木糖葡萄球菌课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,二、临床意义,凝固酶阳性葡萄球菌是重要致病菌，以急性,化脓性感染为特征，感染还可扩散或转移。,常见的感染有疖痈、切口创伤等局部感染和,骨髓炎等全身性感染。致病性与侵袭性酶类,(,如血浆凝固酶,),和多种毒素有关。某些菌株,还能产生肠毒素引起食物中毒；产生剥脱毒,素可引起人类烫伤样皮肤综合征；产生毒性,休克综合征毒素引起毒性休克综合征,(TSS),。,二、临床意义 凝固酶阳性葡萄球菌是重要致病菌，以,凝固酶阴性葡萄球菌是人体皮肤粘膜,正常菌群，是医院感染的主要病原菌，,其中表皮葡萄球菌引起人工瓣膜性心,内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性,腹膜炎、血管移植物感染和人工关节,感染等；腐生葡萄球菌则是女性尿路,感染的重要病原菌，成为重要的条件,致病菌和免疫受损患者的感染菌。,凝固酶阴性葡萄球菌是人体皮肤粘膜,感染的发生常和细菌产生夹膜多糖或糖,萼有关，它能增强细菌与生物性瓣膜、,导管等物质表面的粘附或在其表面形成,一层生物膜而保护细菌对抗杀菌物质作,用。葡萄球菌的耐药性已演变为医院感,染和临床治疗的棘手问题。,感染的发生常和细菌产生夹膜多糖或糖,三、微生物特性,直径,0.5,1.5m,、革兰阳性球菌，,排列呈葡萄串样，无鞭毛和芽胞。,能形成荚膜。,三、微生物特性 直径0.51.5m、革兰阳性球菌，,兼性厌氧菌，营养要求不高，最适生长温,度,35,37,，最适,pH7.4,7.6,。普通培,养基上形成,2,3mm,呈金黄色、白色、柠檬,色等不透明圆形凸起菌落，血琼脂平板上,有透明溶血环。能在,10,15,NaCl,琼脂,中生长，接种于高盐琼脂平板上，有利于,菌种检出。,兼性厌氧菌，营养要求不高，最适生长温,抵抗力最强，耐干燥，对多种抗生素和,消毒剂不敏感。生化反应活泼、能分解,多种糖类和蛋白质，触酶阳性。,G+Cmol,为,30,39,，携带青霉素酶和乙酰基转移,酶的质粒，能通过转导转移耐药性。,抵抗力最强，耐干燥，对多种抗生素和,四、微生物检验,（一） 采取标本应避免正常菌群污染。,（二） 直接显微镜检查,无菌体液如脑脊液和关节穿刺液涂片革,兰染色，查见细菌具有重要临床价值；,其他体液标本如同时伴有炎性细胞也,具有参考价值，可向临床初步报告,“,查,见属革兰阳性葡萄球菌,”,。,四、微生物检验 （一） 采取标本应避免正常菌群污染。,其他体液标本如同时伴有炎性细,胞也具有参考价值，可向临床初,步报告,“,查见属革兰阳性葡萄球菌,”,。,其他体液标本如同时伴有炎性细,（三）分离培养与鉴定,临床标本可接种血平板，污,染标本接种在选择平板上，如甘,露醇高盐平板，血液标本则用肉,汤增菌培养基。,（三）分离培养与鉴定,孵育过夜平板上可见直径约为,2-3mm,，,呈金黄色、白色或柠檬色的光滑、不,透明、凸起圆形菌落，有时可见,-,溶血环，挑取菌落作鉴定试验。,孵育过夜平板上可见直径约为2-3mm，,鉴定病原性葡萄球菌的方法,1,凝固酶试验 试验所用的血浆为,EDTA,抗凝兔血浆。金黄色葡萄球,菌、中间型葡萄球菌呈现阳性反,应。,鉴定病原性葡萄球菌的方法 1凝固酶试验 试验所用的血浆为,(1),玻片凝固酶试验：金黄色葡萄,球菌表面有结合的凝固酶,(,聚集,因子,),，与血浆中的纤维蛋白原,交联使菌体快速凝聚。,(1)玻片凝固酶试验：金黄色葡萄,(2),试管凝固酶试验：细菌分泌到,菌体外的凝固酶被血浆中的协,同因子激活形成复合物，再使,纤维蛋白原转变成纤维蛋白。,(2)试管凝固酶试验：细菌分泌到,2.,耐热核酸酶试验 大多数金,黄色葡萄球菌、施氏葡萄球,菌、中间葡萄球菌、猪葡萄,球菌能产生耐热核酸酶。,2.耐热核酸酶试验 大多数金,将待测菌的过夜肉汤培养物置沸,水浴,15min,后，滴加于含甲苯胺蓝,核酸琼脂上已打好的直径为,2,5mm,小孔内，置,35,孵育，,1h,后观察,结果，绕孔周围蓝色琼脂转变为,粉红环为阳性。,将待测菌的过夜肉汤培养物置沸,大多数的表皮葡萄球菌和金黄色葡,萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄,球菌和猪葡萄球菌为阳性。,磷酸酶试验,大多数的表皮葡萄球菌和金黄色葡磷酸酶试验,将待测菌种点种在加有硝基酚,磷酸盐的,pH5.6,6.8MH,琼脂上，,孵育,18,24h,，菌落周围出现黄,色为阳性。,将待测菌种点种在加有硝基酚,溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌、,施氏葡萄球菌和中间葡萄球菌为,试验阳性。,将孵育,24h,斜面培养物接种在含,吡咯烷酮,-,萘基酰胺肉汤中,35,孵育,2h,，加入试剂后,2,分钟内呈现,深紫红色为阳性。,吡咯烷酮芳基酰胺酶试验,溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌、吡咯烷酮芳基酰胺酶试验,(,四,),药物敏感性试验,葡萄球菌属细菌药敏试验选择抗生素：,A,组,(,常规首选药物,),为苯唑西林、青,霉素；,B,组,(,临床使用主要药物,),阿齐霉素、,克林霉素、甲氨苄啶磺胺甲嗯唑、,万古霉素；,(四)药物敏感性试验 葡萄球菌属细菌药敏试验选择抗生素：,C,组,(,对,A,组耐受、过敏或无反应者,),用环丙沙星、庆大霉素、氯霉素；,U,组,(,尿道中分离细菌,),用诺氟沙星、,呋喃妥因。,C组(对A组耐受、过敏或无反应者),耐甲氧西林葡萄球菌,通过药敏试验可筛选出耐甲氧西林葡萄球菌,(methecillin resistant Staphylococcus,，,MRS),，它是携带,mec A,基因、编码低亲和力,青霉素结合蛋白导致耐甲氧西林、所有头孢,菌素、碳青霉烯类、青霉素类,+,青霉素酶抑,制剂抗生素的葡萄球菌，该菌是医院内感染,的重要病原菌，感染多发生于免疫缺陷患者、,老弱患者及手术、烧伤后的患者、极易导致,感染暴发流行，治疗困难、病死率高。,耐甲氧西林葡萄球菌通过药敏试验可筛选出耐甲氧西林葡萄球菌,(,六,),检验结果分析与报告,葡萄球菌是临床上常见的细菌，经涂,片染色镜检观察革兰阳性球菌和典型,菌落形态，若触酶试验阳性者，应先,用凝固酶试验检查，将其分成凝固酶,阳性和凝固酶阴性细菌。,(六)检验结果分析与报告葡萄球菌是临床上常见的细菌，经涂,前者大多为金黄色葡萄球菌，应及,时快速鉴定和进行药敏试验，尽快,报告临床。后者大多是从输液导管、,人工植入组织中分离出的细菌，应,视为病原菌，须鉴定到菌种。,前者大多为金黄色葡萄球菌，应及,对凝固酶阴性葡萄球菌，可先用呋,喃唑酮纸片（,100g/,片,),，杆菌肽,纸片,(0.04u,片,),作药敏试验和氧化,酶试验，以此与微球菌属细菌鉴别，,微球菌对杆菌肽敏感而对呋喃唑酮,耐药、氧化酶试验阳性，与葡萄球,菌属正好相反。,对凝固酶阴性葡萄球菌，可先用呋,若药物敏感性试验是甲氧西林耐药,的菌株，则报告该菌株耐所有青霉,素、头孢菌素、碳青霉烯类和,-,内,酰胺药,-,内酰胺酶抑制剂类抗生素，,同时对氨基糖苷类，大环内酯类和,四环素类抗生素也耐药。,若药物敏感性试验是甲氧西林耐药,第二节 链球菌属,一、分 类,分类发生变化，,D,群链球菌独立为肠球菌属, N,群链球菌为乳球菌属。鉴定仍用传统的分类方法，分为：,1.,具有,A,、,C,、,G,抗原群,溶血性链球菌。,包括,: ,菌落直径大于,0.5mm A,群的化脓,性链球菌,C,群、,G,群的马链球菌和似马链,球菌；菌落直径小于,0.5mm,具,A,、,C,、,G,抗原，称米勒链球菌，主要包括咽喉炎,链球菌、中间型链球菌和星座链球菌,3,种。,还有溶血和不溶血的细菌。,第二节 链球菌属 一、分 类,2.,具有,B,抗原群,溶血性链球菌又称,无乳菌。,3.,溶血或草绿色溶血包括肺炎链球,菌和草绿色链球菌群。,4.,不溶血,D,群抗原链球菌称牛链球菌。,2. 具有B抗原群溶血性链球菌又称,二、临床意义,化脓性链球菌是致病力最强的链球菌,能产生多种毒素、,M,蛋白、脂磷壁酸和,链激酶、链道酶、透明质酸酶等致病因,子，可引起咽炎、呼吸道感染、丹毒、,心内膜炎和脑膜炎等，产毒株还可引起,猩红热。该群细菌可致变态反应性疾病,如急性肾小球肾炎，风湿热等。,二、临床意义 化脓性链球菌是致病力最强的链球菌,无乳链球菌是新生儿脑膜炎的常见菌，,该菌定居于妇女生殖道，故感染多发于出,生后,24h,，以肺炎为主。晚发型为产后,7,天,至,3,月,以脑膜炎和菌血症为主。,B,群链球菌对成人侵袭力较弱，主要有,肾盂肾炎、子宫内膜炎,;,糖尿病泌尿生殖道,功能失调，肿瘤和免疫功能低下者易受,B,群链球菌感染。,无乳链球菌是新生儿脑膜炎的常见菌，,C,、,G,群,溶血性链球菌可引起上,述相似的感染。米勒链球菌是口腔、,上呼吸道、消化道、泌尿生殖道正常,菌群，引起手术和创伤等内源性感染。,C、G群溶血性链球菌可引起上,肺炎链球菌是大叶性肺炎、支气,管炎的病原菌，还可引起中耳炎、乳,突炎、鼻窦炎、脑膜菌血症。荚膜的,侵袭力起重要作用，溶血素、神经胺,酸酶也是其主要致病物质。,肺炎链球菌是大叶性肺炎、支气,草绿色链球菌是人体正常菌群，从,血液中分离出该菌常被认为是污染的,细菌。然而它可引起瓣膜异常患者的,亚急性细菌性心内膜炎。血液链球菌、,温和链球菌、格氏链球菌、口腔链球,菌、中间型链球菌、常分离自深部脓,肿、尤其是肝和脑脓肿。,草绿色链球菌是人体正常菌群，从,三、微生物特征,直径小于,2m,的革兰阳性球菌，呈链状排,列，无芽胞和动力，形成荚膜。肺炎链球菌,呈矛尖状，宽端相对尖端向外。,兼性厌氧菌，肺炎链球菌和草绿色链球菌,某些菌种需要,CO,2,：促进其生长。营养要求,高，须在培养基中加入血液、血清。最适生,长温度,35,37,，,pH7.4,7.6,，血平板上形,成灰白色，透明表面光滑的小菌落，环绕菌,落形成,、,、,三种特征性溶血现象，液,体培养形成絮状和颗粒沉淀。,三、微生物特征,发酵葡萄糖和多种糖，不产气，乳,酸为代谢终末产物，触酶阴性。链球,菌基因,DNA,中,G+C mol,为,31,34,。,抗原结构复杂，主要有多糖抗原和蛋,白抗原，前者位于细胞壁以此可将链,球菌分类为,A,、,D,、,C,、,D,、,F,、,G,等,13,群。,本菌属对干燥和消毒剂敏感，除肺,炎链球菌外，较少引起细菌耐药性。,发酵葡萄糖和多种糖，不产气，乳,四、微生物检验,1.,主要采咽拭标本、痰液、脓汁和血液,等标本，采集后在,2h,内送验，对,B,群,溶血链球菌的检查，第,35,37,周妊娠,妇女的阴道分泌物，置于含多粘菌素,(10g,m1),和萘啶酸,(15g g,m1),选择性培养肉汤中孵育,18,24h,，再,作分离培养。,四、微生物检验,2.,直接显微镜检查标本涂片革兰染色,镜检，见链状排列革兰阳性球菌有,助于无正常菌群污染标本，荚膜肿,胀试验用于检查肺炎链球菌。,3.,直接检测抗原咽拭标本的,A,群和阴,道标本的,D,群链球菌可用抗原检测，,先将标本放于含亚硝酸液中孵育片,刻，用,ELISA,方法检测。标本含菌,数少可出现假阴性。,2. 直接显微镜检查标本涂片革兰染色,4.,分离培养与鉴定,用血平板培养有助于识别溶血特性和,进一步鉴定。初代分离需用,5,CO,环,境, 3537,孵育,24h,观察菌落性状：,溶血的,A,、,C,、,G,群菌落较大，直径大,于,0.5mm,，而米勒链球菌则小于,0.5mm,。,B,群链球菌菌较大，溶血环较,A,、,C,、,G,群模糊，,溶血菌落呈草绿色，肺炎链,球菌因荚膜多糖使菌落呈粘性。牛型链,球菌则为无溶血环呈灰色。,4. 分离培养与鉴定,链球菌属鉴定方法,1. -,溶血链球菌鉴定,(1) Lancefield,群特异性抗原鉴定：,B,群,为无乳链球菌，,F,群为米勒链球菌。,(2) PYR,试验：化脓性链球菌产生的吡,咯烷酮芳基酰胺酶水解吡咯烷酮,B-,萘基酰胺，加入,N,、,N-,二甲氧基肉,桂醛试剂后产生桃红色。,链球菌属鉴定方法,(3),杆菌肽敏感试验：可作为筛选试验。,0.04U,杆菌肽药敏纸片贴在待测菌的,血平板上，,35,孵育过液后，观察,抑菌环,化脓性链球菌敏感为阳性。,(4) VP,试验：挑取平板上孵育过夜菌落,置于,2ml VP,肉汤中，孵育,6h,后加入,VP,试剂，摇匀,30,秒，出现桃红色者,为阳性。,(3) 杆菌肽敏感试验：可作为筛选试验。,(5) CAMP,试验：无乳链球菌能产生,CAMP,因子促进金葡菌溶血能力，,可作为初步鉴定试验。先将金葡,菌,(ATCC25923),沿直径划线接种，,再沿垂直方向接种无乳链球菌，,两线不得相接，间隔约,3,4mm,。,35,孵育过夜，划线交界处出现,箭头状溶血为阳性。,(5) CAMP试验：无乳链球菌能产生,2.,非,溶血链球菌鉴定,(1) optochin,试验：含,5,optochin,纸片贴于涂布有待测菌的平板上,35,孵育过夜，抑菌圈大于,14mm,即为敏感。肺炎链球菌敏感。,2. 非溶血链球菌鉴定,(2),胆汁溶菌试验：将,O,5ml,的麦氏浓,度细菌悬液和等量的,2,去氧胆盐置,于试管内，,35,孵育,2,小时后,菌液,变清为阳性。肺炎链球菌为阳性。,(3),胆汁七叶苷试验：将待测菌落接种,于胆汁七叶苷斜面，,35,孵育,48,小,时，斜面黑色为阳性。牛链球菌试,验阳性。,(2) 胆汁溶菌试验：将O5ml的麦氏浓,3,草绿色链球菌鉴定,链球菌群,VP,脲酶,精氨酸,七叶苷,甘露醇,山梨醇,温和,链球菌群,-,-,-,-,-,-,变异,链球菌群,+,-,-,+,+,+,唾液,链球菌群,+/-,+/-,-,+,-,-,米勒,链球菌群,+,-,+,+/-,+/-,-,3草绿色链球菌鉴定 链球菌群VP脲酶精氨酸七叶苷甘露醇山梨,(,五,),抗链球菌溶血素,O,试验,常用于风湿热的辅助诊断，活,动性风湿热患者的抗体效价一般,超过,400,单位。,(五) 抗链球菌溶血素O试验,(,六,),药物敏感性试验,A,组为红霉素、青霉素、甲氨苄啶磺,胺甲嗯唑等；,B,组为头孢吡肟、头孢噻肟、氧氟沙星、,培南类等；,C,组为阿莫西林、头孢呋辛、氯霉素、,利福平等。青霉素是抗链球菌的首选药,物，此外头孢菌素、红霉素、万古霉素,也是治疗链球菌感染的药物。,(六) 药物敏感性试验,有报道,A,群链球菌红霉素耐药株和,牛链球菌万古霉素耐药株，耐青霉,素的肺炎链球菌和草绿色链球菌。,若来源于血和脑脊液，对该菌株应,检测对头孢曲松、头孢噻肟和美洛培,南的,MIC,以判断敏感、中介或耐药。,有报道A群链球菌红霉素耐药株和,(,七,),检验结果分析与报告,-,溶血性链球菌和肺炎链球菌,系毒力强的致病菌，均应及时报,告，及时使用抗生素以减少发生,并发症。,(七) 检验结果分析与报告,C,、,G,群大菌落,-,溶血性链球菌是,咽喉炎病原体，而米勒链球菌群是正,常菌群，但在脓肿或伤口中分离的应,视为致病菌而非污染菌。,牛链球菌生物型,1,和心内膜炎及胃,肠道癌症有关。,C、G群大菌落-溶血性链球菌是,第三节 肠球菌属,一、分 类,肠球菌属归类链球菌科，但种系,分类法证实粪肠球菌和屎肠球菌,不同于链球菌属的细菌，将其命,名为肠球菌属。有,19,种肠球菌，,分成,5,群，临床分离的肠球菌多属,于,2,群。,第三节 肠球菌属 一、分 类,二、临床意义,肠球菌所致感染最多见于尿路感,染，多与尿路器械操作、留置导尿、,尿路结构异常有关，是重要的医院,感染病原菌。腹腔和盆腔创伤时也,常见肠球菌感染。近年来用抗生素,而出现的耐药性，使肠球菌感染率,不断上升。,二、临床意义,肠球菌引起的菌血症常发生于有,严重基础疾患的老年人、长期住院,的免疫功能低下患者。偶尔可见呼,吸道或中枢神经系统的肠球菌感染，,在临床诊断前应认真评估分离菌的,临床意义。,肠球菌引起的菌血症常发生于有,三、微生物特性,革兰阳性球菌、卵圆形、链状排列。无芽,胞和荚膜，个别菌种有稀疏鞭毛。,兼性厌氧菌，最适生长温度,35,；大多数,菌株在,10,45,均能生长。在含,6.5,NaCl,肉汤中能生长，在,40,胆汁培养基中能分解,七叶苷，多数菌种具有吡咯烷酮芳基酰胺酶，,能水解吡咯烷酮,-,萘基酰胺,(PYR),，不含细,胞色素氧化酶和触酶。粪肠球菌培养于血培,养基中，可合成细胞色素或触酶。含,D,群链,球菌,D,抗原。,G+Cmol,为,37,45,。,三、微生物特性 革兰阳性球菌、卵圆形、链状排列。无,四、微生物检验,1.,常规采集血、尿、创伤标本和,其他拭子，标本于,1,小时内接,种完毕。,2.,直接涂片染色镜检可见成短链,排列,卵圆形革兰阳性球菌。,四、微生物检验,3.,接种于含血平板，若含革兰阴性杆菌可,选用选择鉴别培养基，常用叠氮胆汁七,叶苷琼脂，可抑制革兰阴性菌生长，而,肠球菌分解七叶苷为黑色菌落；,35,37,孵育,24h,后，形成灰白不透明、表面,光滑、直径,0.5,1,大小的圆形菌落，,血平板上为,溶血或不溶血。,3. 接种于含血平板，若含革兰阴性杆菌可,细菌鉴定方法,菌属,万古霉素,分解葡萄糖,PYR,胆汁七叶苷,NaCL,10,45,肠球菌属,敏感,-,+,+,+,+,+,乳球菌属,敏感,-,+,+,可变,+,可变,链球菌属,敏感,-,-,-,-,-,可变,明串珠,菌属,耐药,+,-,可变,可变,-,可变,细菌鉴定方法 菌属万古霉素 分解葡萄糖 PYR胆汁七叶苷Na,(,五,),药物敏感试验,A,组为青霉素或氨苄青霉素，,B,组为万古霉素；,C,组为四环素类和红霉素、氯霉素、 利福平；,U,组为环丙沙星、诺氟沙星等。,(五) 药物敏感试验 A组为青霉素或氨苄青霉素，,肠球菌的耐药性对一般剂量或中,剂量氨基糖苷类耐药和对万古霉素,低度耐药。临床上联合使用青霉素,G,、氨苄青霉素与氨基糖苷类抗生,素成为治疗肠球菌首选方法。,肠球菌的耐药性对一般剂量或中,对重症感染患者分离的肠球菌应鉴定到,种，由于医院内感染肠球菌呈上升趋势，故,对肠球菌分型的流行病学调查显得越来越重,要，传统的分型可用生物分型、抗生素耐药,谱、噬菌体、细菌素等分型方法，但费时费,力，较为先进的分子生物学方法分型，尤其,是在耐药株暴发流行时，显示其重要价值。,(,六,),检验结果分析与报告,对重症感染患者分离的肠球菌应鉴定到(六) 检验结果,第四节奈瑟菌属和布兰汉菌属,一、分 类,奈瑟菌科包括奈瑟菌属、卡他布,兰汉菌属、莫拉菌属、金氏菌属和不,动杆菌属。奈瑟菌属包括淋病奈瑟菌、,脑膜炎奈瑟菌及卡他布兰汉菌。,第四节奈瑟菌属和布兰汉菌属一、分 类,二、临床意义,1.,淋病奈瑟菌,淋病奈瑟菌是性病病原菌，临床,表现为：淋病；盆腔炎；口,咽部和肛门直肠病；淋菌性结膜,炎；播散性淋病。,淋病奈瑟菌致病物质包括菌毛、,外膜蛋白、,IgA,蛋白酶、脂多糖和,铁调节蛋白。,二、临床意义,2.,脑膜炎奈瑟菌,脑膜炎奈瑟菌是流行性脑脊髓膜炎,病原体,通过呼吸道感染后多数为隐性,感染或表现为上呼吸道症状，少数可,发展为败血症，进而形成化脓性脑膜,炎。,3.,卡他布兰汉菌,卡他布兰汉菌是导致中耳炎，鼻窦,炎，慢性阻塞性肺炎的病原体。,2. 脑膜炎奈瑟菌,三、微生物特性,为革兰阴性双肾样，坦面相邻的双球,菌,直径约为,0.6,1.5m,，无动力无芽,胞,某些菌种形成荚膜，孵育,24h,后在培,养基上发生自溶。需要丰富营养，对脂,肪酸敏感,在培养基中需加入淀粉。,三、微生物特性,需氧生长，,CO2,和湿度刺激奈瑟菌,生长，最适生长温度为,35,37,。,氧化酶阳性，触酶阳性，对糖分解能,力、硝酸盐还原能力和,DNA,合成酶不,同，常作为鉴别依据。抵抗力弱，对,化学消毒剂敏感。,+,mol,奈瑟菌,属为,46,54,，布兰汉菌属为,40,48,。,需氧生长，CO2和湿度刺激奈瑟菌,四、微生物检验,1.,采集脑脊液、血液、瘀点穿刺液等标,本后,立即送检，或用血平板床边接种,后立即孵育。,2.,直接镜检 涂片固定革兰染色，显微镜,观察可见革兰阴性双球菌和胞内含球,菌的多形核白细胞，有助于男性淋病,早期诊断。女性宫颈拭子标本涂片可,见胞内、胞外大量革兰阴性双球菌,由,于女性阴道有正常菌群寄居，故必须,由培养结果得以证实方可报告。,四、微生物检验,脑脊液或皮肤瘀点渗出液涂片所见革阴,性双球菌和白细胞内的革兰阴性双球菌，,有助于流行性脑脊髓膜炎早期诊断。,3.,抗原检测和核酸检测 利用,ELISA,检测淋,病奈瑟菌抗原，该法在检测男性尿道分,泌物标本和涂片染色具有相同的敏感度,和特异度，但在宫颈和直肠拭子中，由,于奈瑟菌属存在共同抗原，其特异性较,革兰染色涂片镜检低。,4.,分离培养与鉴定。,脑脊液或皮肤瘀点渗出液涂片所见革阴,奈瑟菌属鉴定,1.,推测性鉴定,G,-,双球菌和氧化酶试验阳性是两个推测,性鉴定指标。区分,G,-,双球菌和,G,-,球杆菌方,法是将待检菌接种于巧克力平板上,贴,10U,的青霉素纸片，,35,孵育,1824,小时，挑,取纸片边缘生长的菌落，涂片 染色观察，,若菌体延长成长索状则为,G,-,球杆菌，而,G,-,双球菌则仍保持双球菌形态，某些菌体出,现肿胀。,奈瑟菌属鉴定,2.,确证性鉴定,利用生化反应，如脑膜炎奈瑟菌、,淋病奈瑟菌葡萄糖试验产酸，而卡,他布兰汉奈瑟菌为阴性；脑膜炎奈,瑟菌麦芽糖试验产酸，而淋病奈瑟,菌为阴性。,2. 确证性鉴定,(,五,),药物敏感性试验,药物敏感试验选择药物为青霉素、头,孢菌素、四环素、环丙沙星和壮观霉素。,治疗首选药物为青霉素。,近年来，由于淋病奈瑟菌耐药质粒转,移，由其介导的耐青霉素酶的淋病奈瑟,菌临床上多见，该菌表现对青霉素和四,环素耐药，对壮观霉素和三代头孢菌素、,喹诺酮类敏感，强调临床实验室的药敏,试验结果，以有助于合理用药。,(五) 药物敏感性试验,对引起的下呼吸道感染卡他布兰,汉菌，既往对青霉素敏感，近年来,报告耐药菌株日渐增多，可用广谱,青霉素与青霉素酶抑制剂的合剂进,行治疗。,对引起的下呼吸道感染卡他布兰,(,六,),检验结果分析与报告,淋病的早期和正确诊断，具有医,学和社会的重要意义，诊断报告必,须慎重，对各种实验室诊断试验需,掌握其敏感性和特异性的程度，必,须综合分析各种试验的结果，最后,的确证还依赖于分离培养和鉴定。,(六) 检验结果分析与报告,脑膜炎奈瑟菌的快速诊断能为治,疗提供时机，故瘀点及脑脊液的染,色，涂片镜检是快速简便方法。,脑膜炎奈瑟菌的快速诊断能为治,第七章 肠杆菌科,第一节 概述,肠杆菌科包括,24,个与医学有关的菌属,G+Cmol,39-59,。,1.,四类引起人类腹泻和肠道感染的细菌：埃,希菌属、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森菌,属。,2.,八种与医院感染有关的条件致病菌：枸橼,酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、多源,菌属、沙雷菌属、变形杆菌属、普罗威登,菌属和摩根菌属；,第七章 肠杆菌科 第一节 概述,3.,其中鼠疫耶尔森菌、伤寒沙门菌对,人致病性较强。此外，许多细菌既,是正常菌群，也是条件致病菌。在,机体抵抗力下降，寄居部位的改变,或菌群失调时能引起机会感染。,3. 其中鼠疫耶尔森菌、伤寒沙门菌对,二、临床意义,占临床分离菌总数的,50,和,-,总数的,80,将近,50,的败血症,70,以上的泌尿,道感染和大量的肠道感染是由肠杆菌科,细菌引起的。,1.,人类肠道外感染 除志贺菌较少引起肠外,感染，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产,酸克雷伯菌、奇异变形杆菌、产气肠杆,菌、阴沟肠杆菌、粘质沙雷菌等均可引,起泌尿道、呼吸道、伤口和中枢神经系,统的感染,;,二、临床意义,且往往为医院感染。鼠疫耶尔森菌可,引起烈性传染病鼠疫。,2.,人类肠道感染,埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属和耶,尔森菌属。主要引起各种急、慢性肠,道感染、食物中毒、旅行者腹泻及肠,热症等。,且往往为医院感染。鼠疫耶尔森菌可,三、共同特性,(1),1.,形态结构,-,杆状或球杆状、无芽孢、多数有鞭,毛，能运动。致病性菌株有菌毛。,2.,抗原成分,抗原是细胞壁成分脂多糖。以核,心多糖为中心的三层结构，内侧是脂类,A,为内毒素的毒性成分。外侧是由重复,的特异多糖，决定抗原的特异性。,三、共同特性 (1), H,抗原是不耐热的蛋白质抗原，氨基酸,序列和空间构型决定,H,抗原的特异性。, 表面抗原是包绕在抗原外侧的多糖抗,原，由多糖结构决定抗原特异性。大肠,埃希菌称,K,抗原、伤寒沙门菌称,Vi,抗原,和志贺菌称,B,抗原等。,O,抗原和,H,抗原是肠杆菌科血清学分,群和分型的依据。表面抗原存在时可阻,断。抗原与相应抗体之间的反应，加热,处理能消除表面抗原的阻断作用。, H抗原是不耐热的蛋白质抗原，氨基酸,共同特性,(2),3.,变异性,S-R,变异是初次分离的细菌，菌体,抗原上都有特异性多糖链，菌落为光滑,型。在人工培养基中反复传代时，细胞,壁上特异性多糖链消失而核心多糖仍保,留，菌落变为粗糙型。,H-O,变异是有鞭毛的细菌,失去鞭,毛，动力也随之消失，称,H-O,变异,有,时见于新分离的菌株中。,共同特性 (,4.,培养和生化特性,营养要求不高，在普通培养基上生长,良好；兼性厌氧，主要生化特性包括发,酵葡萄糖,(,产酸或产酸产气,),，触酶阳性,氧化酶阴性，可将硝酸盐还原至亚硝酸,盐。,5.,抵抗力,抵抗力不强，加热,6030min,即被杀,死，不耐干燥，对一般化学消毒剂均敏,感。对低温有耐受力。能耐胆盐，能抵,抗染料的抑菌作用。,4. 培养和生化特性,四、微生物检验,1.,标本采集, 肠外标本,:,采自不同的感染部位如血液,、体液、呼吸道、伤口、尿液及其他各,种标本。, 肠道标本,:,疾病早期留取新鲜粪便，挑,取粘液脓血部分进行培养。应在,2h,内进,行，以利志贺菌等检出。如不能及时培,养应冷藏待检。,2.,直接镜检 ,-,杆菌，形态及染色性无鉴别,意义。,四、微生物检验,3,分离培养鉴定,(1),肠外标本,:,采自无菌部位的标本用血,琼脂，血培养时可用肉汤增菌。其他,标本中含有杂菌，需用选择性培养基,以增加分离率，常用伊红美蓝,(EMB),琼脂，因为,EMB,能促进肠杆菌科细,菌生长并抑制其他,-,菌。,3分离培养鉴定,(2),肠道标本：常用的选择鉴别培,养基,(,如,EMB),和针对沙门菌和志贺,菌的强选择鉴别培养基，,(,如,SS,琼脂,),。如疑耶尔森菌感染可用耶尔森菌选,择琼脂,(CIN),。,(2) 肠道标本：常用的选择鉴别培,肠杆菌科细菌,鉴定,1),常规生化鉴定,:,为实验室最常用的方,法。各菌属,(,种,),主要生化特性有助,于鉴定细菌。,2),鉴定试剂盒,:,选用标准化和商品化的,微生物鉴定试剂盒，特点是质量可,靠稳定鉴定能力强，并与编码技术,结合，可用仪器读取结果，实现自,动化，并提高了工作效率。,肠杆菌科细菌鉴定,3),血清学鉴定：用特异性抗血清进,行血清学分型鉴定后才能作出最,终报告。,4),分子生物学鉴定：可鉴定至科、,属 、种、血清型和肠毒素基因,等。甚 至可区分致病菌株和非,致病菌株。,3) 血清学鉴定：用特异性抗血清进,耐药性问题日趋严重。粘质沙雷菌对青霉,素,G,等抗生素天然耐药，而大多数是形成的,获得性耐药。有染色体或质粒介导的超广谱,-,内酰胺酶或,AmpC,酶而产生的耐药性。已,出现了耐多种抗菌药物的多重耐药菌株，因,此必须根据抗菌药物敏感试验选用抗生素，,并作好耐药性监控工作。同时细菌的耐药谱,还可成为医院感染流行病学调查中的标志。,(,五,),抗菌药物敏感试验,耐药性问题日趋严重。粘质沙雷菌对青霉(五) 抗菌药物,一、分 类,埃希菌属包括,5,个种：, 大肠埃希菌是肠道中,G,-,杆菌的主要,成员， 常引起肠内外的感染，是腹,泻和泌尿道感染的主要病原菌。, 蟑螂埃希菌偶而检出并有潜在的致,病性。,第二节 埃希菌属,一、分 类第二节 埃希菌属,弗格森埃希菌；, 赫尔曼埃希菌；, 伤口埃希菌。,最近还发现称为不脱胺凝聚埃,希菌,G+Cmol,为,48,52,。, 弗格森埃希菌；,二、临床意义 ,1.,致病因素, 侵袭力,K,抗原能抗吞噬，并有抵抗抗体和,补体的作用。菌毛能帮助细菌粘附于,粘膜表面称定殖因子，能使细菌定殖,产生毒素而引起相应的症状，直接侵,犯粘膜引起炎症。,二、临床意义 ,内毒素,具有发热、休克、,DIC,等病理作用。, 肠毒素,产生不耐热和耐热肠毒素两种肠,毒素：均可使肠道细胞中,cAMP,的水平升高，引起肠液大量分泌,而导致腹泻。, 内毒素,二、临床意义 ,2.,所致疾病, 肠道外感染,是临床分离的,G-,杆菌中最常见的,菌种，可引起泌尿系等各种类型的感染。,引起泌尿系感染的菌株以血清型,01,、,2,、,6,为多见，本菌还可引起菌血症、,胆囊炎、肺炎及新生儿脑膜炎等。 常,见于腹腔内脓肿、肠穿孔继发腹膜炎、,肠道手术后继发感染或大面积灼伤创面,感染。,二、临床意义 ,有时与类杆菌、粪肠球菌混合感染。产,生的脓液粘稠，有粪臭味。该菌对一般,抗生素敏感，易产生超广谱,-,内酰胺酶，而导致对第三代头孢菌素耐药。, 肠道内感染,其中有些菌株能引起轻微腹泻至霍乱,样严重腹泻，并能引起致死性并发症如,溶血性尿毒综合征。,有时与类杆菌、粪肠球菌混合感染。产,(1),肠毒素型大肠埃希菌,(ETEC),：,引起儿童腹泻和旅行者腹泻，类似轻型,霍乱样腹泻。该菌产生耐热肠毒素,(ST),和不耐热肠毒素,(LT),。,(2),肠致病性大肠埃希菌,(EPEC),：,引起婴幼儿肠道感染,血清型是,055,、,0111,等,是婴儿腹泻的重要病原菌。,(3),肠侵袭型大肠埃希菌,(EIEC),：,类似于志贺菌，侵犯肠粘膜细胞，引起,菌痢样症状，出现脓血粘液便。,引起肠道感染的大肠埃希菌,(1) 肠毒素型大肠埃希菌(ETEC)：引起肠道感染的大肠埃,(4),肠出血型大肠埃希菌,(EHEC),，多为食,源性感染，通过粪,-,口途径传播。致病,因子是菌毛和,Vero,毒素，血清型是,0157,：,H7,，可引起出血性结肠炎，有,2,7,发展成溶血性尿毒综合征，出现溶,血性贫血，血小板减少性紫癜和急性肾,衰竭，死亡率为,3,10,。,(5),肠凝聚型大肠埃希菌,(EaggEC),：代表,一群不产生,LT,或,ST,，不能用,O,：,H,血清,分型，可粘附于,Hep-2,细胞的菌株。与,世界各地慢性腹泻有关。,(4) 肠出血型大肠埃希菌(EHEC)，多为食,三、微生物特性,1.,形态结构,G-,直短杆状，,大小为,1.0,1.5m,，,多数有鞭毛能运动，,引起肠外感染的菌株有荚膜,(,微,荚膜,),和周身菌毛。,三、微生物特性,2.,抗原成分,O,抗原是多糖磷脂复合物,(LPS),，耐,热加热,100,不能灭活，已有,171,种,是血清学分型的基础。,H,抗原是不耐热的蛋白质，已知有,56,种，均为单相菌株。,K,抗原是多糖荚膜抗原，对热稳定，,能阻止,O,凝集。血清型别按,O,：,K,：,H,的顺序以数字表示。,2. 抗原成分,3.,培养特性,兼性厌氧，营养要求不高，在普通,琼脂上生长良好，形成圆形光滑、湿,润的菌落，在选择培养基上可发酵乳,糖形成有色菌落。,IMViC,试验结果为,+-,。,3. 培养特性,四、微生物检验,(1),肠道外感染标本,1.,标本采集,血液标本以无菌操作技术采集静脉血,5ml,注入血液培养瓶。痰标本取清晨口,腔清洁后从深部咳出的痰液。脓、分泌,物等标本用无菌棉拭子直接采取。,2.,直接涂片染色检查,除血液标本外，脓、痰、分泌物等标本,均作涂片染色检查。尿液和各种体液离,心后取沉淀物作涂片,可见,G-,短杆菌。,四、微生物检验 (1),3.,分离培养鉴定,(1),血液标本接种肉汤增菌培养，待生,长后移种血平板。体液标本取离心,沉淀物接种于血平板。尿液标本应,同时作菌落计数。脓、痰和分泌物,标本可直接接种于血平板。,35,孵,育,18,24h,后观察菌落形态。,3. 分离培养鉴定,(2),鉴别培养基上挑选有色菌落，用生,化反应、血清学试验鉴定到属和种。,典型的生化反应特征：,TSIA(,双糖铁,),产酸产酸产气，,CIT(,枸橼酸盐,),阴性,URE(,脲酶,),阴性,IND(,吲哚,),阳性,MOT(,动力,)+,-,ORN(,鸟氨酸,)+,-,。,(2) 鉴别培养基上挑选有色菌落，用生,四、微生物检验,(2),肠道内感染标本,引起腹泻的,ETEC,、,EPEC,、,EIEC,和,EHEC,具有与肠道外感染的大肠埃希菌相似的生物学特性，但分别具有特殊的血清型、肠毒素或毒力因子。,检验程序同肠道外标本。采集腹泻,和食物中毒患者粪便和残留食物，肛拭标本，接种肠道选择鉴别培养基分离培养和鉴定 。,四、微生物检验(2),肠道感染大肠埃希菌鉴定,1) ETEC,生化反应、血清分型加肠毒素,测定：生化反应符合大肠埃希菌，但血,清型别与致病没有一定的联系。主要依,赖,ST,和,LT,肠毒素的检测。,2) EPEC,生化反应加血清分型：用多价抗,血清检测,O,抗原，进行特异性抗血清的,凝集试验，阳性的菌株测定凝集滴度以,排除交叉反应，同时做,H,抗原测定,(O,：,H,分型,),。,肠道感染大肠埃希菌鉴定,3)EIEC,生化反应、血清分型加肠毒素测定：用,O,：,H,血清分型，赖氨酸脱羧酶阴性，无动力，常见的血清型,0152,和,0124,，与志贺菌相似，主要的鉴别试验是醋酸钠、葡萄糖铵利用试验和粘质酸盐产酸试验，大肠埃希菌三者均阳性，而志贺菌三者均阴性。,4)EHEC,血清分型加生化反应：应常规作,0157,：,H7,的培养，必须经生化反应证实为大肠埃希菌。凡山梨醇阴性的大肠埃希菌,0157,：,H7,分离株无须再做毒素的检测，因为均产生,Vero,毒素。,5)EaggEC,用液体培养,-,凝集试验，检测细菌对细胞的粘附性或用,DNA,探针技术。,3)EIEC 生化反应、血清分型加肠毒素测定：用O：H血清,可致多种感染，轻者为自愈性胃,肠炎，重者可引起致死性伤寒。伤,寒和副伤寒,A,、,B,引起胃肠炎、菌血,症和肠热症；猪霍乱沙门菌引起胃,肠炎和败血症，儿童多见。,第三节 沙门菌,可致多种感染，轻者为自愈性胃第三节 沙门菌,一、分 类,沙门菌属是肠杆菌科中最复杂的菌,属。根据,O,抗原分群，再根据,H,抗原,分血清型，将沙门菌属分为,6,个亚属,(,亚属,1-6,，其中亚属,3,再分为,3a,和,3b,见表,7,。,8),，绝大多数,(99,),沙门菌,的临床分离株是亚群,1,中的菌种。本,属细菌,DNA G+C,含量为,50,-53,。,一、分 类,二、临床意义,(,一,),致病因素,1.,侵袭力,有,Vi,抗原的具有侵袭力，穿过小肠,上皮被吞噬后，由于,Vi,抗原的保护,反,而在细胞内繁殖，并随吞噬细胞至机体,其他部位，故称细胞内寄生菌。,二、临床意义,2.,内毒素,有较强的内毒素，可引起发热，白,细胞改变，中毒性休克，并能激活,补体，导致一系列病理生理变化。,3.,肠毒素,某些沙门菌,(,如鼠伤寒沙门菌,),能产,生类似大肠埃希菌的肠毒素。,2. 内毒素,(,二,),所致疾病,1.,胃肠炎,最常见，引起腹泻，伴有低热，恶心,和呕吐。,2.,菌血症或败血症,以猪霍乱沙门菌感染为多，表现为高热,寒战。常伴有胆囊炎、骨髓炎。血培养,阳性而便培养阴性。,3.,肠热症,由伤寒沙门菌引起。血培养或肥达反应,阳性。经口感染，穿过小肠上皮到达淋,巴结，进入血流，第一次菌血症。出现,发热等症状。,(二)所致疾病,随血流播散至肝、脾等器官中继续繁,殖，再次进入血流扩散，第二次菌血症，,出现持续高热、肝脾肿大、皮疹和全身中,毒症状。细菌随胆汁进入肠腔，经粪便排,出。,潜伏期,720,天，典型病程,3-4,周，发病,2,周后机体出现免疫反应，使疾病好转，,但同时也引起迟发性变态反应，导致肠壁,淋巴结坏死溃疡，可造成肠穿孔而危及生,命。,4.,携带者,约,3,患者成为携带者，粪便持续排菌达,1,年以上。,随血流播散至肝、脾等器官中继续繁,三、微生物特性,1.,形态染色,G-,杆菌细长，,1.0,3.0m,有鞭毛， 无芽胞,和荚膜。,2.,抗原结构有,3,种,:, O,抗原为多糖,类脂,蛋白质复合物，能耐,受,100 2.5 h,。共有,58,种，是分群的依据,凡,含共同抗原的血清型归为一个群，沙门菌含,一种或数种,O,抗原,每群以,O,加上数字及括号,大写英文字母顺序编排，如,02,群,(A),，,Z,以后,直接加数字表示，如,051,群。刺激机体产生,IgM,抗体,与相应抗血清反应呈颗粒状凝集。,三、微生物特性, H,抗原,为蛋白质抗原，加热被破坏。有两个,相,第一相称特异相，用,a,、,b,、,c,表示,是定型的依据。刺激机体产生的,IgG,抗体,与相应的抗血清呈絮状反应。, 表面抗原,为,Vi,抗原有保护作用。可阻止,O,抗原,与相应抗体发生凝集，故在沙门菌血,清学鉴定时应加以注意。, H抗原,三、微生物特性 ,3.,培养特性,兼性厌氧，生长温度,35,37,，最适,生长,pH,为,6.8,7.8;,营养要求不高，在肠道,选择性培养基上因不发酵乳糖形成透明菌,落，在,SS,琼脂上形成黑色的菌落。,4.,抵抗力,不强，加热,601h,或,6520min,，在水,中能活,2,3,周，粪便中呵存活,1,2,个月,5.,变异性,有,S-R,变异、,H-O,变异和位相变异等具,有双相,H,抗原菌变成单相菌 。,三、微生物特性 ,四、微生物检验,1.,采集标本,伤寒沙门菌发病第,l,周取血。第,2,、,3,周取粪便、尿液做培养的分离率高。,2.,直接镜检,革兰阴性杆菌。直接用胶乳凝集试验,检测病人标本或增菌培养物沙门菌抗,原，可快速诊断。,四、微生物检验,3.,分离培养与鉴定,常用肠道鉴别培养基或选择培养,基。在菌最较少时，血液和骨髓液,分离培养用增菌肉汤。,35-37,孵,育，选择透明的可疑菌落做鉴定。,3. 分离培养与鉴定,沙门菌的鉴定,1.,用生化试验将可疑菌落鉴定到属和种,基本,生化反应特征：,TSIA(,双糖铁,),产碱产酸,或产碱产酸产气，,H2S,阳性、,CIT(,枸橼酸,盐,),阳或阴性、,URE (,脲酶,),阴性、,IND(,吲哚,),阴性、,MOT(,动力,),阳性、,VP,阴性、,ORN(,鸟,氨酸,),阳性。凡临床分离菌乳糖、吲哚阳性，,或脲酶阳性者，均不考虑为沙门菌。,沙门菌的鉴定,2.,血清学分型：,用抗血清对所分离菌种的,O,抗原、,Vi,抗原、第一、二相,H,抗原进行凝集试,验。先用多价,O,抗血清,(A-F),进行分群,，,95,以上都属,A-F,群，对早期诊断,有重要意义。再分别用单价因子血清,定群，用,H,因子血清检查,H,抗原。,综合,O,、,H,及,Vi,因子血清的检查结,果进行判断。,2. 血清学分型：,(,五,),抗体检测,(,肥达反应,),用已知伤寒、副伤寒沙门菌的,O,、,H,抗原，检测受检血清中有无相应的抗体,的半定量试管内凝集试验，称为肥达反,应。能辅助诊断伤寒，甲、乙、丙型副,伤寒沙门菌引起的肠热症。,(五) 抗体检测(肥达反应),1.,方法,将受检血清用生理盐水作倍比稀,释，分别加入等量伤寒沙门菌,O,、,H,抗原及副伤寒沙门菌甲、乙、丙的,H,抗原，进行试管内凝集试验，凡,血清最高稀释度出现明显凝集者为,凝集效价。,1. 方法,2.,结果解释,(1),正常值：各地区有所不同，,O 80,H1,：,160,，,A,、,B,，,Cl,：,80,；,或第二份血清效价增高,4,倍以上具有,诊断意义。,(2) O,抗原的抗体为,IgM,，出现较早，,H,抗体为,IgG,，出现较迟。,O,高,H,不高,可能为疾病早期；,周后复查如升高,为肠热症。,H,高,O,不高，可能以往,患过伤寒或接受过预防接种，为回忆,反应。,2. 结果解释,、分 类,将志贺菌属分为,4,个血清群,(,种,),：,A,群为,痢疾志贺菌；,B,群为福氏志贺菌；,C,群为鲍,特志贺菌；,D,群为宋内志贺菌。,最近将生化性状相近的,A,、,B,，,C,群归为,一群，统称志贺菌,A,、,B,、,C,血清群；而将,生化特征与之相异，鸟氨酸脱羧酶和,-,半,乳糖苷酶均阳性的宋内志贺菌单列出来。,DNA G+Cmol,为,49,53,。,第四节 志贺菌属,、分 类第四节 志贺菌属,二、临床意义,(,一,),致病因素,1.,侵袭力,因菌毛的作用，细菌粘附在肠粘膜表面,;,2.,内毒素,造成粘膜细胞死亡发炎，并形成毛细血,管血栓，导致坏死脱落和溃疡，临床出现,脓血便；并引起全身中毒症状，导致发热,、意识障碍，甚至中毒性休克；,3.,外毒素,A,群志贺菌,和,型产生志贺毒素，有,细胞毒、肠毒素和神经毒等生物学活性。,二、临床意义,(,二,),所致疾病,有以下,3,种临床类型：,1,急性细菌性痢疾,表现为腹痛发热，有里急后重现象,便中含有粘液和血。很少进血流，中毒,性菌痢见于小儿，常无消化道症状而表,现为全身中毒症状，往往造成死亡。,(二) 所致疾病,2.,慢性细菌性痢疾,菌痢治疗不彻底，造成反复发作,迁延不愈，超过,2,个月视为慢性菌,痢；,3.,携带者,有恢复期带菌、慢性带菌和健康,带菌等,3,种，是主要的传染源。,2. 慢性细菌性痢疾,三、微生物特性,1. G-,杆菌，菌体短小，无芽胞荚膜和鞭,毛，有菌毛,2.,抗原成分,有群和型特异性两种,O,抗原，是分类依,据根据生化反应和,O,抗原的不同，分为,A,、,B,、,C,、,D 4,个血清群和,40,余个血清型。,O,抗原耐热，加热,100,、,60min,不被破坏。,K,抗原能阻断,O,凝集。,三、微生物特性,3.,变异性,有,S-R,变异、耐药性变异。多重耐药性,问题己成为严重的医学问题。,4.,培养特性,兼性厌氧，生长温度,37,，,pH7.2,7.4,。营养要求不高，能在普通培养基上生,长。在鉴别培养基上形成无色半透明的,菌落。,5.,抵抗力,比其他肠道细菌抵抗力低，在,1,石炭酸,中,15-30min,和加热,6010min,即被杀死,3. 变异性,四、微生物检验,1.,标本采集,在治疗前采集粘液脓血便作床边,接种，不能及时接种可置甘油保存,液送检,;,2.,直接镜检,G-,杆菌。胶乳凝集试验和免疫荧,光技术检测抗原。,四、微生物检验,3.,核酸检测,志贺菌携带一个非结合型大质粒,能,编码与侵袭性相关的外膜蛋白,是产,生痢疾综合征的重要致病因子,从中,2.5kb,侵袭相关区段中设计出,ipaH,引,物,可用于检测志贺菌序列。,4.,分离培养,用鉴别培养基和选择培养基,取可疑,菌落鉴定。,3. 核酸检测,志贺菌鉴定（,1,）,1.,生化试验,鉴定到属和种 基本生化反应特征,: TSIA(,双糖铁,),产碱产酸、不产气, CIT(,枸橼酸盐,),阴性, URE(,脲酶,),阴性, MOT(,动力,),阴性, YP,阴性。,志贺菌鉴定（1）,志贺菌鉴定（,2,）,2.,血清学鉴定,先用志贺菌属,4,种多价,(A,群,1,，,2,型、,B,群,1,6,型、,C,群,l,6,型及,D,群,),作玻片凝集试,验，凝集者再进一步作定型。,A,群：即痢疾志贺菌，为一群甘露醇阴性,的菌株，共有,10,个血清型,(1,)0),，其,O,抗,原从,1,X,共,10,种均为独立的血清理，,志贺菌鉴定（2）,群：即福氏志贺菌，有,6,个血清型,和,X,、,Y 2,个变型。,6,型菌株缺少共同,的群抗原，故多价血清中应包含,6,型因,子血清，否则将会造成漏检。,C,群：即鲍特志贺菌。本菌共有,15,个,血清群，,D,群：即宋内志贺菌：仅有,个血清,型，但有光滑型,(S),和粗糙型,(R),两种茵,落,; R,型菌 不被,S,型血清所凝集；因此诊,断血清应含有,S,及,R,两种因子血清,群：即福氏志贺菌，有6个血清型,包括,3,种人类致病菌：鼠疫耶尔森,菌、小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶,尔森菌。还可从临床标本中分离到弗,氏、中间、克氏、舆氏、伯氏、莫氏,、罗氏和鲁氏等,8,种耶尔森菌。,第五节 耶尔森菌属,包括3种人类致病菌：鼠疫耶尔森第五节 耶尔森菌,一、鼠疫耶尔森菌,(,一,),临床意义,是烈性自然疫源性传染病鼠疫的,病原菌。,1,致病因素,有内毒素和鼠毒素两种毒素。鼠,毒素与毒力有关，作用于心血管系,统，引起不可逆性休克与死亡，该,毒素存在于细胞内，菌细胞裂解或,白溶后释放。,一、鼠疫耶尔森菌,2,临床类型,1),腺鼠疫：局部淋巴结,(,多为腹股沟淋,巴结,),的肿胀、坏死和脓肿；,2),败血型鼠疫：由细菌侵入血流大量,繁殖所致。可在,2-3,天内死亡；,3),肺鼠疫：由腺鼠疫、败血型鼠疫继,发而成，可通过呼吸道在人与人之,间直接传播，引起原发性肺鼠疫，,死亡率极高。,2临床类型,(,二,),微生物特性,1. G-,杆状，,0.5,1.0m,，两极浓染，,有荚膜，无芽胞和鞭毛。,2.,抗原构造构造复杂，重要的有,(1)F1,抗原,:,是封套抗原。特异性高，抗原,性强，产生的抗体有良好的保护作,用,; (2)V,W,抗原：是菌体的表面,抗原，与本菌的毒力和侵袭力有关。,(3)T,抗原：为为鼠毒素,有良好的抗,原性和免疫原性，可脱毒成类毒素,制成抗毒素。,(二) 微生物特性,3.,兼性厌氧，生长温度为,27,30,，最,适,pH,为,6.9,7.2,血琼脂培养,48h,后形成,粗糙菌落，肉汤培养,48h,后形成菌膜，稍,加摇动后的菌膜钟乳石状下垂；本菌动,力为阴性；,IMViC,试验反应模式为,+,、苯丙氨酸脱氨酶、脲酶、硫化氢,均为阴性；不液化明胶，当穿刺培养时,菌沿穿刺线纵树状发育；分解葡萄糖产,酸不产气，对多数糖不分解：,3. 兼性厌氧，生长温度为2730，最,(,三,),微生物检验,鼠疫耶尔森菌传染性极强，故应严格遵守操,作规程，一旦疑为本菌，应立即向省市疾病控,制中心等部门报告，并将菌种送检验中心或专,业实验室作进一步的鉴定。鼠疫的确诊主要依,赖病原学诊断，须经全面生化反应、噬菌体裂,解试验和动物实验才得以作出最终鉴定。诊断,确立后除对患者进行隔离治疗外，对疫区及有,关人