临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法,1,临床PcR检验标本的处理、,保存及核酸提取方法,卫生部临床检验中心李金明88,卫生部临床检验中心,Nationa Center For Cl inical Laborator ies,临床PcR检验标本的处理、,2,临床标本的正确采集、运送、保存:,的重要性,临床检验的质量保证关键性环节,解决涉及实验室检验的医患纠纷的方法,之,生部临床检验中心,Nationa Center For Cl inical Laborator ies,3,。,核酸提取的重要性,00,00,核酸提取是临床PCR检验最为关键的部分,亦,是手式操作的主要部分,核酸提取的成败关系到临床PcR检验的正确与,l临床PCR检验操作中最易出问题的环节,卫生部临床检验中心,Nationa Center For Cl inical Laborator ies,。,4,标本采集,00,00,标本采集时间对扩增检测结果的影响,标本采集部位的准备,标本的类型和采集量,采样质量的评价,采样及运输容器,标本采集中的防污染,生部临床检验中心,Nationa Center For Cl inical Laborator ies,5,。,标本运送,00,00,样本一经采集,则应尽可能快的送至检测实验,室,样本中如加入了适当的稳定剂如用于RNA测,定加入GITC的血清(浆)样本和用于DNA测定的,EDTA抗凝血等,则可在室温下运送或邮寄。,实验室应根据待测靶核酸的特性,对各种临床,样本的运送条件作出相应的规定。,卫生部临床检验中心,Nationa Center For Cl inical Laborator ies,。,6,。,临床标本的处理和保存,00,00,血清(浆),全血,外周血单个核细胞,痰,棉拭子,脓液,体液,乳汁,组织,卫生部临床检验中心,Nationa Center For Cl inical Laborator ies,。,7,血清(浆),00,00,DNA测定,可按照一般的血清标本处理程序,对测定影响不大。,RNA测定,标本的获取和保存方式对测定结果,可能有决定性影响。最好是使用EDTA抗凝(严,禁使用肝素,因其对PCR扩增有抑制,且很难,在核酸提取过程中完全去除)全血标本,抗凝,后6小时内分离血浆,如使用血清标本,则需,尽快(2小时内)分离血清,标本的短期(12周),保存可在-20下,较长期保存应在-70下,卫生部临床检验中心,Nationa Center For Cl inical Laborator ies,8,全血,00,以全血作为待测标本时必须注意抗凝剂的选,择,一般使用EDTA-Na,或枸椽酸钠,不可使用肝,素,全血样本如用于DNA提取检测可4下短期保,存如用于RNA检测,则应在取血后,尽快提,取RNA,卫生部临床检验中心,Nationa Center For Cl inical Laborator ies,9,外周血单个核细胞,00,00,外周血单个核细胞可从抗凝全血制备,主要有,两条途径,一是使用淋巴细胞分离液分离制备,二是使用红细胞裂解液,裂解全血中的红细胞,经生理盐水数次洗涤,即可得到单个核细胞,外周血单个核细胞如暂不提取核酸可保存于,70下,卫生部临床检验中心,Nationa Center For Cl inical Laborator ies,10,痰,00,痰属于分泌物,临床上常用作为结核杄菌DNA测定标本,痰标本中含有大量粘蛋白和杂质,故在核酸提取时,需,对样本进行初步处理,即用1mo/NaOH或变性剂液,化,如用于非结核杆菌如肺炎支原体的PCR检测,痰标本,只能室温悬浮于生理盐水中,充分振荡混匀,促使大,块粘状物下沉,取上清离心,所得到的沉淀物即可用,于核酸提取。,液化标本如不立即用于核酸提取,可保存于-70C下。,卫生部临床检验中心,Nationa Center For Cl inical Laborator ies,11,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,12,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,13,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,14,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,15,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,16,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,17,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,18,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,19,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,20,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,21,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,22,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,23,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,24,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,25,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,26,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,27,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,28,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,29,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,30,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,31,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,32,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,33,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,34,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,35,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,36,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,37,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,38,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,39,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,40,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,41,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,42,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,43,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,44,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,45,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,46,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,47,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,48,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,49,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,50,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,51,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,52,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,53,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,54,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,55,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,56,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,57,临床PCR验标本的处理保存及核酸提取方法课件,58,谢谢,46,、我们若已接受最坏的，就再没有什么损失。,卡耐基,47,、书到用时方恨少、事非经过不知难。,陆游,48,、书籍把我们引入最美好的社会，使我们认识各个时代的伟大智者。,史美尔斯,49,、熟读唐诗三百首，不会作诗也会吟。,孙洙,50,、谁和我一样用功，谁就会和我一样成功。,莫扎特,谢谢46、我们若已接受最坏的，就再没有什么损失。卡耐基,59,