瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件

, , , , , ,*, , , , , , ,*, , , , , , ,*,可编辑,*, , , , , , ,*,可编辑,*,瘢痕与瘢痕疙瘩 的综合治疗,山东大学第二医院整形外科,张基勋,瘢痕与瘢痕疙瘩 的综合治疗,目录,一、瘢痕的定义,二、瘢痕的形成过程,三、瘢痕的组织学分类,四、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的鉴别,五、影响瘢痕增生的因素,六、瘢痕的转归,七、分类论述治疗,八、治疗方式概括,九、科研,目录一、瘢痕的定义,一、瘢痕的定义,皮肤损伤愈合过程中，胶原合成代谢机能失去正常的约束控制，持续处于亢进状态，以致胶原纤维过度增生的结果，又称为结缔组织增生症，在中医上称为蟹足肿或巨痕症，它表现为隆出正常皮肤，形状不一，色红质硬的良性肿块。,一、瘢痕的定义 皮肤损伤愈合过程中，胶原合成代谢机能失去正,二、瘢痕的形成过程,瘢痕的形成过程也即是皮肤创伤愈合过程，以下以皮肤手术切口为例，叙述创伤愈合的基本过程：,1.,急性炎症期：数小时内便出现炎症反应，表现为充血、浆液渗出及白细胞游出。,2.,伤口收缩：,23,日后边缘的整层皮肤及皮下组织向中心移动，伤口迅速缩小，,14,天左右停止。伤口收缩是由伤口边缘新生的肌成纤维细胞的牵拉作用引起，与胶原无关。,二、瘢痕的形成过程 瘢痕的形成过程也即是皮肤创伤愈合过程,二、瘢痕的形成过程（续）,3.,肉芽组织增生和瘢痕形成：大约从第,3,天开始从伤口底部及边缘长出肉芽组织填平伤口。毛细血管大约以每日延长,0.10.6mm,的速度增长。第,56,天起成纤维细胞产生胶原纤维，随着胶原纤维越来越多，出现瘢痕形成过程，大约在伤后一个月瘢痕完全形成。,4.,表皮及其他组织再生：创伤发生,24,小时内，伤口边缘的基底细胞即开始增生，覆盖在肉芽组织表面，当这些细胞相遇时，则停止迁移，并增生、分化成为鳞状上皮。健康的肉芽组织对表皮再生十分重要，它可以提供上皮再生所需的营养及生长因子。,二、瘢痕的形成过程（续） 3.肉芽组织增生和瘢痕形成：大约从,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,三、瘢痕的组织学分类,表浅性瘢痕：发生于表皮或真皮表层的瘢痕，局部平坦，一般无功能障碍。,增生性瘢痕：发生于真皮深层的瘢痕，是突出于皮肤表面但局限于原有损伤范围的瘢痕。,萎缩性瘢痕：发生于皮肤全层与皮下的瘢痕。具有很大的收缩性，可牵拉临近的组织、器官，造成严重的功能障碍。,瘢痕疙瘩：大部分瘢痕疙瘩通常发生在局部损伤,1,年后，一般表现为高出周围正常皮肤的、超出原损伤部位的持续性生长的肿块，扪之较硬，弹性差，局部痒或痛。,三、瘢痕的组织学分类表浅性瘢痕：发生于表皮或真皮表层的瘢痕，,四、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的鉴别,两者统称为病理性瘢痕,相同点：基本病理形式均以胶原纤维在真皮大量沉积为,组织特征,不同点：,过去：增生病变局限于病损,增生性瘢痕,增生病变超出病损区,瘢痕疙瘩,现在：两者除了“量”的区别，还有“质”的区别,瘢痕疙瘩可以归入皮肤良性肿瘤的范畴,四、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的鉴别两者统称为病理性瘢痕,四、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的鉴别（续）,增生性瘢痕：是因成纤维细胞增殖、生长失控，胶原过,度沉积导致真皮纤维化，增生往往持续数月或数年以,后，才逐渐发生退行性变化。,相关基因,(9,个,),：,转化生长因子,-1 (TGF1,）,信号转导子和转录激活子,3(STAT3),转录因子,Sp1,肿瘤蛋白,p53,肿瘤蛋白,p63,（,TP63,）,白介素,-6,受体（,IL6R),白介素,-6,（,IL6,）,血管源生长因子,(VEGFA),丝氨酸蛋白酶抑制剂,E,族（,SERPINE1),四、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的鉴别（续） 增生性瘢痕：是因成纤维,四、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的鉴别（续）,瘢痕疙瘩：皮肤损伤后引发的以成纤维细胞过度增生和细胞外基质的异常积聚为特征的皮肤胶原性疾病。有好发部位，多见于有色人种，不发生退行性变化和单纯手术后极易复发等特点，因此有良性真皮肿瘤之称。,相关基因,(5,个,),：,TP53,TGF,1,磷脂酰肌醇,3,激酶（,PI3K),血管紧张素,受体,2,型（,AGTR2,）,血管紧张素,受体,1,型（,AGTR1,）,四、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的鉴别（续）瘢痕疙瘩：皮肤损伤后引发,四、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的鉴别（续）,四、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的鉴别（续）,一、内在因素,（一）种族,（二）年龄 青年人是瘢痕或瘢痕疙瘩的高发人群。,（三）部位 机体任何部位在受到深及皮肤网状层的损伤均可能形成瘢痕。,好发部位：下颌、胸前、三角肌部、上背部、髋部等。,少见部位：眼睑、乳晕、前额、外生殖器。,五、影响瘢痕增生的因素,一、内在因素五、影响瘢痕增生的因素,皮肤的分层：,角质层,透明层,表皮 颗粒层,棘状层,生发层,皮肤 基底层,乳头层,真皮,网状层,皮下组织,皮肤的分层：,（四）皮肤张力,Borges,皮肤纹线和张力线。包括,langer,皮纹张力线。,（四）皮肤张力,（五）家族因素,常染色体隐性遗传和常染色体显性遗传均提示瘢痕疙瘩有家族遗传倾向。,（六）内分泌因素,与皮质激素、性激素有关。,（五）家族因素,二、外在因素,（一）手术切口与缝合质量,切口线,langer,，,s line,关系,切口和皮肤表面的垂直关系,“刀快、针锐、线滑”,缝合技术的要求,459045,二、外在因素缝合技术的要求459045,（二）损伤的程度,深度 网状层为界,（三）感染,炎症，炎症细胞及因子的参与使愈合时间延长，瘢痕更容易形成。,（四）异物,污染异物，医源性异物（线头、棉纤维、滑石粉、碎屑）。,（五）慢性机械性刺激,搔抓、摩擦。,应对：熟悉解剖、精细操作、严格无菌、术后护理,（二）损伤的程度深度 网状层为界应对：熟悉解剖、精细操作,一、软化,瘢痕退行性变。表现为形成后数月到数年瘢痕组织充血逐渐消褪，色泽变淡，外形趋于平整，质地变软，基地松动。,六、瘢痕的转归,一、软化六、瘢痕的转归,二、挛缩,瘢痕组织收缩，牵拉周围正常皮肤使之变形，进而因瘢痕收缩对皮肤延展性的影响而造成相应功能障碍。如对肌肉、血管、神经发育的影响；对四肢关节活动度的影响；外观影响尤其重要。,二、挛缩,三、恶变,见于不稳定瘢痕。遭受反复刺激，破溃，感染而发生鳞状上皮癌，基底细胞癌。,三、恶变,一、分类,根据组织学和形态学的区别进行：,（一）表浅性瘢痕,真皮浅层，原因多由于轻度擦伤、浅度烧伤（,浅,）、浅表皮肤感染。,表面粗糙、可有色素沉着。局部扪之平坦，柔软，与周围正常皮肤界限欠清。,处理：无特殊处理或一般美容药物涂抹。,七、瘢痕的治疗,-,分类论述,一、分类（一）表浅性瘢痕七、瘢痕的治疗-分类论述,（二）增生性瘢痕,累及真皮深层（网状层）的创伤均可形成增生性瘢痕。见于深,及以上烧伤或浅,烧伤感染、切割伤、中厚皮片供皮区等瘢痕显著高于周围正常皮面，扪之较硬，界限清楚。早期：毛细血管充血而呈红色、潮红或紫色，剧烈瘙痒是主要症状。持续时间与年龄及部位相关，青壮年、血供较好部位增生期较长，反之较短。,转归,生理性瘢痕（成熟、静止）,美容手术：解决外观及相关部位因瘢痕所致功能障碍。,（二）增生性瘢痕美容手术：解决外观及相关部位因瘢痕所致功能障,左 胸部增生性瘢痕 右面部增生性瘢痕,左 胸部增生性瘢痕 右面部增生性瘢痕,（三）萎缩性瘢痕,见于累及皮肤全层及皮下组织的损伤，如大面积,烧伤，创伤后组织缺损伴慢性溃疡及其愈合之后，皮下组织较少部位如头皮、胫前区等。瘢痕坚硬，平坦或略高于皮肤面，与深部组织紧密粘连。循环较差，淡红或苍白，表皮极薄而不耐受摩擦，容易溃破且经久不愈。容易癌变。因极易收缩牵拉影响周围组织功能。,（三）萎缩性瘢痕,放射性皮炎所致萎缩性瘢痕,掌指、指间关节功能障碍,放射性皮炎所致萎缩性瘢痕掌指、指间关节功能障碍,面部痤疮反复感染遗留萎缩性瘢痕,面部痤疮反复感染遗留萎缩性瘢痕,足背外伤后萎缩性瘢痕,可疑鳞状上皮癌,足背外伤后萎缩性瘢痕可疑鳞状上皮癌,（四）瘢痕疙瘩,现在认为,皮肤纤维组织肿瘤,，其病理要点为瘢痕组织内胶原及其机制成分大量沉积，病损侵犯周围正常组织且短期无愈合倾向。镜下见大量幼稚成纤维细胞增生，胶原纤维透明样变、粗大、排列紊乱，并有丰富粘液基质。,常见于,前胸,、,颈部,、,肩部,及,上臂三角肌区域,。好发年龄,30,岁以下青壮年。外观色红、坚硬，突出皮肤表面，可呈蟹足状（蟹足肿）。,单纯手术治疗极易复发，加压疗法亦无效。,美容外科治疗：影响美观的采取以手术为主的综合治疗,（四）瘢痕疙瘩美容外科治疗：影响美观的采取以手术为主的综合治,（五）其他分类,依其外观形状分：线状瘢痕、蹼状瘢痕、凹陷性瘢痕、桥状瘢痕等等。,（五）其他分类,八、治疗方式,1.,硅凝胶治疗,2.,加压治疗,3.,类固醇皮质激素治疗,4.,激光治疗,5.,冷冻治疗,6.,放射治疗,7.,手术治疗,8.,干扰素,9.,中医药,10.,其他：重组人表皮生长因子、,A,型肉毒毒素、高压氧等,八、治疗方式1.硅凝胶治疗,八、治疗方式,11.,基因治疗：基因治疗是将质粒,DNA,插入目的细胞后,修复遗传错误或产生治疗因子,(,如多肽、蛋白质、抗原等,),。,如鲁峰等将正常人,Fas,基因导入瘢痕疙瘩成纤维细胞,Fas,通道得以稳定重建,转染后的瘢痕疙瘩细胞处于增殖期的明显减少,出现明显的细胞凋亡。,基因治疗本质上就是一个目的基因、载体与转染的问题,基因转染效率低下，转移过程尚需克服体内和细胞内的屏障，一直是制约基因转移技术发展和广泛应用的瓶颈问题，所以基因运载方式是目前基因治疗能否成功的关键环节。利用光化学作用促进纳米脂质体选择性介导，实现正常凋亡基因在瘢痕疙瘩成纤维细胞内的高效表达，激光与基因治疗联合作用诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的目的，将为人们提供新的治疗思路和手段。,八、治疗方式11.基因治疗：基因治疗是将质粒DNA 插入目的,治疗,（一）非手术治疗,1,、加压疗法,弹性织物（弹力套、弹力衣、弹力绷带等）对瘢痕部位实施持续压迫而达到预防瘢痕增生和治疗增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的办法，称为压力疗法原理主要是通过压力，使瘢痕内血管管腔变窄，血流减少，造成瘢痕内组织缺少营养，瘢痕组织的增生受到明显的抑制，而达到治疗瘢痕的目的。 作为手术、激光、药物、放射等治疗的辅助治疗，这样可以减少用药剂量及降低复发率。适用于各种面积的增生性瘢痕，或着不适于放疗、局部药物治疗的患者。配合支具坚持,6,个月以上者尤佳。,治疗（一）非手术治疗,病理性瘢痕的治疗,加压疗法,加压疗法的原则,一早二紧三持久,1,、早：早期肉芽创面期和深度烧伤创面愈合后，尚未形成明显瘢痕前。越早开始，效果越好。,创面愈合后,10,天开始,无瘢痕，无症状；,11-12,天开始,无瘢痕，有症状；大于,30,天开始,瘢痕,+,症状；,3-4,月后开始：可防止瘢痕继续增生，但难使瘢痕萎缩。,病理性瘢痕的治疗加压疗法加压疗法的原则一早二紧三持久,病理性瘢痕的治疗,加压疗法,2,、紧：不影响肢体远端血运，病人能耐受的情况下越紧越好。早期,较小压力，后期,较大压力。理论上讲内层压力要达到,24mmHg,，实践中压力,10-25mmHg,，说法不一。,3,、持久：一天加压,24,小时，放松时间不超过,30,分钟，压迫,6,个月以上，一般,6-18,个月。,病理性瘢痕的治疗加压疗法2、紧：不影响肢体远端血运，病人,病理性瘢痕的治疗,加压疗法,副作用：,皮肤损伤,压力衣下加棉垫等,皮肤感染,保持局部干洁，勤洗勤换,过敏,加一层纱布,加压疗法防治增生性瘢痕有近二百年历史，疗效确切，应用过程中瘙痒明显，病人可能出现不耐受而放弃治疗。,引自,:,井万里,岑瑛,.,烧伤后增生性瘢痕的加压疗法,J.,华西医学,2004;19(1):145-146.,病理性瘢痕的治疗加压疗法副作用：引自:井万里,岑瑛.烧伤,2.,放射疗法,放射线可以穿透人体组织，当它照射到瘢痕组织后，其辐射能量向组织传递，使瘢痕造成物理和化学损伤，从而抑制、破坏瘢痕的生长，达到治疗瘢痕的目的。早期应用穿透力较强的的,X,射线对瘢痕疙瘩直接照射，但作用缓慢，副作用大，目前已改进为瘢痕疙瘩或增生性瘢痕切除后再应用只照射浅层的,射线照射，缩短了治疗时间，也大大降低了副作用。,适用于病理性瘢痕的治疗，通常作为手术后预防复发的辅助疗法。个别患者照射后局部有轻微反应，甚至出现放射性皮炎、放射性溃疡，故需要进一步综合治疗。目前不推荐放射疗法。,2.放射疗法 放射线可以穿透人体组织，当它照射到,3.,疤痕的药物治疗,治疗瘢痕的药物很多，目前临床最常用的是瘢痕局部注射类固醇：,主要是疤痕内局部注射（如曲安奈德等）或配制成霜、膏，涂抹、贴敷。适用于增生性瘢痕及瘢痕疙瘩，效果明显。由于药物本身效应，或注射剂量过大，方法不正确，患者的个体敏感性不同等，用药后有可能出现局部或全身的副作用，比如：局部毛细血管扩张，色素沉着、脱失，局部皮肤轻度凹陷、女性月经紊乱等。,3.疤痕的药物治疗,4.,其他,硅类制剂的使用：,最常用的有美皮护、疤痕敌、硅酮霜、瘢痕贴等，方法为外贴、外涂等，使用方便、简单、无局部不适或不适感轻微。适用于术后或烧伤后早期应用。除此之外我国中药制剂抑制瘢痕止痒也有其特色，如瘢痕止痒软膏等。但是见效比较慢，治愈率低。,理疗：,激光照射、冷冻、蜡疗、超声离子透入等。,4.其他,（二）手术治疗,1.,原则 仅针对由于瘢痕部位所致功能障碍者。,2.,时机 增生性瘢痕一般在,6m2y,方趋成熟，所以须待瘢痕,6m1y,之后进行。,3.,方法,（,1,）浅表性瘢痕 一般无需手术，若手术直接切除并予以缝合。,（,2,）凹陷性瘢痕 须予以填充，必要时加转移皮瓣。,（,3,）线状瘢痕 “,Z”,或“,W”,形手术。,（,4,）蹼状瘢痕 成形术。,（,5,）大面积瘢痕 组织扩张术加移植术,（,6,）磨削术,（二）手术治疗,手术方法,疤痕切除直接缝合术，适用于现状疤痕或面积较小的凹陷性疤痕、萎缩性疤痕、桥状疤痕。,疤痕切除 “,Z”,字成形术，适用于蹼状或直线状疤痕，且疤痕两侧有健康的富有弹性的正常皮肤者。,疤痕切除,+,五瓣成形术，适用于蹼状疤痕。,手术方法疤痕切除直接缝合术，适用于现状疤痕或面积较小的凹陷性,疤痕切除,+,皮片转移术，适用于疤痕切除并松解后创面较大、不能直接缝合且创面基地无神经、肌腱、骨骼等外露者。,疤痕切除,+,皮瓣转移术，适用于创面基地有神经,.,肌腱、骨骼等外露，或须进一步做深部组织修复者。,疤痕切除+皮片转移术，适用于疤痕切除并松解后创面较大、不能直,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,55,可编辑,55可编辑,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,瘢痕与瘢痕疙瘩的综合治疗课件,五、病理性瘢痕的国内外研究进展,1.,遗传学,2.,细胞,3.,细胞凋亡与凋亡相关基因,4.,细胞外基质,5.,细胞因子,6.,细胞连接及信号传导,7.,蛋白质组学,8.,细胞骨架基因相关蛋白,9.,血管因素,10.,免疫,11.,激素、热休克蛋白、微量元素,12.,物理环境（力学或机械因素）,五、病理性瘢痕的国内外研究进展1.遗传学,（一）遗传,1.,人种：有色人种瘢痕疙瘩和增生性瘢痕的发病率明显高于白种人，其中黑色人种的发病率最高，故认为黑色素细胞激素异常可能与瘢痕的发生有关。,2.,遗传因素：,瘢痕体质患者具有一定的家庭遗传倾向及家族聚集性，单卵双生的患者瘢痕疙瘩的发病具有较高的一致性，符合,常染色体显性遗传疾病，伴外显不完全,，表现度存在差异，并具有延迟显性特征。,（一）遗传1.人种：有色人种瘢痕疙瘩和增生性瘢痕的发病率明显,（二）细胞,1.,肥大细胞（,mast cell,MC),：在正常皮肤中,肥大细胞主要位于真皮乳头层的血管周围,病理性瘢痕中,MC,主要分布于胶原纤维束之间及血管周围,数量较正常皮肤明显增多,且,MC,相关的活性递质较正常皮肤亦显著增多。主要通过成纤维细胞（,fibroblast,FB,）和细胞因子发挥作用，能促进,FB,增生和胶原合成，,MC,脱颗粒可释放肝素和,ECM,合成的细胞因子。,（二）细胞 1.肥大细胞（mast cell,MC)：在正常,（二）细胞,2.,成纤维细胞：成纤维细胞是创面愈合、瘢痕形成、增生和挛缩的功能性细胞，其增殖、活化和分化的异常可以导致病理性瘢痕的形成。皮肤病理性瘢痕的成纤维细胞比正常皮肤的成纤维细胞产生更高水平的胶原等细胞外基质。很多学者研究发现：成纤维细胞有不同的表现型，从而构成了成纤维细胞的异质性。由于成纤维细胞有不同的类型，从而在伤口愈合过程中，形成不同的愈合方式：增生性瘢痕、瘢痕疙瘩或正常的组织等。,（二）细胞2.成纤维细胞：成纤维细胞是创面愈合、瘢痕形成、增,（二）细胞,2.,成纤维细胞：病理性瘢痕中,FB,的,ECM,存在着明显的合成增加和降解不足。病理性瘢痕中,FB,的胶原酶活性剂,mRNA,水平均明显降低。正常皮肤,FB,一旦相互接触后则停止增殖,进入抑制状态,即接触性抑制及密度抑制,;,而增生性瘢痕中部分,FB,与瘢痕疙瘩中的,FB,接触后细胞仍能继续增殖。提示增生性瘢痕中可能存在两种不同的,FB,细胞亚型,一种存在持续性抑制及密度抑制,另一种为失接触性抑制及密度抑制,二者在一定条件下可以相互转化,决定了增生性瘢痕的转归。,（二）细胞 2.成纤维细胞：病理性瘢痕中FB的ECM存在着明,（二）细胞,3.,角质形成细胞：表皮角质形成细胞与皮肤成纤维细胞的相互作用,在调整组织内环境稳定与修复中发挥了重要作用。有研究发现，有瘢痕疙瘩的角质形成细胞存在时,成纤维细胞表达更多的,TGF-,1,、,2,受体, ,型胶原纤维、结缔组织生长因子、胰岛素源生长因子、,TGF-,的活性因,KD,角质形成细胞的存在而显著提高。,（二）细胞 3.角质形成细胞：表皮角质形成细胞与皮肤成纤维细,（三）细胞凋亡与凋亡相关基因,细胞凋亡是指机体为维持体内环境稳定,由基因控制细胞自主的、有序的死亡。多项实验研究证实,由于成纤维细胞凋亡减少继而细胞增殖过度,分泌过多的胶原和细胞外基质是导致病理性瘢痕发生的重要机制。,（三）细胞凋亡与凋亡相关基因 细胞凋亡是指机体为维持体内环,（三）细胞凋亡与凋亡相关基因,一、细胞凋亡,FB,凋亡：研究发现，肌成纤维细胞和血管细胞的凋亡数量在创面闭合期增加，证实凋亡是肉芽组织转化为瘢痕的机制之一。若肉芽组织中,FB,凋亡不足或中断，增殖相对过度，将导致病理性瘢痕的形成。研究发现来源于瘢痕疙瘩中心区域的,FB,群体倍增时间明显缩短，增殖旺盛，同时其,FB,凋亡数比例减少，说明瘢痕疙瘩来源地,FB,增殖与凋亡平衡受损有关。,（三）细胞凋亡与凋亡相关基因一、细胞凋亡,（三）细胞凋亡与凋亡相关基因,二、凋亡基因,正常细胞的增殖是由促进细胞增殖的原癌基因和抑制细胞增殖的抑癌基因之间的平衡以及凋亡调控基因的共同调节来维持的,.,基因芯片分析,8400,条基因,普通瘢痕与瘢痕疙瘩相比，有,402,条基因的表达有区别，其中有,250,条基因上调，,152,条基因下调，有,8,种凋亡基因表达过低,瘢痕疙瘩不能正常凋亡并持续产生胶原，是其不断增生的原因之一。,（三）细胞凋亡与凋亡相关基因二、凋亡基因,（三）细胞凋亡与凋亡相关基因,1. p53,基因,2. Fas,基因,3.bcl-2,家族,4. survivin,与,caspase-3,5.NNP-1,基因,6.C-erbB-2,基因,7.,其他,（三）细胞凋亡与凋亡相关基因1. p53基因,（三）细胞凋亡与凋亡相关基因,1. p53,基因：细胞周期调节基因和凋亡基因。约,3/4,瘢痕疙瘩组织中存在野生型,P53,基因突变。突变的,P53,增强了自身的转录活性，增加了细胞的稳定性，延长了细胞活性，使瘢痕疙瘩,FB,增殖能力增强，而凋亡减少。基因突变可能是瘢痕疙瘩浸润性生长及治疗后复发的原因。,（三）细胞凋亡与凋亡相关基因1. p53基因：细胞周期调节基,（三）细胞凋亡与凋亡相关基因,2. Fas,基因：基因表达产物,Fas,蛋白与,FasL,结合后，诱导,FasL,蛋白所在的细胞在数小时内发生凋亡。银染,PCR-SSCP,检测发现瘢痕疙瘩成纤维细胞内编码,Fas,蛋白分子死亡域基因存在突变,致使瘢痕疙瘩成纤维细胞的,Fas,受体处于无功能状态,使在,Fas - Mcab,作用下造成成纤维细胞凋亡异常。,（三）细胞凋亡与凋亡相关基因2. Fas基因：基因表达产物F,（三）细胞凋亡与凋亡相关基因,3. survivin,与,caspase-3,：,survivin,表达于细胞周期,G,2,/M,期，定位于细胞有丝分裂的纺锤体，广泛表达于人类肿瘤细胞系，可以促进细胞增殖，抑制凋亡并参与血管形成过程，主要通过抑制,caspase-3,活性而发挥抗凋亡作用。,caspase-3,是细胞凋亡过程中的关键酶,必须经过上游活化才能发挥作用。国内外许多学者构建不需上游活化的重构型,caspase-3,，可快速诱导肿瘤细胞发生凋亡，因而重构型,caspase-3,有可能成为瘢痕疙瘩治疗的新的靶标和效应分子。,（三）细胞凋亡与凋亡相关基因3. survivin与casp,（四）细胞外基质,增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的形成主要是由于细胞外基质产生和降解平衡失调的结果。,K,和,HS,以胶原蛋白的合成显著增加为病理特征。,（四）细胞外基质 增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的形成主要是由于细,（四）细胞外基质,无瘢痕愈合的细胞外基质研究：,1.,蛋白,胶原纤维：早中期胚胎皮肤中，胶原蛋白以,型为主，至中年逐渐转化为以,型为主，,型胶原蛋白组成的胶原纤维较细，排列较规则，形成松散疏松的网状结构，而,I,型胶原蛋白组成的胶原纤维较粗，排列紧密和不规则。,伴侣素和线粒体蛋白,P1,前体：在胎兔皮肤伤口后表达增加，可协助蛋白折叠，维持正常的蛋白构象和细胞形态，促进伤口愈合。,（四）细胞外基质无瘢痕愈合的细胞外基质研究：,（四）细胞外基质,1.,蛋白,波形蛋白和微管蛋白,多肽：起细胞支架和网络的作用，在成年个体中能促进瘢痕的增殖，在胚胎时具有调整胶原纤维的排列，抑制瘢痕增生和愈合作用。,核不均一蛋白,H,、腺病毒纤维调节蛋白、纤粘蛋白等,2.,酶,-,烯醇酶、丝氨酸蛋白酶类、基质金属蛋白酶、环氧合酶,-2,3,、肽,降钙素基因相关肽、神经肽,P,物质等,（四）细胞外基质1.蛋白,（四）细胞外基质,细胞外基质的降解系统,:,纤溶酶原激活剂,(PA),是,ECM,降解酶中重要的组成部分,它能促进,ECM,重塑中的溶解反应。,PA,的作用是控制血纤维蛋白溶酶原活化为血纤维蛋白溶酶。血纤维蛋白溶酶不仅对纤维蛋白溶解起首要作用,而且也参与其他,ECM,蛋白的降解,并激活前胶原酶转变为胶原酶。,KD,成纤维细胞中,纤溶酶原活化因子抑制剂,-1,显著增加,尿激酶型溶酶原激活剂,(uPA),持续减少,随之而来的是,KD,成纤维细胞表现出纤维蛋白溶解能力、纤维凝块降解能力的降低,这一现象只在,KD,中出现。,（四）细胞外基质 细胞外基质的降解系统:纤溶酶原激活剂(,（五）细胞因子,1. TGF-,（转化生长因子,-,）,2. -MSH,（,-,促黑素细胞雌激素）,3. TNF-,（肿瘤坏死因子,-,）,4. PDGF,（血小板衍生生长因子）,5. IGF-,（胰岛素样生长因子,-,）,6. IL- 8,（白细胞介素,-8,）,7.,bFGF,（碱性成纤维细胞生长因子）,8.CTGF,（结缔组织生长因子）,（五）细胞因子1. TGF-（转化生长因子-）,（五）细胞因子,1.TGF-,（转化生长因子,-,）：是目前已知与病理性瘢痕关系最密切的细胞因子,目前在哺乳类动物中检测到,TGF-,1,、,TGF-,2,和,TGF-,3,其中,TGF-,1,和,TGF-,2,生物活性相同,是促进,ECM,过度密集的最密切的正性调控因子之一,参与瘢痕形成,; TGF-,3,则具有抗纤维化作用。瘢痕疙瘩中, FB,的,TGF-,1,和,TGF-,2,水平明显增高,而,TGF-,3,无变化。,（五）细胞因子1.TGF-（转化生长因子-）：是目前已知,（五）细胞因子,2. -MSH,（,-,促黑素细胞雌激素,):,国内学者通过免疫组织化学染色证实瘢痕疙瘩表皮层和瘢痕层中,-MSH,表达增强,以表皮基底层最明显。一定剂量的,-MSH,可明显促进,FB,的生长与增殖,一定浓度的,-MSH,可促进,FB,分泌,TGF-,1,.,国外学者通过实验发现给鼠注射,TGF-,造成胶原沉积,再给已致纤维化的鼠注射,-MSH,能够抑制胶原沉积,推测,-MSH,在瘢痕形成过程中可能起负调控作用。,（五）细胞因子2. -MSH（-促黑素细胞雌激素):国内,（五）细胞因子,3. TNF-,（肿瘤坏死因子,-,）：在真皮纤维化中, TNF-,有明显促分解代谢作用,通过直接抑制纤维连结蛋白的产生和促进,FB,产生胶原蛋白酶,增强蛋白多糖酶活性而发生作用。,TNF-,在增生性瘢痕中的表达明显少于正常瘢痕组织。,TNF-,在创面愈合中起重要作用,异常的增殖性愈合可能与,TNF-,表达水平降低有关。,（五）细胞因子3. TNF-（肿瘤坏死因子-）：在真皮纤,（五）细胞因子,4.PDGF,（血小板衍生生长因子）：通过对,FB,促分裂增殖、趋化及刺激纤维粘连合成等作用参与创伤修复,对胶原合成、分解也有调节作用。多数研究认为,瘢痕疙瘩,FB,对,PDGF,的化学趋化和促有丝分裂较普通瘢痕明显提高,可能与细胞表面,PDGF,受体水平明显增高有关。有学者研究表明，两者,PDGF-,受体,mRNA,表达均升高,且二者表达水平无统计学意义。,（五）细胞因子4.PDGF（血小板衍生生长因子）：通过对FB,（五）细胞因子,5. IGF-,（胰岛素样生长因子,-,）：胰岛素样生长因子受体分为,型和,II,型, I,型受体与胰岛素受体同源,具有酪氨酸激酶活性,介导,IGF-,、,II,和胰岛素的有丝分裂功能。,II,型受体则与胰岛素受体不同,无信号转导功能。,IGF- ,具有降低胶原酶和胶原酶,mRNA,表达、增加胶原蛋白,mRNA,表达和促进胶原蛋白合成的功能,并能使瘢痕组织中,ECM,胶原蛋白过度沉积。,（五）细胞因子5. IGF-（胰岛素样生长因子-）：胰岛,（五）细胞因子,6.IL- 8,（白细胞介素,-8,）：,Chrunyk,等在研究胎儿无瘢痕愈合时发现,创伤胎儿愈合过程中,体内炎性细胞因子包括,IL- 8,明显减少,提示缺乏细胞增殖和炎症反应可能是胎儿无瘢痕愈合的原因。郑健生等研究也证实一定浓度的,-MSH,促进体外培养的瘢痕疙瘩,FB,分泌,IL- 8,。,（五）细胞因子6.IL- 8（白细胞介素-8）：Chruny,（五）细胞因子,7,.,bFGF,（碱性成纤维细胞生长因子）：是,FGF,家族中对血管内皮细胞有很强的促有丝分裂作用的形成因子,是,FB,趋化剂,能诱导角质细胞、真皮,FB,和血管内皮细胞发生有丝分裂,诱导肉芽组织的新生上皮组织和血管形成,从而加速伤口愈合过程。,bFGF,能刺激胶原酶产生,抑制胶原尤其是,型胶原的合成与沉积,对胶原代谢起负性调节作用。与正常皮肤相比,增生性瘢痕中,bFGF,及,bFGF,受体阳性细胞在胶原纤维束间明显增高,这些细胞主要为,FB,和巨噬细胞。,（五）细胞因子7.bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）：是FG,（五）细胞因子,8.CTGF,（结缔组织生长因子）：,CTGF,能促进,HS,成纤维细胞的增殖、分化及免于凋亡，促进以胶原为主的细胞外基质的沉积近来的研究发现，,TGF-,1,独立致纤维化作用仅呈一过性，而在加入,CTGF,联合刺激后，其致纤维化的效应才得到增强和延长，故推断,TGF-,1,仅仅是纤维化进程的启动因素，而,CTGF,才是维持纤维化进程并最终导致病理性瘢痕的关键。另有研究阻抑,CTGF,后发现，,I,型胶原,mRNA,水平显著降低，瘢痕疙瘩的增殖速度降低至接近正常水平。提示,CTGF,有希望成为瘢痕疙瘩治疗的新靶点。,（五）细胞因子 8.CTGF（结缔组织生长因子）：CTGF能,（六）细胞连接及信号传导,1.,缝隙连接细胞间通讯：相邻细胞间通过缝隙连接所介导的细胞间连接通讯进行着信息、能量和物质的交换,对细胞的新陈代谢、内环境稳定、增殖和分化等生理过程起着重要的调控作用。鲁峰等应用交互式激光细胞仪对,FB,间的细胞间通讯进行了观察,发现正常皮肤,FB,的细胞间通讯正常,增生性瘢痕,FB,的细胞间通讯受到抑制,瘢痕疙瘩,FB,的细胞间通讯被阻断。,其后, Moyer,等发现透明质酸促进了连接蛋白,43,和,- actin,聚集于细胞表面,形成了更多的缝隙连接,从而提高了胶原的形成,促进了肉芽组织的成熟。,（六）细胞连接及信号传导 1.缝隙连接细胞间通讯：相邻细胞,（六）细胞连接及信号传导,2.,细胞信号转导系统中转化生长因子信号通道异常,：细胞信号转导是指细胞感受刺激后,以特定的方式通过细胞膜,诱导酶活性与构象改变,激发磷酸化或去磷酸化过程,活化转录因子,导致基因表达,进而影响细胞的增殖、分化、凋亡、黏附及物质合成功能等生物学效应的一系列生物活性反应过程。经研究证实,转化生长因子,信号通道在瘢痕形成中具有重要作用。,（六）细胞连接及信号传导2.细胞信号转导系统中转化生长因子,（六）细胞连接及信号传导,Smads,蛋白家族是近年来发现的转化生长因子,1,(TGF-,1,),受体下游信号蛋白，也是目前公认的介导,TGF-,1,胞内反应的主要通路。,Smads,是,TGF-,1,的下游信号蛋白，,Smad2,和,Smad7,分别起正性和负,性调节作用。已知在,HS,中,TGF-I,、,1I,型受体明显增加。因此我们推测，,Smad2,信号通路在细胞内异常持续地激活和,(,或,)Smad7,抑制作用逐渐减弱，是,HS,形成的原因。,（六）细胞连接及信号传导 Smads蛋白家族是近年来发现的,（七）蛋白组学,用蛋白质组学的方法,进行增生性瘢痕、瘢痕疙瘩组织及其成纤维细胞中的差异蛋白表达的研究,通过分别比较取自同一人的正常真皮组织与增生性瘢痕真皮组织,;,培养的正常成纤维细胞与增生性瘢痕成纤维细胞和取自另一人的正常真皮组织与瘢痕疙瘩真皮组织,;,培养的正常成纤维细胞与瘢痕疙瘩成纤维细胞蛋白质表达的差异,找出组织中增生性瘢痕与瘢痕疙瘩的差异蛋白质,及来自成纤细胞中的差异蛋白质,并对其作出分析比较,揭示这一类疾病发生过度纤维化的分子病理学原因,为增生性瘢痕、瘢痕疙瘩的治疗提供新思路。,（七）蛋白组学 用蛋白质组学的方法, 进行增生性瘢痕、瘢,（八）细胞骨架基因相关蛋白,1.,波形蛋白：波形蛋白是中等纤维的主要成分之一,在,FB,中起到细胞支架与网络作用,在创伤愈合及瘢痕愈合过程中起重要作用。,Ribotta,等认为增生性瘢痕中波形蛋白的表达信号强、分布广,在,FB,爬片中阳性率高,而非增生性瘢痕中表达很快降至低水平,正常皮肤中则难以看到。,（八）细胞骨架基因相关蛋白1.波形蛋白：波形蛋白是中等纤维的,（八）细胞骨架基因相关蛋白,2. -,平滑肌肌动蛋白：只有在增生性瘢痕中才含有,-,平滑肌肌动蛋白表达阳性的肌成纤维细胞, - SMA,是一种同时具有,FB,和平滑肌细胞结构和功能特点的间充质细胞,与增殖性瘢痕的发展有本质联系,其表达与持续存在是形成病理性损害的原因之一。,（八）细胞骨架基因相关蛋白2. - 平滑肌肌动蛋白：只有在,（九）血管因素,病理性瘢痕研究中两种独立存在而又相互矛盾的血管生成观点：,病理性瘢痕形成过程中，由于瘢痕组织血管生成过多、血供丰富支撑了瘢痕的过度增生,瘢痕组织中供血不足、组织缺氧诱发了病理性瘢痕的发生发展,微血管构筑表型,（九）血管因素 病理性瘢痕研究中两种独立存在而又相互矛盾的,（十）免疫,参与创面愈合与组织重塑的免疫细胞主要有淋巴细胞、巨噬细胞等,通过释放细胞因子,既可促进创面愈合,亦可导致病理性瘢痕形成。研究表明,瘢痕组织中存在着大量淋巴细胞、树突状细胞及免疫球蛋白,表明瘢痕过度增殖与免疫因素有密切关系。,（十）免疫 参与创面愈合与组织重塑的免疫细胞主要有淋巴细胞,（十一）激素、热休克蛋白、微量元素,雌激素能够促进创面愈合,而且增生性瘢痕组织中孕激素和雄激素的含量都较高,提示病理性瘢痕的产生可能和性激素有关。,热休克蛋白,47 (HSP47),对快速、强烈的胶原合成过程有一定的影响,瘢痕疙瘩组织中,HSP47,的表达在,mRNA,水平上调了,8,倍,在蛋白质水平上调超过了,16,倍。,另外,增生性瘢痕与自身正常皮肤比较,钙、镁、锌、铁、铜等微量元素含量下降,;,而扁平瘢痕与自身正常皮肤比较无差异,说明微量元素含量变化与病理性瘢痕产生有关。,（十一）激素、热休克蛋白、微量元素 雌激素能够促进创面愈合,（十二）物理环境（力学或机械因素）,许多皮肤中的细胞对于它们机械性的物理环境是具有反应的。特别是整合素家族的细胞表面分子通过机械力的作用具有活性，导致成纤维细胞的激活增殖，产生胶原和纤维蛋白对组织进行重塑的作用。虽然涉及细胞内信号传导的相关过程是复杂而不完全清楚的，但已发现一些如,FAK,等转录的调节是关键因素。,氧供情况是物理环境的另一个因素，低氧可增强成纤维细胞分裂增殖,延长成纤维细胞寿命。另外,氧张力能影响成纤维细胞的合成分泌功能。,（十二）物理环境（力学或机械因素） 许多皮肤中的细胞对于它,六、两种重要的病理性瘢痕研究方法,（一）胚胎创面无瘢痕愈合的比较性研究,比较胚胎创面的无瘢痕愈合及成体创面瘢痕愈合之间细胞和分子形成机制的差异，一直是瘢痕研究的重点和热点。自胎儿离开母体羊水环境，其皮肤对创伤的反应以及修复机制发生了显著变化。研究认为，细胞因子在这一过程中扮演着关键性角色。,六、两种重要的病理性瘢痕研究方法（一）胚胎创面无瘢痕愈合的比,（二）瘢痕疙瘩发生的肿瘤源性学说：瘢痕疙瘩与肿瘤具有相似的生物学特性。,1.,发病均与外界环境密切相关,2.,都具有遗传性，瘢痕疙瘩多高发于有色人种，而且主要发生于色素聚集部位，瘢痕体质患者具有一定的家庭遗传倾向及家族聚集性。,3.,基因变化都存在癌基因激活和过度表达，抑癌基因突变和丢失，微卫星不稳定。但瘢痕疙瘩的错配修复基因突变研究尚未见报道。,4.,多种肿瘤相关的细胞因子及其受体均参与了瘢痕疙瘩的形成与发展。,六、两种重要的病理性瘢痕研究方法,（二）瘢痕疙瘩发生的肿瘤源性学说：瘢痕疙瘩与肿瘤具有相似的生,六、两种重要的病理性瘢痕研究方法,5.,内分泌因素：与肿瘤发生有关的激素较明确的是雌激素、催乳素与乳癌有关。雄激素、雌激素、孕激素等与瘢痕疙瘩发生有关。,6.,免疫因素：先天性或后天性免疫缺陷者易发生恶性肿瘤，肾移植后长期使用免疫抑制剂的患者肿瘤发生率高。研究表明瘢痕疙瘩患者存在着免疫学指标的明显异常，免疫学因素在瘢痕疙瘩发病机制中也具有重要作用。,7.,治疗方式类似，手术、放疗、化疗、生物、中医药治疗。,六、两种重要的病理性瘢痕研究方法5.内分泌因素：与肿瘤发生有,七、病理性瘢痕的研究模型,由于动物与人皮肤结构的差异性,以及类瘢痕样增生组织来源尚存在争议等原因,目前尚无公认的比较理想的病理性瘢痕动物模型。比较常用的动物模型有：,1,、裸鼠动物模型,2,、兔耳动物模型,3,、豚鼠动物模型,4,、杜洛克猪动物模型,七、病理性瘢痕的研究模型 由于动物与人皮肤结构的差异性,以及,九、展望,目前的研究大多数是基于实际动物模型和人类病理标本的研究结果，由于研究的标本都是在瘢痕病变的终末期，存在一定的局限性和不足之处，他们忽视了导致病理性瘢痕的起始因子。这些起始因子是否与在人类模型中病理性瘢痕的形成具有相似程度，是否与病理性瘢痕有相同的因素等问题至今仍不明了。因为上述原因，使得病理性瘢痕在治疗反面的研究未能达到明显的效果。这也是目前临床上众多治疗方法中却没有一种能够获得广泛应用的原因。,九、展望 目前的研究大多数是基于实际动物模型和人类病理标本,十、我的科学问题,1.TGF-,3,信号传导通路研究。,2.,多因子联合瘢痕治疗研究，研究其相互间协同和拮抗作用。,3.,干细胞移植，胚胎无瘢痕愈合是因为干细胞还是基因、细胞因子等的不同。,4.,促进创面修复的各种生长因子应用的最佳浓度和剂量。,5.,瘢痕的蛋白组学研究，寻找特异性蛋白或瘢痕标志物。,6.,其它更多的问题有待开发。,十、我的科学问题1.TGF-3信号传导通路研究。,附：蛋白组学和特异性蛋白或瘢痕标志物,蛋白质组学,( proteome),是,1994,年由澳大利亚科学家,Wilkins,提出,:,它是指一种生物或一种细胞在特定时间和空间上表达的所有蛋白质。相对于基因组的固定,蛋白质组是动态的。同样的基因编码,在不同的细胞组织、不同的时间和不同的环境会有完全不同的表达。正因为如此, Cordwe ll,和,Humphery-Smith,提出了功能蛋白质组的概念,把特定时间、特定环境表达的蛋白质作为研究对象。蛋白质组学是大规模分析某一特定状态下的整个细胞或组织的蛋白质及其活动规律的学科。,附：蛋白组学和特异性蛋白或瘢痕标志物 蛋白质组学( pro,附：蛋白组学和特异性蛋白或瘢痕标志物,过程：样本通过双向凝胶电泳通过电位和分子量两种途,经分离蛋白，再经过鉴定和质谱分析出差异性蛋,白。,方法：进行增生性瘢痕、瘢痕疙瘩组织及其成纤维细胞,中的差异蛋白表达的研究。,真皮组织：正常,VS,增生性瘢痕；正常,VS,瘢痕疙瘩,成纤维细胞：正常,VS,增生性瘢痕；正常,VS,瘢痕疙瘩,附：蛋白组学和特异性蛋白或瘢痕标志物过程：样本通过双向凝胶电,108,可编辑,108可编辑,