛及芽孢。G+,（二）培养特性：,营养要求不高,需氧或兼性厌氧,温度37,pH7.4,菌落形态：中等大小，光滑型菌落，产生脂溶性色素。,在血琼脂平板上形成溶血环,（三）生化反应,致病性葡萄球菌能发酵甘露醇,9/12/2024,7,金黄色葡萄球菌纯培养镜下形态（革兰染色）,9/12/2024,8,9/12/2024,9,9/12/2024,10,9/12/2024,11,（四）抗原构造,9/12/2024,12,1蛋白质抗原：主要有,葡萄球菌蛋白A,（Staphlococcus Protein A；,SPA,）,SPA的概念,即葡萄球菌蛋白A，是金葡菌细胞壁表面的蛋白质抗原，可与多种哺乳动物IgG FC段发生非特异性结合，此点为SPA协同凝集试验以及SPA具有抗吞噬等生物学效应的原理的基础。,9/12/2024,13,协同凝集试验,含A蛋白,的金葡菌,结合IgG,的金葡菌,IgG,Ag,9/12/2024,14,生物学效应：,A抗吞噬作用,Fab,Fc,SPA,IgG,Fc receptor,PHAGOCYTE,BACTERIUM,9/12/2024,15,B促有丝分裂作用：SPA为人的T、B,细胞激活剂T、B细胞增殖,C诱发变态反应：使嗜碱性粒细胞释放组织胺,2多糖抗原,为半抗原，具有群的特异性，故可用此抗原进行分群,9/12/2024,16,（五）分类：方法很多,1,根据色素、生化反应和致病性：,金黄色葡萄球菌,（,S.aureus,）：金黄色,表皮葡萄球菌,（,S.epidermidis,）：白色,腐生葡萄球菌,（,S.saprophyticus,）：柠檬色,2根据凝固酶：,凝固酶阳性菌株,凝固酶阴性菌株,9/12/2024,17,(六）抵抗力,强于其他无芽胞菌,干燥脓汁、痰液中存活,2-3,个月,加热,601h,或,8030min,耐盐性强,(,能在,10,15%NaCl,培养基上生长,),对碱性染料敏感,对多数抗生素敏感，但易产生耐药性,9/12/2024,18,二、致病性,（一）致病物质：主要为毒素和酶,1,凝固酶（coagulase）：,致病性葡萄球菌,产生，非致病性葡萄球菌不产生。有两种：,结合凝固酶：结合于菌体表面使菌凝聚,游离凝固酶：纤维蛋白元纤维蛋白血浆,凝固,作用：抗吞噬,保护细菌,使病灶局限,易形成血栓,9/12/2024,19,2葡萄球菌溶素（staphlolysin）,由致病性葡萄球菌产生,分类：按Ag性不同分为、五种。,作用：损伤细胞膜：如RBC，WBC，血小板，,肝细胞等。,3杀白细胞素（leukocidin）,作用：只攻击中性粒细胞和巨噬细胞，主要作用,于细胞膜。,4肠毒素（enterotoxin）：,约1/3的金葡菌能产生肠毒素，为外毒素,特点：耐热：100 30，耐蛋白酶,作用：引起食物中毒：进食含肠毒素食物后16h潜伏期，出现恶心、呕吐、上腹痛、腹泻等症状。呕吐最为突出。大多数病人于12d内可自行恢复，预后良好。,9/12/2024,20,5.表皮剥脱毒素（exfoliative toxin）,表皮溶解毒素,特点：为蛋白质，具有Ag性类毒素,引起剥脱性皮炎（患者皮肤呈弥漫性,红斑和水疱继之表皮上层大片脱落）,6.毒性休克综合征毒素-1（toxic shock syndrome toxin 1,TSST-1),特点：起病急，高热，昏厥，休克，多器,官衰竭,9/12/2024,21,Pathogenesis of staphylococcal infections,Stye:,麦粒肿,Carbuncle:,痈,Impetigo：脓疱疮,9/12/2024,22,（二）所致疾病,1侵袭性疾病：,局部化脓性感染 特点： 全身感染,2毒素性疾病：,食物中毒：特点：,假膜性肠炎：菌群失调,烫伤样皮肤综合征,毒素休克综合征,9/12/2024,23,9/12/2024,24,9/12/2024,25,三、微生物学检查法,1取材：根据不同疾病取不同材料,2直接塗片镜检：革兰染色,3,Differential Tests,：,致病性葡萄球菌的鉴别要点：,葡萄球菌肠毒素的检查,（动物接种；免疫学方法（ELISA）；PCR等）,9/12/2024,26,致病性葡萄球菌的鉴别要点：,性状 金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌,菌落色素,金黄色 白色 白色或柠檬色,发酵甘露醇,+ - -,凝固酶,+ - -,溶素,+ - -,耐热核酸酶 + - -,SPA + - -,致病性,+ - -,9/12/2024,27,小猫试验,总结 微生物检查法,标本,脓汁，血液，剩余食物，呕吐物等,分离培养,血浆凝固酶,发酵甘露醇,耐热核酸酶,直接涂片镜检,革兰阳性葡萄球菌,生长现象,色素，溶血，,生化反应,毒素检查,9/12/2024,28,防治原则,防,注意,消毒隔离,注意,个人卫生,防止,医源性感染,防止,耐药性产生,治,抗菌素,药敏试验,自身菌苗疗法,9/12/2024,29,第二节,链球菌属,(streptococcus),9/12/2024,30,一、生物学性状,（一）形态与染色：,球形，成链状排列,（二）培养特性：,1营养要求较高：血液，血清,2在血琼脂培养基上：细小菌落,3在液体培养基中：沉淀生长,9/12/2024,31,9/12/2024,32,9/12/2024,33,9/12/2024,34,（三）分类,1根据溶血现象分为：甲、乙、丙三个型,2根据抗原结构分类：,核蛋白Ag（P-Ag）：无特异性,多糖Ag（C-Ag）：有群特异性，分为A. B20个群，对人致病主要在A群,表面蛋白Ag：表面Ag有型的特异性，主要有M，R，T，S四种：如A群约100个型,9/12/2024,35,Classsification:,Hemolytic activity:,-hemolytic streptococcus:,incomplete hemolysis, green zone around colonies,*,opportunistic pathogens,-hemolytic/pyogenic streptococcus:,complete hemolysis, clear zone around colonies,*,major human pathogens,-streptococcus:,no hemolyzation, no pathogenicity,9/12/2024,36,二、致病性,（一）致病物质：,主要介绍A群链球菌,依靠外毒素和酶,1链球菌溶素（streptolysis）,两种： slo和sls,slo：特点：对O,2,敏感；有Ag性；对机体细胞有毒性作用（如WBC）：引起WBC胞内内溶酶的释放，导致细胞死亡,sls：特点：对O,2,稳定；无Ag性,2致热外毒素（Pyrogenic exotoxin）：,又称红疹毒素或猩红热毒素：发热，全身红斑,3透明质酸酶：,溶解细胞间质的透明质酸 使病菌扩散扩散因子,9/12/2024,37,4链激酶（streptokinase；SK）,使血液中纤维蛋白酶元纤维蛋白酶，溶解纤维蛋白又称溶纤维蛋白酶,5链道酶（streptodornase；SD）,降解脓汁中具有高度粘稠性的DNA-又称,链球菌DNA酶,6M蛋白：,作用：抗吞噬,与心肌、肾小球基底膜有共同抗原,超敏反应性疾病,7F蛋白（protein F）：,作用：粘附于上皮,细胞，与致病性有关,9/12/2024,38,（二）所致疾病,1急性化脓性感染,皮肤和皮下组织炎症,特点:易于扩散,呼吸道感染,2中毒性疾病：,猩红热,3超敏反应性疾病：,急性肾小球肾炎,风湿热,9/12/2024,39,网状淋巴结炎丹毒,管状淋,巴管炎,9/12/2024,40,呼吸道感染引起,小儿猩红热,:临床特征为发热、全身弥漫性皮疹和疹退后的明显脱屑，病后可获得较强的免疫力。,猩红热皮疹,9/12/2024,41,A.急性肾小球肾炎:,多见于儿童和青少年，大多数由A群M12型链球菌引起。临床表现为蛋白尿、浮肿和高血压。,B.风湿热:,主要在咽炎后有可能发生，由A族链球菌的多种型别引起。临床表现以关节炎、心肌炎为主。,致病机理:,、 超敏反应,9/12/2024,42,三、免疫性：,1抗M蛋白的抗体,2各型间无交叉免疫，,型别多反复感染,3链球菌致热外毒素抗体（SPE抗体）,终身免疫，但无交叉免疫,4. ASO试验（antistreptolysin O test),用SLO检测血清中的ASO抗体，常用于风湿热、急性肾小球肾炎的诊断,9/12/2024,43,四、微生物学检查法,直接涂片镜检,标本,革兰阳性链球菌,分离培养,脓汁，血液，咽喉拭子,与金葡菌的鉴别,与肺炎链球菌的鉴别,9/12/2024,44,五、防治原则,积极治疗儿童链球菌感染，,防止风湿热或急性肾小球肾炎等并发症的发生。,选用青霉素，对青霉素过敏者可改用红霉素林可霉素,。,疗程不应少于10天。,9/12/2024,45,第三节,肺炎球菌,（Pneumococcus）,是细菌性肺炎的主要病原菌,9/12/2024,46,一、生物学性状,（一）形态与染色：,G,，呈双排列，矛尖状，矛尖向外，宽 端相对，有毒株有荚膜，人工培养后消失。,（二）培养特性：,营养要求高，在血培养基上草绿色溶血环,（三）抗原结构：,荚膜多糖抗原、C多糖、M蛋白,CRP（C reaction protein,C反应蛋白):,肺炎球菌的C多糖可与人血清中,球蛋白非特异性结合，发生沉淀反应，所以又称该蛋白为CRP。CRP不是抗体，正常人血清中含量低，急性炎症或风湿热时，CRP含量升高，可用于风湿热的辅助诊断。,9/12/2024,47,9/12/2024,48,9/12/2024,49,9/12/2024,50,二、致病性：,（一）致病物质：主要为荚膜,（二）所致疾病：,主要引起人类的大叶性肺炎,三、与甲链的鉴别要点,相同点：,G,球菌；草绿色溶血环,不同点：见下表,9/12/2024,51,肺炎双球菌,甲型溶血性链球菌,排列,成双,链状,菌落,脐状（因产生自溶酶）,无脐状,试验,发酵菊糖 +,-,胆汁溶菌试验 +,-,奥普托欣试验 抑菌圈直径20mm,20mm,9/12/2024,52,第 四 节,奈 瑟 菌 属,（Neisseria）,是一群G,球菌，常呈双排列,该菌属中只有脑膜炎双球菌和淋球菌对人类,致病性,9/12/2024,53,脑膜炎球菌,（meningococcus）,引起流行性脑脊髓膜炎,9/12/2024,54,一、生物学性状,（一）形态与染色,G,球菌，多呈双排列。,在患者脑脊液中，多位于白细胞内,呈肾形，两凹面相对,（二）培养特性,营养要求高,常用培养基：巧克力血琼脂培养基,初次分离培养：需供给5-10%CO,2,9/12/2024,55,9/12/2024,56,9/12/2024,57,9/12/2024,58,9/12/2024,59,（三）抵抗力,怕冷怕热，怕干燥，怕阳光，易产生,自溶酶,二、致病性,（一）致病物质,1菌毛,2荚膜,3内毒素：为主要致病物质,9/12/2024,60,传染源,带菌者,健康人鼻咽部,上呼吸道,症状,病人,生长繁殖（1-4天）,脑双菌进入血流, 畏寒、发热、恶心、呕吐,菌血症/败血症：,通过 皮肤瘀斑等症,血脑屏障,到达,脑脊髓膜,流行性脑脊髓膜炎 （流脑）,头痛，喷射性呕吐，发热，颈项强直等,（为颅内压所致）,（二）致病经过及所致疾病,9/12/2024,61,小结:,a.人类自然免疫力较强，感染后,只有2-3%发病,b.可为各种钝挫型,c.多见于儿童,d.病后免疫力较强，一般不会患第2次,e.致病因素：主要是内毒素,9/12/2024,62,儿童和成人的脑膜炎症状,9/12/2024,63,三.微生物学检查法,标本,分离培养与鉴定,脑脊液、血液、出血点渗出液、鼻咽拭,保暖、保湿、立即送检，培养基预温,直接涂片镜检,中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌，可作出初步诊断。,巧克力（色）培养基,快速诊断,对流免疫电泳，SPA协同凝集试验,9/12/2024,64,四.防治原则,综合性预防措施,隔离病人、检查带菌者、预防性投药，室内通风,流脑疫苗：,6个月-2岁接种两次，间隔1月,A群脑膜炎球菌多糖抗原。制备疫苗,青霉素、磺胺大剂量治疗,脑膜炎接种,9/12/2024,65,淋球菌,（gonococcus）,淋球菌是引起淋病的病原菌，主要引起人类泌尿生殖系统粘膜的急性或慢性化脓性感染。,淋病是一种性传播疾病，目前是我国发病率最高的性病。,9/12/2024,66,一、生物学性状,G,球菌，常呈双排列，新分离菌株有荚 膜，有菌毛。,初次分离培养时须供给5%CO,2,，营养要求高，常用培养基为巧克力色血琼脂培养基。,抵抗力很低，与脑膜炎双球菌相似,9/12/2024,67,白细胞内淋球菌,9/12/2024,68,淋球菌电镜观察,9/12/2024,69,二、致病性,（一）致病物质,1菌毛：粘附作用,2外膜蛋白：,P插入中性粒细胞膜上膜损伤,P参与淋球菌与宿主细胞间的粘附,作用,P阻抑杀菌抗体的活性,3IgA1蛋白酶：破坏SIgA,9/12/2024,70,（二）所致疾病,1成人淋病,男性: 初期为前尿道炎 尿频、尿痛、,女性: 初期为尿道炎与宫颈炎 尿道流脓,进一步扩散到生殖系统,男性：前列腺炎等,女性：盆腔炎等不孕,药物：青霉素G、氨苄西林、红霉素等,9/12/2024,71,9/12/2024,72,2新生儿淋菌性眼结膜炎：,1硝酸银滴眼,9/12/2024,73,三.微生物学检查法,标本,用无菌棉拭沾取,直接涂片镜检,在中性粒细胞内发现有革兰阴性双球菌,时，有诊断价值,分离培养与鉴定,标本采集后应注意保暖保湿，立即送检接种,子宫颈口表面分泌物,泌尿生殖道脓性分泌物,巧克力色平板，5-10% 二氧化碳,9/12/2024,74,四.防治原则,防,开展防治性病的知识教育,防止不正当的两性关系,治,抗生素,首选壮观霉素（淋必治）,新生儿1%硝酸银滴眼。,9/12/2024,75,