C4免疫球蛋白课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,进入夏天，少不了一个热字当头，电扇空调陆续登场，每逢此时，总会想起那一把蒲扇。蒲扇，是记忆中的农村，夏季经常用的一件物品。记忆中的故乡，每逢进入夏天，集市上最常见的便是蒲扇、凉席，不论男女老少，个个手持一把，忽闪忽闪个不停，嘴里叨叨着“怎么这么热”，于是三五成群，聚在大树下，或站着，或随即坐在石头上，手持那把扇子，边唠嗑边乘凉。孩子们却在周围跑跑跳跳，热得满头大汗，不时听到“强子，别跑了，快来我给你扇扇”。孩子们才不听这一套，跑个没完，直到累气喘吁吁，这才一跑一踮地围过了，这时母亲总是，好似生气的样子，边扇边训，“你看热的，跑什么？”此时这把蒲扇，是那么凉快，那么的温馨幸福，有母亲的味道！蒲扇是中国传统工艺品，在我国已有三千年多年的历史。取材于棕榈树，制作简单，方便携带，且蒲扇的表面光滑，因而，古人常会在上面作画。古有棕扇、葵扇、蒲扇、蕉扇诸名，实即今日的蒲扇，江浙称之为芭蕉扇。六七十年代，人们最常用的就是这种，似圆非圆，轻巧又便宜的蒲扇。蒲扇流传至今，我的记忆中，它跨越了半个世纪，也走过了我们的半个人生的轨迹，携带着特有的念想，一年年，一天天，流向长长的时间隧道，袅,C4免疫球蛋白,进入夏天，少不了一个热字当头，电扇空调陆续登场，每逢此时,1,内容提要,概述,免疫球蛋白的结构,抗体的异质性,免疫球蛋白的生物学特性,人工制备抗体,2,内容提要概述2,C4免疫球蛋白课件,3,C4免疫球蛋白课件,4,C4免疫球蛋白课件,5,C4免疫球蛋白课件,6,C4免疫球蛋白课件,7,C4免疫球蛋白课件,8,1.,重链与轻链,1,）重链（,heavy chain, H,链）,约,450-550,氨基酸,重链分为,5,种：,、。,其相应,Ig,为,IgG,、,IgM,、,IgA,、,IgD,、,IgE,每类又可分为不同,亚,类,掌握,9,1.重链与轻链1）重链（heavy chain, H链）,1.,重链与轻链,2,）,轻链,（,light chain, L,链）,约,214,个氨基酸,轻链有两型：,及,但每一,Ig,分子的两条轻链,总是同型的。,掌握,10,1.重链与轻链 2）轻链（light chain, L链）掌,2.,可变区和恒定区,掌握,11,2.可变区和恒定区掌握11,恒定区,（,constant region,C,区,),位于免疫球蛋白分子的,C,端，占轻链,1/2,和重链,3/4,（,IgA,、,IgD,）或,4/5,（,IgM,、,IgE,）。在同一种属中，同一类重链和同一类轻链,C,区氨基酸的组成或排列比较恒定。介导免疫球蛋白多种生物学功能。,掌握,12,恒定区（constant region,C,可 变 区（,variable region,，,V,区,）,位于,Ig,分子,N,端，占轻链,1/2,和重链,1/4,或,1/5,；不同抗体其,IgV,区氨基酸组成和排列有较大差异，并决定抗体与抗原结合的特异性；,掌握,13,可 变 区（variable region,高变区,（,hypervariable region,HVR,）,在,VL,和,VH,中，某些局部区域的氨基酸组成更高变化程度，此为,HVR,。轻、重链各有,3,个,HVR,。,14,高变区（hypervariable region, HVR,互补决定区,（,complementarity-determining region, CDR,）,高变区乃抗体与抗原（表位）特异性结合的位置，此为,CDR,。,高变区,=,互补决定区,15,互补决定区（complementarity-determi,骨架区（,framework region, FR,）,V,区中非,HVR,部位的氨基酸组成和排列相对保守，此为,FR,。,VH,和,VL,各有,4,个,FR,。,16,骨架区（framework region, FR） V区中,恒定区,可变区,高变区,骨架区,17,恒定区可变区高变区骨架区17,高变区形状特异性,18,高变区形状特异性18,19,19,位于,CH1,和,CH2,之间，含丰富的脯氨酸，易伸展弯曲，有利于免疫球蛋白,V,区与抗原互补性结合；有利于暴露补体结合位点；,3.,铰 链 区,20,位于CH1和CH2之间，含丰富的脯氨酸，易伸展弯曲，有利于免,21,21,Flash 2,22,Flash 222,4.,免疫球蛋白的功能区,(,结构域,),VH,和,VL,：与抗原特异性结合的部位；,CL,和,CH1,：某些同种异型（,allotype,）遗传标记；,IgG,的,CH2,、,IgM,的,CH3,：,补体,C1q,结合点 激活补体经典途径；,IgG,的,CH3,：,结合单核,/,巨噬细胞表面,FcR,不同生物学效应,23,4.免疫球蛋白的功能区(结构域)VH和VL：与抗原特异性结合,结合抗原,遗传标记,结合补体,结合细胞,功能区或结构域,24,结合抗原遗传标记结合补体结合细胞功能区或结构域24,25,25,结构域的二级结构是,“,三明治”,Flash 3,26,结构域的二级结构是“三明治”Flash 326,免疫球蛋白超家族（,IgSF,）,27,免疫球蛋白超家族（IgSF）27,其它成分,J,链,（,joining chain,）,分泌片,（,secretory piece, sp,）,水解片段,功能区,28,其它成分28,29,29,30,30,31,31,第,2,节 抗体的异质性,抗体在结构和功能上差异的总和。,32,第2节 抗体的异质性抗体在结构和功能上差异的总和。32,33,33,一、免疫球蛋白的分类,类,（,class,）,：根据,CH,不同, ,IgG IgM IgA IgD IgE,亚类：,IgG1-G4,；,IgA1-A2,；,IgM1-M2,。,34,一、免疫球蛋白的分类类（class）：根据CH不同,型,（,type,）,：,根据,CL,不同分为两个型：,型和,型,亚型,：,型有亚型,35,型（type）：35,二、抗体的多样性,36,二、抗体的多样性36,免疫球蛋白既可与抗原特异性结合，本身又可作为抗原，激发机体特异性免疫应答。,三、内源性因素所致抗体异质性,免疫球蛋白的血清型,37,免疫球蛋白既可与抗原特异性结合，本身又可作为抗原，激发机体特,免疫球蛋白的双重身份,38,免疫球蛋白的双重身份38,免疫球蛋白的血清型,同种型,同种异型,独特型,39,免疫球蛋白的血清型同种型39,同种型（,isotype,）,指同一种属所有个体的,Ig,分子共有的,抗原特异性标志，位于,Ig C,区。,为,种属标志,（颜色不一样）,40,同种型（isotype）40,同种异型（,allotype,）,指同一种属不同个体间,Ig,分子所具有的不同的抗原特异性标志。为,个体标志,（花纹不一样）,41,同种异型（allotype）41,独特型（,idiotype,）,指,每个,Ig,分子所特有的抗原特异性标志，其决定簇又称为独特位，主要存在于,V,区。,42,独特型（idiotype）42,43,43,第,3,节 免疫球蛋白的生物学特性,免疫球蛋白的主要功能,各类免疫球蛋白的特性和功能,44,第3节 免疫球蛋白的生物学特性免疫球蛋白的主要功能44,一、免疫球蛋白的主要功能,免疫球蛋白,V,区的功能,免疫球蛋白,C,区的功能,45,一、免疫球蛋白的主要功能免疫球蛋白V区的功能45,1.,免疫球蛋白,V,区的功能,特异性识别结合抗原,中和毒素,阻断病原体入侵,46,1.免疫球蛋白V区的功能特异性识别结合抗原46,Ag,Ab,47,AgAb47,中和毒素,48,中和毒素48,阻止病毒入侵,49,阻止病毒入侵49,阻止细菌入侵,Flash 4,50,阻止细菌入侵Flash 450,1,）、,激活补体,IgM,、,IgG13,激活补体经典途径,凝聚的,IgA,或,IgG4,激活补体旁路途径,2.,免疫球蛋白,C,区的功能,51,2.免疫球蛋白C区的功能51,Flash 5,52,Flash 552,与细胞表面,FcR,结合,调理作用,（,opsonization,),；,IgFc,段与吞噬细胞表面,FcR,结合,促吞噬；,抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用,（,Ab-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC,),介导,I,型超敏反应,2,）细胞亲嗜性,53,与细胞表面F,Flash 6,54,Flash 654,抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用,Flash 7,55,抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用Flash 755,与细胞表面,Fc,受体结合,56,与细胞表面Fc受体结合56,与细胞表面,Fc,受体结合,57,与细胞表面Fc受体结合57,58,58,二、各,类,免疫球蛋白的特性和功能,IgG,IgM,IgA,IgD,IgE,59,二、各类免疫球蛋白的特性和功能IgG59,60,60,IgG,的特性和功能,血清中的主要抗体成分（,80%,）；半寿期长（,20-23,天）；,多数抗菌、抗病毒、抗毒素抗体均属,IgG,类,具有调理作用、,ADCC,作用等；,具有活化补体经典途径的能力（,IgG3IgG1IgG2,）；,61,IgG的特性和功能血清中的主要抗体成分（80%）；半寿期长（,出生后,3,个月开始合成，,3-5,岁接近成人水平,是,唯一,能,通过胎盘,的,Ig,，发挥自然被动免疫功能；,参与,型、,型超敏反应，某些自身免疫病的抗体也属,IgG,再次免疫应答的主要抗体,Flash 8,62,出生后3个月开始合成，3-5岁接近成人水平Flash 862,IgM,的特性和功能,为五聚体，分子量最大，称为巨球蛋白（,macroglobulin,）；,个体发育中最,先,出现的,Ig,，胚胎晚期即能产生，脐带血,IgM,增高提示宫内感染（如风疹病毒、巨细胞病毒感染等）；,63,IgM的特性和功能为五聚体，分子量最大，称为巨球蛋白（mac,抗原初次刺激机体时，是体内,最先,产生的,Ig,；血清,IgM,升高说明有近期感染；,有强大激活补体能力和调理作用，在机体早期免疫防御中具有重要作用；,天然血型抗体是,IgM,；,未成熟,B,细胞仅表达,mIgM,，记忆,B,细胞,mIgM,消失。,64,抗原初次刺激机体时，是体内最先产生的Ig；血清IgM升高说明,65,65,66,66,IgA,的特性和功能,分为单体的血清型和二聚体的分泌型,IgA,（,SIgA,）；,67,IgA的特性和功能分为单体的血清型和二聚体的分泌型IgA（,分泌型,IgA,主要由粘膜相关淋巴组织产生，存在于唾液、泪液、乳汁及呼吸道、消化道、泌尿道的分泌液中和粘膜表面，是机体粘膜局部抗感染免疫的重要因素。,初乳中的,sIgA,可对婴幼儿发挥自然被动免疫作用,68,分泌型IgA 主要由粘膜相关淋巴组织产生，存在于唾液、泪液、,IgD,的特性和功能,血清中含量低，其生物学作用尚不清楚,mIgD,可作为,B,细胞分化成熟标记，成熟,B,细胞同时表达,mIgM,和,mIgD,mIgM,mIgM,mIgD,成熟,B,细胞,活化,B,细胞,未成熟,B,细胞,69,IgD的特性和功能血清中含量低，其生物学作用尚不清楚mIgM,IgE,的特性和功能,是血清中含量最低的,Ig,；,与抗寄生虫免疫有关,属嗜细胞抗体，可与肥大细胞、嗜碱性粒细胞表面,FcR,结合，介导,I,型超敏反应。,Flash 9,70,IgE的特性和功能是血清中含量最低的Ig；Flash 970,初次接触,花粉,B,细胞产生特异性,IgE,IgE,结合于肥大细胞的,FcR,再次接触花粉,脱颗粒,花粉症,71,初次接触B细胞产生特异性IgEIgE结合于肥大细胞的FcR,五、人工制备抗体,多克隆抗体,单克隆抗体,基因工程抗体,72,五、人工制备抗体多克隆抗体72,多克隆抗体,（,polyclonal antibody,）,用含多种抗原决定簇的抗原物质免疫动物，刺激多个,B,细胞克隆所获得的免疫血清（含多种抗体的混合物），此为多克隆抗体。,来源广泛，制备容易；特异性不高。,73,多克隆抗体（polyclonal antibody）用含多,单克隆,B,细胞应答,多克隆,B,细胞应答,抗原,抗原,74,单克隆B细胞应答多克隆B细胞应答抗原抗原74,带有多个表位,抗原,针对不同表位的,B,细胞,克隆增殖,多种抗体的混合物,（多克隆抗体）,刺激小鼠,75,带有多个表位抗原针对不同表位的B细胞克隆增殖多种抗体的混合物,单克隆抗体,monoclonal antibody, mAb,由一个识别一种抗原表位的,B,细胞克隆产生的同源抗体,纯度高、特异性强、可大量生产。,76,单克隆抗体monoclonal antibody, mAb,77,77,为什么,HAT,培养基里面只剩下杂交瘤细胞？,正常浆细胞在体外培养难，寿命短。,骨髓瘤细胞在体外培养容易且永生，为什么在,HAT,培养基里会死亡？,78,为什么HAT培养基里面只剩下杂交瘤细胞？正常浆细胞在体外培养,单克隆抗体技术基本原理,哺乳类动物的细胞合成,DNA,有两条途径：,从头,磷酸核糖焦磷酸,尿嘧啶,补救,次黄嘌呤磷酸核糖转化酶,次黄嘌呤,胸腺嘧啶,氨基蝶呤,79,单克隆抗体技术基本原理哺乳类动物的细胞合成DNA有两条途径：,浆细胞在体外难生存,HAT,培养基里加入了氨基蝶呤，所以骨髓瘤细胞,不,能用,从头,合成途径,同时骨髓瘤细胞自己没有次黄嘌呤磷酸核糖转化酶，,不,能用,补救,合成途径,单克隆抗体技术基本原理,所以,HAT,中骨髓瘤细胞死亡,80,浆细胞在体外难生存单克隆抗体技术基本原理所以HAT中骨髓瘤细,为什么杂交瘤细胞能生存？,杂交瘤细胞能从浆细胞里面获得次黄嘌呤磷酸核糖转化酶，所以可以通过补救途径合成,DNA,杂交瘤细胞存活。,81,为什么杂交瘤细胞能生存？杂交瘤细胞能从浆细胞里面获得次黄嘌呤,基因工程抗体,又称重组抗体,借助,DNA,重组技术和蛋白质工程技术，按人们的意愿在基因水平上对,Ig,进行切割、拼接或修筛，重新组装成为新型抗体分子,82,基因工程抗体又称重组抗体82,Human-mouse chimeric Ab,83,Human-mouse chimeric Ab83,Recombinant single chain Ab:VH-linker-VL,84,Recombinant single chain Ab:VH,85,85,思考题,简述免疫球蛋白的结构,简述免疫球蛋白的功能,各类免疫球蛋白的生物学特性及功能,86,思考题简述免疫球蛋白的结构86,下一章问题,第五章 补体系统,1,、比较三条补体激活途径的主要差异。,2,、补体系统具有哪些生物学功能？,3,、补体系统在抗感染过程中的作用。,87,下一章问题 第五章 补体系统87,C4免疫球蛋白课件,88,