微生物培养标本采集与送检

,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,微生物培养标本采集与送检,检验科的工作就像法医，法医是为公安提供,证据，而检验科是为临床医生诊断、治疗提,供依据。数据直接影响医生的诊断，所以检,验结果是否准确的重要性不言而喻。,如何看待微生物检验工作,俗话说“巧妇难为无米之炊”，如果送检的标本本身就有问题，再先进的设备、再高的检测技术，结果可谓“差之毫厘，谬之千里”。由此可见，检验结果的质量控制,非常地重要,。,质量,是检验科之本，,质量控制,目的就是要有一个质量可靠的检验结果,质量控制,实验室质量控制环节,标本采集、,运送,标本合格判定,培养基、试剂,仪器设备,危急值,报告,分析前,分析中,分析后,实验室不同阶段误差发生率,定义,:,按时间顺序，从临床医生开出检验医嘱开始，到检验分析过程开始时终止的步骤，包括检验要求、患者准备、原始样本采集、运送到实验室并在实验室内部的传输。,分析前质量,控制,是最易出现问题、也是最难控制的环节。,标本采集,是分析前质量控制最关键的环节！,何谓分析前程序？,1.,早期采集（使用抗菌药物之前）,2.,无菌采集,3.,及时送检,4.,容器无菌无消毒剂,5.,标明来源和检验目的,采集的基本原则,临床标本的分类,带菌体液,无菌体液,痰液,血液,咽拭子,脑脊液,粪便,胸腹水、胆汁,其他类别,其他类别,血液属于天然的无菌体液,，血流感染的细菌种类往往比较单一，血培养结果对于明确诊断意义重大。同时，血培养的检测结果受标本采集及运送干扰的影响较小，更容易进行质量控制。,痰液、尿液、粪便等标本属于非无菌标本，有较多的正常菌群生长，且检测结果受采集方法，运送方式等多方面的因素影响，其检测结果对明确诊断的意义相对较小。,无菌体液是最有意义的病原学检测标本,各类标本的区别,我院标本送检情况,近两年标本错误率,时间,14,年下,15,年全年,16,年上,合,计,错误率,数量,（涂片,+,培养）,12018,例,30439,例,16774,例,59231,例,原因,标本类型：标本与条码不符,223,例,0.376%,其它：非标准痰液、无条码、标本污染、无标本,150,例,0.253%,1.,手卫生,（洗手或卫生手消毒）,2,.,皮肤消毒,程序 严格执行以下,三步法,:,（1）用75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上；,（2）然后用1%-2%碘酊作用30秒或10%碘伏作用60秒，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达3cm以上；,（3）最后用75%酒精脱碘，待酒精挥发干燥后采血。,新生儿及对碘过敏的患者，只能用75%酒精消毒60s，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。,1.,血培养标本采集：,2.,培养瓶消毒,程序：,70%,乙醇,擦拭血培养瓶橡皮塞，作用,60,秒,后用,无菌,棉签清除塞子表面乙醇,3,、用注射器无菌穿刺取血后直接注入血培养瓶（切勿换针头）或严格按厂家推荐的方法采血，轻轻颠倒混匀防止血液凝固，立即送检。,4、成人每套（2瓶）应采血,16-20ml,，不同部位采集23套，儿童患者因为血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于成人，对于婴幼儿患者推荐的采血量每瓶不少于,2ml,采血量不超过体重的,1%,，由于婴幼儿患者厌氧菌所致菌血症比较罕见，婴幼儿血培养可以仅用需氧瓶。,1、严格无菌操作避免污染,2、从两侧上肢静脉采血，“双瓶双侧”采血培养。,至少做到“双侧双瓶”。必要时从下肢静脉采血做,第三套血培养。,采血注意事项：,3,、,切忌在静脉点滴处采血，不宜从静脉导管或埋置针中采血,4,、,采血后先注入,厌氧瓶,后注入,需氧瓶,，当采血量不能满足推荐，应先分配,需氧瓶,再,厌氧瓶,，因为菌血症中专性需氧菌比专性厌氧菌高。,采血注意事项：,采血后应该立即送检,如不能,立即,送检，可,室温,保存，,切勿冷藏,。若冷藏有些苛养菌如流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟氏菌、淋球菌等遇冷易死亡；若环境温度高于,35,，瓶内细菌繁殖后浓度过高时，感应细菌生长的底物被耗尽，放入培养仪后因为不再产生生长变化而出现,假阴性,。,3.,标本运送及保存：,什么时候采血最好？,为什么要采集足够的血液？,为什么每套标本中应包含厌氧培养？,为什么要求多次采血？,思考的问题,尽可能在患者寒战开始时、发热高峰前,1h,内采血,在患者接受抗菌药物治疗前采血,如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养,什么时候采血最好？,为什么要采集足够的血液？,采血量是影响,灵敏度,最关键因素,，在一项研究中，成,人血培养采血量,2-30ml,，检出率与采血量呈比例增长，而且成人只做,1,瓶血培养所得结果是很难正确解释的。,但,并非越多越好,，超过一定数量的采血量会稀释培养瓶的肉汤，所以血液与肉汤的最佳比例为1：51：10,便于解释血培养结果是污染还是真正感染,保证兼性厌氧菌的生长及厌氧菌的培养,报告时间提前,：需氧瓶有9%比厌氧瓶早1天报告结果 ，厌氧瓶有5%比需氧瓶早1天报告结果。因此只做需氧菌不做厌氧菌培养, 有5%的血培养延迟1天报告阳性结果,为什么每套标本中应包含厌氧培养？,（1）菌血症有“,持续性,”和“,暂时性,”之分，多次采血可提高阳性检出率，减少漏检；,（2）血流感染有,原发性,与,继发性,之分，许多继发性血流感染来源于肺、尿路、肝脏、肠道与创口，血培养阳性有助于循环外感染的诊断。,（3）菌血症患者多数为间歇性，病原菌周期性出现在血液中，在无菌时期不管临床症状严重程度如何，患者血液中的病原菌浓度水平相当低，因此要求多次采血，但24h内一般不超过3次。,为什么要多次采血？,污染菌和感染菌的确认,脑脊液,标本采集：,严格的,无菌操作,进行腰椎穿刺采集，必要时也可从小脑延髓池或侧脑室穿刺采集。采集后收集于,3,个,无菌容器中，,第,1,管,用于,细菌,学检查，第,2,管用于化学或免疫学检查，第,3,管用于常规检查。,若仅收集到,1,管,脑脊液，首先送往微生物实验室，之后再做其它检查；,标本采集后应,立即,送检，若延误送检，标本应,室温,保存，但保存时间不应超过,24,小时，某些细菌具有自溶酶，放置时间过长易自溶死亡。脑脊液标本不可放置冰箱中保存，以防某些细菌死亡（如脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、嗜血杆菌）,标本运送与保存,痰 液,1.,采集方法：,自然咳痰法：留取前刷牙，用清水漱口,3,次,，以去除口腔内大量杂菌，之后先深呼吸再用力咳出呼吸道深部痰液吐至一次性痰杯内，盖好盖子。如患者痰液较深或者黏稠难以咳出时可诱导排痰。最佳痰液采集量为,210ml,，最低不少于,1ml,。,特殊取痰法：由临床医生采集，主要有：纤支镜抽吸法（采集支气管肺泡灌洗、经支气管镜直接吸引或防污染样本毛刷）,2.,痰标本的运送、保存、验收,:,尽快送至实验室内（,2,小时,），运送延误可导致肺炎双球菌、流感嗜血杆菌等苛养菌由于不适应外界环境和自溶现象而死亡。,延迟送检或待处理标本应置于,1020,室温保存，既可防止苛养菌死亡也能避免杂菌快速生长，保存时间不可超过,24,小时,。,1,、正常人尿液是,无菌,的，而尿液细菌培养最大的问题是,杂菌污染,。正常人外尿道有大肠杆菌、葡萄球菌等存在。而这些细菌又是尿路感染中常见的病原菌。因此要作好尿液细菌学检查，首先应注意标本收集问题。,尿液培养相关问题,2,、尿液经尿道排出时会受到尿道内正常菌群的污染,所以需要定量接种、合理评价才能判断培养的细菌是否与尿路感染有关。,3,、另外,由于绝大多数的泌尿系感染是由肠杆菌科细菌引起,而此类细菌的,硝酸盐,还原实验为阳性,故可参考尿常规检查中的硝酸盐还原实验来推断是否有细菌感染。,中段尿培养简单易行，又无感染的危险。通常取晨起第一次尿送检。尿液在膀胱内停留6-8h以上（给细菌足够的繁殖时间）,尿标本必须用无菌带螺帽的容器采集，容器上标有,培养型,，而非尿常规尿杯！,中段尿培养,采集方法：尽量取早晨第一次尿液,取尿前用肥皂水清洗外阴（女性）或尿道口（男性），再用无菌水洗净，用无菌纱布擦拭，然后排尿弃去前段尿，留取中段尿 10-15ml，置于无菌容器内。,婴幼儿不少于,1ml,，尿量不足，培养结果不可靠。,中段尿培养,标本采集后,立即,送检，通常标本采集后到接种的,时间不能超过,2,小时，尤其气温较高的夏季，保存,时间应适当缩短或,4,冷藏保存，但冷藏时间仍不,得超过8小时。注意：考虑,淋病奈瑟菌,感染时，采,集的尿液应该立即送检，并且,不得冷藏,。,标本的运送与保存,脓肿标本：,标本的采集与送检：,闭合,性脓肿：勿用拭子取样。脓肿表面清创，用注射器抽取脓肿内容物；或将脓肿切开引流后，取脓肿壁的一部分进行培养。,开放,性损伤和脓肿：尽量去除表面覆盖物和渗出液，并用拭子用力擦拭损伤基底或边缘取样。取自表浅切口感染的标本不进行厌氧培养。伤口进展边缘处活检标本检测厌氧菌、分枝杆菌和真菌最佳。,采集后立即送检,采集前清洁、消毒尿道口及外阴，尿道分泌物可将无菌棉拭子伸入尿道捻转拭子采集。,阴道分泌物采集时可用无菌棉拭子自阴道深部或阴道穹隆后部，宫颈,23cm,处，转动并停留,1030s,取分泌物。,淋球菌培养需,保温及时,送检，衣原体、支原体等培养无法及时送检时应,4,保存。,生殖道标本送检,用药前自然排便，采集脓血、黏液部分,23g,。,液体便取絮状物,12ml,置,无菌容器,内送检。,如排便困难或婴幼儿患者，可用直肠拭子法采集标本。,采集后立即送检，若不能及时送检，在,4,冰箱中保存不超过,24,小时,粪便标本,小结,血液、脑脊液为无菌性体液,，采集标本时要注意无菌采集，血液标本还要注意采集的时间和采血量，若排除污染并有相应的临床症状只要有细菌生长即视为致病菌。,有菌部位的标本如痰液、粪便,等应了解该部位常见的正常菌群，采集标本时尽量避免污染，对于分离的细菌应结合临床进行分析。,尿液标本,因采集时常常会受到尿道口正常菌群的污染，因此尿液细菌培养应进行活菌计数。,感谢聆听,谢谢！,