诊断学-骨髓细胞学检测-课件

骨髓细胞学检测长治医学院内科教研室申徐良 史文芝血细胞生成血细胞生成细胞形态学细胞形态学细胞化学染色细胞化学染色细胞免疫学细胞免疫学遗传学遗传学主主 要要 内内 容容 造血干细胞造血干细胞能够长期重建造血和免疫能够长期重建造血和免疫功能的细胞。具有二大特点：自我更新；多向功能的细胞。具有二大特点：自我更新；多向分化。呈不对称分裂。分化。呈不对称分裂。造血微环境造血微环境造血干细胞赖以生存的内造血干细胞赖以生存的内环境。包括：基质细胞和细胞外基质。环境。包括：基质细胞和细胞外基质。血血细胞胞起起源源胚胚胎胎期期造造血血出出生生后后造造血血骨骨 髓髓 采采 集集 1、骨髓穿刺部位：髂后上棘、髂前上棘、胸骨、骨髓穿刺部位：髂后上棘、髂前上棘、胸骨、棘突。棘突。2、吸取骨髓液：一般、吸取骨髓液：一般0.2ml，过多易被血稀释。，过多易被血稀释。3、骨髓穿刺成功的标志：抽吸骨髓液时患者感、骨髓穿刺成功的标志：抽吸骨髓液时患者感觉锐痛；有黄色骨髓小粒；涂片中有骨髓细胞成分。觉锐痛；有黄色骨髓小粒；涂片中有骨髓细胞成分。4、骨髓涂片和染色：制备厚薄、长短适宜的涂、骨髓涂片和染色：制备厚薄、长短适宜的涂片数张，同时作外周血涂片片数张，同时作外周血涂片2-3张，瑞张，瑞-姬染色后备姬染色后备检。检。骨髓穿刺术骨髓穿刺术正常骨髓象正常骨髓象 贫血骨髓象贫血骨髓象正正常常细细胞胞形形态态观察内容：观察内容：1.1.大小、形态。大小、形态。3.3.核：位置、大小、形态、染色质。核：位置、大小、形态、染色质。2.2.胞浆：量、着色、包含物。胞浆：量、着色、包含物。4.4.核仁：大小、多少、清晰度。核仁：大小、多少、清晰度。正正常常细细胞胞形形态态观察内容：观察内容：1.1.大小、形态。大小、形态。3.3.核：位置、大小、形态、染色质。核：位置、大小、形态、染色质。2.2.胞浆：量、着色、包含物。胞浆：量、着色、包含物。4.4.核仁：大小、多少、清晰度。核仁：大小、多少、清晰度。血细胞的成熟规律血细胞的成熟规律骨髓增生程度分级骨髓增生程度分级 骨髓增生程度：指有核细胞骨髓增生程度：指有核细胞:成熟红细胞成熟红细胞 1 1：1 1 增生极度活跃增生极度活跃 1 1：10 10 增生明显活跃增生明显活跃 1 1：20 20 增生活跃增生活跃 1 1：50 50 增生低下增生低下 1 1：200 200 增生极度低下增生极度低下骨骨髓髓增增生生程程度度极极 度度 活活 跃跃明显明显 活活 跃跃 活活 跃跃低低 下下极极 度度 低下低下幼红细胞系统幼红细胞系统原始原始红细胞红细胞早幼早幼红细胞红细胞晚幼晚幼红细胞红细胞中幼中幼红细胞红细胞粒粒 细细 胞胞 系系 统统原始粒原始粒细胞细胞分叶粒分叶粒细胞细胞杆状粒杆状粒细胞细胞晚幼粒晚幼粒细胞细胞中幼粒中幼粒细胞细胞早幼粒早幼粒细胞细胞嗜酸粒细胞嗜酸粒细胞 嗜碱粒细胞嗜碱粒细胞淋巴细胞淋巴细胞 单核细胞单核细胞巨核细胞的形态特点巨核细胞的形态特点组织细胞、巨噬细胞、海蓝组织细胞、组织细胞、巨噬细胞、海蓝组织细胞、内皮细胞、骨髓小粒内皮细胞、骨髓小粒破骨、成骨、网状、脂肪细胞破骨、成骨、网状、脂肪细胞各种组织细胞各种组织细胞各各 种种 浆浆 细细 胞胞低倍镜：低倍镜：选择镜检部位；选择镜检部位；判定增生程度；判定增生程度；计数巨核细胞；计数巨核细胞；观察特殊细胞观察特殊细胞 。油镜：计数油镜：计数500500个有核细个有核细胞，然后计算各系不胞，然后计算各系不同阶段比例。同阶段比例。诊断诊断:结合临床资料，结合临床资料，提出诊断或提供参考提出诊断或提供参考意见意见。骨髓细胞学检查的内容和方法骨髓细胞学检查的内容和方法骨髓细胞学检查临床应用骨髓细胞学检查临床应用血象有异常：血象有异常：RBCRBC、WBCWBC、PTSPTS、异常细胞、异常细胞肝脾淋巴结舯大：髓外造血、浸润、脂质肝脾淋巴结舯大：髓外造血、浸润、脂质 沉积病沉积病查明发热原因：如黑热病等查明发热原因：如黑热病等消瘦、恶液质：有无骨髓转移消瘦、恶液质：有无骨髓转移血血细细胞胞超超微微结结构构扫描电镜扫描电镜 透射电镜透射电镜急性粒细胞白血病急性粒细胞白血病病病理理血血细细胞胞形形态态 急性早幼粒细胞白血病急性早幼粒细胞白血病 单核细胞单核细胞白血病白血病病病理理血血细细胞胞形形态态 巨核细胞白血病巨核细胞白血病 红白血红白血病病病病理理血血细细胞胞形形态态急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病(L1-(L1-L3)L3)嗜酸粒细胞白血病嗜酸粒细胞白血病 嗜碱粒细胞白嗜碱粒细胞白血病血病病病理理血血细细胞胞形形态态慢性粒细胞白血病慢性粒细胞白血病病病理理血血细细胞胞形形态态 恶性组织细胞增生症恶性组织细胞增生症 霍奇金淋霍奇金淋巴瘤巴瘤病病理理血血细细胞胞形形态态 毛细胞白血病毛细胞白血病 多发性骨多发性骨髓瘤髓瘤病病理理血血细细胞胞形形态态 骨髓转移癌骨髓转移癌 骨髓坏死骨髓坏死病病理理血血细细胞胞形形态态利利 什什 曼曼 原原 虫虫病病理理血血细细胞胞形形态态常见的化学染色包括：常见的化学染色包括：过氧化物酶（过氧化物酶（POX)POX)碱性磷酸酶碱性磷酸酶(NAP)(NAP)酸性磷酸酶酸性磷酸酶(ACP(ACP）糖原糖原(PAS(PAS）铁染色铁染色血细胞化学染色血细胞化学染色 是在保存细胞结构完整的情况下，是在保存细胞结构完整的情况下，根据化学反应的原理进行染色，研究其中的化学成分的根据化学反应的原理进行染色，研究其中的化学成分的分布与变化，了解各种细胞的化学组成及病理生理改变，分布与变化，了解各种细胞的化学组成及病理生理改变，主要用作血细胞类型的鉴别。主要用作血细胞类型的鉴别。血细胞化学染色血细胞化学染色细胞发育过程中的过氧化酶细胞发育过程中的过氧化酶中性粒细胞硷性磷酸酶反应中性粒细胞硷性磷酸酶反应酸性磷酸酶染色酸性磷酸酶染色糖糖 原原 染染 色色骨髓含铁血黄素染色骨髓含铁血黄素染色急性白血病细胞化学染色特点急性白血病细胞化学染色特点 免疫学检查免疫学检查cluster of differentiation system：系列特异性和阶段特异性。系列特异性和阶段特异性。MICROSCOPYMICROSCOPY(immunochemistry)(immunochemistry)FLOW CYTOMETRYFLOW CYTOMETRYAntibodiesCell免疫学表型免疫学表型 AML:cMPO AML:cMPO、CD117 CD117、CD13 CD13、CD33CD33、CD65 CD65、CD14CD14、CD15CD15、CD64 CD64、HLA-DRHLA-DR、血型糖蛋白、血型糖蛋白、CD41CD41、CD61CD61。ALL:B:CD79a ALL:B:CD79a、cCD22cCD22、cIgM cIgM、CD19CD19、CD20 CD20、CD10 CD10、CD24CD24。T:cCD3T:cCD3、TCR TCR、CD2 CD2、CD5CD5、CD7CD7、CD4CD4、CD8CD8、CD10 CD10、CD1a CD1a、TdTTdT。Stem Cell:CD34Stem Cell:CD34+、CD38CD38-、LinLin-遗遗 传传 学学(Cytogenetics)荧光光原原位位杂交交常见细胞遗传学异常常见细胞遗传学异常染色体改变染色体改变 基因改变基因改变白血病类型白血病类型t(8;21)(q22;q22)AML1-ETOM2t(15;17)(q22;q21)PML-RARM3t(11;17)(q23;q21)PLZF-RARM4inv(16)(p13;q22)CBF-MYH11M4Eot(16;16)(p13;q22)CBF-MYH11M4Eot(11q23)MLLM4/M5t(8;14)(q24;q32)MYC-IgHL3t(9;22)(p34;q11)BCR-ABLCML例一例一:t(15;17)/PML-RAR:t(15;17)/PML-RAR 例二例二:t(8;21)(q22;q22);:t(8;21)(q22;q22);AML1/ETOAML1/ETO