妇科感染常见病原菌及检测方法(板式整齐)课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,优质内容,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,优质内容,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,妇科感染常见病原菌及检测方法,1,优质内容,妇科感染常见病原菌及检测方法1优质内容,妇科感染常见疾病,阴道病,/,阴道炎,尿道炎,子宫颈炎,盆腔感染,子宫内膜炎,输卵管卵巢脓肿,输卵管炎症,2,优质内容,妇科感染常见疾病阴道病/阴道炎2优质内容,妇科感染实验室检查的意义,很多妇科感染症状、体征有很多相似之处。,临床诊断本身既不敏感，也不特异,。,实验室诊断可以：,明确病原微生物，使治疗更具针对性；,提高患者治疗依从性；,使患者更有可能遵从性伴侣告知,。,3,优质内容,妇科感染实验室检查的意义很多妇科感染症状、体征有很多相似之处,病例一,患者，女性，,24,岁，已婚，孕,25,周。外阴瘙痒一周来就诊。妇检：宫高与妊娠月份相符,外阴潮红、充血，见大量黄色脓性分泌物。,考虑什么病？进一步做什么检查？,4,优质内容,病例一患者，女性，24岁，已婚，孕25周。外阴瘙痒一周来就诊,阴道炎,正常情况下阴道内寄居有大量需氧菌及厌氧菌，形成,正常的阴道菌群,。,任何原因将阴道菌群生态平衡打破，可形成,条件致病菌，引起阴道炎,。,阴道粘膜生态系统,5,优质内容,阴道炎正常情况下阴道内寄居有大量需氧菌及厌氧菌，形成正常的阴,阴道炎,临床常见有：细菌性阴道病、念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道炎。,吴文湘,廖秦平,.,阴道炎的诊治进展,J.,中国实用妇科与产科杂志, 2009(12):949-952.,6,优质内容,阴道炎临床常见有：细菌性阴道病、念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道炎,阴道炎相关病原实验室检查,常见病原因子,诊断方法,最优标本,转运要求及最佳时间,酵母菌,（,pH4.5,）,盐水湿片和,10,KOH,阴道分泌物拭子,置于,0.5mL,生理盐水或转运拭子,，,室温,，,2h,定量革兰染色,阴道分泌物拭子,转运拭子送检，,室温,，,12h,DNA,杂交探针,阴道分泌物拭子,室温，,7d,毛滴虫,（,pH4.5,）,盐水湿片,阴道分泌物拭子,置于盐水送检,， 室温,，,30min,（,最佳）,2h,快速抗原检查,阴道上皮,/,分泌物拭子,转运拭子或盐水送检， 室温，,24h,DNA,杂交探针,阴道分泌物拭子,室温，,7d,培养,阴道分泌物拭子,直接放入,InPouch TV,培养系统送检,室温，,48h,核酸扩增实验,阴道拭子、宫颈拭子、尿液、液基细胞学标本、尿道拭子、直肠拭子、咽拭子,室温，,7d,7,优质内容,阴道炎相关病原实验室检查常见病原因子 诊断方法最优标本 转运,病例,1,患者，女性，,24,岁，已婚，孕,25,周。外阴瘙痒一周来就诊。妇检：宫高与妊娠月份相符,外阴潮红、充血，见大量黄色脓性分泌物。,医生：,根据病史及临床表现可初步诊断为,阴道炎,。,取阴道分泌物拭子，嘱病人立即送检,，以明确病原学诊断。,8,优质内容,病例1患者，女性，24岁，已婚，孕25周。外阴瘙痒一周来就诊,念珠菌性阴道炎,主要病原菌为：,白色假丝酵母菌 约占,80%-90%,光滑假丝酵母菌,热带假丝酵母菌,近平滑假丝酵母菌,约占,10%-20%,9,优质内容,念珠菌性阴道炎主要病原菌为：约占10%-20%9优质内容,念珠菌性阴道炎的实验室诊断,1. pH 4.5,2.,盐水湿片,+10% KOH,3.,培养,4. DNA,杂交探针,10,优质内容,念珠菌性阴道炎的实验室诊断1. pH 4.5,2.,盐水湿片,+10% KOH,3.,定量革兰染色,Nugent,评分,4. DNA,杂交探针,线索细胞,KOH,氢氧化钾,18,优质内容,细菌性阴道病的实验室诊断1. pH 4.52. 盐水,盐水湿片,线索细胞,是诊断,BV,的最敏感特异的指标,。,19,优质内容,盐水湿片线索细胞是诊断BV的最敏感特异的指标。19优质内容,胺试验,将一滴阴道分泌物滴于玻片上，再加一滴,10,KOH,，可闻到氨味或鱼腥样气味，即胺试验阳性。,10%KOH,氢氧化钾,20,优质内容,胺试验将一滴阴道分泌物滴于玻片上，再加一滴10KOH，可闻,定量革兰染色,Nugent,评分,定量革兰染色是,BV,诊断最特异的检查。,形态类别,每个油镜视野菌体数,/,分值,得分,0,1,1 - 5,5 -30,30,加德纳菌,/,普雷沃菌,(,革兰染色不定、球杆菌,),0,1,2,3,4,动弯杆菌,0,1,2,3,4,乳酸杆菌,4,3,2,1,0,21,优质内容,定量革兰染色 Nugent评分定量革兰染色是BV 诊断最,定量革兰染色,Nugent,评分,乳酸杆菌革兰染色,22,优质内容,定量革兰染色 Nugent评分乳酸杆菌革兰染色22优质内,定量革兰染色,Nugent,评分,阴道加德纳菌革兰染色,23,优质内容,定量革兰染色 Nugent评分阴道加德纳菌革兰染色23优,定量革兰染色,Nugent,评分,动弯杆菌革兰染色,24,优质内容,定量革兰染色 Nugent评分动弯杆菌革兰染色24优质内,定量革兰染色,Nugent,评分,线索细胞革兰染色,25,优质内容,定量革兰染色 Nugent评分线索细胞革兰染色25优质内,定量革兰染色,Nugent,评分,分数解释标准：,0-3,分 正常,4-7,分 中介,7-10,分 细菌性阴道炎,26,优质内容,定量革兰染色 Nugent评分分数解释标准：26优质内容,定量革兰染色,Nugent,评分,乳酸杆菌,0,分，上皮细胞周围非常清楚。,评分：,0,分,27,优质内容,定量革兰染色 Nugent评分乳酸杆菌0分，上皮细胞周围,定量革兰染色,Nugent,评分,乳酸杆菌,0,分，少量杂菌，见白细胞和菌丝。,评分：,1,分 诊断：,BV,阴性，但诊断为,VVC,28,优质内容,定量革兰染色 Nugent评分乳酸杆菌0分，少量杂菌，见,定量革兰染色,Nugent,评分,乳酸杆菌,2,分，加德纳菌,/,普雷沃菌等,3,分，动弯杆菌,1,分。,评分：,6,分 诊断：,BV,中间型,29,优质内容,定量革兰染色 Nugent评分乳酸杆菌2分，加德纳菌/普,定量革兰染色,Nugent,评分,乳酸杆菌,3,分，加德纳菌,/,普雷沃菌等,3,分，动弯杆菌,4,分。,评分：,10,分 诊断：,BV,30,优质内容,定量革兰染色 Nugent评分乳酸杆菌3分，加德纳菌/普,阴道毛滴虫,阴道的致病性厌氧寄生原虫，虫体为,8-45m,，呈梨形或椭圆形，无色透明，大小为白细胞的,2-3,倍。,31,优质内容,阴道毛滴虫 阴道的致病性厌氧寄生原虫，虫体为 8-,毛滴虫性阴道炎的实验室诊断,1. pH 4.5,2.,盐水湿片,3.,快速抗原检查,4. DNA,杂交探针,5.,培养,6.,核酸扩增实验,32,优质内容,毛滴虫性阴道炎的实验室诊断1. pH 4.52. 盐,盐水湿片,33,优质内容,盐水湿片33优质内容,革兰染色,34,优质内容,革兰染色34优质内容,快速抗原检查,检测阴道毛滴虫特定的抗原,已有商品化试剂,最优试验条件并不需要活的微生物,35,优质内容,快速抗原检查检测阴道毛滴虫特定的抗原35优质内容,培养,36,优质内容,培养36优质内容,核酸扩增试验,APTIMA Trichomonas vaginalis (ATV) test,（,Gen-Probe, Inc. San Diego, CA,）是近期,FDA,批准的检查，既可用于女性,TV,的筛检，也可用于诊断。,可以使用多种标本类型。,一些实验室也可通过比对，验证自己的,PCR,方法。,37,优质内容,核酸扩增试验APTIMA Trichomonas vagin,病例二,患者，女性，,40,岁，已婚，阴道分泌物增多，伴腰酸，偶有性生活后出血,2,年。检查外阴正常，宫颈肥大，,度糜烂，接触性出血。,考虑什么病？进一步做什么检查？,38,优质内容,病例二患者，女性，40岁，已婚，阴道分泌物增多，伴腰酸，偶有,子宫颈炎,子宫颈可因各种致病因素的侵袭而发生炎症，有急性和慢性两种。,疾病,致病菌,急性宫颈炎,沙眼衣原体、淋病奈瑟菌,慢性宫颈炎,性传播病原体,：沙眼衣原体、淋病奈瑟菌、单纯疱疹病毒,内源性病原体,：葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌等；,部分与引起阴道炎的病原菌相同,39,优质内容,子宫颈炎子宫颈可因各种致病因素的侵袭而发生炎症，有急性和慢性,尿道炎,是指尿道黏膜的炎症 。多为致病菌逆行侵入尿道引起。,疾病,致病菌,淋病性尿道炎,淋病奈瑟菌,非淋病性尿道炎,沙眼衣原体、解脲支原体、阴道毛滴虫、嗜血短杆菌、单纯疱疹病毒最常见,非特异性尿道炎,大肠埃希杆菌、链球菌属及葡萄球菌属,40,优质内容,尿道炎是指尿道黏膜的炎症 。多为致病菌逆行侵入尿道引起。疾病,尿道炎,/,宫颈炎相关病原实验室检查,常见病原因子,诊断方法,最优标本,转运要求及最佳时间,沙眼衣原体,核酸扩增实验,尿液、宫颈内、阴道和,/,或尿道拭子（直肠、咽部、结膜、液基细胞学标本）,实验室提供转运装置，,室温，,2d,杂交探针,宫颈内或尿道拭子,实验室提供转运装置，,室温，,2d,培养,宫颈内、尿道、结膜、,NP,、咽、直肠拭子,实验室提供转运装置，,4,冷藏；,2h,直接免疫荧光染色,结膜拭子,转运培养基，室温，,2h,淋病奈瑟菌,革兰染色,尿道分泌物,直接涂片或将拭子置于转运培养基，室温，立即,核酸扩增实验,尿液、宫颈内、阴道和,/,或尿道拭子（直肠、咽部、结膜、液基细胞学标本）,实验室提供转运装置，,室温，,2d,杂交探针,宫颈内或尿道拭子,实验室提供转运装置，,室温，,2d,培养,宫颈内、尿道、结膜、,NP,、咽、直肠拭子,转运培养基， 室温， ,1h,，不要冷藏 标本,41,优质内容,尿道炎/宫颈炎相关病原实验室检查常见病原因子 诊断方法 最优,尿道炎,/,宫颈炎相关病原实验室检查,常见病原因子,诊断实验,最优标本,转运要求及最佳时间,阴道毛滴虫,盐水湿片,宫颈内或尿道拭子,置于,0.5mL,盐水，,30min-2h,快速抗原检查,宫颈内拭子,实验室提供转运装置，,室温，,24h,杂交探针,宫颈内或阴道拭子,实验室提供转运装置，,室温，,7d,培养,宫颈内或尿道拭子,直接接种在,InPouch TV,培养系统，,2-5d,核酸扩增实验,阴道、宫颈内拭子，尿，液基细胞学标本，尿道、直肠、咽部拭子,实验室提供转运装置，,室温，,2d,HSV,直接免疫荧光染色,病变基底部刮取,床边制片，室温，,24h,培养,病变基底部刮取,置于,VTM/UTM,，室温或置于冰上，,2h,核酸扩增实验,病变基底部刮取或分泌物拭子,实验室提供转运装置,42,优质内容,尿道炎/宫颈炎相关病原实验室检查常见病原因子 诊断实验 最优,病例二,患者，女性，,40,岁，已婚，阴道分泌物增多，伴腰酸，偶有性生活后出血,2,年。检查外阴正常，宫颈肥大，,度糜烂，接触性出血。,医生：,根据临床表现初步诊断为,宫颈炎,。取,宫颈内拭子,，嘱病人,立即,送检（注意保温），以明确感染病原体。,43,优质内容,病例二患者，女性，40岁，已婚，阴道分泌物增多，伴腰酸，偶有,淋病奈瑟菌,革兰染色,为革兰阴性双球菌，似肾形或咖啡豆状，常成双排列，凹面相对。,急性淋病患者的淋球菌常被吞噬于中性粒细胞内；慢性淋病患者的淋球菌多分布在细胞外。,简便、快速，可做出初步诊断。,仅对男性患者进行涂片革兰染色,。,44,优质内容,淋病奈瑟菌革兰染色44优质内容,淋病奈瑟菌,细胞内革兰阴性双球菌,对,GC,特异性达,95,细胞外革兰阴性双球菌,对,GC,特异性达,10-29,45,优质内容,淋病奈瑟菌细胞内革兰阴性双球菌细胞外革兰阴性双球菌45优质内,培养,诊断淋病的重要手段,接种到,选择培养基,，置于,36,、含,5-10% CO,2,，,湿润,环境中培养。,如果床边直接接种标本到选择培养基，加,CO,2,药片形成气体环境，培养敏感性会更好。,46,优质内容,培养诊断淋病的重要手段46优质内容,培养,初代培养生长缓慢，,24,小时后可形成灰色,/,湿润、半透明的小菌落（直径,0.5-1mm,）。,氧化酶阳性、触酶阳性、葡萄糖产酸试验阳性且仅分解利用葡萄糖。,图片,by,陈东科,47,优质内容,培养初代培养生长缓慢，24小时后可形成灰色/湿润、半透明的小,核酸扩增试验,已有商品化试剂盒。,优点是快速、准确，缺点是试验设备要求高。,淋病奈瑟菌,DNA,在感染成功治疗后，在标本中仍可保留,3,周之久，所以不能作为治疗评估指标。,48,优质内容,核酸扩增试验已有商品化试剂盒。48优质内容,杂交探针,目前,FDA,已有批准的,GC,的杂交试验试剂盒。,不可针对尿标本。,49,优质内容,杂交探针目前FDA 已有批准的GC的杂交试验试剂盒。49优质,病例三,病人，女，,24,岁，主诉为持续,3,天的轻度排尿困难，化脓性阴道分泌物，发热，并伴有中度的双侧下腹痛。查体：子宫和附件压痛，化脓性宫颈分泌物。,考虑什么病？进一步做什么检查？,50,优质内容,病例三病人，女，24岁，主诉为持续3天的轻度排尿困难，化脓性,盆腔炎,盆腔炎症性疾病是女性上生殖道一系列疾病的总称。,包括：,子宫内膜炎,输卵管卵巢脓肿,输卵管炎症,盆腔腹膜炎,51,优质内容,盆腔炎盆腔炎症性疾病是女性上生殖道一系列疾病的总称。51优质,盆腔炎致病菌,盆腔炎,外源性病原体,内源性病原体,主要为性传播疾病病原体：淋病奈瑟菌、沙眼衣原体、支原体等,来自于原寄生于阴道的正常菌群，包括：需氧菌和厌氧菌,52,优质内容,盆腔炎致病菌盆腔炎外源性病原体内源性病原体主要为性传播疾病病,内源性病原体,需氧菌及兼性厌氧菌,：,金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌、,阴道加德纳菌等,厌氧菌：,脆弱拟杆菌、消化链球菌、普雷沃菌、真杆菌等,感染特点：容易形成盆腔脓肿、感染性血栓静脉炎，脓液有粪臭并有气泡,53,优质内容,内源性病原体需氧菌及兼性厌氧菌：53优质内容,盆腔炎相关病原实验室检查,常见病原因子,诊断方法,最优标本,转运要求及最佳时间,混合厌氧菌,阴道菌从,肠杆菌科、链球菌、,支原体,血培养和,AST,来评估少见病原,血，,20mL,注入,2,瓶,，静脉穿刺采集,床边注入血培养瓶，室温，,1h,革兰染色,需氧和厌氧培养,子宫内膜，输卵管,-,卵巢脓肿和,/,或输卵管内容物,置入或注入无菌厌氧容器，室温，,30min,子宫内膜炎组织学证据,子宫内膜活检,无菌容器，室温，,30min,福尔马林容器，室温，,30min-4h,淋病奈瑟菌,沙眼衣原体,阴道毛滴虫,核酸扩增试验,尿液，宫颈内拭子,实验室提供转运装置，室温，,2d,HIV,HIV EIA,抗体,血清,促凝管，室温，,2h,54,优质内容,盆腔炎相关病原实验室检查常见病原因子 诊断方法最优标本 转运,病例三,病人，女，,24,岁，主诉为持续,3,天的轻度排尿困难，化脓性阴道分泌物，发热，并伴有中度的双侧下腹痛。查体：子宫和附件压痛，化脓性宫颈分泌物。,医生：,根据临床表现初步诊断为,急性盆腔炎,。进一步送检至少一套血培养，抽取脓肿置于厌氧容器尽快送检，并取宫颈内拭子送检，必要时取子宫内膜活检，以明确感染病原体。,55,优质内容,病例三病人，女，24岁，主诉为持续3天的轻度排尿困难，化脓性,盆腔炎相关厌氧菌培养流程,分离培养,挑取菌落,需氧培养,厌氧培养,厌氧培养,生长,不生长,生长,专性厌氧菌：,做第二次耐氧试验,形态染色 菌落特征 生化反应 药敏鉴定 气相色谱,厌氧（,+,）,需氧（,-,）,兼性厌氧菌,标本,肉眼观察,染色镜检,56,优质内容,盆腔炎相关厌氧菌培养流程 分离培养挑取菌,直接涂片染色镜检,在接种时做涂片，革兰染色并镜检：,观察脓细胞的有无及特殊情况，细菌与细胞之间的相关性。,观察有无细菌，微生物的类型和大概的数量以及有无芽孢、形状和位置、着色及菌体特征。,大致推断微生物的种类，如梭菌、放线菌、拟杆菌、消化球菌和消化链球菌等。,57,优质内容,直接涂片染色镜检 在接种时做涂片，革兰染色并镜检：57优质,常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征,拟杆菌、普雷沃菌属,产气荚膜梭菌，破伤风梭菌,双歧杆菌属，真杆菌属,乳酸杆菌属，放线菌属,消化链球菌属，消化球菌属,58,优质内容,常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征拟杆菌、普雷沃菌属产气荚膜梭菌，,常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征,革兰阴性杆菌，两端钝圆着色深，中间着色浅不均匀，且有空泡，长短不一,拟杆菌,59,优质内容,常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征革兰阴性杆菌，两端钝圆着色深，中,常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征,革兰阳性粗短两端钝圆杆菌，无芽孢，中性粒细胞也很少且变形破碎，标本来自战伤或肢体严重肿胀者,产气荚膜梭菌,60,优质内容,常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征革兰阳性粗短两端钝圆杆菌，无芽孢,常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征,革兰阳性杆菌，菌体有分枝，呈棒状或栅状排列,放线菌,61,优质内容,常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征革兰阳性杆菌，菌体有分枝，呈棒状,革兰阴性厌氧菌鉴定（CLSI M35-A2）,62,优质内容,革兰阴性厌氧菌鉴定（CLSI M35-A2）62优质内容,革兰阳性厌氧菌鉴定（CLSI M35-A2）,63,优质内容,革兰阳性厌氧菌鉴定（CLSI M35-A2）63优质内容,商品化的鉴定试剂,我们使用的是商品化的厌氧菌鉴定卡,API 20A,和,ANC,64,优质内容,商品化的鉴定试剂我们使用的是商品化的厌氧菌鉴定卡API,病例三,该患者脓液涂片见革兰阴性杆菌，染色不均，两端圆而深染，中间不着色或染色较浅，似为空泡。,65,优质内容,病例三该患者脓液涂片见革兰阴性杆菌，染色不均，两端圆而深染，,病例三,脓液培养：在厌氧血平板上生长良好，形成圆形、微凸、光滑、边缘整齐、半透明、灰白色，不溶血的菌落。需养平板上不生长。,66,优质内容,病例三脓液培养：在厌氧血平板上生长良好，形成圆形、微凸、光滑,病例三,API,鉴定卡鉴定为,脆弱拟杆菌,67,优质内容,病例三API鉴定卡鉴定为脆弱拟杆菌67优质内容,谢谢,!,68,优质内容,谢谢!68优质内容,