药物分析芳酸类药物的分析课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,第一节、典型药物的分类与性质,第二节、鉴别试验,第三节、特殊杂质检查,第四节、含量测定,内 容,第一节、典型药物的分类与性质第二节、鉴别试验第三节、特殊杂质,1,第一节,典型药物的分类与性质,一、苯甲酸类,典型药物,（苯甲酸）,COOH(Na),COOH,NH,CH,3,CH,3,（甲芬那酸）,第一节 典型药物的分类与性质一、苯甲酸类（苯甲酸）COOH,2,（丙磺舒）,COOH,SO,2,（,CH,3,CH,2,CH,2,),2,N,主要性质,羧酸与苯环直接相连，具有较强酸性（用于含量测定）；,药物结构中的苯环及其取代基具有特征的紫外和红外吸收光谱（用于鉴别和含量测定）；,苯甲酸及其钠盐的中性溶液与,FeCl,3,试剂反应，生成赭色沉淀；,含硫的丙磺舒受热可分解成亚硫酸盐。,（丙磺舒）COOHSO2（CH3CH2CH2)2N主要性质,3,二、水杨酸类,典型药物,COOH,OH,水杨酸,COOH,OCOCH,3,阿司匹林,COONa,OH,NH,2,对氨基水杨酸钠,二、水杨酸类 COOHOH水杨酸COOHOCOCH3阿司匹林,4,双水杨酯,COOH,O,O,OH,贝诺酯,OCOCH,3,COO,NHCOCH,3,OH,COOH,F,F,二氟尼柳,双水杨酯COOHOOOH贝诺酯OCOCH3COONHCOCH,5,主要性质,本类药物的基本结构为邻羟基苯甲酸，能形成分子内氢键，使酸性增强（水杨酸的酸性比苯甲酸强），可用酸碱滴定法测定含量；,邻位羟基的存在使得本类药物在弱酸性溶液中可与三价铁离子生成紫色配合物；,水杨酸酯类结构易水解成游离水杨酸，游离水杨酸类受热易脱羧降解成酚类，故本类药物应检查游离水杨酸与酚类杂质。,O,H,OH,O,主要性质OHOHO,6,三、其他芳酸类,典型药物,氯贝丁酯,Cl,O,C,CH,3,CH,3,COOC2H,5,CHCH,2,CH,COOH,CH,3,H,3,C,H,3,C,布洛芬,三、其他芳酸类 氯贝丁酯ClOCCH3CH3COOC2H5C,7,主要性质,与苯甲酸和水杨酸类比较，布洛芬（苯乙酸衍生物）的酸性较弱，溶于中性乙醇后，可用氢氧化钠直接滴定。,氯贝丁酯（苯氧基丙酸酯衍生物）遇光不稳定，易水解，可用两步滴定法测定含量。,布洛芬和氯贝丁酯均具有特征的紫外和红外吸收光谱，可用于鉴别。,主要性质,8,芳酸类药物的,结构与性质比较,结构,共同点：苯环、羧基,不同点：取代基不同（如酚羟基、芳伯氨基等）,物理性质,大多数为固体，具有一定的熔点；,游离芳酸类药物几乎不溶于水，易溶于有机溶剂；芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水，难溶于有机溶剂；,芳酸类药物的结构与性质比较,9,芳酸类药物的,结构与性质比较（续）,化学性质,芳酸具游离羧基，呈酸性，其,pKa,在,3,6,之间，属中等强度的酸或弱酸；,-X,、,-NO,2,、,-OH,等吸电子取代基使酸性增强；,-CH,3,、,-NH,2,等斥电子取代基使酸性减弱；,邻位取代,间位、对位取代，尤其是邻位取代酚羟基，形成分子内氢健，酸性大为增强。,芳酸类药物的结构与性质比较（续）,10,芳酸类药物的,结构与性质比较（续）,化学性质（续）,芳酸酯可水解,利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别；,利用芳酸酯水解定量消耗氢氧化钠的性质，芳酸酯类药物可用水解后剩余滴定法测定含量；,芳酸酯类药物还应检查因水解而引入的特殊杂质。,芳酸类药物的结构与性质比较（续）,11,芳酸类药物的,结构与性质比较（续）,化学性质（续）,芳酸碱金属盐易溶于水，水解，溶液呈弱碱性，可用双相滴定法或非水碱量法测定其含量。,取代芳酸类药物可利用其取代基的性质进行鉴别和含量测定。,具有酚羟基的药物可用,FeCl,3,反应鉴别。,具芳伯氨基的药物可用重氮化,-,偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。,芳酸类药物的结构与性质比较（续）,12,第二节,鉴别试验,一、与铁盐的反应,水杨酸及其盐类,COOH,OH,6,+4FeCl,3,COO,O,2,Fe,-,-,3,Fe+12HCl,紫色,pH=46,具酚羟基或水解后产生酚羟基的药物有此反应,第二节 鉴别试验 一、与铁盐的反应 COOHOH6+4Fe,13,补充说明,阿斯匹林加水煮沸使水解后与,FeCl,3,试液反应，呈紫堇色；,二氟尼柳加乙醇溶解后与,FeCl,3,反应，呈深紫色；,对氨基水杨酸钠加稀盐酸后与,FeCl,3,试液,反应，呈紫红色；,双水杨酯的稀溶液与,FeCl,3,反应，呈紫色；,贝诺酯加氢氧化钠试液煮沸水解后，加盐酸至微酸性后与,FeCl,3,反应，呈紫堇色。,强酸性溶液中配位化合物分解,补充说明 强酸性溶液中配位化合物分解,14,苯甲酸盐,COONa,7,+3FeCl,3,+2OH,-,COO,6,Fe,3,(OH),2,+7NaCl+2Cl,-,OOC,赭色沉淀,苯甲酸盐COONa7+3FeCl3+2OH-COO6F,15,丙磺舒,加少量,NaOH,试液使成钠盐溶解后（,pH=5.0,6.0,），与,FeCl,3,试液反应，生成米黄色沉淀。,COO,SO,2,（,CH,3,CH,2,CH,2,),2,N,3,Fe,丙磺舒COOSO2（CH3CH2CH2)2N3Fe,16,布洛芬,布洛芬的无水乙醇溶液，加高氯酸羟胺的无水乙醇试液及,N,N-,双环己基羧二亚胺（,DCC,）的无水乙醇溶液，混合，在温水中加热,20min,冷却后，加高氯酸铁的无水乙醇溶液，呈紫色。,紫色,C,O,NH,Fe,/3,O,CHCH,2,CH,CH,3,H,3,C,H,3,C,布洛芬紫色CONHFe/3OCHCH2CHCH3H3CH3C,17,氯贝丁酯,氯贝丁酯的乙醚溶液（,110,）数滴，加盐酸羟胺的乙醇饱和溶液与氢氧化钾的乙醇饱和溶液各,2,3,滴，水浴加热,2min,，冷却，加稀盐酸使成酸性，加,1%FeCl,3,溶液,1,2,滴，显紫色。,该反应用于羧酸及其酯类的鉴别,C,O,NH,Fe,/3,O,Cl,O,C,CH,3,CH3,（异羟肟酸铁）,氯贝丁酯该反应用于羧酸及其酯类的鉴别CONHFe/3OClO,18,二、重氮化,-,偶合反应,贝诺酯加酸水解后产生游离芳伯胺基结构，在酸性溶液中，与亚硝酸钠试液进行重氮化反应，再与碱性,-,萘酚偶合生成橙红色沉淀。,OCOCH,3,COO,NHCOCH,3,+3H,2,O,OH,COOH,NH,2,HCl,+HO,+2CH,3,COOH,二、重氮化-偶合反应 OCOCH3COONHCOCH3+3,19,NH,2,+NaNO,2,+2,HCl,HO,N,2,+,Cl,-,+NaCl+2H,2,O,HO,N,2,+,Cl,-,HO,OH,+,+NaOH,N=N,HO,+NaCl+H,2,O,HO,NH2+NaNO2+2HClHON2+Cl-+,20,三、氧化反应,甲芬那酸的硫酸溶液,显黄色，并有绿色荧光,呈深蓝色，随即变为棕绿色,三、氧化反应 甲芬那酸的硫酸溶液显黄色，并有绿色荧光呈深蓝色,21,四、水解反应,（可溶于醋酸铵试液）,四、水解反应（可溶于醋酸铵试液）,22,五、分解产物的反应,苯甲酸盐,含硫的药物,苯甲酸,苯甲酸钠,+,4,2,SO,H,-,+,2,4,HNO,3,2,SO,SO,Na,NaOH,3,丙磺舒,五、分解产物的反应含硫的药物苯甲酸苯甲酸钠+42SO,23,第三节,特殊杂质检查,一、阿司匹林中特殊杂质的检查,合成工艺,ONa,ONa,COONa,CO,2,OH,COOH,H,+,OH,COOH,乙酰化,OCOCH,3,COOH,+,（,CH,3,CO),2,O,+CH,3,COOH,第三节 特殊杂质检查 一、阿司匹林中特殊杂质的检查 ONaO,24,检查,溶液澄清度,未反应的酚类、及其他副反应生成的醋酸苯,酯,、水杨酸苯酯和乙酰水杨酸苯酯均不溶于碳酸钠试液，而阿司匹林溶于碳酸钠试液。,OH,OCOCH,3,（,CH,3,CO),2,O,（醋酸苯酯）,检查OHOCOCH3（CH3CO)2O（醋酸苯酯）,25,COOH,OH,OH,+,COO,OH,（,水杨酸苯酯,）,COOH,OCOCH,3,OH,+,COO,OCOCH,3,（乙酰水杨酸苯酯,）,COOHOHOH+COOOH（水杨酸苯酯）COOHOCO,26,水杨酸的检查,水杨酸杂质来源：,原料残存（生产过程中乙酰化不完全）,水解产生（贮存过程中水解产生）,检查原理：,水杨酸在弱酸性溶液中与,Fe,3+,反应呈紫堇色,阿司匹林结构中无游离酚羟基，无以上反应,限量,:,原料：,0.1%,阿司匹林片：,0.3%,阿司匹林肠溶片：,1.5%,水杨酸的检查,27,易碳化物的检查,检查易被硫酸碳化呈色的低分子有机物质。,检查方法：,取供试品,0.5mg,置于含硫酸（,95.5%g/g,）,5ml,的比色管,振摇使溶解,静置,15min,观察颜色,对照液,（比色用氯化钴液,0.25ml,，比色用重铬酸钾液,0.25ml,，比色用硫酸铜,0.40ml,，加水成,5ml,）,与对照液比较,颜色不得更深,易碳化物的检查取供试品0.5mg置于含硫酸（95.5%g/,28,二、,对氨基水杨酸钠,中,间氨基酚,的检查,间氨基酚杂质来源,原料残存（间氨基酚为原料）,对氨基水杨酸在潮湿空气中，露置日光或遇热受潮时，易脱羧基，生成间氨基酚。,COONa,OH,NH,2,-CO,2,H,2,O,OH,NH,2,二、对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查 COONaOHNH2-C,29,双相滴定法,原理：,利用对氨基水杨酸钠不溶于乙醚，间氨基酚溶于乙醚的性质，使二者分离；,在乙醚提取液中加适量水和指示剂（甲基橙），用盐酸滴定；,控制盐酸滴定液体积以控制间氨基酚限量；,生成的盐酸盐在乙醚中不溶，转溶于水相中。,双相滴定法,30,离子对,HPLC,法（内标法）,色谱条件,填充剂：,十八烷基硅烷键合硅胶,流动相：,磷酸二氢钠液,(0.05mol/L)-,磷酸氢二钠,(0.05mol/L)-,甲醇,(,含氢氧化四丁基铵,1.9g)(425:425:150),内标：,磺胺溶液（,5,g/ml,）,用流动相配制。,流速：,1.5ml/min,检测波长：,254nm,进样量：,20,l,离子对HPLC法（内标法）,31,离子对试剂和其他添加剂选用规则,样品中含有,-COOH,、,-SO,3,H,基团时，选用的离子对试剂应是带正电荷的有机胺盐，流动相通常使用甲醇,-,水；,除离子对试剂外，一般还需加入磷酸盐缓冲液，以控制流动相的酸度。从而使这些酸性官能团获得解离；,样品中含有,-NH,2,、,-NH-,基团时，选用的离子对试剂应是烷基磺酸盐或硫酸盐；,样品中同时含有,-NH,2,、,-COOH,，,-SO,3,H,等不同性质的基团时，则规则、或选用的离子对试剂和添加剂均为合理。,离子对试剂和其他添加剂选用规则,32,三、,二氟尼柳中有关物质,的检查,二氟尼柳存在多条合成路线，产品中可能存在多种苯或联苯类合成中间体及副产物，结构和性质相差较大；,使用单一的正相或反相色谱法难以检出有关物质；,中国药典,（,2005,）分别采用,TLC,（正相）和反相,HPLC,，以自身对照法检查有关物质,A,和,B,。,三、二氟尼柳中有关物质的检查,33,有关物质,A,的检查（自身高低浓度对比法）：,吸取,5,l,点样,精密量取适量,加甲醇稀释成浓度为,50,g/ml,配制本品的甲醇溶液,浓度约为,10mg/ml,对照液,吸取,5,l,点样,同一硅胶,CF,254,薄层板,以正己烷,-,二氧六环,-,冰醋酸（,85:10:5,）为展开剂，展开后，晾干，置于紫外灯,(254nm),下检查,有关物质A的检查（自身高低浓度对比法）：吸取5l点样,34,供试品,对照品,判断,:,控制杂质斑点个数，控制杂质种类；,供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液的主斑点（或荧光强度）。,供试品对照品判断:,35,优点：,以供试品的稀溶液作为对照液，不需要杂质对照品，简单、价廉，还可配成几种限量的对照溶液；,缺点：,不同物质，不同,R,f,值比较，准确度较差、直观性较差。,优点：,36,杂质对照品法,判断：,供试品中所含杂质斑点不得超过相应的杂质对照斑点。,优点：,同一物质，同一,Rf,值比较，准确度高、直观性强。,缺点：,需要杂质对照品。,供试品,对照品,杂质对照品法 供试品对照品,37,有关物质,B,的检查,取有关物质,A,项下的供试品与对照液，照,HPLC,法测定。,填充剂：,十八烷基硅烷键合硅胶,流动相：,水,-,甲醇,-,乙腈,-,冰醋酸,(55:23:30:2),检测波长：,254nm,进样量：,供试品和对照品各,20,l,判断：,供试品溶液的色谱图中的各杂质峰面积的和不得大于对照品溶液的主峰面积。,有关物质B的检查,38,四、,甲芬那酸中特殊杂质,的检查,合成工艺,（邻氯苯甲酸,）,CH,3,NH,2,H,3,C,COOH,Cl,Cu,COOH,NH,CH,3,CH,3,+,（,2,3-,二甲苯胺）,（甲芬那酸）,四、甲芬那酸中特殊杂质的检查（邻氯苯甲酸）CH3NH2H3,39,检查,中国药典,（,2005,）规定检查,“,铜,”,和,“,有关物质,”,。,“,铜,”,检查法,采用原子吸收分光光度法测定，铜含量的限度：,0.001%,。,供试品：,加硫酸湿润,炽灼至灰化完全,取本品,1.0g,置于石英坩埚,加,0.1mol/L,硝酸溶液溶解，定量转移至,25ml,容量瓶中，摇匀，即得,检查加硫酸湿润取本品1.0g加0.1mo,40,加,0.1mol/L,硝酸溶液稀释至刻度，摇匀即得,精密称取硫酸铜,0.393g,置于,1000ml,量瓶中,加,0.1mol/L,硝酸溶液溶解,并稀释至刻度，摇匀,标准铜溶液：,精密称取标准铜溶液,1.0ml,，置于,25ml,量瓶中,精密量取,10ml,置于,100ml,量瓶中，加,0.1mol/L,硝酸溶液稀释至刻度，摇匀即得,对照品溶液：,测定法：,324nm,处测定吸光度，,A,供试品,A,对照品,加0.1mol/L硝酸溶液稀释至刻度，摇匀即得精密称取硫酸铜,41,有关物质检查法,中国药典,（,2005,）采用高效液相色谱法,填充剂：,十八烷基硅烷键合硅胶,流动相：,对照溶液：,供试液：,用流动相配制成每,1ml,中含,1mg,本品溶液,用流动相配制成每,1ml,中含,5,g,本品溶液,0.05mol/L,磷酸二氢铵溶液,-,乙腈,-,四氢呋喃（,40:46:14,）,有关物质检查法用流动相配制成每1ml中含1mg本品溶液用流动,42,检测波长：,254nm,进样量：,10,l,判断：,供试品中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照液主峰面积的,1/5;,各杂质峰面积的总和不得大于对照溶液主峰面积。,检测波长：254nm,43,五、,氯贝丁酯中特殊杂质,的检查,合成工艺,Cl,OH,缩合，水解,CH,3,COCH,3,CHCl,3,NaOH,（对氯苯酚）,（对氯苯氧异丁酸钠）,Cl,O,C,CH,3,CH,3,COONa,五、氯贝丁酯中特殊杂质的检查 ClOH缩合，水解CH3COC,44,氯贝丁酯,Cl,O,C,CH,3,CH,3,COOC,2,H,5,Cl,O,C,CH,3,CH,3,COONa,酸化,HCl,Cl,O,C,CH,3,CH,3,COOH,酯化,CH,3,CH,5,OH,H,2,SO,4,（对氯苯氧异丁酸）,氯贝丁酯ClOCCH3CH3COOC2H5ClOCCH3CH,45,对氯酚的检查,对氯酚为起始原料，且氯贝丁酯可分解产生对氯酚，其毒性大。,中国药典,（,2005,）采用气相色谱法检查对氯酚。,色谱柱：,2m,玻璃色谱柱；,固定液：,甲基硅橡胶（,SE-30,）；,载气：,氮气,柱温：,160,检测器：,氢火焰离子化检测器,对照品溶液：,0.0025%,对氯酚的三氯甲烷溶液,对氯酚的检查,46,供试品溶液：,取本品,10.0g,，加氢氧化钠试液,20ml,振摇提取,分取下层液，用水,5ml,振摇洗涤，留作挥发性物质检查,水洗液并入碱性提取液用三氯甲烷洗涤,2,次后,加稀盐酸使成酸性,用三氯甲烷提取,2,次，每次,5ml,，合并提取液，并加三氯甲烷至,10ml,即得,供试品中对氯酚峰面积不得大于对照品中对氯酚峰面积,供试品溶液：取本品10.0g，加氢氧化钠试液20ml振摇提取,47,挥发性杂质的检查,中国药典,（,2005,）采用气相色谱法检查在合成过程中引入的脂类与其他挥发性物质及残留有机溶剂。,色谱条件：,同对氯酚的检查,供试品溶液：,预试溶液：,取对氯酚项下经碱液洗涤后的本品适量，经无水硫酸钠干燥即得。,称取供试品适量，用三氯甲烷溶解制成每,ml,约含,10mg,的溶液，用于调节检测器灵敏度。,供试品中各杂质峰面积的和，不得大于总峰面积的千分之五,挥发性杂质的检查取对氯酚项下经碱液洗涤后的本品适量，经无水硫,48,第三节,含量测定,一、酸碱滴定法,直接滴定,本类药物中的游离羧基的酸性（,p,K,a3,6,），可用碱滴定液直接滴定。,COOH,OCOCH,3,+NaOH,COONa,OCOCH,3,+H,2,O,（阿司匹林）,第三节 含量测定 一、酸碱滴定法 COOHOCOCH3+N,49,阿司匹林,Ch.P,（,2005,）,取本品约,0.4g,，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）,20ml,，溶解后，加酚酞指示液,3,滴，用氢氧化钠滴定液（,0.1mo1/L,）滴定。每,lml,的氢氧化钠滴定液（,0.1mo1/L,）相当于,18.02mg,的,C,9,H,8,O,4,。,例,注：,中性乙醇：溶解阿司匹林且防止酯键水解。,“,中性,”,是对中和法所用的指示剂而言；,优点：简便、快速；,阿司匹林 Ch.P（2005）例注：,50,缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）、酸性杂质干扰（如水杨酸）；,适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定；,苯甲酸、丙磺舒、水杨酸、二氟尼柳、双水杨酸脂和布洛芬等的含量可采用直接滴定法测定；,二氟尼柳：以甲醇,-,水为溶剂，酚红为指示剂；,甲芬那酸：以无水中性乙醇为溶剂，以酚红为指示剂。,缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）、酸性杂质干扰（如水,51,水解后剩余滴定法,利用阿司匹林酯类结构在碱性溶液中易于水解的特点，加入定量过量的氢氧化钠滴定液，加热水解，剩余的碱滴定液用硫酸滴定液回滴。,2NaOH,（过量）,H,2,SO,4,Na,2,SO,4,2H,2,O,COOH,OCOCH,3,+2NaOH,COONa,OH,+CH,3,COONa,（阿司匹林）,水解后剩余滴定法 2NaOH（过量）H2SO4 Na2S,52,阿司匹林,USP,（,29,）,取本品约,1.5g,，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（,0.5mo1/L,）,50.0m1,，混合，缓缓煮沸,10min,，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（,0.25mo1/L,）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每,1ml,的氢氧化钠滴定液（,0.5mol/l,）相当于,45.04mg,的,C,9,H,8,O,4,。,例,注：,优点：消除了酯键水解的干扰；,缺点：酸性杂质干扰,;,阿司匹林 USP（29）例注：,53,碱受热易吸收二氧化碳，生成碳酸盐；当用酸回滴定时，酸滴定液的消耗体积减少，致使结果偏高；需在相同条件下进行空白校正。,阿司匹林与氢氧化钠反应的摩尔比为,1:2,。,氢氧化钠滴定液（,0.5mol/L,）相对于阿司匹林的滴定度为：,T=0.5,1/2,180.16=45.04(mg/ml),W,：阿司匹林样品称取量；,F,：硫酸滴定液浓度校正因素；,V,0,、,V,：分别为空白试验与样品消耗硫酸滴定液的体积（,ml,）。,碱受热易吸收二氧化碳，生成碳酸盐；当用酸回滴定时，酸滴定液的,54,两步滴定法,阿司匹林片,片剂中加有少量酒石酸或枸櫞酸做稳定剂，制剂工艺过程可能产生水杨酸与醋酸，不能采用碱直接滴定法和水解后剩余滴定法，需采用两步法。,第一步,:,中和,两步滴定法,55,第二步,:,水解后剩余滴定,2NaOH,（过量）,H,2,SO,4,Na,2,SO,4,2H,2,O,第二步:水解后剩余滴定 2NaOH（过量）H2SO4 N,56,阿司匹林片,取本品,10,片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林,0.3g,），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液,3,滴，滴加氢氧化钠滴定液,(,0.1mol/L,),至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液,(0.1mol/L)40m1,，置水浴上加热,15,分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液,(,0.05mol/L,),滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每,lml,的氢氧化钠滴定液,(0.1mo1/L),相当于,18.02mg,的,C,9,H,8,O,4,。,例,阿司匹林片例,57,注：,消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰,;,阿司匹林肠溶片和氯贝丁酯采用同法测定,;,氯贝丁酯：消除供试品中共存的酸性杂质,;,氢氧化钠与阿司匹林反应摩尔比为,1:1,；故氢氧化钠的滴定度为：,T=0.11/1180.16=18.02,（,mg/ml),片剂含量测定结果的计算,注：,58,二、,亚硝酸钠滴定法,具芳伯氨基的药物（如氨基水杨酸钠），能在盐酸存在下与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐。可采用亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠及其制剂的含量。,+2HCl,A,r,NH,2,+NaNO,2,+NaCl+2H,2,O,Ar,Cl,-,+,N,N,二、亚硝酸钠滴定法+2HClArNH2 +N,59,三、双相滴定法,芳酸碱金属盐（如苯甲酸钠）易溶于水，呈碱性，可用酸滴定液滴定；,滴定过程中析出的游离苯甲酸微溶于水，具有一定的酸性，使溶液浑浊且形成缓冲体系，滴定终点,pH,突跃不明显；,苯甲酸溶于有机溶剂，在水相中加入不相混溶的有机溶剂，可将滴定过程中产生的苯甲酸不断萃取出来，降低苯甲酸在水相的量，使终点易于判断。,三、双相滴定法,60,苯甲酸钠,取本品,1.5g,，精密称定，置分液漏斗中，加水,25m1,、乙醚,50ml,及甲基指示液,2,滴，用盐酸滴定液,(0.5mo1/L),滴定，边滴,边,振摇，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水,5ml,洗涤，洗液并入锥形瓶中,加乙醚,20m1,，继续用盐酸滴定液滴定，至水层显持续的橙红色。每,1ml,的盐酸滴定液,(0.5mol/L),相当于,72.06mg,的,C,7,H,5,NaO,2,。,苯甲酸钠,61,注：,优点：消除了反应产物的干扰,;,乙醚的作用：萃取反应生成的苯甲酸，使水相中的中和反应进行到底,;,滴定中要强力振摇。随着滴定不断进行，苯甲酸不断被萃取入有机溶剂层，使滴定反应完全，终点清晰。,注：,62,四、紫外分光光度法,直接分光光度法,贝诺酯的取代苯结构在乙醇溶液中，在,240nm,处有最大吸收，可用于含量测定。,离子交换,-,紫外分光光度法,氯贝丁酯在,226nm,处有最大吸收，但对,-,氯酚等亦有吸收，干扰测定。,氯贝丁酯不发生电离，而对,-,氯酚等可发生酸性解离，采用阴离子交换色谱分离后，再用紫外,-,可见分光光度法测定。,四、紫外分光光度法,63,柱分配色谱,紫外分光光度法,经柱色谱分离后，,可同时定量测定阿司匹林胶囊中阿司匹林和水杨酸的含量,水杨酸的限量测定,固定相：,洗脱液：,冰醋酸,-,水饱和乙醚溶液,(110),；,测定波长：,306nm,上层为硅藻土,3g,和新制,FeCl,3,-,尿素试剂,2ml,的混合物；下层为硅藻土,1g,和磷酸液（,5mol/L,）,0.5ml,的混合物。,柱分配色谱紫外分光光度法上层为硅藻土3g和新制FeCl3-,64,注：,水杨酸与三氯化铁,-,尿素生成紫色配位化合物，保留于硅藻土色谱柱上,;,用三氯甲烷洗脱时，高浓度的尿素使配位化合物移动较慢,;,以冰醋酸的乙醚溶液洗脱时，紫色配合物解离，水杨酸游离出来，继而被三氯甲烷洗脱。,注：,65,注：,在硅藻土,-NaHCO,3,色谱柱中，阿司匹林及水杨酸成钠盐保留在柱上，先用三氯甲烷洗脱除去中性或碱性杂质。,再用醋酸酸化，使阿司匹林游离，继而被三氯甲烷洗脱。,阿司匹林含量测定,固定相：,洗脱液：,冰醋酸三氯甲烷,(110),测定波长：,280nm,硅藻土,3g,和新制,NaHCO,3,(110),试剂,2ml,的混合物；,注：阿司匹林含量测定硅藻土3g和新制NaHCO3(110),66,五、高效液相色谱法,药物制剂中的杂质、辅料及稳定剂，常干扰主成分的含量测定。,中国药典,（,2005,）采用,HPLC,测定阿司匹林肠溶胶囊、栓剂，布洛芬缓释胶囊、口服溶液、糖浆剂等的含量。,填充剂：,十八烷基硅烷键硅胶,流动相：,1%,冰醋酸,-,甲醇（,50:50,）,测定波长：,280nm,五、高效液相色谱法,67,鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是（）,A.,碘化钾,B.,碘化汞钾,C.,三氯化铁,D.,硫酸亚铁,E.,亚铁氰化钾,自测题,鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是（）自测题,68,阿司匹林片,片剂可采用的测定方法为（）,A.,非水滴定法,B.,水解后剩余滴定法,C.,两步滴定法,D.,柱色谱法,E.,双相滴定法,阿司匹林片片剂可采用的测定方法为（）,69,两步滴定法测定阿司匹林片的含量时，每,1ml,氢氧化钠溶液（,0.1mol/L,）相当于阿司匹林（分子量,=180.16,）的量是（）,18.02mg,180.2mg,90.08mg,45.04mg,450.0mg,两步滴定法测定阿司匹林片的含量时，每1ml氢氧化钠溶液（0.,70,反应摩尔比为,1:1,T,：滴定度，每,1ml,滴定液相当于被测组分的,mg,数,C,：滴定液浓度，,mol/L,M,：被测物的摩尔质量，,g/mol,N,：,1mol,样品消耗滴定液的摩尔数,反应摩尔比为1:1T：滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的,71,采用双相滴定测定法苯甲酸钠的含量，其所用的溶剂体系为（）,水,-,乙醇,水,-,冰醋酸,C.,水,-,氯仿,D.,水,-,乙醚,E.,水,-,丙酮,采用双相滴定测定法苯甲酸钠的含量，其所用的溶剂体系为（）,72,双相滴定法可适用的药物为（）,A.,阿司匹林,B.,对乙酰氨基酚,C.,水杨酸,D.,苯甲酸,E.,苯甲酸钠,双相滴定法可适用的药物为（）,73,阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是（）,苯酚,乙酰水杨酸,C.,水杨酸,D.,醋酸钠,E.,醋酸苯酯,阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉,74,水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应，要求溶液的,pH,值是（）,pH10.0,pH2.0,C.pH7,8,D.pH4,6,E.pH2.00.1,水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应，要求溶液的pH值是,75,两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是（）,测定阿司匹林含量,消除共存酸性物质的干扰,使阿司匹林反应完全,便于观测终点,有利于第二步滴定,两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的,76,对氨基水杨酸钠中的特殊杂质是（）,水杨酸,间氨基酚,氨基酚,苯酚,苯胺,对氨基水杨酸钠中的特殊杂质是（）,77,能用与,FeC1,3,试液反应产生现象鉴别的药物有（）,苯甲酸钠,水杨酸,对乙酰氨基酚,氢化可的松,丙酸睾酮,能用与FeC13试液反应产生现象鉴别的药物有（）,78,采用双相滴定法测定苯甲酸钠含量时，加入乙醚的目的是（）,防止反应产物的干扰,乙醚层在水上面，防止样品被氧化,消除酸碱性杂质的干扰,防止样品水解,以上都不对,采用双相滴定法测定苯甲酸钠含量时，加入乙醚的目的是（）,79,采用双步滴定法测定阿司匹林制剂含量时，被测组分与,NaOH,的反应摩尔比为（）,A.2:1,B.1:2,C.1:1,D.3:1,E.,以上都不对,采用双步滴定法测定阿司匹林制剂含量时，被测组分与NaOH的反,80,阿司匹林中含量最高的杂质为（）,乙酰水杨酸酐,乙酰水杨酸,水杨酸,水杨酰水杨酸,以上都不对,阿司匹林中含量最高的杂质为（）,81,下列试液中，最常用于区别水杨酸和苯甲酸钠的试液是,(),碘化钾,碘化汞钾,三氯化铁,硫酸亚铁,亚铁氰化钾,下列试液中，最常用于区别水杨酸和苯甲酸钠的试液是(),82,在中性条件下，可与三氯化铁试液反应，生成赭色沉淀的药物是（）,A.,水杨酸钠,B.,对氨基水杨酸钠,C.,乙酰水杨酸,D.,苯甲酸钠,E.,扑热息痛,在中性条件下，可与三氯化铁试液反应，生成赭色沉淀的药物是（）,83,用直接滴定法测定阿司匹林含量时，下列说法正确的是（）,与,NaOH,的反应摩尔比为,1:1,在中性乙醇溶液中滴定,用盐酸滴定液滴定,以中性红为指示剂,滴定时应在不断振摇下稍快进行,用直接滴定法测定阿司匹林含量时，下列说法正确的是（）,84,胺,芳胺,芳伯氨基,胺芳胺,85,羧酸,芳酸,羧酸芳酸,86,药物分析芳酸类药物的分析课件,87,氨甲苯酸,羟苯乙酯,氨甲苯酸羟苯乙酯,88,布美他尼,布美他尼,89,酚磺乙胺,酚磺乙胺,90,