骨质疏松症治疗药物的研究及应用-课件

,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,编辑版ppt,*,骨质疏松症治疗药物的研究及应用,1,编辑版ppt,骨质疏松症治疗药物的研究及应用1编辑版ppt,主要内容,1,前 言,2,研究现状,3,中医药研究,2,编辑版ppt,主要内容1前 言2研究现状3中医药研究2编辑版ppt,前言,骨质疏松症,(Osteoporosis,，简称,OP),是以低骨量及骨组织微结构退变为特征的一种全身性骨骼疾病，伴有骨脆性增加、易于发生骨折。,3,编辑版ppt,前言骨质疏松症(Osteoporosis，简称OP) 是以低,骨质疏松症在世界常见病多发病中居第七位,全世界骨质疏松症患者超过,2,亿,1/3,60,-,70,岁的女性，,2/3,80,岁以上的女性患有骨质疏松症,在欧洲和美国,髋部骨折人数每年达,65,万,死亡率以每年,10-20%,递增,美国骨质疏松症已超过,2500,万，每年治疗费用高达,100,亿美元（,2001,年）,2010,年我国,60,岁人口占总人口,13.26%,，预计,2050,年将超过,2,亿。,2001,年根据我国骨质疏松诊断标准预测我国骨质疏松症患者,8400,万，占总人口,6.6%,，到,2050,年将占总人口,13.2%,。,4,编辑版ppt,骨质疏松症在世界常见病多发病中居第七位4编辑版ppt,社会经济影响,骨质疏松症的高发病率,巨额的治疗费用,给个人、社会和国家造成严重的负担,5,编辑版ppt,社会经济影响骨质疏松症的高发病率5编辑版ppt,分类,原发性骨质疏松,绝经后骨质疏松,老年性骨质疏松,特发性骨质疏松,幼年性骨质疏松,成年性骨质疏松,继发性骨质疏松,先天性,成骨发育不全,性腺发育不全,染色体病,6,编辑版ppt,分类原发性骨质疏松6编辑版ppt,获得性,内分泌代谢系统疾病（皮质醇增多症、甲亢、甲旁亢、肢端肥大症、性功能低下、卵巢切除、垂体功能低下、侏儒症、糖尿病等）,消化系统疾病（慢性肝胆疾病，吸收不良综合征、胃肠切除、慢性胰腺炎、腹泻、进食障碍）,肾脏系统疾病（慢性肾功能衰竭）,营养性不良（维生素,D,、维生素,C,、钙摄入不足，蛋白质缺乏或过多）,废用所致（制动、长期卧床、失重、外伤性骨萎缩、瘫痪、肩,-,手综合征）,肿瘤所致（多发性骨髓瘤、白血病、淋巴瘤、恶性肿瘤、转移瘤等）,药物所致（糖皮质激素、肝素、咖啡因和抗癫痫药等）,其它因素（类风湿性关节炎、氟骨症、缺氧、吸烟、酒精中毒、妊娠等）,7,编辑版ppt,获得性7编辑版ppt,研究现状,8,编辑版ppt,研究现状8编辑版ppt,一、骨与骨组织,骨由皮质骨（密质骨）和小梁骨（松质骨）构成,皮质骨由骨单位构成（哈弗系统：哈弗管，同心骨板、间骨板、环形骨板）,松质骨由大量针状或片状骨小梁相互连接而成,骨组织是坚硬的结缔组织，由细胞和钙化的细胞外基质构成,9,编辑版ppt,一、骨与骨组织骨由皮质骨（密质骨）和小梁骨（松质骨）构成9编,（一）骨基质,无机成份（,65%,） ：,骨盐，主要存在形式为羟基磷灰石结晶,有机成份（,35%,） ：,骨胶原（,9095%,） 、无定形基质（,10%,）,胶原纤维,基质,钙盐,骨细胞,10,编辑版ppt,（一）骨基质无机成份（65%） ：胶原纤维基质钙盐骨细胞10,1,、无机成份,钙,钙的分布,成人,1200g,，约,99%,（,1180g,）存在于骨组织，软骨、牙齿各含,7g,，细胞外液约,1g,钙含量在,2025,岁达到峰值，平均每天增加,130160mg,钙的生理作用,钙的肠吸收及影响因素,游离钙被吸收，主动转运为主，依赖于维生素,D,及其活性代谢产物。肠内钙浓度高时存在被动转运。吸收能力依次为十二指肠、空肠、回肠,维生素,D,、年龄、激素、阳离子、食物成分、药物、,H,+,浓度、妊娠与哺乳,11,编辑版ppt,1、无机成份11编辑版ppt,肾钙转运和尿钙,肾小球滤液的钙浓度为血钙的,60%,，约一半在近曲小管被吸收（被动转运），远曲小管和集合管为主动转运，有最大重吸收，受多种激素和因素影响，是肾钙调节的重要部位,骨钙的沉积和释放,摄入钙增加时，一部分钙就储存在骨组织中，但有一定限度,机体缺钙时，一部分骨钙动员出来以维持正常血钙,血钙及其调节系统,离子钙、与蛋白结合的钙、与小分子阴离子结合的钙,8.310.5mg/100ml,甲状旁腺激素、降钙素、维生素,D,12,编辑版ppt,肾钙转运和尿钙12编辑版ppt,磷,成人含,600g,，,85%,分布于骨骼牙齿，含磷骨无机质主要是磷酸钙，占骨无机质的,84%,影响磷代谢的因素,甲状旁腺激素、维生素,D,及其代谢产物，其它（降钙素，生长素、甲状腺激素、糖皮质激素等）,镁,成人含,2128g,，,60%,分布于骨骼,微量元素,锌、铜、锰、氟、锶、硅、铝,13,编辑版ppt,磷13编辑版ppt,2,、有机成份,胶原（,9095%,）,无定形基质（,10%,）,骨基质非胶原蛋白、葡萄糖蛋白,3,、骨基质的矿化,成骨细胞合成并分泌骨的有机成分后，在一定条件下无机盐有秩序地沉积于内，基质中涉及很多细胞内外的生化过程，使钙和磷形成羟基磷灰石，再与有机质形成螯合物，变为正常骨质。,14,编辑版ppt,2、有机成份14编辑版ppt,影响及调节机制,整体因素,种族、地理、性别、运动,激素对骨矿化的调节,活性维生素,D,、雄激素、雌激素、生长素、甲状腺激素、甲状旁腺素、降钙素等,病理因素对骨矿化的影响,早产儿、类风湿、铅中毒、铝中毒、甲状旁腺功能亢进、慢性肾功衰,15,编辑版ppt,影响及调节机制15编辑版ppt,（二）骨的构成细胞,骨的构成细胞：成骨细胞、骨细胞、破骨细胞,调节及分泌无机质成分，协调维持血清钙浓度,进行骨重建，使骨对因负重和锻炼引起的力学改变作出反应，维持骨骼内在平衡,16,编辑版ppt,（二）骨的构成细胞骨的构成细胞：成骨细胞、骨细胞、破骨细胞1,（三）骨重建,骨重建是维持骨组织代谢和力学功能的重要机制。是骨组织自我更新和自我调整的生理过程。,皮质骨中是新的哈弗系统形成,松质骨是新骨小梁的形成,是一个有序的活动，最先是激活，随之出现破骨细胞骨吸收，形成吸收陷窝，随后成骨细胞到达吸收陷窝，新的骨基质形成并进行矿化，完成骨形成。,17,编辑版ppt,（三）骨重建骨重建是维持骨组织代谢和力学功能的重要机制。是骨,（四）骨的老化,骨的无机质逐渐减少，钙的含量降低,有机质中的蛋白多糖明显减少，胶原蛋白增多，胶原纤维增粗且排列不规则,结构疏松，骨密度降低,18,编辑版ppt,（四）骨的老化骨的无机质逐渐减少，钙的含量降低18编辑版pp,（五）骨代谢的调节,1,、维生素,D,及其代谢产物,生理作用,对肠的作用,促进钙磷吸收,对肾脏的作用,与,PTH,协同促进肾小管对钙的重吸收,对骨骼的作用,与,PTH,协同促进破骨细胞的溶骨作用,直接刺激成骨细胞，加速成骨作用,对甲状旁腺的作用,升高血钙，间接抑制,PTH,释放,19,编辑版ppt,（五）骨代谢的调节1、维生素D及其代谢产物19编辑版ppt,2,、甲状旁腺激素,甲状旁腺激素的分泌与调节,血浆钙离子浓度反馈调节,镁、锂、钾离子促进分泌,降钙素直接、间接促进分泌,维生素,D,年龄、性别、季节因素可影响其分泌,生理功能,对骨的作用：促进骨吸收，超生理剂量可抑制胶原及基质合成,对肾脏的作用：增加磷排泄，增加钙重吸收，促进维生素,D,活化,对肠道的作用,20,编辑版ppt,2、甲状旁腺激素20编辑版ppt,3,、降钙素,降钙素的分泌与调节及影响因素,血浆钙离子浓度升高促进分泌,镁离子促进分泌,甲状旁腺激素直接、间接促进分泌,年龄、性别可影响其分泌,生理功能,对骨的作用：直接抑制骨吸收，抑制破骨细胞的数量和活性，促进骨生成过程,21,编辑版ppt,3、降钙素21编辑版ppt,4,、雌激素,对骨吸收的作用：抑制,抑制,IL-1,介导的破骨细胞形成,通过维生素,D,间接抑制,PTH,介导的破骨细胞形成,抑制,IL-6,介导的破骨细胞形成,对骨形成的作用：有实验证明有一定的刺激骨形成作用,促进活性维生素,D,在肾内的合成,22,编辑版ppt,4、雌激素22编辑版ppt,5,、维生素,维生素,C,与骨代谢,参与胶原蛋白的合成，增加肠钙吸收,维生素,A,与骨代谢,促使骨细胞功能增强，缺乏可引起维生素,A,缺乏性佝偻病,维生素,K,与骨代谢,影响骨组织的胶原形成与矿化,23,编辑版ppt,5、维生素23编辑版ppt,6,、细胞因子,骨形态发生蛋白（,BMP,）,位于骨陷窝壁上，促进骨基质的形成和钙化,胰岛素样生长因子（,IGFs,）,促进成骨细胞活性，生成新骨,成纤维细胞生长因子（,FGF,）,促进骨细胞形成，防止凋亡,白细胞介素（,IL,）,骨吸收刺激因子，抑制骨形成,肿瘤坏死因子（,TNF,）,骨吸收刺激因子，抑制骨形成,前列腺素（,PG,）,增强骨吸收,单核细胞集落刺激因子（,M-CSF,）,刺激破骨细胞前体的增殖分化,转化生长因子,（,TGF-,）,对骨吸收具有刺激和抑制双向调节作用,一氧化氮（,NO,）,24,编辑版ppt,6、细胞因子24编辑版ppt,二、原发性骨质疏松症的发病机制,（一） 骨重建失衡,原发性骨质疏松的发生可能是由于骨重建过程中，激素的系统调节和各种细胞因子的局部调节发生变化，导致激活频率增加或骨吸收和骨形成的偶联机制障碍，使骨再建失衡所致。,绝经期后骨吸收增加,20,，骨形成增加,15,，每日负钙平衡可达,40mg,肠钙吸收减少，,尿钙排泄增加,老年性骨质疏松主要与骨形成减少有关。,由此可见，无论哪种类型的骨质疏松都是骨吸收大于骨形成，从而发生骨量丢失。,25,编辑版ppt,二、原发性骨质疏松症的发病机制（一） 骨重建失衡25编辑版p,（二）骨强度降低,骨量,小梁骨较多的股骨和椎骨骨量丢失出现最早，且下降幅度大，而其它的皮质骨部位骨量降低出现晚且降低幅度较小。,骨量水平取决于峰骨量和骨丢失速率。前者主要由性别、遗传和种族等因素决定，后者主要与生理变化（如增龄和绝经等）有关，而营养、环境、运动和生活习惯等对两者均有影响。,骨质量,是指除骨量之外的其它影响骨强度的因素，主要包括骨结构、骨矿化、骨有机基质和骨损伤等,4,个方面,骨质量的增加可能对,BMD,影响很小，却能明显提高骨强度,26,编辑版ppt,（二）骨强度降低26编辑版ppt,（三）相关因素,激素因素,营养因素,免疫因素,物理因素,遗传因素,27,编辑版ppt,（三）相关因素27编辑版ppt,1,、激素因素,雌激素不足,降钙素水平低,甲状旁腺激素水平升高,年龄增高、雌激素水平低,甲状腺激素增多,甲亢可干扰维生素,D,的生成、蛋白质分解亢进引起钙磷代谢紊乱，减少降钙素分泌,活性维生素,D,水平低,与雌激素、甲状旁腺激素的功能密切相关,28,编辑版ppt,1、激素因素28编辑版ppt,雄激素缺乏,骨吸收大于骨形成,维生素,D,合成减少,生长激素分泌不足,骨发育不良,钙肠吸收减少,皮质类固醇激素增多,成骨细胞减少，骨形成受抑制,胶原形成不利，蛋白异化作用亢进，骨基质减少,直接影响维生素,D,活性，血钙降低,肾小管对钙重吸收减少，血钙降低,29,编辑版ppt,雄激素缺乏29编辑版ppt,2,、营养因素,钙缺乏,钙摄入量不足,摄入钙吸收不良,磷代谢异常,磷酸盐缺乏导致骨吸收,磷摄入过多可影响钙吸收,蛋白质的影响,低蛋白摄入影响骨基质形成,蛋白质摄入过多影响钙的代谢,镁缺乏,影响骨代谢,氟的作用,过多干扰钙磷代谢，血钙降低，,PTH,分泌亢进,30,编辑版ppt,2、营养因素30编辑版ppt,3,、免疫因素,免疫功能老化，导致机体结合组织如构成骨的支架和包膜的胶原纤维、弹性蛋白等老化,免疫异常可释放刺激破骨细胞的活动因子，促进骨吸收,4,、物理因素,是否经常运动,:,运动能增加血中睾酮和雌二醇的浓度，有助于保持正常的性腺功能,日光照射情况,重力负荷,:,长期卧床病人有明显的骨质疏松倾向,31,编辑版ppt,3、免疫因素31编辑版ppt,5,、遗传因素,维生素,D,受体基因（,VDRG,）,VDRG,多态性与腰椎骨密度的相关性最强，可预测骨质疏松症的危险度，,存在种族差异,雌激素受体基因（,ERG,）,其他基因,PTH,基因、胶原基因、转移因子,基因等,32,编辑版ppt,5、遗传因素32编辑版ppt,（四）影响因素,1.,年龄,性激素降低,胃肠功能减退所致营养缺乏和钙摄入减少,肾脏功能减退，,1-,羟化酶活性下降,血钙降低继发,PTH,增加,成骨细胞功能减退,钙调节激素和细胞因子水平改变且反应性下降,33,编辑版ppt,（四）影响因素33编辑版ppt,2.,性别,与男性相比，女性平均峰骨量低于男性，而骨丢失速率高于男性。,女性骨量还与绝经前月经状况有关。,绝经前月经规则而黄体期过短或无排卵周期的妇女骨丢失增加。除雌激素不足外，黄体期过短所致孕酮和睾酮分泌减少也与骨丢失过多有关。,3.,种族,不同种族人群的骨量有明显差异,白人女性明显低于黑人女性,居住夏威夷的日本移民骨量低于当地土著居民的骨量,34,编辑版ppt,2.性别34编辑版ppt,4.,体型,身高和体重产生的外在机械压力负荷可以促进承重骨的骨再建，使骨量增加,体型瘦小的女性好发骨质疏松。因为肾上腺皮质中的雄烯二酮在脂肪组织中转变为雌二醇，所以脂肪组织对绝经后骨量的稳定起保护作用,5.,生活习惯,BMD,与每日吸烟和饮酒量呈负相关。使骨折危险性明显增加。酒精诱导肝脏酶系统，促进肝脏酶对雌激素和维生素,D,分解，使成骨细胞活性受到抑制，骨形成减少。,饮用咖啡或含咖啡因类饮料嗜好的人有骨量降低的倾向,35,编辑版ppt,4.体型 35编辑版ppt,三、骨质疏松症的临床表现,疼痛,身长缩短,骨折,呼吸系统障碍,36,编辑版ppt,三、骨质疏松症的临床表现疼痛36编辑版ppt,四、骨质疏松症的诊断原则,以骨密度减少为基本依据，结合病史和有无骨折进行综合考虑，在鉴别原发性和继发性骨质疏松时，需进行相关的血液生化检查。,37,编辑版ppt,四、骨质疏松症的诊断原则以骨密度减少为基本依据，结合病史和有,五、骨质疏松症的诊断方法,物理诊断,X,线、单光子和单能,X,线吸收法、双能,X,线吸收法、定量,CT,，定量,B,超等。,生化诊断,检测血液、尿液中反映骨吸收和骨形成的矿物质、激素、细胞因子等，如空腹尿钙，血抗酒石酸盐酸性磷酸酶，羟脯氨酸，羟脯氨酸糖苷，尿吡啶啉、降钙素、性激素、维生素,D,等,其他方法,基因诊断法检测一些与骨质疏松症相关基因的多态性,38,编辑版ppt,五、骨质疏松症的诊断方法物理诊断38编辑版ppt,六、骨质疏松症的药物治疗,（一）治疗原则,防治结合，预防为主,病因治疗,对症治疗,预防骨折的发生,39,编辑版ppt,六、骨质疏松症的药物治疗（一）治疗原则39编辑版ppt,（二）治疗药物分类,抗骨吸收药,促进骨形成药,钙制剂与维生素,D,活性代谢产物,中医中药,40,编辑版ppt,（二）治疗药物分类40编辑版ppt,1,、雌激素,治疗作用,常用制剂,倍美力、倍美安、倍美盈、尼尔雌醇、炔雌醇、替勃龙（利维爱）,2,、双磷酸盐类,药理作用,抑制骨吸收,不良反应及禁忌症,常用制剂,依替膦酸二钠盐、氯膦酸二钠、阿仑膦酸钠,41,编辑版ppt,1、雌激素41编辑版ppt,3,、雄激素,治疗作用,不良反应及禁忌症,常用制剂,丙酸睾酮、甲睾酮、苯丙酸诺龙,42,编辑版ppt,3、雄激素42编辑版ppt,4,、孕激素,治疗作用,对抗雌激素对子宫内膜的增生作用，减少子宫内膜癌的发生,减少骨吸收，增加骨形成，调节降钙素的分泌,对抗糖皮质激素引起的骨质疏松症,常用制剂,黄体酮（孕酮）、醋酸甲羟孕酮（甲孕酮、安宫黄体酮）、醋酸甲地孕酮（醋酸去氢甲孕酮、美可治、妇宁片）、氯地孕酮、炔诺酮、炔诺孕酮,43,编辑版ppt,4、孕激素43编辑版ppt,5,、氟化物类,作用机制,刺激骨形成,不良反应,常用制剂,特乐定（氟钙定）,6,、甲状旁腺激素,治疗作用,模仿人体,PTH,分泌的脉冲方式，人为地在人体内造成,PTH,分泌的高度稳定和规律性，从而达到治疗目的,不良反应,44,编辑版ppt,5、氟化物类44编辑版ppt,7,、降钙素,治疗作用,常用制剂,密钙息、益钙宁,8,、依普黄酮,药理作用,协同雌激素促进降钙素的分泌,抑制骨吸收：抑制钙从骨中溶出，抑制骨量减少,刺激骨形成：促进骨基质的形成和矿化,适应症,绝经后和老年性骨质疏松症,45,编辑版ppt,7、降钙素45编辑版ppt,9,、钙剂,补钙对骨量的影响,钙的生物利用度与剂型,散剂、胶囊、片剂,人体对各种钙盐的吸收率基本相同，不会超过,40%,碳酸钙,39%,，乳酸钙,32%,，草酸钙,30%,，葡萄糖酸钙,27%,钙剂的合理选择,钙剂不良反应,46,编辑版ppt,9、钙剂46编辑版ppt,10,、维生素,D,类,治疗作用,毒性作用与预防,常用制剂：,阿法骨化醇、骨化三醇、维生素,D,3,、胆维丁乳（英康利）,11,、中医中药,补肝脾肾，活血化瘀,疗效及作用机理方面还需不断提高,47,编辑版ppt,10、维生素D类47编辑版ppt,中医药研究,48,编辑版ppt,中医药研究48编辑版ppt,一、中药治疗药物的研究思路,中药治疗本病不同于常用的抑制骨吸收药，也不同于促进骨形成药，而着重于整体调节，调动内因，作用于多个环节，最终达到纠正机体激素失衡和负钙平衡的功效。,49,编辑版ppt,一、中药治疗药物的研究思路中药治疗本病不同于常用的抑制骨吸收,（一）对内分泌及免疫系统的调节作用,肾虚是骨质疏松症的发病关键,肾虚时，下丘脑,-,垂体性腺（甲状腺、肾上腺）轴功能紊乱,肾虚时免疫功能下降，细胞免疫、体液免疫、补体系统、单核,-,吞噬细胞系统吞噬功能均有不同程度的降低，而影响骨代谢的局部调节因子多与此有关。,补肾方药可以促进下丘脑,-,垂体,-,性腺轴系统的功能活动，纠正免疫系统的功能低下。这可能与补肾中药提高性腺上,E2,受体敏感性或,E2,受体数量有关。,50,编辑版ppt,（一）对内分泌及免疫系统的调节作用 肾虚是骨质疏松症的发病,（二）调节微量元素平衡,肾虚患者体内锌含量明显低于正常人，缺锌会影响垂体促性腺激素的分泌，使垂体组织及血浆内促生长激素的含量减少，表现为性腺功能减退、发育不良,补肾方药可调节体内微量元素的平衡，促进矿物质在骨中的沉积，进而发挥抗骨质疏松的作用,51,编辑版ppt,（二）调节微量元素平衡 肾虚患者体内锌含量明显低于正常人，缺,（三）对骨形成及骨吸收的影响,1.,增强成骨细胞活性，使骨生成增强,2.,抑制骨吸收作用,52,编辑版ppt,（三）对骨形成及骨吸收的影响1.增强成骨细胞活性，使骨生成增,二、中药治疗药物的研究方法,（一）实验动物的选择,原则,骨质疏松在组织学表现上与人类一致；,遗传稳定性；遗传背景明确，资料完整便于交流,动物经济、易饲养、操作简便,符合伦理学标准,53,编辑版ppt,二、中药治疗药物的研究方法（一）实验动物的选择53编辑版pp,1,、啮齿目动物：,大鼠骨代谢与人有许多相似之处：随年龄增长骨量丢失，相似的骨松质分布及重建功能，卵巢切除后高的骨转化率，肠钙吸收下降及对性激素相似的反应性等，再加上大鼠经济、易饲养等优点使其成为建立骨质疏松模型最广泛的动物。,小鼠和豚鼠在遗传背景、饲养、寿命等方面与大鼠有一样的优势，但其骨代谢及骨组织对性激素的反应性与人类不尽一致，应用较少。,54,编辑版ppt,1、啮齿目动物：54编辑版ppt,兔：以其经济、明显的哈氏重建能力、,6,个月左右骨骼即发育成熟等优点，在骨质疏松模型研究中被广泛应用，可以用来作药物对松质骨及哈氏重建作用的研究，还可以作为糖皮质激索诱导的骨质疏松模型。,55,编辑版ppt,兔：以其经济、明显的哈氏重建能力、6个月左右骨骼即发育成熟,2,、成年犬：,优点：在骨代谢和组织结构方面与人类相似，皮质骨有丰富的哈氏系统，与松质骨比例适当，适于评价药物对哈氏系统重建的影响，另外还可用于研究废用性骨质疏松,缺点：犬卵巢切除术后,6,个月在组织形态学、骨量等方面无明显改变，对雌激素缺乏的反应差，不适合作研究松质骨的骨质疏松模型。,56,编辑版ppt,2、成年犬：56编辑版ppt,3,、灵长类：,灵长类的内分泌代谢、生殖周期、骨生物力学特性及骨组织变化与人类极为相似，最适于作骨质疏松模型动物，但费用昂贵、实验操作难度高、实验周期长等因素限制了研究应用。,57,编辑版ppt,3、灵长类：57编辑版ppt,4,、猪,猪的峰值骨量出现在,2-3,岁，具有与人相当的皮质骨及松质骨丢失与沉积的发生率，且有板层结构，曾被成功地用于氟化物的研究和骨骼实验，但作为雌激素缺失性骨质疏松模型，目前尚不成熟。,另外，羊，鸟类，马，牛等动物目前作为骨质疏松症的模型动物应用极少,58,编辑版ppt,4、猪58编辑版ppt,（二） 动物模型,1,、去卵巢致骨质疏松模型,原理：,对大鼠实施卵巢切除术，使之雌激素减少，造成骨质疏松，与人类绝经后的骨量丢失，松质骨变化，骨高转化率等均相似,方法：,wistar,、,SD,雌性大鼠，鼠龄,3-12,月，摘除两侧卵巢。术后常规饲养，自由饮水和摄食，,3-4,个月后，可造成骨质疏松模型。,59,编辑版ppt,（二） 动物模型59编辑版ppt,2,、糖皮质激素致大鼠骨质疏松,原理：,糖皮质激索长期使用或虽间断使用但用量过大，都可引起骨质疏松。其特征为易发生自发性骨折。,方法：,取,3,月龄雄性大鼠，以醋酸泼尼松龙注射液进行肌注，每次剂量为,5mg/,掩，每周两次，对照组肌注生理盐水，连续,3,个月可形成骨质疏松。,60,编辑版ppt,2、糖皮质激素致大鼠骨质疏松60编辑版ppt,3,、维甲酸致骨质疏松模型,原理：,维甲酸是维生素,A,的一类衍生物，用于治疗白血病和银屑病等，对骨质有明显影响，具有致骨质疏松的副作用。用于实验动物，可造成骨质疏松模型。,方法：,取,3,月龄,SD,大鼠，维甲酸,75mg/kg,（以,1,纤维素溶液配制）灌胃，每日,1,次,2,周后停用，对服组则以,1,纤维素溶液灌胃给药停止后，动物在标准颗粒饲料和自由饮水条件下饲养，可诱发形成骨质疏松。,61,编辑版ppt,3、维甲酸致骨质疏松模型61编辑版ppt,4,、废用性骨质疏松模型,原理：,用人工方法使动物部分肢体处于不荷重状态而建立的活体骨质疏松模型，此时，机体骨矿化水平降低，钙磷代谢负平衡，最后导致骨质丢失。,方法,机械固定法系利用石膏、绷带等物品将动物肢体固定于特殊的不荷重位置。,悬吊法是将动物尾部悬吊，双后肢悬空，让动物靠两前肢载重并在一定范围内活动。,手术切除动物一侧坐骨神经或一侧膝腱甚至跟腱,5,、营养性骨质疏松模型,通过给动物喂饲缺乏钙、磷、维生素,D,等的饮食，可使骨密度下降，血钙磷浓度上升，尿钙增加，符合骨质疏松的表现,62,编辑版ppt,4、废用性骨质疏松模型62编辑版ppt,（三） 客观指标,1,、骨密度测量,双能,X,射线吸收测量法,(DEXA),单光子吸收测量法,(SPA),双光子吸收测量法,(DPA),定量计算机断层扫描法（,QCT),超声法,(Ultra Sonic),2,、骨组织计量学观察,骨组织形态学分析，包括骨标本的骨片静态和动态分析测量，具体指标有骨小梁面积、骨小梁周长、骨小梁厚度、骨矿化沉积率、矿化延迟时间等,63,编辑版ppt,（三） 客观指标63编辑版ppt,3,、骨代谢的生化指标,1,）与骨形成有关的生化指标：,血清总碱性磷酸酶,(ALP),和骨特异性碱性磷酸酶,(B-ALP),：,评价骨形成和骨转换的指标,骨钙素（,BGP,）,由成骨细胞分泌，其数值大小可反映成骨细胞活性,唾液酸蛋白,(BSP),：,BSP,大量存在于活性成骨细胞，由成骨细胞分泌,骨桥蛋白：,人骨桥蛋白,(OPN),发现存在于中枢、骨与细胞外，在骨矿化前由活性成骨细胞生成，由破骨细胞吸收,64,编辑版ppt,3、骨代谢的生化指标64编辑版ppt,2,）与骨吸收有关的生化指标,血浆或血清抗酒石酸酸性磷酸酶,(TRAP),：,由破骨细胞释放，血浆,TRAP,水平反映破骨细胞活性和骨吸收状态,破骨细胞生成抑制因子,(OCIF) /,骨保护素,(OPG),：,OCIF/OPG,是一种破骨细胞负性调节因子，抑制破骨细胞生成、活化,尿吡啶,/,肌酐：,尿吡啶,/,肌酐值可以反映破骨细胞的骨吸收功能,65,编辑版ppt,2）与骨吸收有关的生化指标65编辑版ppt,4,、生物力学指标,长骨的三点弯曲试验来评价骨的生物力学性质,骨结构力学指标：最大载荷、断裂挠度、弹性载荷、弹性挠度及弯曲能量，反映骨结构力学的变化，其变化主要受骨尺寸大小和几何形态的影响；,骨材料力学指标：最大弯曲应力和弹性模量等。反映骨的内在质量，不受骨尺寸的影响。,5,、骨矿成分的测定,骨灰化后用原子吸收仪测定或用离子选择电极法及钼蓝比色法测出骨灰中钙、磷等元素含量。,66,编辑版ppt,4、生物力学指标66编辑版ppt,新工艺仙灵骨葆制剂 抗实验性骨质疏松症的研究,“十一五”国家科技支撑计划项目,实例,67,编辑版ppt,新工艺仙灵骨葆制剂 抗实验性骨质疏松症的研究“十一五,第一部分 新工艺仙灵骨葆制剂抗去卵巢 致大鼠骨质疏松症的研究,1,2,第二部分 新工艺仙灵骨葆制剂抗维甲酸 致大鼠骨质疏松症的研究,68,编辑版ppt,第一部分 新工艺仙灵骨葆制剂抗去卵巢 致大鼠,关于仙灵骨葆,淫羊藿,续断,补骨脂,地黄,丹参,知母,苗族民间验方,+,临床验证筛选,诸药合用起滋补肝肾、活血通络、强筋壮骨之功效,69,编辑版ppt,关于仙灵骨葆淫羊藿续断补骨脂地黄丹参知母苗族民间验方 + 临,第一部分 新工艺仙灵骨葆制剂抗去卵巢致大鼠骨质疏松症的研究,新工艺仙灵骨葆制剂抗实验性骨质疏松症的研究,70,编辑版ppt,第一部分 新工艺仙灵骨葆制剂抗去卵巢致大鼠骨质疏松症的,模型的选择,卵巢切除致雌性大鼠骨质疏松症模型,研究绝经后骨质疏松症的经典动物模型,71,编辑版ppt,模型的选择卵巢切除致雌性大鼠骨质疏松症模型研究绝经后骨质疏松,受试药物,新工艺仙灵骨葆浸膏,原工艺仙灵骨葆胶囊制粒粉,受试药物：,倍美力 临床常用雌激素处方药,雌激素替代疗法治疗绝经后妇女骨质疏松症,72,编辑版ppt,受试药物新工艺仙灵骨葆浸膏受试药物：倍美力 临床,骨密度测定,采用小动物模式，,Lunar DPX,型双能,X,线骨密度仪测定大鼠,右侧,股骨远端,、,腰椎,骨密度,73,编辑版ppt,骨密度测定采用小动物模式，Lunar DPX 型双能 X 线,骨组织形态计量学测定,制作胫骨近端不脱钙骨切片,(,5m,),甲苯胺蓝染色切片,未染色切片,光镜下,荧光下,骨小梁体积百分比,(TBV%),骨小梁吸收表面百分比,(TRS%),骨小梁形成表面百分比,(TFS%),骨皮质上类骨质平均宽度,(OSW),骨小梁矿化率,(MAR),骨皮质矿化率,(mAR),Leica-Qwin Pro,图象分析系统,74,编辑版ppt,骨组织形态计量学测定制作胫骨近端不脱钙骨切片(5m)甲苯胺,骨生物力学测定,股骨三点弯曲试验,wd-1,型电子万能试验机,位移,-,加载力曲线图,最大载荷,断裂挠度,75,编辑版ppt,骨生物力学测定股骨三点弯曲试验位移-加载力曲线图最大载荷断裂,股骨颈压力试验,垂直“站立姿势”的力学模拟测试,位移,-,加载力曲线图,断裂挠度,最大载荷,76,编辑版ppt,股骨颈压力试验垂直“站立姿势”的力学模拟测试位移-加载力曲线,血生化指标的测定,Olympus AU400,型全自动生化分析仪,血清钙,血清磷,血清镁,血清碱性磷酸酶,（,AKP,）,血清酒石酸酸性磷酸酶（,StrACP,）,77,编辑版ppt,血生化指标的测定Olympus AU400 型全自动生化分析,血生化指标的测定,Multiskan MK3,型酶标仪,Axsym,全自动免疫发光分析仪,酶联免疫吸附法,(ELISA),测定,型胶原氨基交联末端肽,(NTX),微粒子酶免疫分析法,(MEIA),测定血清雌二醇,(E,2,),含量,78,编辑版ppt,血生化指标的测定Multiskan MK3 型酶标仪Axsy,子宫指数及灰重系数,子宫指数,=,子宫重量,(mg) /,体重,(g) 100%,灰重系数,=,骨灰重,(g) /,骨干重,(g),左侧股骨,60,过夜烘干,称干重,称灰重,马弗炉,800,煅烧,6h,79,编辑版ppt,子宫指数及灰重系数子宫指数 = 子宫重量(mg) / 体重(,股骨中元素含量的测定,Agilent 7500ce,电感耦合等离子体质谱仪,测定常量元素钙、磷、镁及,微量元素锶、锰、锌、铜含量,样品处理：,将煅烧后的股骨磨成细粉,精确称取,0.0500g,用,5%,的硝酸定容为,50ml,80,编辑版ppt,股骨中元素含量的测定Agilent 7500ce 电感耦合等,对去势大鼠骨小梁形态学的影响,Sham,OVX,ESG,NX0.5,NX2,NX1,X0.5,X1,Sham,：假手术组；,OVX,：模型组；,ESG,：模型,+,倍美力组；,NX,：模型,+,仙灵骨葆新工艺组；,X,：模型,+,仙灵骨葆原工艺组,81,编辑版ppt,对去势大鼠骨小梁形态学的影响 ShamOVXESGNX0.5,小结,原工艺,新工艺,模型,指标,股骨远端,BMD,股骨灰重系数,股骨,Ca P Mg,股骨,Sr Cu,股骨颈最大载荷,股骨,Mn Zn,子宫指数,血清,E,2,血清,Ca,82,编辑版ppt,小结原工艺新工艺模型指标股骨远端BMD股骨灰重系数股骨Ca,小结,原工艺,新工艺,模型,指标,骨小梁,TRS%,骨小梁,TFS% MAR,骨小梁,TBV%,血清,AKP NTX,83,编辑版ppt,小结原工艺新工艺模型指标骨小梁TRS%骨小梁TFS% MAR,小结,仙灵骨葆对卵巢切除大鼠骨质疏松症的作用机制可能与抑制骨吸收及调节体内钙磷镁和微量元素的含量相关,84,编辑版ppt,小结仙灵骨葆对卵巢切除大鼠骨质疏松症的作用机制可能与抑制骨吸,第二部分 新工艺仙灵骨葆制剂抗维甲酸致大鼠骨质疏松症的研究,新工艺仙灵骨葆制剂抗实验性骨质疏松症的研究,85,编辑版ppt,第二部分 新工艺仙灵骨葆制剂抗维甲酸致大鼠骨质疏松症的,动物及受试药物,新工艺仙灵骨葆浸膏,原工艺仙灵骨葆胶囊制粒粉,福善美,(,阿仑膦酸钠片,),受试药物：,用于治疗绝经后妇女的骨质疏松症和男性骨质疏松症,86,编辑版ppt,动物及受试药物新工艺仙灵骨葆浸膏受试药物：用于治疗绝经后妇女,对模型大鼠骨小梁形态学的影响,Normal,Model,ESG,NX0.5,NX2,NX1,X0.5,X1,Normal,：正常组；,Model,：模型组；,FSM,：模型,+,福善美组,NX,：模型,+,仙灵骨葆新工艺组；,X,：模型,+,仙灵骨葆原工艺组,87,编辑版ppt,对模型大鼠骨小梁形态学的影响NormalModelESGNX,小结,血清,StrACP,股骨颈能量吸收,股骨颈最大载荷,血清,AKP,TRS% TFS% MAR mAR,骨小梁,TBV%,股骨、股骨颈和,股骨远端,BMD,原工艺,新工艺,模型,指标,88,编辑版ppt,小结血清StrACP股骨颈能量吸收血清AKPTRS% TFS,结论,新工艺仙灵骨葆对骨质疏松症大鼠有明确的治疗作用，对骨量、骨组织微结构和骨生物力学性能都有明显的改善。,其作用机制可能与抑制破骨细胞活性，降低骨吸收和调节体内的钙磷镁及微量元素含量相关。,89,编辑版ppt,结论新工艺仙灵骨葆对骨质疏松症大鼠有明确的治疗作用，对骨量、,谢 谢,90,编辑版ppt,谢 谢90编辑版ppt,