骨髓细胞形态学检验课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2020/9/14,#,第三节 血细胞形态学特征,一、血细胞发育过程中形态学演变的一般规律,血细胞发育：从原始到成熟有一定的规律性,1、细胞体积,（1）胞体由大到小（普通规律）,（2）特殊规律：早幼粒大于原粒细胞,巨核细胞体积增大,第三节 血细胞形态学特征一、血细胞发育过程中形态学演变的一,1,2、细胞质：,（1）量由少到多,（2）染色由深蓝到浅蓝,（3）颗粒：从无有嗜天青颗粒特异性颗粒,3、细胞核：,（1）大小：由大到小，由规则到不规则（巨核细胞核由小到大）,（2）染色质：细致疏松粗糙成块,4、核/质 比例,：由大到小。,2、细胞质：,2,骨髓细胞形态学检验课件,3,二、血细胞的形态学特征,1、红细胞系,（1）原红（normoblast）：1522um,（2）早幼红（basophilic normoblast）：11-20um,（3）中幼红（polychromatic normoblast）：8-18um,（4）晚幼红（ortho-chromatic nurmblast）：7-12um,（5）网织红（RC）： 7.4um,（6）成熟RBC（RBC）：7.4um,二、血细胞的形态学特征,4,2、粒细胞系统：,（1）原粒细胞（myeloblast）：11-18um,（2）早幼粒（promyelocyte）：12-22um,（3）中幼粒（myelocyte）,中性中幼粒（neutrophilic myelocyte）：10-18um,嗜酸性中幼粒（eosinophilic myelocyte）：15-20um,嗜硷性中幼粒（basophilic myelocyte）：10-15um,2、粒细胞系统：,5,（4）晚幼粒细胞（metamyelocyte）：10-16um,中性 嗜酸 嗜硷,（5）杆状核粒细胞（stab granulocyte、 bandgranulocyte）,中性 嗜酸 嗜硷,（6）分叶核粒细胞（segmented granulocyte）,中性 嗜酸 嗜硷,（4）晚幼粒细胞（metamyelocyte）：10-16,6,3、淋巴细胞系统,（1）原淋巴细胞（Lymphoblast）：10-18um,（2）幼淋巴细胞（prolymphocyte）：10-16um,（3）淋巴细胞（lymphocyte）,大淋巴细胞 小淋巴细胞,3、淋巴细胞系统,7,4、浆细胞系统：,（1）原浆细胞（plasmablast）：15-20um,（2）幼浆细胞（proplasmacyte）：12-16um,（3）浆细胞（plasmacyte）：8-20um,4、浆细胞系统：,8,5、单核细胞系统：,（1）原单核细胞（monoblast）：15-25um,（2）幼单核细胞（promonocyte）：15-25um，核可见凹陷，切迹，扭曲或折叠,（3）单核细胞（macrophage）：12-20um：核呈肾形，马蹄形，笔架形及“S”形。,（4）吞噬细胞（macrophage）：单核细胞组织细胞巨噬细胞或吞噬细胞,5、单核细胞系统：,9,6、巨核细胞学：,（1）原巨核细胞（megakaryoblast）：15-30um,（2）幼巨核细胞（promegakaryocyte）：30-50um,（3）颗粒型巨核细胞（granular megakaryocyte）：50-70um,（4）产板巨（thronbocytogenous megakaryocyte）。,（5）巨核细胞裸核（naked nucleus）,6、巨核细胞学：,10,7、其它细胞,（1）网状细胞 （3）纤维细胞,（2）内皮细胞 （4）组织嗜硷,（5）成骨细胞 （6）破骨细胞,7、其它细胞,11,三、细胞化学染色,概念：,（1）细胞形态学为基础,（2）对骨髓片按一定程序染色,（3）显微镜下观察（细胞化学成分及其变化）,三、细胞化学染色,12,（一）过氧化物酶染色,1、原理：,细胞中的POX（peroxidase）H2O2O2氧化联苯胺呈蓝色+亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色颗粒。,2、结果：,（1）阴性：无颗粒,（2）弱阳性：细小颗粒分散,（3）强阳性：颗粒粗大而密集,3、意义：,（1）急粒：强阳性,（2）急单；弱阳性,（3）急淋：阴性,（一）过氧化物酶染色,13,（二）中性粒细胞碱性磷酸酶染色,1、原理,：NAP（neutrophil alkaline phosphatase）的显示方法有偶氮偶联法：,NAP（PH9.4-9.6）-磷酸茶酚钠-茶酚+重氮盐形成灰黑色沉淀（定位于酶活性处）。,（二）中性粒细胞碱性磷酸酶染色,14,2、结果：,（1）5级分类,0级阴性,1级+,2级+,3分+,4分4（+）,（2）阳性率报告：,计数100NC中阳性细胞分率。,（3）积分报告：,100NC细胞的累积分数,2、结果：,15,3、参考区间：,NAP：阳性率：10-40%,积分：,40-80分,4、临床意义：,（1）感染性疾病的诊断：鉴别细菌或病毒感染,（2）CML和类白血病鉴别,（3）AA与PNH鉴别,3、参考区间：NAP：阳性率：10-40%,16,骨髓细胞形态学检验课件,17,（三）酸性磷酸酶染色,1、原理,：ACP（acid phosphatase）：,ACP（PH5.0）甘油磷酸钠磷酸钠+硝酸铅磷酸铅沉淀+硫化铵反应棕黑色硫化铅沉淀。,2、结果：,胞质内出现棕黑色颗粒为阳性反应。,骨髓细胞形态学检验课件,18,3、意义：,（1）多毛细胞白血病（hairy cell leukemia，HCE）诊断：HCL为阳性不被L-酒酶抑制,（2）T-B淋巴细胞鉴别：T阳性，B阴性,（3）协助鉴别Gaucher病与Niemann-Pick病：Caucher阳性，Niemann-Pick阴性,（4）单核细胞、组织细胞、网状细胞、巨核细胞ACP阴性。,3、意义：,19,骨髓细胞形态学检验课件,20,骨髓细胞形态学检验课件,21,（四）氯化醋酸AS-D茶酚酯酶染色,1、原理：,AS-D（SE）氯化醋酸AS-D茶酚AS-D+重氮盐GBC偶联红色沉淀定位于胞浆中,2、结果：,粒系阳性或强阳性反应,单核阴性或弱阴性反应,淋巴、嗜酸细胞、浆细胞阴性反应,3、意义：,（1）急粒阳性或强阳性,（2）急单、急淋阴性反应,（四）氯化醋酸AS-D茶酚酯酶染色,22,骨髓细胞形态学检验课件,23,（五）-醋酚茶酚酯酶染色,1、原理：,-NAE-醋酸茶酚-茶酚+重氮盐染料偶联黑色沉淀定位于胞浆中。,2、结果：,1、单核细胞阳性（灰黑色沉淀）,2、粒细胞弱阳性,3、淋巴细胞阴性,3、意义：,1、急单强阳性反应,2、急粒弱阳性反应,（五）-醋酚茶酚酯酶染色,24,骨髓细胞形态学检验课件,25,（六）糖原染色,1、原理：,PAS反应,过典酸（糖原）醛基+无色品红紫红色化合物,2、结果：,（1）阳性：颗粒状、小块状或弥漫均匀红色,（2）分为：强阳性、弱阳性和阴性或阳性百分率,（3）粒系：,原粒阴性，早幼粒以下阶段阳性反应程度渐增强,单核弱阳性，淋巴细胞阴性,红系：阴性,巨核：阳性,（六）糖原染色,26,3、意义：,1、红血病与巨幼贫鉴别：前者幼红细胞阳性，后者幼红细胞阴性,2、白血病：急粒：阴性或弱阳性,急淋：原幼淋阳性呈粗颗粒状或块状,急单：呈弥漫均匀或细颗粒状,3、其它：,Gaucher细胞阴性,Niemann-Pick阴性,3、意义：,27,骨髓细胞形态学检验课件,28,骨髓细胞形态学检验课件,29,（七）铁染色：,1、原理：,（1）铁铁蛋白或含血黄素单核-吞噬细胞质内,（2）Fe3+亚铁氰化钾铁氰化铁沉淀（普鲁土蓝）,2、结果：,（1）细胞外铁：一、1+ 4（+）,（2）细胞内铁：,含有铁颗粒的幼红细胞铁粒幼红细胞,油镜下计数100个幼红细胞计算其阳性率,I、II、和环状铁粒幼细胞,（七）铁染色：,30,3、参考值：,（1）细胞外铁：1+ 2（+），大多为2+,（2）细胞内铁：2090%,4、意义：,（1）缺铁性贫血诊断,（2）非缺铁性贫血：如AA、铁粒幼细胞性贫血、溶贫、巨幼贫、内外铁增加,（3）MDS-RARS：环状铁粒幼细胞15%,3、参考值：,31,骨髓细胞形态学检验课件,32,骨髓细胞形态学检验课件,33,四、细胞免疫分型：,1、用单抗和免疫学技术检测细胞表血特异性,2、分化抗原细胞所属系列、分化程度及功能状态。,（一）检测方法：,1、免疫荧光法（immme of luoresence technique）,（1）原理：,荧光标记的单抗+细胞表面分化抗原结合产生荧光,用荧光显微镜和流式细胞仪检测,直接荧光法、间接荧光法,（2）参考值：,有荧光阳性细胞,无荧光阴性细胞,四、细胞免疫分型：,34,2、免疫酶染色法：,（1）APAAP法（碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法）：,一抗+CD抗原+AKP标记二抗底物显色,（2）PAP法（过氧化物酶抗过氧化物酶法）,一抗+CD抗原+POX标记抗体底物显色,（3）ABC法（亲和素生物素酶复合物）法：,一抗+CD抗原+生物素标记二抗HRP标记亲和素+底物,2、免疫酶染色法：,35,骨髓细胞形态学检验课件,36,骨髓细胞形态学检验课件,37,骨髓细胞形态学检验课件,38,（二）细胞免疫分型的临床应用,1、有助于识别不同系列的细胞：,髓系：CD13、CD14、CD15、CD32、CD33、CD65、CD91、CD156、CD166,淋巴系：CD1、CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD9、CD10、CD19、CD20、CD52、CD77,巨核系：CD41、CD42、CD61,2、识别不同的淋巴细胞,：,T系统：CD2、CD3、CD4、CD7、CD8,B系统：CD19、CD20、CD22,NK：CD16、CD56,（二）细胞免疫分型的临床应用,39,3、用于T淋巴细胞亚群检测：,T：（CD3）,TH（CD4+ CD8）,TS（CD4 CD8+）,4、用于识别不同分化阶段的细胞：,（1）造血干细胞CD34+、CD90+、lin,（2）髓系祖细胞CD34+、CD33+,（3）T淋巴细胞系祖细胞CD34+、TDT+、CD10+、CD7+,（4）B淋巴细胞系祖细胞CD34+、CD19+,3、用于T淋巴细胞亚群检测：,40,5、有助于识别不同功能状态的细胞,：,记忆T细胞CD45RO高表达、CD45RA不表达,活化T细胞CD45RA不表达、CD25、CD2、CD45RO、CD54、CD58均强表达。,5、有助于识别不同功能状态的细胞：,41,6、用于不同系列和不同分化阶段的细胞进行分离：分选的流式细胞仪,7、白血病的免疫分型,8、可用于白血病微小残留病检测：,（1）CD病人：CD19、CD22、CD10、CD7、CD5、CD13、CD37、CD34阳性并伴有TbT+则可诊断微小残留病存在,（2）敏感性：10,-4,水平,6、用于不同系列和不同分化阶段的细胞进行分离：分选的流式细胞,42,（,三）急性白血病细胞免疫表型特点,（三）急性白血病细胞免疫表型特点,43,骨髓细胞形态学检验课件,44,骨髓细胞形态学检验课件,45,五、细胞遗传学分析,1、染色体检查方法,2、染色体分析,（1）染色体命名：46条，22对常染色体，1对性染色体,男46XY，女：46XX,A-G7组,ZP35表示,五、细胞遗传学分析,46,（2）核型分析及其书写：,（1）书写顺序：染色体数目、性染色体、染色体异常,（2）染色体变异以小写表示：,t易位 iso或i等臂染色,inv,倒位,ins,插入,del缺失 r环状染色,“”-丢失 “+”-增加,骨髓细胞形态学检验课件,47,（3）第一括号内表示染色体数目，第二括号内表示染色体区带,（4）P表示短臂，q表示长臂,（5）45，X，-Y，t（8；21），（q22，q22）表示45条染色体，丢失Y染色体，第8号与第21号染色体之间易位，断裂点在8号染色体长臂2区2带与21号染色体长臂2区2带。,3、染色体畸变,（1）二倍体（2n）,（2）数目畸变：整倍体和非整倍体,（3）亚二倍体：比2n少,（4）超二倍体：比2n多,（3）第一括号内表示染色体数目，第二括号内表示染色体区带,48,骨髓细胞形态学检验课件,49,骨髓细胞形态学检验课件,50,骨髓细胞形态学检验课件,51,第五节：常见血液病的血液学特征,一、贫血,贫血（anemia）：指单位容积循环血液中红细胞数，血红蛋白量及血细胞比容（Hct）低于参考值低限，,贫血是一种症状,。,第五节：常见血液病的血液学特征一、贫血,52,（一）缺铁性贫血：,1、定义,：IDA（iron deficiency anemia）：由于缺铁而造成的贫血。,2、血象：,（1）Hb、RBC下降，Hb下降更明显,（2）血片：RBC体小、淡染、中心区扩大（MCV、MCH、MCHC均下降）,（3）RC轻度增多或正常,（4）WBC、PLT正常,（一）缺铁性贫血：,53,3、骨髓象：,（1）增生明显活跃,（2）红系：明显增生30%，以中、晚幼红为主，胞体小胞质少，嗜碱性，核小，固缩,（3）粒细胞等相对减少，巨核系正常,3、骨髓象：,54,骨髓细胞形态学检验课件,55,（二）溶血性贫血：,1、定义,：HA（hemolytic anemia）是由于各种原因使红细胞寿命缩短，破坏增加，超过了骨髓的代偿功能所致的贫血。,2、血象：,（1）Hb、RBC平行下降,（2）血片：RBCRA不一，易见大RBC，嗜多色红细胞及有核红细胞，可见H-J小体，Cabot环、点彩RBC，也见特殊RBC：球形RBC、靶形RBC、椭圆RBC，裂红细胞。,（3）RC：明显增多,（4）WBC、PLT增多或正常,（二）溶血性贫血：,56,3、骨髓象：,（1）增生明显活跃,（2）红系：明显增多，可3050%，以中晚幼红为主，可见核畸形，H-J小体，嗜硷性点彩等。,（3）粒系相对减少，形态正常。,（4）巨核系正常。,3、骨髓象：,57,骨髓细胞形态学检验课件,58,（三）巨幼细胞贫血,1、巨幼贫,（megaloblastic anemia）：由于叶酸及VitB12缺乏使DNA合成障碍所引起的一组贫血。,2、血象：,（1）Hb、RBC下降，RBC下降更明显。,（2）血片：RBC大小不等，可见嗜多色、点彩，H-J小体，Cabot环。,（3）RC轻度增加。,（4）WBC减少，分叶过多，在45叶以上。,（5）Plt减少。,（三）巨幼细胞贫血,59,3、骨髓象：,（1）增生明显活跃,（2）红系：40%，巨幼变,（3）粒系：巨幼变,（4）巨核系：巨幼变及分叶,3、骨髓象：,60,骨髓细胞形态学检验课件,61,（四）再生障碍性贫,1、再障（aplastic anemia AA）,：是由于多种原因所致骨髓造血干细胞减少和功能异常导致三系减少。,2、症状为：感染、贫血和出血。,3、分型：急性和慢性。,（四）再生障碍性贫,62,1、急性型：,（1）血象：,Hb、RBC明显减少,RC：0.5109/L或O,WBC：1.0-2.0109/L， L占60%,plt：20109/L或10109/L,（2）骨髓象：,增生明显减低,三系明显减少,非造血细胞增多,骨髓小粒以非造血细胞为主。,1、急性型：,63,骨髓细胞形态学检验课件,64,骨髓细胞形态学检验课件,65,2、慢性型：,（1）血象：,Hb、RBC平行下降，为中、重度贫血,RC：15109/L,WBC：2.0-3.0109/L， L占50%,plt：30109/L-50109/L,（2）骨髓象：,增生减低三系明显减少淋巴细胞相对增多、非造血细胞增多骨髓小粒以非造血细胞为主。,2、慢性型：,66,骨髓细胞形态学检验课件,67,骨髓细胞形态学检验课件,68,二、白血病,1,、白血病（,leukemia,）：,白血病细胞异常增生与分化成熟障碍，并浸润其他器官和组织，正常造血受抑制。,2、症状：贫血、出血感染和浸润症状,3、分型：急性和慢性,4、分类：,成人以急粒为主，儿童以急淋为主,慢粒比慢淋为多见,二、白血病,69,（一）急淋白血病：,1、血象：,（1）Hb、RBC下降（重度或中度下降），可见幼红细胞,（2）WBC计数：,增多：10-50109/l,正常,减少：如APL,（3）WBC分类：可见白血病细胞（幼稚细胞，异常白细胞），可达30-90%。,（4）Plt计数减少：早期正常，晚期明显减少,（一）急淋白血病：,70,2、骨髓象：,（1）骨髓增生明显或极度活跃,（2）一系或二系原始细胞明显增多：30%ANC,（3）其它系列受抑制或减少,（4）涂片中：急淋易见涂抹细胞，急非淋，可见Auer小体,2、骨髓象：,71,3、分型,（1）FAB分型：急淋和急非淋,（2）AML：M1、M2、M3、M4、M5、M6、M7,（3）ALL：L1、L2、L3,（4）我国AML分型标准：修改为：M2M2a、M2b,M3M3a M3b,M4M4a,、,M4b,、,M4c,3、分型,72,骨髓细胞形态学检验课件,73,骨髓细胞形态学检验课件,74,骨髓细胞形态学检验课件,75,骨髓细胞形态学检验课件,76,骨髓细胞形态学检验课件,77,骨髓细胞形态学检验课件,78,骨髓细胞形态学检验课件,79,骨髓细胞形态学检验课件,80,（二）慢性白血病：分为慢性粒细胞和慢性淋巴细胞白血病,1、慢性粒细胞白血病,（1）血象：,Hb、RBC早期轻度贫血，晚期重度贫血,WBC明显升高：早期（20-50）109/L,晚期（100-300）109/L,分类：以中、晚、杆状核粒细胞为主，原+早10%,PLT：早期升高，晚期下降,（二）慢性白血病：分为慢性粒细胞和慢性淋巴细胞白血病,81,（2）骨髓象：,增生极度活跃,粒系增生明显占90%以上，以中、晚、杆状核粒细胞为主，原+早10%，嗜酸、嗜硷细胞易见,红系增生受抑,巨核系早期增多，晚期减少,NAP积分减少,t(9;22)(q34;911)bcr-abl融合基因,（2）骨髓象：,82,骨髓细胞形态学检验课件,83,2、慢性淋巴细胞白血病,（1）临床特征：,为B淋巴细胞白血病,欧美国家多见,老年人多见,肝脾淋巴结进行性肿大,病程长达10-20年。,2、慢性淋巴细胞白血病,84,（2）血象：,Hb、RBC轻度下降，合并HA时明显下降,WBC升高：（15100）109/L L60-70%，以小淋巴细胞增生为主。,中性粒轻度减少，PLT正常。,（3）骨髓象：,增生明显或极度活跃,淋巴系增多50%，为成熟淋、原、幼淋少见,粒系，红系减少,晚期巨核细胞减少,（2）血象：,85,三、骨髓增生异常综合征,1、概念：,（,1）MDS（myelodysplastic syndrome MDS），是二组造血干细胞克隆性疾病，出现病态造血。,（2）外周血细胞减少，而骨髓细胞增生，成熟及幼稚细胞形态有异常。,骨髓细胞形态学检验课件,86,2、MDS分类：,RA（refractory anemia）,AR-S（refractoryamemia with sideroblastosis）,RAEB（refractoryamemia with excess of blasts）,CMML（chromic myelomonocytic leukemia）,RAEB-T（refractoryanemia with excess of blasts in trans -formation）,2、MDS分类：,87,3、血象：,（1）Hb、RBC下降，RBC大小不均及异形，可见椭圆，嗜多色性红细胞、点彩RBC，有核RBC，RC减少。,（2）WBC正常或减少：形态异常，分叶过多，Pelger-Huet畸形，胞质颗粒减少或缺如，有异常大颗粒，也可见幼稚细胞。,（3）plt：正常或减少，可见巨大或畸形血小板。,3、血象：,88,4、骨髓象：增生及病态造血,（1）增生明显活跃,（2）红系明显增生：30%50%，幼红有形态异常巨幼样变，核形异常，双核，多核，核芽，分叶状，碎裂，环状铁粒幼红细胞增多。,（3）粒系正常或减少，核左移和形态异常。,（4）巨核细胞正常或增多：小原巨核细胞，畸形血小板,4、骨髓象：增生及病态造血,89,骨髓细胞形态学检验课件,90,骨髓细胞形态学检验课件,91,骨髓细胞形态学检验课件,92,四、多发性骨髓瘤,1、概念：,MM（multiple myeloma）：浆细胞异常增生的恶性疾病,单克隆浆细胞增生单克隆免疫球蛋白骨质破坏,血清出现M蛋白,2、血象：,Hb、RBC下降，RBC呈纸钱状排列，ESR升高。,WBC计数正常或减少，可见幼稚粒细胞,浆细胞：占23%如2109/L可诊断浆细胞白血病,四、多发性骨髓瘤,93,3、骨髓象：,（1）增生明显活跃,（2）骨髓瘤细胞,早期：5-10%呈灶性分布,中期：15-20%可确诊,形态：与浆细胞相似：,大小不一,形态圆或椭圆,多核瘤细胞易见,胞质丰富,（3）粒系、红系、巨核系可减少或正常,3、骨髓象：,94,骨髓细胞形态学检验课件,95,经常,不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有,力量,Study Constantly, And You Will Know Everything. The More You Know, The More Powerful You Will,Be,写,在最后,经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量写,96,谢谢你的到来,学习并没有结束，希望大家继续努力,Learning Is Not Over. I Hope You Will Continue To Work Hard,演讲人：,XXXXXX,时 间：,XX,年,XX,月,XX,日,谢谢你的到来演讲人：XXXXXX,97,