动物微生物学及免疫学细菌生理课件

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份,（75-85%）,自由水,无机物,干物质,（15-25%）,有机物,第一节细菌的化学组成,2,第二节细菌的物理特性,比面积大,光学性质,多相胶体性质,渗透压,带电现象,布朗氏运动,第二节细菌的物理特性比面积大,3,第三节细菌的营养,一、营养物质的吸收与运转,扩散：,物质由高浓度向低浓度,方向的运输方式。分为：,单纯扩散,易化扩散,第三节细菌的营养一、营养物质的吸收与运转,4,主动运输：,物质由低浓度向高浓度,方向的运输方式。它需要酶的作用，,如渗透酶各周围间隙蛋白，在运输大,分子物质（糖、氨基酸、无机离子）,中起着重要作用。,运输示意图为：,主动运输：物质由低浓度向高浓度,5,主支运输转动方式,营养物质 释放营养物质,渗 透 酶,载体 复合物 细胞内,周围间隙蛋白,载体回位,主支运输转动方式,6,二、细菌的营养需要,水分,新陈代谢所需媒介。,含碳化合物,用来合成菌体的糖、蛋白质、核酸等，亦作为能量来源。,含氮化合物,用来合成菌体的各种含氮化合物。,二、细菌的营养需要水分新陈代谢所需媒介。,7,矿物质,在细菌代谢中起着酶激活物的作用，用来构成酶的辅基，对于维持原生质胶体状态和细胞渗透性具有较大作用。,Vit,在代谢中起重要作用（如B簇Vit起着辅酶或辅基的作用。,矿物质在细菌代谢中起着酶激活物的作用，用来构成酶的辅基，对,8,三、细菌的营养类型,自养型,这类细菌酶系统完善，能利用无机碳,（,CO,2,、C、H,2,CO,3,）,合成菌体有机碳。,分为光能和化能自养型两类。,异养型,这类细菌酶系统不完善，只能利用有机碳作为养料。分为光能异养菌和化能异养菌两大类。绝大多数病原菌都属于化能异养菌。,三、细菌的营养类型自养型 这类细菌酶系统完善，能利用无机,9,第四节细菌的新陈代谢,一、细菌的酶,胞外酶、胞膜酶、固有酶、适应酶,与医学,有关的酶类：,卵磷脂酶、透明质酸酶、胶原酶、,溶纤蛋白酶、凝血浆酶、溶血素、尿素酶,第四节细菌的新陈代谢一、细菌的酶,10,二、细菌的呼吸,1、细菌呼吸的概念：,细菌借助于体内的酶类，从物质的氧化还原过程中获得它所需要的能量的过程，称细菌的呼吸。,ATP,二、细菌的呼吸1、细菌呼吸的概念：ATP,11,2、细菌呼吸类型：,专性需氧菌,微需氧菌,兼性厌氧菌,厌氧菌,专性厌氧菌,2、细菌呼吸类型：专性需氧菌,12,各型细菌呼吸特点,专性需氧菌：,需充足O,2,，生长于表面.。,微需氧菌：,需低浓度O,2,，生长于表面以下数mm处。,兼性厌氧菌：,生长于整个培养基中。,厌氧菌和专性厌氧菌：,生长于培养基底部。,各型细菌呼吸特点专性需氧菌：需充足O2，生长于表面.。,13,3、厌氧菌培养的原理,1、厌氧菌缺乏细胞色素和细胞色素氧化酶,二者具有较高的氧化还原电势，能氧化高电势的化合物产生能量。在有氧环境中，培养基中的营养物质多为氧化型状态，氧化还原电势随之升高。故厌氧菌不能利用这些营养物质，造成能量不足而不能生长。,3、厌氧菌培养的原理1、厌氧菌缺乏细胞色素和细胞色素氧化酶,14,2、缺乏过氧化氢酶和过氧化物酶,细菌在有氧环境的代谢中常产生H,2,O,2,，这是一种氧化剂，有杀菌作用，缺乏二酶，故厌氧菌不能分解H,2,O,2,，而不能生长。,3、有氧环境中SH被氧化,SH是菌体许多酶类的辅酶（如CoA、琥珀酸脱氢酶、氨基酸转移酶等），故厌氧菌不能生长。,2、缺乏过氧化氢酶和过氧化物酶 细菌在有氧环境的代谢中常产,15,三、细菌的代谢产物,（一）分解产物的检测,1糖代谢测定,糖发酵试验：,多糖经胞外酶分解为双糖单糖再经胞内,酶分解为有机酸、醇、CO2和H2O。细,菌分解糖的能力是不同的。,三、细菌的代谢产物（一）分解产物的检测,16, 产酸不产气, 产酸产气, 阴性,动物微生物学及免疫学细菌生理课件,17,VP试验：,大肠杆菌与产气杆菌均分解葡萄糖，为区分两菌可采用VP试验及甲基红试验。产气杆菌能使丙酮酸脱羧、氧化（在碱性溶液中）生成二乙酰，后者可与含胍基的化合物反应，生成红色化合物，称VP阳性。,VP试验：大肠杆菌与产气杆菌均分解葡萄糖，为区分两菌可采用,18,甲基红试验：,产气杆菌使丙酮酸脱羧后形成中性产物，培养液pH5.4，甲基红指示剂呈桔黄色，为甲基红试验阴性，大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸，培养液呈酸性pH5.4，指示剂甲基红呈红色，称甲基红试验阳性。,甲基红试验：产气杆菌使丙酮酸脱羧后形成中性产物，培养液pH,19,枸橼酸盐利用试验：,能利用枸橼酸盐作为唯一碳源的细菌如产气杆菌，分解枸橼酸盐生成碳酸盐，同时分解培养基的铵盐生成氨，由此使培养基变为碱性，使指示剂溴麝香草酚蓝（BTB）由淡绿转为深蓝，此为枸橼酸盐利用试验阳性。,枸橼酸盐利用试验：能利用枸橼酸盐作为唯一碳源的细菌如产气杆菌,20,2、蛋白质代谢测定,H2S试验：,含S氨基酸 菌 产生H,2,S,与基中醋酸铅 PbS黑,色沉淀物。,吲哚试验：,色氨酸 菌 吲哚,明胶试验：,明胶 菌 液化,紫乳试验：,酪蛋白 菌 胨化,2、蛋白质代谢测定H2S试验：,21,（二）合成代谢产物及临床意义,热原质,毒素与酶,色素,抗生素,细菌素,（二）合成代谢产物及临床意义热原质,22,第五节细菌的生长繁殖,一、细菌生长繁殖的条件,1、营养物质 供给细菌适量的H,2,O、糖类、,蛋白质或氨基酸、无机盐及Vit等。,2、温度 细菌生长的最适温度随菌种不同而,异，一般病原菌要求与体温相同，如牛羊病原菌,需37，鱼类病原菌则要求22。,第五节细菌的生长繁殖一、细菌生长繁殖的条件,23,3、酸碱度（PH） PH对细菌发育影响很大，大多数病原菌最适酸碱度为PH7.2-7.6，少数细菌可在特殊PH条件下生长，如霍乱弧菌在PH6.4-9.6 时均能生长（最适为7.8-8.0），乳酸杆菌在PH 3.4-4.5时可生长，霉菌则在PH 3.0-6,0生长良好。,4、渗透压 细菌只有在等渗环境中才能生存。若环境渗透压过高，则菌体被脱水造成质壁分离；若环境渗透压过低，则细菌臌胀破裂。,5,、气体,O,2,、,CO,2,、,N,3、酸碱度（PH） PH对细菌发育影响很大，大多数病原菌,24,二、细菌的繁殖方式和速度,多数细菌为,横分裂式,繁殖,（,122,2,2,）。,少数细菌如酵母进行出芽繁殖 。近年来，电子显微镜观察可见，某些细菌也存在有性结合。,绝大多数细菌,繁殖速度为15-30min一代。,但菌种不同其繁殖速度亦不同，如大肠杆菌20min繁殖一代，结核杆菌较慢，需0.5-18h才能繁殖一代。,二、细菌的繁殖方式和速度多数细菌为横分裂式繁殖 （122,25,三、细菌群体的人工培养,用人工的方法，将细菌从自然界、动物体或病料中分离出来，其目的是为了研究细菌的形态、生理特性、生物学特性或制取细菌的某种代谢产物等。这对于传染病的诊断、流行病学调查、菌苗制备、微生物的工业生产都具有重要意义。为此，了解和掌握细菌分离培养的有关基础知识是十分必要的。,三、细菌群体的人工培养用人工的方法，将细菌从自然界、动物体或,26,（一）培养基的种类和常用培养基,培养基的概念：,将细菌所需的各种营养物质按一定比例混合在一起，并调节到适宜的PH，这种人工配制的适合细菌生长繁殖的细菌营养物，称为培养基,。,培养基必需符合以下条件：,营养物,适宜的PH环境,温度和渗透压,无菌,（一）培养基的种类和常用培养基培养基的概念：培养基必需符合以,27,培养基种类,1、基础培养基,含有培养一般细菌的最基本成分。又分为：,液体培养基、固体培养基和半固体培养基,三种。在液体（肉汤）培养基中，加入2-3%琼脂即为固体培养基，加入0.2- 0.5%琼脂即为半固体培养基。,培养基种类 1、基础培养基,28,2、营养培养基,于基础培养基中加入高营养物质如葡萄,糖、血液、血清、腹水、生长因子等，以,满足营养要求较高的细菌生长需要。有的,细菌还需加入特殊物质，如结核杆菌需加,入鸡蛋清、马铃薯、甘油等才能良好生长,2、营养培养基于基础培养基中加入高营养物质如葡萄,29,3、选择培养基,利用细菌对某种物质敏感程度的不同，可,在培养基中加入抑制某些细菌生长的药物，,而选择性地让欲分离的细菌旺盛生长的培养,基如胆盐和蔷薇色酸可以选择性地抑制G+菌,的生长，而不影响G,菌的生长。在培养基,中加入二药后可选择性地分离出肠道杆菌。,3、选择培养基 利用细菌对某种物质敏感程度的不同，可,30,4、鉴别培养基,利用细菌分解底物及其代谢产物,的不同，可在培养基中加入某种物,质和指示剂，即制为鉴别培养基，,以测定不同细菌的生化反应。,5、厌气培养基,将培养基与空气及氧隔离，或降,低培养基中的氧化还原电势，供厌,氧菌生长。,4、鉴别培养基,31,除去培养基中氧的方法：,a、降低培养基中氧化还原电势： 如肝汤或加入谷胱甘肽、硫基醋酸盐等。,b、化合去氧法：如焦性没石子酸、,好氧厌氧菌混合、种子发芽等。,c、隔绝阻氧法：如液体石腊等。,除去培养基中氧的方法：a、降低培养基中氧化还原电势： 如肝汤,32,（二）细菌群体的生长现象,划线接种,分点接种,涂抹接种,液体接种,穿剌接种,倾注接种,注射接种,活体接种,细菌的接种方法,（二）细菌群体的生长现象细菌的接种方法,33,动物微生物学及免疫学细菌生理课件,34,1、细菌在固体培养基上的生长现象：,观察细菌在平板上的菌落特征：,形态、大小、边缘、表面构造（湿润度和光滑度）、隆起度、透明度、颜色等，及在血平板上的溶血现象（溶血、溶血）。,1、细菌在固体培养基上的生长现象：,35,菌落特征,菌落特征,36,2、细菌在半固体培养基中的生长现象,有鞭毛的细菌，沿穿剌线呈模糊,羽毛状,生长。,无鞭毛的细菌，沿穿剌线呈,清晰,的线状生长,。,2、细菌在半固体培养基中的生长现象有鞭毛的细菌，沿穿剌线呈模,37,3、细菌在液体培养基中的生长现象,观察肉汤培养物的,混浊度、管底沉淀、肉汤表面菌膜或菌环，以及有无汽泡等。, , , ,3、细菌在液体培养基中的生长现象观察肉汤培养物的混浊度、管底,38,3、细菌群体的生长曲线,将一定数量的细菌接种在适宜的液体培养基中，在适宜温度下孵育，每隔一定的时间取样计算，如以时间为横坐标，细菌数的对数为纵坐标，则可绘制出一条曲线，称细菌生长曲线。,细菌生长曲线由四个时期组成：,3、细菌群体的生长曲线将一定数量的细菌接种在适宜的液体培养基,39,写在最后,成功的基础在于好的学习习惯,The foundation of success lies in good habits,40,写在最后成功的基础在于好的学习习惯40,谢谢聆听,学习就是为了达到一定目的而努力去干,是为一个目标去战胜各种困难的过程,这个过程会充满压力、痛苦和挫折,Learning Is To Achieve A Certain Goal And Work Hard, Is A Process To Overcome Various Difficulties For A Goal,谢谢聆听Learning Is To Achieve A C,41,