14章棒状杆菌检验课件

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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,种类,白喉棒状杆菌(,C.diphtheriae,),假白喉棒状杆菌(,C.pseudodiphtheriticum,),干燥棒状杆菌(,C.xerosis,),化脓棒状杆菌(,C.pyogenes,),溃疡棒状杆菌(,C.ulcerans,),假结核棒状杆菌(,C.pseudotuberculosis,),溶血棒状杆菌(,C.haemolyticum,),J-K,群棒状杆菌(,C.jeikeium-CDC group JK,),第,14,章,棒状杆菌属,种类 白喉棒状杆菌(C.diphtheriae) 假白喉棒状,?,致病物质,1,、白喉外毒素,?,毒力强,?,抗原性强,?,编码外毒素的,tox,基因,-,棒状杆菌噬,菌体,一、临床意义,第一节,白喉棒状杆菌,C.diphtheriae,? 致病物质 1、白喉外毒素 ?毒力强 ?抗原性强 ?编码,作用机制:,-,影响蛋白质的合成,作用特点:,?,作用于多种细胞,心肌、神经细胞均有,毒素受体,?,肿瘤细胞对此毒素敏感,作用机制: -影响蛋白质的合成 作用特点: ?作用,2,、索状因子,细菌表面的一种糖脂,能破坏细胞的线,粒体,影响细胞的呼吸与磷酸化,3,、,K,抗原,?,细胞壁外面的一种不耐热糖蛋白,?,抗吞噬,?,有利于细菌在黏膜表面的定植,2、索状因子 细菌表面的一种糖脂,能破坏细胞的线粒体,影响细,?,所致疾病,白喉(急性呼吸道传染病),传染源:患者及带菌者,传播途径:飞沫或污染的物品,临床表现:,?,局部炎症,:炎性渗出,坏死,纤维蛋白,假膜,窒息,?,全身中毒症状,?,外周,N-N,炎:膈肌麻痹,-,呼吸困难,声带麻痹,-,声音嘶哑,咽肌麻痹,-,吞咽困难,?,心肌,-,心肌炎,?所致疾病 白喉(急性呼吸道传染病) 传染源:患者及带菌,白喉假膜,白喉假膜,?,感染后机体可获得牢固的免疫力,?,机体还可通过其它方式获得免疫力:,?,六月以下婴儿,-,母亲,?,成人,-,隐性感染、人工主动免疫,?,易感者:,?,24,岁儿童,?,成人,-,也有可能,?,免疫性:,?感染后机体可获得牢固的免疫力 ?机体还可通过其它方式获得免,二、生物学特性,形态与染色,:,?,G,+,细长微弯的杆菌,?,一端或两端膨大呈棒状,?,常排列呈,V,、,L,、,X,等文字形,?,异染颗粒,形态上的鉴别特征,?,无荚膜、无芽胞、无鞭毛,二、生物学特性 形态与染色: ? G+细长微弯的杆菌,白喉棒状杆菌异染颗粒,1000,白喉棒状杆菌异染颗粒 1000,培养特性,?,营养要求高,?,吕氏,(Loeffler),血清斜面或鸡蛋斜面:,?,形成灰白色、湿润、有光泽的光滑型菌苔,/,菌,落,培养特性 ?营养要求高 ?吕氏(Loeffler)血清斜面,BAP,中菌落,BAP,(血琼脂平板),?,菌落灰白色、光滑型,,直径,1,2mm,、有狭窄,溶血环(轻型),?,多次传代后菌体变为,球形,BAP中菌落 BAP(血琼脂平板) ?菌落灰白色、光滑型,,亚碲酸钾,BAP,(选择鉴别培养基),?,黑色菌落,鉴别依据,?,根据菌落特征及生化反应特点可将本菌分为:重,型、中间型、轻型,?,不同菌型还原能力不同,呈现黑色或灰黑色菌落,白喉棒状杆菌,在亚碲酸钾,BAP,中菌落,亚碲酸钾BAP(选择鉴别培养基) ?黑色菌落鉴别依据 ?,三、微生物学检验,检验程序,见图,14-3,标本采集,分泌物,取双份,三、微生物学检验 检验程序 见图14-3 标本采集,直接涂片染色镜检:,?,2,3,张涂片,革兰染色、异染颗粒染色,镜检,初报“直接涂片检出形似白喉,杆菌”,早期诊断,?,用无菌棉拭子浸以动物血清,采集标本,,37,10h,,涂片染色镜检,提高阳性率,直接涂片染色镜检: ?23张涂片革兰染色、异染颗粒染色,分离培养与鉴定,1,、分离培养,?,吕氏血清斜面:,37,、,8,12h ,涂片染色镜检,-,检出率要比直接涂片高,有助于快速诊断,?,亚碲酸钾,BAP,:,37,、,24,48h,,黑色菌落,?,BAP,:,轻型有,溶血环,应注意与,溶血性链球菌,鉴,别,分离培养与鉴定 1、分离培养 ?吕氏血清斜面: 37,2,、鉴定,?,形态染色、菌落特点、生化反应,?,糖发酵试验、尿素酶、硝酸盐还原,鉴别棒状杆菌属不同的种,2、鉴定 ?形态染色、菌落特点、生化反应 ?糖发酵试验、尿素,3,、毒力试验(鉴定致病菌株的重要依据),?,体外法:,?,琼脂平板毒力试验(,Elek,平板毒力测定),?,SPA,协同凝集试验,?,对流电泳,?,体内法,:,用豚鼠作毒素,-,抗毒素中和试验,3、毒力试验(鉴定致病菌株的重要依据) ?体外法: ?琼脂平,对流免疫电泳,琼脂平板毒力试验,-Elek,平板,白喉抗毒素,待测菌,白喉抗毒素,标准产毒株,阴性菌,(-),待测菌,(+),待测菌,(-),对流免疫电泳 琼脂平板毒力试验-Elek平板 白喉抗毒素 待,(,五)免疫力测定,1,、锡克试验(,Schick test,),白喉外毒素皮内试验,?,调查人群在感染或预防接种后对白喉是否产生免,疫力,?,根据外毒素与抗毒素中和的原理,以少量白喉外,毒素测定机体有无相应抗毒素,?,缺点,观察时间长、操作繁琐,不易进行广泛测,试,(五)免疫力测定 1、锡克试验(Schick test),2,、致敏红细胞凝集试验,?,测定血清中抗毒素水平,?,0.1ml,血清,倍比稀释,+,外毒素致敏红细胞,,37,、,1h,后观察结果,?,敏感度可达,10,-4,单位,简便快速,2、致敏红细胞凝集试验 ?测定血清中抗毒素水平 ?0.1ml,
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