吸收光谱曲线课件

吸收光谱曲线课件1第九章第九章 吸光光度法吸光光度法9.1 吸光光度法基本原理吸光光度法基本原理9.2 分光光度计及吸收光谱分光光度计及吸收光谱9.3 显色反应及影响因素显色反应及影响因素9.4 光度分析法的设计光度分析法的设计9.5 吸光光度法的误差吸光光度法的误差9.6 吸光光度法的应用吸光光度法的应用第九章 吸光光度法2化学分析与仪器分析方法比较化学分析与仪器分析方法比较化学分析：化学分析：常量组分常量组分(1%),Er 0.1%0.2%依据化学反应依据化学反应,使用玻璃仪器使用玻璃仪器 准确度高准确度高仪器分析：仪器分析：微量组分微量组分(1%),E3仪器分析方法分类仪器分析方法分类2.电化学分析法电化学分析法:依据物质的电化学性质及其变化依据物质的电化学性质及其变化3.色谱法色谱法:气相色谱气相色谱,液相色谱液相色谱4.质谱法、热分析法、放射化学法等质谱法、热分析法、放射化学法等非光谱法非光谱法 （折射法，浊度法，旋光法）（折射法，浊度法，旋光法）（不以光的波长为特征讯号）（不以光的波长为特征讯号）光谱法光谱法分子光谱法分子光谱法 UV/Vis、IR、MFS、MPS原子光谱法原子光谱法 AAS、AES、AFS（以光的吸收、发射等作用而建立的分析方法，通过以光的吸收、发射等作用而建立的分析方法，通过检测光谱的检测光谱的波长和强度波长和强度来进行定性和定量的方法来进行定性和定量的方法）光光学学分分析析法法1.光学分析法光学分析法:基于电磁辐射与物质的相互作用基于电磁辐射与物质的相互作用仪器分析方法分类2.电化学分析法:依据物质的电化学性质及4吸光光度法：分子光谱分析法的一种，又称分光光吸光光度法：分子光谱分析法的一种，又称分光光度法，是基于被测物质的度法，是基于被测物质的分子分子对光具对光具有有选择性吸收的选择性吸收的特性而建立起来的分特性而建立起来的分析方法，析方法，属于分子吸收光谱分析方法。属于分子吸收光谱分析方法。基于外层价电子跃迁。基于外层价电子跃迁。9.1吸光光度法基本原理吸光光度法基本原理吸光光度法：分子光谱分析法的一种，又称分光光度法，是基于被测5波动性波动性波动性波动性粒子性粒子性粒子性粒子性 E光的折射光的折射光的折射光的折射光的衍射光的衍射光的衍射光的衍射光的偏振光的偏振光的偏振光的偏振光的干涉光的干涉光的干涉光的干涉光电效应光电效应光电效应光电效应E:E:光子的能量（光子的能量（光子的能量（光子的能量（J,J,焦耳）焦耳）焦耳）焦耳）:光子的频率（光子的频率（光子的频率（光子的频率（Hz,Hz,赫兹）赫兹）赫兹）赫兹）:光子的波长（光子的波长（光子的波长（光子的波长（cmcm）c c:光速（光速（光速（光速（2.99792.9979 10101010 cm.s cm.s-1-1）h h:Plank:Plank常数（常数（常数（常数（6.62566.6256 1010-34-34 J J s,s,焦耳焦耳焦耳焦耳 秒）秒）秒）秒）1 吸收光谱产生的原因吸收光谱产生的原因 光光:一种电磁波一种电磁波,波粒波粒二象性二象性 波动性粒子性 E光的折射光的衍射光的偏振光的干涉光电6光学光谱区光学光谱区远紫外远紫外近紫外近紫外 可见可见近红外近红外中红外中红外 远红外远红外（真空紫外）（真空紫外）10nm200nm200nm 400nm400nm 750nm750 nm 2.5 m2.5 m 5.0 m5.0 m 1000 m光学光谱区远紫外近紫外可见近红外中红外 远红外（真空紫7光谱种类光谱种类原子光谱：吸收、发射、荧光原子光谱：吸收、发射、荧光线状光谱线状光谱 黑体辐射：白炽灯、液、固灼热发光黑体辐射：白炽灯、液、固灼热发光连续光谱连续光谱 分子光谱分子光谱：紫外、可见、红外等：紫外、可见、红外等吸收光谱吸收光谱、分子荧光等分子荧光等发射光谱发射光谱带状光谱带状光谱 I光谱种类原子光谱：吸收、发射、荧光线状光谱黑体辐射：白炽灯8物质对光的吸收与发射物质对光的吸收与发射 1.电子相对于原子核的运动电子相对于原子核的运动-电子能级电子能级;单重态：激发态与基态中的电子自旋方向相反单重态：激发态与基态中的电子自旋方向相反.三重态：激发态与基态中的电子自旋方向相同三重态：激发态与基态中的电子自旋方向相同.2.原子核在其平衡位置附近的相对振动原子核在其平衡位置附近的相对振动-振动能级振动能级;3.分子本身绕其重心的转动分子本身绕其重心的转动-转动能级转动能级.物质分子内部物质分子内部 3 种运动形式及其对应能级：种运动形式及其对应能级：物质对光的吸收与发射 1.电子相对于原子核的运动-电子能9分子光谱为带光谱分子光谱为带光谱原子光谱为线光谱原子光谱为线光谱电子跃迁能级电子跃迁能级分子振动能级分子振动能级分子转动能级分子转动能级 分子能级示意图分子能级示意图S:S:电子能级电子能级v:v:振动能级振动能级r:r:转动能级转动能级分子光谱为带光谱电子跃迁能级分子能级示意图10色色 光：光：有颜色的光。每种色光具有一定的有颜色的光。每种色光具有一定的波长范围波长范围，如，如 绿色光：绿色光：500560nm，黄色光：黄色光：580600nm。单色光：单色光：波长唯一的光。波长唯一的光。如波长为如波长为 470 nm 的光就是单色光。的光就是单色光。2 物质颜色和吸收光的关系物质颜色和吸收光的关系色 光：2 物质颜色和吸收光的关系11单色光、复合光、光的互补单色光、复合光、光的互补单色光单色光复合光复合光光的互补光的互补单一波长的光单一波长的光由不同波长的光组合而成的光由不同波长的光组合而成的光若两种不同颜色的单色光按一定的强度比若两种不同颜色的单色光按一定的强度比例混合得到白光，那么就称这两种单色光例混合得到白光，那么就称这两种单色光为为互补色光互补色光，这种现象称为光的互补。，这种现象称为光的互补。蓝蓝黄黄紫红紫红绿绿紫紫黄绿黄绿绿蓝绿蓝橙橙红红蓝绿蓝绿单色光、复合光、光的互补单色光复合光光的互补单一波长的光由不12/nm吸收光颜色吸收光颜色物质的颜色物质的颜色400-450紫紫黄绿黄绿450-480蓝蓝黄黄480-490绿蓝绿蓝橙橙490-500蓝绿蓝绿红红500-560绿绿紫红紫红560-580黄绿黄绿紫紫580-610黄黄蓝蓝610-650橙橙绿蓝绿蓝650-760红红蓝绿蓝绿互互 补补 色色/nm吸收光颜色物质的颜色400-450紫黄绿450-4813有色化合物有色化合物溶液溶液的颜色的颜色溶液中有色化合物分子中的价电子由于能级溶液中有色化合物分子中的价电子由于能级跃迁，可以选择性吸收不同波长的互补色光跃迁，可以选择性吸收不同波长的互补色光中的一种色光而让另一种色光透过溶液，被中的一种色光而让另一种色光透过溶液，被人眼所感觉。故人眼所感觉。故有色化合物的颜色为透过光有色化合物的颜色为透过光的颜色的颜色。有色化合物溶液的颜色溶液中有色化合物分子中的价电子由于能级跃14ItI0bdxI I-dIs3 朗伯朗伯-比尔定律比尔定律 T=It/I0,T:透射比或透光度透射比或透光度 A=lg(I0/It)lg(1/T),A:吸光度吸光度光吸收定律光吸收定律:Lambert-Beer定律定律吸光光度法的理论依据吸光光度法的理论依据研究光吸收的最基本定律研究光吸收的最基本定律I0=It+Ia布格布格(Bouguer 1729年年)朗伯（朗伯（1760年）定律：光吸年）定律：光吸收与溶液层收与溶液层厚度厚度成正比成正比比尔（比尔（1852年）定律：光吸收与溶液年）定律：光吸收与溶液浓度浓度成正比成正比ItI0bdxII-dIs3 朗伯-比尔定律 T=It 15朗伯比尔定律朗伯比尔定律:当一束平行单色光垂直照射到样品溶液时，溶液当一束平行单色光垂直照射到样品溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度及光程（溶液的厚度）成正比关系的吸光度与溶液的浓度及光程（溶液的厚度）成正比关系.光吸收定律光吸收定律 数学表达：数学表达：A Alg(1/T)=Kbclg(1/T)=Kbc其中，其中，A:A:吸光度，吸光度，T:T:透射比，透射比，K:K:比例常数，比例常数，b:b:溶液厚度，溶液厚度，c:c:溶液浓度溶液浓度注意：注意：平行单色光平行单色光 均相介质均相介质 无发射、散射或光化学反应无发射、散射或光化学反应朗伯比尔定律:当一束平行单色光垂直照射到样品溶液时，溶液的吸16吸光度吸光度 与透光率与透光率 Absorbance and transmittanceT：透光率透光率A：吸光度吸光度1.00.50ACA100500T%TT=0.0%T=0.0%A=A=T=100.0%T=100.0%A=0.0A=0.0A=0.434A=0.434T=36.8%T=36.8%吸光度 与透光率 Absorbance and transm17吸收定律与吸收光谱的关系吸收定律与吸收光谱的关系AC吸收定律吸收定律吸收定律吸收定律A或或 吸收光谱吸收光谱吸收光谱吸收光谱A C max三三三三维维维维谱谱谱谱图图图图吸收定律与吸收光谱的关系AC吸收定律A或吸收光谱AC18a.摩尔吸光系数摩尔吸光系数 与吸光系数与吸光系数灵敏度表示方法灵敏度表示方法 表示物质的浓度为表示物质的浓度为1mol/L,液层厚度为液层厚度为1cm时溶液的吸光度。时溶液的吸光度。单位：单位：(Lmol-1 cm-1)A=bc ：摩尔吸光系数摩尔吸光系数 A=K Kbcc:mol/Lc:g/LA=abc a:吸光系数吸光系数a.摩尔吸光系数 与吸光系数灵敏度表示方法e 表示物质的浓19摩尔吸光系数摩尔吸光系数的讨论的讨论 （1 1）吸收物质在一定波长和溶剂条件下的吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数特征常数；（2 2）不随浓度不随浓度c c和光程长度和光程长度b b的改变而改变的改变而改变。在温度和波长等条件一在温度和波长等条件一定时，定时，仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关；仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关；（3 3）可作为）可作为定性鉴定的参数定性鉴定的参数；（4 4）同一吸收物质在不同波长下的同一吸收物质在不同波长下的 值是不同的。在最大吸收波长值是不同的。在最大吸收波长 max处的摩尔吸光系数，常以处的摩尔吸光系数，常以 max表示。表示。max表明了该表明了该吸收物质最大限吸收物质最大限度的吸光能力度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。摩尔吸光系数的讨论 （1）吸收物质在一定波长和溶剂条件下20（5 5）max越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。该物质的灵敏度越高。105：超高灵敏；：超高灵敏；=(610）104：高灵敏；：高灵敏；2104 ：不灵敏。：不灵敏。（6）在数值上等于浓度为在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为、液层厚度为1cm时该时该溶液在某一波长下的吸光度。溶液在某一波长下的吸光度。（5）max越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物21对同一种待测物质，不同的显色反应具有不同的对同一种待测物质，不同的显色反应具有不同的 ，表明具有不同的灵敏度。表明具有不同的灵敏度。例例 分光光度法测铜分光光度法测铜铜试剂法测铜试剂法测 Cu 426=1.28 104 L.mol-1.cm-1双硫腙法测双硫腙法测 Cu 495=1.58 105 L.mol-1.cm-1 越大越大,灵敏度越高灵敏度越高:105为高灵敏度为高灵敏度。对同一种待测物质，不同的显色反应具有不同的 ，表明具有不22b.桑德尔桑德尔(Sandell)灵敏度：灵敏度：S 当仪器检测吸光度为当仪器检测吸光度为0.001时，单位截时，单位截面积光程内所能检测到的吸光物质的最低面积光程内所能检测到的吸光物质的最低含量。含量。b.桑德尔(Sandell)灵敏度：S23氯磺酚氯磺酚S测定钢中的铌测定钢中的铌 50ml容量瓶中有容量瓶中有Nb30g，用，用2cm比色池，在比色池，在650nm测定光测定光吸收，吸收，A0.43，求，求S.(Nb原子量原子量92.91)。根据A=bc，求氯磺酚S测定钢中的铌 根据A=bc，求24吸光度的加和性吸光度的加和性A1=1bc1A2=2bc2A =1bc1+2bc2 根据吸光度的加和性可以进行多组分的测定以及根据吸光度的加和性可以进行多组分的测定以及某些化学反应平衡常数的测定某些化学反应平衡常数的测定在某一波长，溶液中含有对该波长的光产生吸收的多种在某一波长，溶液中含有对该波长的光产生吸收的多种物质，那么溶液的物质，那么溶液的总吸光度总吸光度等于溶液中各个吸光物质的等于溶液中各个吸光物质的吸光度吸光度之和之和A=A1+A2+An吸光度的加和性A1=e1bc1根据吸光度的加和性可以进行250.XXX光源光源光源光源单色器单色器单色器单色器吸收池吸收池吸收池吸收池检测器检测器检测器检测器显示显示显示显示I0It参比参比参比参比样品样品样品样品未考虑吸收池和溶剂对光子的作用未考虑吸收池和溶剂对光子的作用注意注意注意注意比较比较比较比较 A=lg(I0/It)lg(1/T)9.2 分光光度计与吸收光谱分光光度计与吸收光谱 1 分光光度计分光光度计260.XXX光源单色器吸收池检测器显示I0It参比样品未考虑吸26常用光源常用光源光源光源波长范围波长范围(nm)适用于适用于氢灯氢灯185375紫外紫外氘灯氘灯185400紫外紫外钨灯钨灯3202500可见，近红外可见，近红外卤钨灯卤钨灯2502000紫外，可见，近红外紫外，可见，近红外氙灯氙灯1801000紫外、可见（荧光）紫外、可见（荧光）能斯特灯能斯特灯10003500红外红外空心阴极灯空心阴极灯特有特有原子光谱原子光谱激光光源激光光源特有特有各种谱学手段各种谱学手段光源光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够的光强度：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够的光强度,稳定。稳定。可可见光区：见光区：钨灯，碘钨灯钨灯，碘钨灯(3202500nm)紫外区：紫外区：氢灯，氘灯氢灯，氘灯(180375nm)常用光源光源波长范围(nm)适用于氢灯185375紫外氘灯27氙灯氙灯氢灯氢灯钨灯钨灯氙灯氢灯钨灯28单色器单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。棱镜棱镜:玻璃玻璃3503200nm,石英石英1854000nm光栅光栅:波长范围宽波长范围宽,色散均匀色散均匀,分辨性能好分辨性能好,使用方便使用方便吸收池（比色皿）吸收池（比色皿）厚度厚度(光程光程):0.5,1,2,3,5cm材质：玻璃比色皿可见光区材质：玻璃比色皿可见光区 石英比色皿可见、石英比色皿可见、紫外光区紫外光区单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。29检测器检测器 作用：接收透射光，并将光信号转化为电信号作用：接收透射光，并将光信号转化为电信号 常用检测器：常用检测器：光电管光电管 光电倍增管光电倍增管 光二极管阵列光二极管阵列 CCD(CCD(电荷耦合器件检测器电荷耦合器件检测器)光电管光电管分为红敏和紫敏，分为红敏和紫敏，阴极表面涂银和氧化铯为阴极表面涂银和氧化铯为红敏红敏，适用，适用6251000 nm波长；波长；阴极表面涂锑和铯为阴极表面涂锑和铯为紫敏紫敏，适用，适用200625 nm波长波长检测器30目视比色法目视比色法比色管比色管 光电比色法光电比色法光电比色计光电比色计 光源、滤光片、比色池、硒光光源、滤光片、比色池、硒光 电池、检流计电池、检流计 分光光度法分光光度法分光光度计分光光度计 目视比色法比色管 光电比色法光电比色计分光光度法311.1.光源光源在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。可见光区：钨灯作为光源，可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在其辐射波长范围在3203202500 2500 nmnm。紫外区：氢、氘灯。发射紫外区：氢、氘灯。发射185185400 nm400 nm的连续光谱。的连续光谱。基本组成光源单色器样品室检测器显示光源 可见光区：钨灯作为光源32将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光的光学系统。单色光的光学系统。入射狭缝：光源的光由此进入单色器；入射狭缝：光源的光由此进入单色器；准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束；准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束；色散元件：将复合光分解成单色光；色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅棱镜或光栅；聚焦装置：透镜或聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至后所得单色光聚焦至出射狭缝；出射狭缝；出射狭缝。出射狭缝。2.2.单色器单色器将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光的光33 3.样品室样品室样品室放置各种类型的吸收池（比样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在主要有石英池和玻璃池两种。在紫紫外区须采用石英池外区须采用石英池，可见区一般用可见区一般用玻璃池。玻璃池。4.4.检测器检测器利用光电效应将透过吸收池的光信利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管。电池、光电管或光电倍增管。5.5.结果显示记录系统结果显示记录系统检流计、数字显示、微机进行仪器检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理自动控制和结果处理 3.样品室34分光光度计的类型1.1.单光束单光束简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。性。2.2.双光束双光束自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。价格较高。3.3.双波长双波长将不同波长的两束单色光将不同波长的两束单色光(1 1、2)2)快速交替通过同一吸快速交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。=1=12nm2nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。两波长同时扫描即可获得导数光谱。分光光度计的类型1.单光束35吸收光谱曲线课件36分光光度计的类型1.1.单光束单光束简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。性。2.2.双光束双光束自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。价格较高。3.3.双波长双波长将不同波长的两束单色光将不同波长的两束单色光(1 1、2)2)快速交替通过同一吸快速交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。=1=12nm2nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。两波长同时扫描即可获得导数光谱。分光光度计的类型1.单光束37吸收光谱曲线课件38吸收光谱曲线课件39吸收光谱曲线课件40 紫外-可见分光光度计 紫外-可见分光光度计41吸收光谱曲线课件42吸收光谱曲线：吸收光谱曲线：物质在不同波长下吸收光的强度大小物质在不同波长下吸收光的强度大小A Al l关系关系最大吸收波长最大吸收波长 l lmaxmax：光吸收最大处的波长光吸收最大处的波长2 2 吸收光谱吸收光谱 max对比度对比度(l l):):络合物最大吸络合物最大吸收波长收波长(l lMRMRmaxmax)与试剂最大吸与试剂最大吸收波收波(l lR Rmaxmax)之差之差 吸收光谱曲线：物质在不同波长下吸收光的强度大小Al关系2 43吸收光谱曲线吸收光谱曲线(curve of absorption spectrum）：）：通过测量某种物质对不同波长单色光的吸光度，通过测量某种物质对不同波长单色光的吸光度，然后然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标以波长为横坐标，吸光度为纵坐标 所绘出的曲线。所绘出的曲线。用途用途：可清楚描述物质对光的吸收情况。可清楚描述物质对光的吸收情况。可查找出最大吸收波长可查找出最大吸收波长(max)，用于分光光度测定。，用于分光光度测定。特点特点：光吸收曲线的形状和光吸收曲线的形状和 max 不随不随有色化合物有色化合物溶液溶液浓度浓度的改变而的改变而改变改变。吸收光谱曲线(curve of absorption spe44300400500600700/nm350525 5451.00.80.60.40.2AbsorbanceCr2O72-、MnO4-的吸收光谱的吸收光谱350Cr2O72-MnO4-300400500600700/nm350525 54545吸收曲线的讨论：吸收曲线的讨论：（1）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长最大吸收波长 max。（2）不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状）不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似相似max不变。而对于不同物质，它们的吸收曲不变。而对于不同物质，它们的吸收曲线形状和线形状和max则不同。则不同。吸收曲线的讨论：（1）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸46（3 3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。性分析的依据之一。（4 4）不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度）不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度 A A 有差异，在有差异，在maxmax处吸光度处吸光度A A 的差异最大。此特性可作为物的差异最大。此特性可作为物质定量分析的依据。质定量分析的依据。（5 5）在）在maxmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。依据。（3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依47本节要点：单色光、复合光、互补色光单色光、复合光、互补色光光的加合性与多组分测定光的加合性与多组分测定朗伯朗伯-比尔定律的内涵比尔定律的内涵摩尔吸光系数与吸光系数摩尔吸光系数与吸光系数分光光度计的类型分光光度计的类型分光光度计的结构组成及其功能分光光度计的结构组成及其功能吸收光谱曲线的绘制及其表达的信息吸收光谱曲线的绘制及其表达的信息本节要点：48