病毒性肝炎标志物检测讲课课件

,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,病毒性肝炎标志物检测,病毒性肝炎标志物检测,1,传染源,粪便,血液,/,血源性物质/,体液,血液,/,血,源,性物质/,体液,血液,/,血,源,性物质/,体液,粪便,传播途径,粪,-,口,经皮肤/,经粘膜,经皮肤/,经粘膜,经皮肤/,经粘膜,粪,-,口,慢性感染,否,是,是,是,否,病毒性肝炎类型,A,B,C,D,E,基因组类型,ssRNA dsDNA,ssRNA,ssRNA,ssRNA,传染源粪便血液/血源性物质/体液血液/血源性物质/体液血,2,急性（轻症）无变化 加重时 、1G、2G、G 均降低 G升高,刺激机体产生抗PreS1和抗PreS2，能阻断HBV与肝细胞受体结合，从而起到抵抗病毒的作用,肝性 中度 中度 20，50%,2171 umol/L,慢性: ALT、肝炎病毒标志物加上AST、ALP、TP、A/G、GT、血清蛋白电泳,重度黄疸 342 umol/L,G 2030 g/L,AntiHBc IgM 急性感染标志,刺激机体产生抗HBc(非保护性抗体),55mmHg有抑制呼吸中枢危险。,肝硬化（活动期）、先天性胆管闭锁等AFP升高,乙肝后期或慢性感染(小三阳),Hepatitis B Virus,乙型肝炎的病原体,在全世界广泛流行，估计全球半数以上人口已被HBV感染过，5%的人口为HBV慢性感染,中国乙肝高发区，人群HBsAg的检出率达9.8%,急性（轻症）无变化 加重时 、1G、2G、G 均降,3,Hepatitis B Virus,Hepatitis B Virus,4,抗原组成(一)HBsAg,位于病毒表面，是一种糖蛋白,4种亚型(adr,adw,ayr,ayw),欧美国家: adw,我国汉族: adr,我国少数民族: ayw,判断HBV感染的指标之一,刺激机体产生保护性抗体即抗HBs,抗原组成(一)HBsAg位于病毒表面，是一种糖蛋白,5,抗原组成(二) HBcAg,位于Dane颗粒核心部分和肝细胞核内，在血清中不易检出游离的HBcAg,主要成分是蛋白质,刺激机体产生抗HBc(非保护性抗体),在乙肝急性期、恢复期和HBsAg携带者中常可检出抗HBc,抗HBc IgM常提示病毒处于复制状态,抗原组成(二) HBcAg位于Dane颗粒核心部分和肝细胞核,6,抗原组成(三) HBeAg,位于HBV的核心,是一种可溶性蛋白抗原,HBeAg和Dane颗粒出现相平行，且与DNA多聚酶在血中的消长动态相符合,血中HBeAg的出现可作为HBV复制及血清有感染性的指标,刺激机体产生抗HBe,抗HBe能与受染肝细胞表面的e抗原结合,通过补体介导破坏受染的肝细胞,抗HBe的出现是预后良好的征象,抗原组成(三) HBeAg位于HBV的核心,是一种可溶性蛋白,7,抗原组成(四) PreS抗原,位于HBV的外衣壳上，有两种,刺激机体产生抗PreS1和抗PreS2，能阻断HBV与肝细胞受体结合，从而起到抵抗病毒的作用,抗PreS1和抗PreS2的出现，表示病情好转，趋向痊愈,抗原组成(四) PreS抗原位于HBV的外衣壳上，有两种,8,传染源,患者,潜伏期,急性期,慢性期,无症状,HBsAg,携带者,传染源患者,9,高,中等,低/不能检出,血液,精液,尿,血清,阴道分泌物,粪便,伤口渗出物,唾液,汗液,泪液,乳汁,各种体液中,HBV,的浓度,高中等低/不能检出血液精液尿血清阴道分泌物粪便伤口渗出物唾,10,血源性传播,输血、注射、外科和牙科手术、针刺等,剃刀、牙刷和蚊虫叮咬等,母婴垂直传播,宫内传播,分娩时微小皮损处传播,产后母婴密切接触,性传播,HBV,传播途径,血源性传播HBV 传播途径,11,病原学诊断(一)抗原抗体检测,项目HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc以及抗HBc IgM,方法,ELISA(enzymelinked immunosorbent assay，最常用，定性),发光免疫分析(定量),反相间接血凝试验(少用),病原学诊断(一)抗原抗体检测,12,ELISA,的基本原理,利用抗原和抗体特异性结合,主要的试剂,固相抗原或抗体,酶标记的抗原或抗体,酶的底物,ELISA的基本原理利用抗原和抗体特异性结合,13,病原学诊断,(二),核酸检测,核酸杂交,探针,PCR,引物,病原学诊断(二)核酸检测核酸杂交,14,34月以后AFP升高 78月高峰 ,但 60 强阳性,1) 合成不足常见肝脏损害(慢性肝病 时,A下降比急性肝炎明显;失代偿期肝硬化低于代偿期肝硬化）,情不稳定或恶化趋势，若逐渐下降，为,中国乙肝高发区，人群HBsAg的检出率达9.,代谢性酸中毒时明显下降，碱中毒时明显上升。,代谢性酸中毒时明显下降，碱中毒时明显上升。,急性或慢性感染(大三阳),2）来源:胎肝和卵黄囊与肝再生时，分裂细胞数量呈正相关,1）AFP是胎儿性蛋白，为胎儿所特有，出生后,肝功能,1.代谢功能,1) 蛋白质、脂肪的同化、储存、异化等,2) 核酸代谢、维生素的活化和储藏,3) 胆红素、胆酸的生成分泌、排泄功能 如对胆红素的排泄,2.分泌、排泄功能如对胆红素的排泄,3.生物转化功能氧化、还原、水解、结合,此酶在心肌含量最高，肝脏为第三，在肝损害时，其漏出量也较AL,18,实验室检查的目的,了 解,肝脏有无损伤及损伤的程度,监测肝功能状态,协助病毒性肝炎和肝癌的诊断,评价肝脏的储备功能,其他,实验室检查的目的了 解,19,2) 原料不足长期饥饿、腹泻、消化道肿瘤和,我国少数民族: ayw,1）血清总蛋白（TP，serum total protein）,2) 原料不足长期饥饿、腹泻、消化道肿瘤和,轻度上升（100200U）或正常,2）在肝GT广泛分布于肝细胞毛细胆管,1、肝功检查无特异性强的检查方法，而且检查项目繁多，选择项目应考虑的选择原则,B、病情恶化，转氨酶反下降，是肝细胞广,在乙肝急性期、恢复期和HBsAg携带者中常可检出抗HBc,3) 胆红素、胆酸的生成分泌、排泄功能 如对胆红素的排泄,各种体液中HBV的浓度,2）来源:胎肝和卵黄囊与肝再生时，分裂细胞数量呈正相关,一）血清总蛋白、白蛋白、球蛋白,A/G,比值测定,1）血清总蛋白（TP，serum total protein）,是血清所含各种蛋白的总称,包括血清A和G，各占60%和40%,2）白蛋白（A，albulin)为血液中主要蛋白质。由肝脏合成，其半衰期为1519天,2) 原料不足长期饥饿、腹泻、消化道肿瘤和一）血清总蛋白、白,20,3）球蛋白 (G，globulin)为血清总蛋白中除去白蛋白以外的蛋白质,是多种蛋白质的混合物，包括免疫球蛋白和补体、各种糖蛋白、脂蛋白、金属结合蛋白和酶,球蛋白主要是由单核吞噬细胞系统合成,与机体免疫有关,4）A/G比值 1 ，如1 称A/G比值倒置,3）球蛋白 (G，globulin)为血清总蛋白中除去白蛋白,21,参 考 值,TP 6080 g/L,A 4050 g/L,G 2030 g/L,A/G 1.52.5 : 1,参 考 值TP 6080 g/L,22,临床意义,1. 总蛋白增高,1）血液浓缩见于重度腹泻、呕吐、高热、,休克等,2）蛋白质合成主要是G，如多发性骨髓,瘤、肝硬化、淋巴瘤,总蛋白降低,1）血液稀释，各种原因所致的水盐潴留,2）各种原因的A降低,临床意义1. 总蛋白增高,23,临床意义,2、白蛋白降低,1) 合成不足常见肝脏损害(慢性肝病 时,A下降比急性肝炎明显;失代偿期肝硬化低于代偿期肝硬化）,2) 原料不足长期饥饿、腹泻、消化道肿瘤和,消化不良等,3)去路增加,丢失过多肾炎、肾病综合征、大量胸腹水,严重烧伤和失血消耗过多甲亢、糖尿病、恶性肿瘤等,白蛋白增高 少见，脱水致血液浓缩,临床意义2、白蛋白降低,24,临床意义,3、球蛋白增高,1）感染、免疫反应，如TB、疟疾和血吸虫等,2）多发性骨髓瘤,3）自身免疫性疾病,如SLE、风湿热、类风湿,性关节炎等,球蛋白降低,合成降低,如肾上腺皮质功能亢进,先天性免,疫缺陷,临床意义3、球蛋白增高,25,临床意义,4、 A/G比值,A/G比值反映A、G浓度变化的关系,正常值1.52.5/1,肝功损害严重时，A下降，G上升，使A/G比值变化,当A/G50%,慢性肝炎PAB的监测PAB持续降低肝硬化,PAB升高预后较好PAB持续降低:预后较差,肝移植病人的监测反映移植肝的合成功能,PAB的意义急性肝炎:PAB无下降,33,凝血功能检查,肝脏严重受损时，肝脏合成凝血因子功能下,降，故凝血时间延长,1),凝血时间（,CT,）延长,VII,、,IX,、,XI,明显减少,2),血浆凝血酶原时间（,PT,）延长,I,、,II,、,V,、,VII,、,X,缺乏,3),活化的部分凝血活酶时间（,APTT,）延长,XII,、,XI,、,IX,、,VIII,、,X,、,V,、,II,等缺乏,凝血功能检查肝脏严重受损时，肝脏合成凝血因子功能下,34,胆红素代谢功能检查,胆红素代谢功能检查,35,病毒性肝炎标志物检测讲课课件,36,胆红素种类,1)未结合胆红素（间接胆红素）:即UCB，指游离胆红素和胆红素白蛋白统称未结合胆红素,2)结合胆红素或直接胆红素:即CB,指胆红素葡萄糖醛酯或其硫酸酯称结合胆红素,3)总胆红素（STB):为非结合胆红素和结合胆红素的总量,胆红素种类1)未结合胆红素（间接胆红素）:即UCB，指游离,37,UCB,和,CB,的特点和理化性质,UCB CB,结构特点 游离胆红素 与葡萄糖醛酸结合 或胆红素白蛋白 分子量 585 重氮反应 间接反应 直接反应透过生物膜 易，有毒性 不易,水溶性,UCB和CB的特点和理化性质 UCB,38,参考值,总胆红素 1.717.1 umol/L结合胆红素 06.8 umol/L非结合胆红素 1.710.28 umol/L,参考值 总胆红素 1.717.1 umo,39,临床意义,1）总胆红素判断有无黄疸及黄疸的程度,隐性黄疸 17.134.2 umol/L,轻度黄疸 34.2171 umol/L,中度黄疸 171342 umol/L,重度黄疸 342 umol/L,临床意义1）总胆红素判断有无黄疸及黄疸的程度,40,急性肝炎:PAB无下降,严重烧伤和失血消耗过多甲亢、糖尿病、恶性肿瘤等,GT （中度）,代谢性酸中毒时明显下降，碱中毒时明显上升。,左右波动或再上升,提示急性转为慢性,功能检测指标之一,1）感染、免疫反应，如TB、疟疾和血吸虫等,2）根据黄疸程度判断黄疸原因,疫苗接种或曾经感染过,有免疫力,肝硬化（活动期）、先天性胆管闭锁等AFP升高,男 1150U/L 女 730U/L,阻塞性 明显 明显 60 强阳性,临床意义,2）根据黄疸程度判断黄疸原因,（总胆红素水平）完全阻塞性黄疸 342 umol/L不完全阻塞性黄疸 171342 umol/L肝性黄疸 17.1171 umol/L溶血性黄疸 85.5 umol/L,急性肝炎:PAB无下降临床意义2）根据黄疸程度判断黄疸原因,41,临床意义,3,）根据,STB,、,CB,及,UCB,判断黄疸类型,STB,+,UCB,溶血性黄疸,STB,+ CB,阻塞性黄疸,STB,+,CB,+,UCB,肝性黄疸,临床意义3）根据STB、CB及UCB判断黄疸类型,42,正常人及三种黄疸的胆红素代谢检查结果,血清胆红素（umol/L） 尿,STB CB UCB CB/ STB 尿胆原 胆红素,正常人1.717.1 06.8 1.710.2 20% （） 弱阳性（）,溶血性 明显 20，60 强阳性,正常人及三种黄疸的胆红素代谢检查结果 血清胆红,43,血清酶学检查,血清酶学检查,44,1,、血清转氨酶测定,1）转氨酶是将氨基酸的氨基转移到酮,酸的酮基上的一种酶,用于肝功能检查的主要是谷氨基丙酮酸转移酶（GPT）和谷氨酸草酰乙酸转移酶（GOT）,1、血清转氨酶测定1）转氨酶是将氨基酸的氨基转移到酮,45,2) GPT,经,WHO,命名为丙氨酸氨基转移酶,(ALT),存,在于肝细胞胞浆中，因肝内该酶活性较血清,约高,100,倍，故只要有,1%,肝细胞坏死,即可使,血清中的,ALT,增高,1,倍,因此,它是最敏感的肝,功能检测指标之一,2) GPT经WHO命名为丙氨酸氨基转移酶(ALT),存,46,3) GOT,现名天门冬氨酸氨基转移酶（,AST,）。此酶在心肌含量最高，肝脏为第三，在肝损害时，其漏出量也较,ALT,低,3) GOT现名天门冬氨酸氨基转移酶（AST）。此酶在心肌含,47,临床意义,（1）急性病毒性肝炎转氨酶阳性率80100%A、在发病前，ALT与AST即有升高，最高值,500U,随病情好转逐渐下降至正常,B、病情恶化，转氨酶反下降，是肝细胞广,泛坏死的表现,C、在急性肝炎的恢复期，如转氨酶在100U,左右波动或再上升,提示急性转为慢性,临床意义（1）急性病毒性肝炎转氨酶阳性率80100%A、在,48,临床意义,（2）慢性肝炎和脂肪肝 :,轻度上升（100200U）或正常,（3）肝硬化、肝癌 :,轻度上升（100200U）或正常,临床意义（2）慢性肝炎和脂肪肝 :,49,2、谷氨酰转移酶（GT）,1）G活性 肾胰肝,2）在肝GT广泛分布于肝细胞毛细胆管,侧和整个胆管系统，在胆汁淤滞时,肝,内GT合成亢进，肝癌可合成 GT,3）参考值,男 1150U/L 女 730U/L,2、谷氨酰转移酶（GT）1）G活性 肾,50,意义,1）肝癌 肝癌合成 A、肝内阻塞 胆汁淤滞 GT 肝癌细胞产生 B、阳性率95%2）阻塞性黄疸:GT（上升幅度与黄疸程度平,行）,意义1）肝癌 肝癌合成 A,51,意义,3)急性肝炎:中度升高 ， 1000U,意义3)急性肝炎:中度升高 ， 200U 若恢复期,52,肝癌标志物的检查,在肝细胞癌时,由于肝细胞功能异常，产生出一些与肝细胞癌密切相关的蛋白质,称为肝癌的肿瘤标志物，对肝癌的诊断有重要意义,肝癌标志物的检查在肝细胞癌时,由于肝细胞功能异常，产生出一些,53,1.AFP,测定,1,）,AFP,是胎儿性蛋白，为胎儿所特有，出生后,不久转为阴性,或仅含微量,在原发性肝癌时升高,因而，测定,AFP,在血中的浓度，对此类疾病的诊断有重要意义,1.AFP测定1）AFP是胎儿性蛋白，为胎儿所特有，出生后,54,2,）来源,:,胎肝和卵黄囊与肝再生时，分裂细胞数量呈正相关,3,）参考值,:,成人, 25 ug/L,3,周,6,个月的小儿, 500 ug/L,持续,1,个月以上,能排除妊娠、活动性肝炎、幼儿性睾丸或卵巢、畸胎瘤等可确诊肝癌,（,2,）肝炎 病毒性肝炎肝细胞重新具有了产,生,AFP,的能力,.,急性、慢性肝炎均可升高，,但,50%,剃刀、牙刷和蚊虫叮咬等,隐性黄疸 17.,抗HBe能与受染肝细胞表面的e抗原结合,通过补体介导破坏受染的肝细胞,抗HBe的出现是预后良好的征象,HBsAg 感染的标志,AntiHBe 病毒不再复制,4),意 义,（3）妊娠,34月以后AFP升高 78月高峰 ,但 95%2）阻塞性黄疸:GT（上升幅度与黄疸程度平,1171 umol/L溶血性黄疸 85.,A/G 1.,1）血液稀释，各种原因所致的水盐潴留,生AFP的能力.,2、癌胚抗原（CEA）测定,肝脏有无损伤及损伤的程度,基因组类型 ssRNA dsDNA ssRNA ssRNA ssRNA,2,、选择项目,1）健康查体:ALT、肝炎病毒标志物,2）肝炎诊断,急性ALT、肝炎病毒标志物,慢性: ALT、肝炎病毒标志物加上AST、ALP、TP、A/G、GT、血清蛋白电泳,1、酸碱度(pH)，参考值7.2、选择项目1）健康查体:AL,62,2,、选择项目,3）黄疸,一般总胆红素、ALT 加上 AFP,4）原发性肝癌,除一般肝功,加测AFP、GT、CEA等,2、选择项目3）黄疸,63,血气分析,血气分析,64,1,、酸碱度,(pH),，参考值,7.35,7.45,。,7.35,为酸血症，,7.45,属碱血症。,但,pH,正常并不能完全排除无酸碱失衡。,2,、二氧化碳分压,(PCO2),参考值,4.65,5.98kPa(35,45mmHg),乘,0.03,即为,H2CO3,含量。,超出或低于参考值称高、低碳酸血症。,55mmHg,有抑制呼吸中枢危险。是判断各型酸碱中毒主要指标。,3,、二氧化碳总量,(TCO2),，参考值,24,32mmHg,，代表血中,CO2,和,HCO3,之和，在体内受呼吸和代谢二方面影响。,代谢性酸中毒时明显下降，碱中毒时明显上升。,1、酸碱度(pH)，参考值7.357.45。7.35为酸,65,4,、氧分压（,PO2,）参考值,10.64,13.3kpa,（,80,100mmHg,）。,低于,55mmHg,即有呼吸衰竭，,30mmHg,可有生命危险。,5,、氧饱和度,(SatO2),，参考值,3.5kPa(26.6mmHg),。,6,、实际碳酸氢根（,AB,），参考值,21.4,27.3mmHg,，标准碳酸氢根（,SB,）参考值,21.3,24.8mmol/L,。,AB,是体内代谢性酸碱失衡重要指标，在特定条件下计算出,SB,也反映代谢因素。二者正常为酸碱内稳正常。,二者皆低为代谢性酸中毒（未代偿），二者皆高为代谢性碱中毒（未代偿），,ABSB,为呼吸性酸中毒。,4、氧分压（PO2）参考值10.6413.3kpa（80,66,