骨髓活检免疫组化的具体运用及病例分享实用ppt课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,骨髓活检免疫组化的具体运用及病例分享王蓉Ppt,骨髓活检免疫组化的具体运用及病例分享王蓉Ppt,1,骨髓活检的适应症,1.,全血细胞减少,2.,不明原因的肝脾肿大,3.,不明原因的发热,4.,骨髓干抽或稀释,5.,低增生性,MDS,或,AL,6.,淋巴瘤侵犯骨髓,7.,再生障碍性贫血,8.,骨髓转移性肿瘤,骨髓活检的适应症1.全血细胞减少,2,病例一,男，,23,岁，因“发热伴头痛,1,月余，右侧肢体疼痛,20,天”入院。,每日仍有发热，体温波动于约,37-39,，无明显畏寒、寒战，无盗汗纳差、腹胀，伴大便次数较前减少，肛门未停止排气，活动上肢时偶有胸骨旁局限性疼痛，无明显腹痛、腹泻，无恶心、呕吐，无咳嗽、咳痰，无皮疹，无尿频、尿急、尿痛，睡眠一般，近,2,月体重减轻,15,斤。,病例一男，23岁，因“发热伴头痛1月余，右侧肢体疼痛20天”,3,实验室检查,血常规提示：,WBC1.12 10,9,/L,，,LY92%,，,HB,88g/L,，,PLT112 10,9,/L,。,生化：白蛋白,37.1g/L,，乳酸脱氢酶,416U/L,，,-,谷氨酰转肽酶,62.9U/L,。,ECT,：全身多处骨代谢异常增高。,实验室检查血常规提示：WBC1.12 109/L ，LY9,4,骨髓涂片检查,提示三系增生明显活跃，血小板散在少见。,骨髓涂片检查提示三系增生明显活跃，血小板散在少见。,5,骨髓活检,结果提示：骨髓腔中见大量肿瘤细胞。,骨髓活检结果提示：骨髓腔中见大量肿瘤细胞。,6,免疫组化结果,CD3,（,-,），,CD20,（,-,），,CD38,（,-,），,CD138,（,+,），,MUM1,（,-,），,Ki-67,（,+,），,（,+,），,（,+,），,EMA,（,+,），,CKpan,（,+,），,Des,（,-,），,Myo D1,（,-,），,CD30,（,-,），,CD56,（,-,），,Syn,（,-,），,CgA,（,-,），,AFP,（,-,），,PLAP,（,-,），,CD117,（,-,），,P63,（,-,），,CD99,（,-,），,S100,（,-,），,CK7,（,-,），,CK20,（,-,），,TTF-1,（,-,），结合,HE,切片，本例为骨髓转移性恶性肿瘤，倾向转移性癌。,免疫组化结果 CD3（-），CD20（-），CD38（-,7,初诊MM，联合骨髓活检病理、骨髓穿刺及涂片流式细胞仪检测检测是目前MM骨髓诊断的“金标准”。,9% CD10:66.,EB病毒DNA定量：1.,典型CLL（LEF1阳性）,标本TCR、TCR重排检测阴性,髓系肿瘤由于细胞分化阶段不如淋系明显，所以髓系肿瘤主要依靠骨髓象及遗传学，仅作辅助诊断。,LEF1调节一系列与,髓系肿瘤由于细胞分化阶段不如淋系明显，所以髓系肿瘤主要依靠骨髓象及遗传学，仅作辅助诊断。,细胞周期和增殖相关的基因,在CLL组和非CLL组（包括所有WM、MCL、FL、SMZL、B-CLPD-U等）比较存在显著差异（P=0.,44 109/L，中性粒细胞 82.,2% CD13:20% CD11b:阴性 CD34:6.,LEF1在机体造血细胞，尤其是前B细胞和T淋巴细胞的正常分化过程中发挥着重要的调控作用,结合HE切片，本例考虑为多发性骨髓瘤。,LEF1在结肠癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌等多种实体肿瘤均呈高表达,典型CLL（LEF1阳性）,LEF1蛋白在CLL、FL标本中存在表达，阳性率分别为87.,血清免疫固定电泳：轻链L型；,CD117:阴性 CD19:96.,血清免疫固定电泳：轻链L型；,骨髓涂片再次复片,阅片可见一处成堆出血的异常细胞，骨髓转移性肿瘤。,初诊MM，联合骨髓活检病理、骨髓穿刺及涂片流式细胞仪检测检测,8,成堆出现的有核红细胞,成堆出现的有核红细胞,9,结果,诊断骨髓转移性肿瘤,结果诊断骨髓转移性肿瘤,10,病例二,女，,60,岁，因“全身肌肉关节疼痛,8,月余”入院（风湿科）。,患者,8,月余前无明显诱因下出现全身多部位疼痛，包括肢带肌及多关节疼痛，肩背及腰臀部疼痛明显，关节以双髋、双膝、双肩受累明显，伴头痛、双眼复视、耳鸣，伴面部麻木。,全身无皮疹，皮肤湿润；两侧颈部分别可触及肿大淋巴结一枚，约蚕豆大小，无触痛，质地韧，活动度可。,病例二女，60岁，因“全身肌肉关节疼痛8月余”入院（风湿科）,11,实验室检查,血常规：白细胞,17.44 10,9,/L,，中性粒细胞,82.10%,，红细胞计数,1.95 10,9,/L,，血红蛋白,57g/L,，,血小板计数,6510,9,/L,。,生化示：谷丙转氨酶,41.7U/L,谷草转氨酶,59.4U/L,乳酸脱氢酶,1000U/L,，,-,谷氨酰转肽酶,154U/L,，,碱性磷酸酶,495.8U/L,，总胆红素,22.3 umol/L,，间接胆红素,15.9 umol/L,，白蛋白,34.2g/L,。,实验室检查血常规：白细胞17.44 109/L，中性粒细胞,12,骨髓涂片,提示三系增生减低，阅片可见原幼细胞。,骨髓涂片提示三系增生减低，阅片可见原幼细胞。,13,骨髓活检,提示骨髓中原幼细胞明显增多，灶性增生。,骨髓活检提示骨髓中原幼细胞明显增多，灶性增生。,14,免疫组化结果,CD3,：散在小簇,+,，,CD5,：散在小簇,+,，,CD20,：,+,，,PAX5,：,+,，,CD34,：散在,+,，,MPO,：粒细胞,+,，,TdT,：,-,，,BCL-6,：,-,，,CD10,：,-,结合,HE,切片，本例提示为,B,细胞淋巴瘤侵犯骨髓,免疫组化结果CD3：散在小簇+，CD5：散在小簇+，CD20,15,三月后复查骨髓涂片,提示急性淋巴细胞白血病,三月后复查骨髓涂片提示急性淋巴细胞白血病,16,流式细胞结果,流式细胞结果,17,1.R1,门原始细胞占,68.0%,R2,淋巴细胞占,18.3%;,R1,门表达：,HLA-DR:97.2% CD13:20% CD11b:,阴性,CD34:6.1%,CD117:,阴性,CD19:96.1% CD64:,阴性,CD33:52.2%,CD14:,阴性,CD15:65.1% CD56:,阴性,CD38:98.7%,CD22:43.4% CD20:64.9% CD10:66.9% CD3:,阴性,CD7:,阴性,CD5:,阴性,CD8:,阴性,CD4:,阴性,CD2:,阴性,TDT:33.7% cMPO:,阴性,cCD3:,阴性,cCD79a:88.5%,结论：,CD13+CD33+CD15+B-ALL,建议进一步检测,t(9;22).,骨髓活检免疫组化的具体运用及病例分享实用ppt课件,18,染色体结果,46,XX20,染色体结果46,XX20,19,分子生物学结果,IGH,、,IGK,重排检测阳性,标本,TCR,、,TCR,重排检测阴性,分子生物学结果IGH、IGK重排检测阳性,20,结果,诊断B-ALL,结果诊断B-ALL,21,转录因子家族的成员之一,转录因子家族的成员之一,LEF1是LEF1/TCF,LEF1蛋白的表达水平在WM、MCL、FL、SMZL、B-CLPD-U等表达较低，组间比较无统计学差异（P=0.,8U/L ，总胆红素 22.,阅片可见一处成堆出血的异常细胞，骨髓转移性肿瘤。,骨髓提示大量吞噬组织细胞，三系增生活跃，形态大致正常。,脾脏内侧缘团块样稍低密度影及脾门处低密度影，性质待定。,77 109/L ，PLT 50 109/L。,LEF1在机体造血细胞，尤其是前B细胞和T淋巴细胞的正常分化过程中发挥着重要的调控作用,提示三系增生明显活跃，血小板散在少见。,CD3：散在小簇+，CD5：散在小簇+，CD20：+，PAX5：+，CD34：散在+，MPO：粒细胞+，TdT：-，BCL-6：-，CD10：-,免疫球蛋白：免疫球蛋白M 0.,肝脏膈顶部不规则片状低密度影，考虑偏良性病变可能。,胆囊增大，结合MR，考虑胆囊炎。,该检测标本IGK重排检测阳性,LEF1是LEF1/TCF,男，23岁，因“发热伴头痛1月余，右侧肢体疼痛20天”入院。,在78例CLL中共发现10例LEF1阴性患者,胆囊增大，结合MR，考虑胆囊炎。,对异常细胞进行定位及定性,病例三,男，,70,岁，因“腹痛半月余，加重伴皮肤巩膜黄染,8,天”入院。（消化科）,3,月前，患者无明显诱因出现腹部隐痛，伴腹胀、厌食，偶有恶心，无呕吐，无发热，未予重视。,1,周后，患者饮酒,1,斤后，腹痛、腹胀、厌食等症状加重。,患者诉血便，共,4,次，每次量约,50ml,，色鲜红，不成形，诉便后腹痛轻微缓解，无呕吐、恶心、发热，发现皮肤、巩膜逐渐增黄。,转录因子家族的成员之一病例三男，70岁，因“腹痛半月余，加重,22,实验室检查,血常规：,N 0.77 10,9,/L,，,PLT 50 10,9,/L,。,生化：,ALT,321U/L,，,AST,334U/L,，,LDH,601U/L,，,ALB,23.60g/L,，,TBIL 82.70umol/L,，,DBIL,72.10umol/L,。,腹部增强,CT,：胆囊泥沙样结石，胆囊炎。前列腺肿大。脾大。,实验室检查血常规：N 0.77 109/L ，PLT 50,23,全腹部增强,CT,肝脏膈顶部不规则片状低密度影，考虑偏良性病变可能。炎性病变？脂肪肝；胆囊增大，结合,MR,，考虑胆囊炎。脾大；脾脏内侧缘团块样稍低密度影及脾门处低密度影，性质待定。腹腔干周围脂肪密度稍高，局限性腹脂炎可能。盆腔少许积液。,全腹部增强CT肝脏膈顶部不规则片状低密度影，考虑偏良性病变可,24,CT,引导下脾穿刺术,病理检查结果：（脾穿刺）极少量穿刺组织，见出血，极少量纤维结缔组织，和极少量肝组织。,CT引导下脾穿刺术病理检查结果：（脾穿刺）极少量穿刺组织，见,25,肝脏穿刺,病理示：（肝穿刺）条索样肝组织，可见3个汇管区，肝小叶结构存在，肝细胞轻度水肿变性，部分肝细胞脂肪变性，部分肝细胞内胆汁淤积，汇管区少量炎细胞浸润。,肝脏穿刺病理示：（肝穿刺）条索样肝组织，可见3个汇管区，肝小,26,PET-CT,腹部显影清晰，肝脏密度较低，,CT,值约,37HU,，肝脏顶部见一大小约,3.3cm 2.8cm,稍低密度影，,CT,值约,30HU,，放射性摄取增高，,SUV,最大值,12.6,；脾脏体积稍大，其内见,2,处放射性摄取增高灶，较大约,5.3cm 4.4cm,，密度稍低，,CT,值约,35HU,，,SUV,最大值,12.2,；右侧心包脂肪垫见一大小约稍大淋巴结影，放射性摄取增高，,SUV,最大值,5.8,。,PET-CT腹部显影清晰，肝脏密度较低，CT值约37HU，肝,27,第一次骨髓涂片（,3.06,）,提示三系增生减低，骨髓稀释可能。,第一次骨髓涂片（3.06）提示三系增生减低，骨髓稀释可能。,28,041012/L ；,EB病毒DNA定量：1.,MM患者骨髓瘤细胞呈局灶性分布、骨髓粘滞度高以及骨髓穿刺抽取骨髓量较多导致标本稀释所致，因此判定肿瘤负荷以骨髓活检最为准确。,患者8月余前无明显诱因下出现全身多部位疼痛，包括肢带肌及多关节疼痛，肩背及腰臀部疼痛明显，关节以双髋、双膝、双肩受累明显，伴头痛、双眼复视、耳鸣，伴面部麻木。,三系增生减低，异常细胞占2%，可见吞噬组织细胞。,提示三系增生明显活跃，血小板散在少见。,CD3（-），CD20（-），CD38（-），CD138（+），MUM1（-），Ki-67（+），（+），（+），EMA（+），CKpan（+），Des（-），Myo D1（-），CD30（-），CD56（-），Syn（-），CgA（-），AFP（-），PLAP（-），CD117（-），P63（-），CD99（-），S100（-），CK7（-），CK20（-），TTF-1（-），结合HE切片，本例为骨髓转移性恶性肿瘤，倾向转移性癌。,髓系肿瘤由于细胞分化阶段不如淋系明显，所以髓系肿瘤主要依靠骨髓象及遗传学，仅作辅助诊断。,1% CD56:阴性 CD38:98.,血清免疫固定电泳：轻链L型；,每日仍有发热，体温波动于约37-39，无明显畏寒、寒战，无盗汗纳差、腹胀，伴大便次数较前减少，肛门未停止排气，活动上肢时偶有胸骨旁局限性疼痛，无明显腹痛、腹泻，无恶心、呕吐，无咳嗽、咳痰，无皮疹，无尿频、尿急、尿痛，睡眠一般，近2月体重减轻15斤。,24h尿轻链总量：L轻链 7.,两侧颈部分别可触及肿大淋巴结一枚，约蚕豆大小，无触痛，质地韧，活动度可。,EB病毒DNA定量：1.,95 109/L ，血红蛋白57g/L，血小板计数65109/L 。,ECT：全身多处骨代谢异常增高。,提示三系增生明显活跃，血小板散在少见。,79,XX,-1,-1,-3,-4,-4,-5,+8,-9,-10,-13,-16,-16,-16,-16,+18,-21,-22,+mar1,+mar2cp3/46,XX7,胆囊增大，结合MR，考虑胆囊炎。,转录因子家族的成员之一,第二次骨髓涂片（,3.24,）,三系增生减低，异常细胞占2%，可见吞噬组织细胞。,041012/L ；第二次骨髓涂片（3.24）三系增生减低,29,第三次骨髓涂片（,3.30,）,骨髓提示大量吞噬组织细胞，三系增生活跃，形态大致正常。,第三次骨髓涂片（3.30）骨髓提示大量吞噬组织细胞，三系增生,30,骨髓活检（,3.24,）,提示异常细胞散在及小簇浸润，胞体偏大，形态不规则，胞浆量丰富，核不规则，核染色质较粗，部分可见核仁。阅片可见吞噬组织细胞。,骨髓活检（3.24）提示异常细胞散在及小簇浸润，胞体偏大，形,31,免疫组化,CD3,：散在,+,，,CD5,：散在,+,，,CD20,：散在,+,，,PAX5,：散在,+,，,CD2,：,+,，,CD56,：,+,，,TIA1,：,+,。,结合,HE,切片，本例提示为,NK,细胞淋巴瘤侵犯骨髓可能性大。,免疫组化CD3：散在+，CD5：散在+，CD20：散在+，P,32,第二次骨髓活检（,3.30,）,提示三系增生活跃，易见吞噬组织细胞，未见异形细胞。,第二次骨髓活检（3.30）提示三系增生活跃，易见吞噬组织细胞,33,流式细胞，染色体及分子生物学均未见异常,EB,病毒,DNA,定量：,1.36 10,4,/ml,。,结论：考虑侵袭性,NK,淋巴瘤？,流式细胞，染色体及分子生物学均未见异常,34,CD7:阴性 CD5:阴性 CD8:阴性 CD4:阴性,提示异常细胞散在及小簇浸润，胞体偏大，形态不规则，胞浆量丰富，核不规则，核染色质较粗，部分可见核仁。,CD7:阴性 CD5:阴性 CD8:阴性 CD4:阴性,患者诉血便，共4次，每次量约50ml，色鲜红，不成形，诉便后腹痛轻微缓解，无呕吐、恶心、发热，发现皮肤、巩膜逐渐增黄。,胆囊增大，结合MR，考虑胆囊炎。,LEF1蛋白在CLL、FL标本中存在表达，阳性率分别为87.,典型CLL（LEF1阳性）,胸腹部CT：双侧胸膜多发淋巴结影，伴两侧胸腔积液，双侧肾上腺多发结节影，考虑转移瘤可能，支气管炎，两下肺慢性炎症，双侧肾盂结石；,肝脏膈顶部不规则片状低密度影，考虑偏良性病变可能。,典型CLL（LEF1阳性）,4U/L 乳酸脱氢酶1000U/L， -谷氨酰转肽酶154U/L， 碱性磷酸酶495.,淋巴增强因子-1（LEF1）,70例MM患者不同检测方法肿瘤负荷的比较,CD3（-），CD20（-），CD38（-），CD138（+），MUM1（-），Ki-67（+），（+），（+），EMA（+），CKpan（+），Des（-），Myo D1（-），CD30（-），CD56（-），Syn（-），CgA（-），AFP（-），PLAP（-），CD117（-），P63（-），CD99（-），S100（-），CK7（-），CK20（-），TTF-1（-），结合HE切片，本例为骨髓转移性恶性肿瘤，倾向转移性癌。,结合HE切片，本例考虑为多发性骨髓瘤。,右侧心包脂肪垫见一大小约稍大淋巴结影，放射性摄取增高，SUV最大值5.,髓系肿瘤由于细胞分化阶段不如淋系明显，所以髓系肿瘤主要依靠骨髓象及遗传学，仅作辅助诊断。,路下游的关键核内转录因子,提示三系增生明显活跃，血小板散在少见。,1g/L，乳酸脱氢酶416U/L，-谷氨酰转肽酶62.,病例四,女，,52,岁，上腹部疼痛,7,天，伴鼻出血,1,次,患者因恶心呕吐，为胃内容物，次数频繁，排便排气，,2,天前出现鼻出血,1,次，鲜红色，量约,20ml,。,体格检查：神志清，精神萎，发育正常，营养中等，查体合作，中度贫血貌，全身皮肤粘膜无黄染，无肝掌及蜘蛛痣，双侧颈部可触及肿大淋巴结，约,11cm,，质中，有触痛，余浅表淋巴结未及肿大。右侧季肋部疼痛。肝脾未及。,CD7:阴性 CD5:阴性,35,实验室检查,血常规示：,WBC2.7510,9,/L,；,RBC2.0410,12,/L,；,HB63g/L,；血小板计数,3510,9,/L,。,生化检查：肌酐,336.7umol/L,，,尿酸,1122umol/L,，,乳酸脱氢酶,597U/L,，,总蛋白,56.90g/L,，,白蛋白,34.10g/L,；,血清免疫固定电泳：轻链,L,型；,24h,尿轻链总量：,L,轻链,7.144g,腹部,B,超：脂肪肝，右肾结石，左肾囊肿，胆胰脾输尿管未见明显异常；,胸腹部,CT,：双侧胸膜多发淋巴结影，伴两侧胸腔积液，双侧肾上腺多发结节影，考虑转移瘤可能，支气管炎，两下肺慢性炎症，双侧肾盂结石；,免疫球蛋白：免疫球蛋白,M 0.17g/L,免疫球蛋,A 0.25g/L,免疫球蛋白,G5.13g/L,；,铁蛋白,796.50ng/mL,；,实验室检查,36,骨髓涂片,骨髓增生活跃,阅片可见,异常细胞,1010,骨髓涂片骨髓增生活跃阅片可见1010,37,10010,10010,10010,10010,异常细胞,：,该细胞胞体偏大，胞浆量丰富，呈蓝色，有泡沫感；胞核大，大多不规则，异型性明显，可见多核。,10010100101001010010异常细胞：该,38,初步考虑那些疾病？,1.,淋巴瘤骨髓浸润？,2.,骨髓转移性肿瘤？,3.,急性白血病？,4.,多发性骨髓瘤？,5.,其他疾病？,初步考虑那些疾病？1.淋巴瘤骨髓浸润？,39,骨髓病理,提示，结节样增生的幼稚细胞，细胞胞体偏大，胞浆量丰富；胞核大，大多不规则，异型性明显，约占有核细胞80%。,骨髓病理提示，结节样增生的幼稚细胞，细胞胞体偏大，胞浆量丰富,40,免疫组化结果,组化：,CD38,：,+,，,CD138,：,+,，,CD56,：,-,，,：,-,，,：,+,，,MUM1,：,+,，,CD34,：血管内皮,+,。,结合,HE,切片，本例考虑为多发性骨髓瘤。,免疫组化结果组化：CD38：+，CD138：+，CD56,41,流式细胞,异常浆细胞占33%（CD138+CD38+CD19-CD56-）,流式细胞异常浆细胞占33%（CD138+CD38+CD19-,42,染色体核型分析,79,XX,-1,-1,-3,-4,-4,-5,+8,-9,-10,-13,-16,-16,-16,-16,+18,-21,-22,+mar1,+mar2cp3/46,XX7,染色体核型分析79,XX,-1,-1,-3,-4,-4,-5,43,分子生物学检查,该检测标本IGK重排检测阳性,分子生物学检查该检测标本IGK重排检测阳性,44,三系增生减低，异常细胞占2%，可见吞噬组织细胞。,1g/L，乳酸脱氢酶416U/L，-谷氨酰转肽酶62.,患者诉血便，共4次，每次量约50ml，色鲜红，不成形，诉便后腹痛轻微缓解，无呕吐、恶心、发热，发现皮肤、巩膜逐渐增黄。,CD3（-），CD20（-），CD38（-），CD138（+），MUM1（-），Ki-67（+），（+），（+），EMA（+），CKpan（+），Des（-），Myo D1（-），CD30（-），CD56（-），Syn（-），CgA（-），AFP（-），PLAP（-），CD117（-），P63（-），CD99（-），S100（-），CK7（-），CK20（-），TTF-1（-），结合HE切片，本例为骨髓转移性恶性肿瘤，倾向转移性癌。,组化：CD38：+，CD138：+，CD56：-，：-，：+，MUM1：+，CD34：血管内皮+。,典型CLL（LEF1阳性）,提示三系增生明显活跃，血小板散在少见。,转录因子家族的成员之一,肝脏膈顶部不规则片状低密度影，考虑偏良性病变可能。,EB病毒DNA定量：1.,多发性骨髓瘤型DS分期III期B组ISS分期期,3月前，患者无明显诱因出现腹部隐痛，伴腹胀、厌食，偶有恶心，无呕吐，无发热，未予重视。,EB病毒DNA定量：1.,初诊MM，联合骨髓活检病理、骨髓穿刺及涂片流式细胞仪检测检测是目前MM骨髓诊断的“金标准”。,ECT：全身多处骨代谢异常增高。,慢淋免疫表型积分均4分,9 umol/L ，白蛋白34.,CD3（-），CD20（-），CD38（-），CD138（+），MUM1（-），Ki-67（+），（+），（+），EMA（+），CKpan（+），Des（-），Myo D1（-），CD30（-），CD56（-），Syn（-），CgA（-），AFP（-），PLAP（-），CD117（-），P63（-），CD99（-），S100（-），CK7（-），CK20（-），TTF-1（-），结合HE切片，本例为骨髓转移性恶性肿瘤，倾向转移性癌。,LEF1蛋白在CLL、FL标本中存在表达，阳性率分别为87.,ECT：全身多处骨代谢异常增高。,多发性骨髓瘤,型,DS,分期,III,期,B,组,ISS,分期,期,结果,三系增生减低，异常细胞占2%，可见吞噬组织细胞。多发性骨髓瘤,45,70,例,MM,患者不同检测方法肿瘤负荷的比较,方法,骨髓涂片,流式细胞,骨髓活检,MM,细胞比例,26.29%22.01%,7.20% 10.92%,59.50%29.70%,MM,患者骨髓瘤细胞呈局灶性分布、骨髓粘滞度高以及骨髓穿刺抽取骨髓量较多导致标本稀释所致，因此判定肿瘤负荷以骨髓活检最为准确。初诊,MM,，联合骨髓活检病理、骨髓穿刺及涂片流式细胞仪检测检测是目前,MM,骨髓诊断的“金标准”。,70例MM患者不同检测方法肿瘤负荷的比较方法骨髓涂片流式细胞,46,免疫组化,是免疫学与组织化学相结合的一个分支。,以特异性抗体（一抗）与组织中相应抗原反应后，加入酶标记的第二抗体，二抗与抗原,-,抗体复合物的一抗结合，形成抗原,-,抗体,-,酶复合物，用所标记酶的底物与酶反应生成有色产物，产物生成部位即为抗原存在部位。,免疫组化是免疫学与组织化学相结合的一个分支。,47,免疫组化的优点,对异常细胞进行定位及定性,对疾病急性诊断及鉴别诊断,回顾性诊断及分析,免疫组化的优点对异常细胞进行定位及定性,48,免疫组化的应用,淋巴瘤的诊断，分型及鉴别诊断,髓系肿瘤由于细胞分化阶段不如淋系明显，所以髓系肿瘤主要依靠骨髓象及遗传学，仅作辅助诊断。,免疫组化的应用淋巴瘤的诊断，分型及鉴别诊断,49,结果的判定,结果的判定,50,骨髓活检免疫组化的具体运用及病例分享实用ppt课件,51,总结,临床,明确诊断,总结临床明确诊断,52,淋巴增强因子,-1,（,LEF1,）,LEF1,是,LEF1/TCF,转录因子家族的成员之一,LEF1,是经典的,Wnt,信号通,路下游的关键核内转录因子,LEF1,调节一系列与,细胞周期和增殖相关的基因,淋巴增强因子-1（LEF1） LEF1是LEF1/TCF,53,LEF1,LEF1,在结肠癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌等多种实体肿瘤均呈高表达,LEF1,在机体造血细胞，尤其是前,B,细胞和,T,淋巴细胞的正常分化过程中发挥着重要的调控作用,LEF1,在多种血液恶性肿瘤中表达增高，在不同,种类的恶性肿瘤中有着不完全相同的甚至完全相反的作用。,LEF1LEF1在结肠癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌等多种实体肿,54,骨髓免疫组化,病种,阳性病例数（例）,总病例数（例）,阳性比例（,%）,CLL,68,78,87.2,FL,2,20,10.0,MCL,0,17,0,WM,0,20,0,MZL,0,5,0,B-CLPD-U,0,5,0,骨髓免疫组化病种阳性病例数（例）总病例数（例）阳性比例（%）,55,LEF1,蛋白在,CLL,、,FL,标本中存在表达，阳性率分别为,87.2%,、,10.0%,，在所有,WM,、,MCL SMZL,、,B-CLPD-U,中不表达。,在,CLL,组和,非,CLL,组（包括所有,WM,、,MCL,、,FL,、,SMZL,、,B-CLPD-U,等）比较存在显著差异（,P=0.000,）。,LEF1,蛋白的表达水平在,WM,、,MCL,、,FL,、,SMZL,、,B-CLPD-U,等,表达较低，,组间比较无统计学差异（,P=0.481,）。,结果分析,结果分析,56,在,78,例,CLL,中共发现,10,例,LEF1,阴性,患者,慢淋免疫表型积分均,4,分,经过,FISH,检测,t(11;14),排除,MCL,10,例,LEF1,阴性患者,均为具有,不典型免疫表型,进一步分析免疫组化结果,在78例CLL中共发现10例LEF1阴性患者进一步分析免疫组,57,LEF1,阴性,CLL,典型,CLL,（,LEF1,阳性）,CD5,表达,CD20,表达,CD5,中等,CD5,弱,CD20,弱,CD20,强,LEF1阴性CLL典型CLL（LEF1阳性）CD5表达CD2,58,CD148,CD200,CD200,CD148,LEF1,阴性,CLL,典型,CLL,（,LEF1,阳性）,CD200/CD1481,CD200/CD1481,CD148CD200CD200CD148LEF1阴性CLL典,59,小结,LEF1,的表达在,CLL,中显著升高，与,B-CLPD,组的表达存在显著差异，且以,LEF1,蛋白作为鉴别诊断,CLL,具有较高的特异度和敏感度（分别为,97%,，,87%),，,提示,B-CLPD,患者骨髓,LEF1,蛋白表达水平可作为,CLL,和其他,B-CLPD,鉴别。,LEF1,表达阴性的,CLL,具有独特的免疫表型。,小结,60,Thank you!,Thank you!,61,提示三系增生明显活跃，血小板散在少见。,结合HE切片，本例考虑为多发性骨髓瘤。,胆囊增大，结合MR，考虑胆囊炎。,8cm稍低密度影，CT值约30HU，放射性摄取增高，SUV最大值12.,IGH、IGK重排检测阳性,CD3：散在小簇+，CD5：散在小簇+，CD20：+，PAX5：+，CD34：散在+，MPO：粒细胞+，TdT：-，BCL-6：-，CD10：-,25g/L,免疫球蛋白G5.,LEF1在机体造血细胞，尤其是前B细胞和T淋巴细胞的正常分化过程中发挥着重要的调控作用,提示三系增生活跃，易见吞噬组织细胞，未见异形细胞。,转录因子家族的成员之一,17g/L,免疫球蛋A 0.,多发性骨髓瘤型DS分期III期B组ISS分期期,4U/L 乳酸脱氢酶1000U/L， -谷氨酰转肽酶154U/L， 碱性磷酸酶495.,提示骨髓中原幼细胞明显增多，灶性增生。,男，23岁，因“发热伴头痛1月余，右侧肢体疼痛20天”入院。,结合HE切片，本例考虑为多发性骨髓瘤。,淋巴瘤的诊断，分型及鉴别诊断,1g/L，乳酸脱氢酶416U/L，-谷氨酰转肽酶62.,LEF1在机体造血细胞，尤其是前B细胞和T淋巴细胞的正常分化过程中发挥着重要的调控作用,提示三系增生明显活跃，血小板散在少见。,病理示：（肝穿刺）条索样肝组织，可见3个汇管区，肝小叶结构存在，肝细胞轻度水肿变性，部分肝细胞脂肪变性，部分肝细胞内胆汁淤积，汇管区少量炎细胞浸润。,谢谢观看！,提示三系增生明显活跃，血小板散在少见。谢谢观看！,62,