组织胚胎学理论绪论课件

普通高等教育国家级十一五规划教材普通高等教育国家级十一五规划教材 组织学与胚胎学组织学与胚胎学理论课件理论课件组织学组织学第第1 1 一、组织学的研究内容一、组织学的研究内容 组织学（组织学（histologyhistology）：研究机体）：研究机体微细结构微细结构及其及其 相关功能相关功能的科学。的科学。组织组织上皮组织上皮组织结缔组织结缔组织肌肉组织肌肉组织神经组织神经组织细胞细胞细胞间质细胞间质器官和系统器官和系统（细胞外基质）（细胞外基质）细胞：是机体形态结构与功能的基本单位。细胞：是机体形态结构与功能的基本单位。组织：由细胞和细胞间质组织：由细胞和细胞间质(又称细胞外基质又称细胞外基质)组成的群体结构，是构成机体器官的组成的群体结构，是构成机体器官的 基本成分。基本成分。器官：具有一定的形态结构，并执行特定的器官：具有一定的形态结构，并执行特定的 生理功能。生理功能。系统：由一些结构连续、功能相关的器官组合而系统：由一些结构连续、功能相关的器官组合而 成，完成连续的生理活动。成，完成连续的生理活动。细胞细胞-组织组织-器官器官-系统系统人体器官分类组织学特征人体器官分类组织学特征实质性实质性器官器官中空性中空性中央：大空腔中央：大空腔表面：被模表面：被模如：消化腺、淋巴器官如：消化腺、淋巴器官 、内分泌腺、肾脏等内分泌腺、肾脏等。如：心血管、消化管、呼吸道等如：心血管、消化管、呼吸道等内部：实质行使功能内部：实质行使功能管壁：分管壁：分3 34 4层层组织学结构观察组织学结构观察组织学组织学 结构结构光镜结构用光学显微镜观察的结构光镜结构用光学显微镜观察的结构（LMLM）(light microscope,LM(light microscope,LM 简称光镜简称光镜)电镜结构电子显微镜下观察的结构电镜结构电子显微镜下观察的结构（EMEM）(electron microscope,EM(electron microscope,EM简称电镜）简称电镜）又称超微结构又称超微结构(ultrastructure)(ultrastructure)二、组织学的研究方法和常用技术二、组织学的研究方法和常用技术(一一)光学显微镜技术光学显微镜技术 1 1、常用组织切片标本制备技术、常用组织切片标本制备技术 石蜡切片术石蜡切片术 取材和固定取材和固定;脱水和包埋脱水和包埋;切片和染色切片和染色;封片。封片。其他；火棉胶包埋其他；火棉胶包埋,冰冻切片冰冻切片,涂片涂片,铺片铺片,磨片等磨片等 苏木精苏木精 伊红伊红 碱性染料碱性染料酸性染料酸性染料 染成红色染成红色 （嗜酸性）（嗜酸性）细胞核中的染色质、细胞核中的染色质、细胞核中的染色质、细胞核中的染色质、细胞质中的核糖体细胞质中的核糖体细胞质中的核糖体细胞质中的核糖体 细胞质细胞质细胞质细胞质细胞间质成份细胞间质成份细胞间质成份细胞间质成份 染成蓝色染成蓝色（嗜碱性）（嗜碱性）常用染色方法：常用染色方法：HEHE染色染色（HematoxylinHematoxylin）（EosinEosin）HEHE染色染色嗜碱性：可使细胞核内的染色质嗜碱性：可使细胞核内的染色质 及细胞质内的核糖体等及细胞质内的核糖体等 结构染成蓝紫色。结构染成蓝紫色。嗜酸性：可使多数细胞的细胞质嗜酸性：可使多数细胞的细胞质 染成粉红色。染成粉红色。中性：中性：与两种染液亲合力都不强。与两种染液亲合力都不强。组织结构的嗜色性组织结构的嗜色性嗜碱性嗜酸性 A A 嗜银性嗜银性 B B 嗜铬性嗜铬性 C C 异染性异染性其它染色方法其它染色方法普通光学显微镜普通光学显微镜是观察组织细胞微细结构最常用的工具，是观察组织细胞微细结构最常用的工具，分为分为光学部分光学部分机械部分机械部分起放大作用起放大作用光镜的分辨率约为光镜的分辨率约为0.2m0.2m可放大可放大15001500倍左右倍左右（light microscope light microscope，LM LM）几种特殊显微镜术几种特殊显微镜术（1 1）相差显微镜）相差显微镜 (phase contrast(phase contrast microscope)microscope)用于观察生活细胞用于观察生活细胞和末经染色细胞的和末经染色细胞的形态结构。形态结构。神经干细胞培养神经干细胞培养(2)(2)荧光显微镜荧光显微镜 (fluorescence micrscope)(fluorescence micrscope)是用以观察是用以观察 细胞、组织内细胞、组织内 荧光物质的分布。荧光物质的分布。神经球神经球(二二)共焦激光扫描显微镜共焦激光扫描显微镜 共焦激光扫描显微镜共焦激光扫描显微镜 (confocal laser scanning(confocal laser scanning microscopemicroscope，CLSM)CLSM)由激光光源、共焦成像扫描由激光光源、共焦成像扫描 系统、电子光学系统和微机系统、电子光学系统和微机 图象分析系统四部份构成。图象分析系统四部份构成。可对样品进行断层扫描重建可对样品进行断层扫描重建 三维图像，进行体视学分析；三维图像，进行体视学分析；测定细胞内测定细胞内pHpH、钙浓度等；、钙浓度等；更精确地检测、识别，更精确地检测、识别，组织细胞的微细结构及其变组织细胞的微细结构及其变 化。化。CLSMCLSM又称细胞又称细胞CTCT。CLSMCLSMCLSM CLSM 图像图像Human neuronal precursor cellsHuman neuronal precursor cellsCLSMCLSM海马海马MRMR、GRGR共存共存 (三三)电子显微镜技术电子显微镜技术 （electron microscope,EMelectron microscope,EM）透射电镜透射电镜 (transmission electron microscope,TEM)(transmission electron microscope,TEM)观察细胞内部结构观察细胞内部结构 分辨率为分辨率为0.1-0.2nm,0.1-0.2nm,可放大几万几十可放大几万几十万倍万倍 扫描电镜（扫描电镜（scanning electron microscope,SEM)scanning electron microscope,SEM)观察组织或细胞表面的立体结构观察组织或细胞表面的立体结构 冰冻蚀刻（冰冻蚀刻（freeze etching methodfreeze etching method）观察细胞断裂表面形态结构观察细胞断裂表面形态结构 分析电镜分析电镜 XX射线显微分析术（射线显微分析术（Xray microanalysisXray microanalysis）研究细胞、组织内元素种类分布和含研究细胞、组织内元素种类分布和含量量透射电镜与照片透射电镜与照片TEM淋巴细胞淋巴细胞THANK YOUSUCCESS2024/7/1617可编辑扫描电镜与照片扫描电镜与照片SEMSEMSEM 1.SEM 1.纤毛纤毛 2.2.微绒微绒毛毛冰冻蚀刻细胞冰冻蚀刻细胞 冷冻断裂肾小球右下线粒体冷冻断裂肾小球右下线粒体 冰冻蚀刻照片冰冻蚀刻照片分析电镜分析电镜X X线微区分析图片线微区分析图片分析电镜分析电镜X X线微区分析线微区分析糖类显示法糖类显示法糖类显示法糖类显示法PASPAS反应：反应：过碘酸过碘酸希夫反希夫反应应(periodic acid Schiff reaction(periodic acid Schiff reaction，PAS)PAS)：检测组织或细胞中有无多糖存在。检测组织或细胞中有无多糖存在。原理：原理：多糖多糖PAPA氧化氧化醛醛SchiffSchiff试剂试剂紫红色沉淀紫红色沉淀(四四)组织化学和细胞化学技术组织化学和细胞化学技术 PASPAS反应阳性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在反应阳性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在 PASPAS阳性小肠上皮阳性小肠上皮组织细胞化学染色图片组织细胞化学染色图片酶细胞化学神经元酶细胞化学神经元ACPACP酶阳性酶阳性 脂类显示法苏丹 脂类显示法脂类显示法苏丹苏丹 锇酸锇酸髓鞘染色髓鞘染色 核酸显示法核酸显示法 利用抗原（利用抗原（利用抗原（利用抗原（antigen,Agantigen,Agantigen,Agantigen,Ag），抗体（），抗体（），抗体（），抗体（antibodyantibodyantibodyantibody）特异）特异）特异）特异结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。免疫细胞化学原理免疫细胞化学原理免疫细胞化学标记物免疫细胞化学标记物免疫细胞化学免疫细胞化学PAPPAP法法免疫细胞化学免疫细胞化学ABCABC法法(五五)免疫组织化学与细胞化学技术免疫组织化学与细胞化学技术免疫组织化学术免疫组织化学术(immunohistochemistry)(immunohistochemistry)是将免疫学原理与组织化学技术是将免疫学原理与组织化学技术相结合建立的新技术，相结合建立的新技术，根据抗原与抗体特异性根据抗原与抗体特异性结合的特点，检测组织结合的特点，检测组织细胞内某种多肽、蛋白质细胞内某种多肽、蛋白质等大分子物质的存在与分布。等大分子物质的存在与分布。人鼻粘膜上皮棘细胞细胞间桥人鼻粘膜上皮棘细胞细胞间桥TMTM阳性阳性(六六)原位杂交术原位杂交术原位杂交原位杂交(in situ hybridization)(in situ hybridization)是一种敏感性高、特异性强的，是一种敏感性高、特异性强的，能在组织细胞原位进行的核能在组织细胞原位进行的核酸分子杂交技术。酸分子杂交技术。常用的标记物有两种：常用的标记物有两种：1 1、放射性同位素，、放射性同位素，如如3 3H H、1414C C、3232P P、3535S S、125125I I，2 2、为非放射性物质，、为非放射性物质，如地高辛等。如地高辛等。非放射性原位杂交非放射性原位杂交 海马海马GAPGAP43 mRNA43 mRNA(七七)放射自显影术放射自显影术放射自显影术放射自显影术(autoradiograph)(autoradiograph)旨在追踪某些物质在体内、组织旨在追踪某些物质在体内、组织或细胞中的分布与代谢径路。或细胞中的分布与代谢径路。放射自显影放射自显影甲状腺甲状腺125125I I同位素注入同位素注入取材取材制标本制标本涂核乳胶涂核乳胶暗室曝光暗室曝光显影、定影显影、定影染色染色LMLM观察观察(八八)组织培养和组织工程组织培养和组织工程组织工程基本方法示意图组织工程基本方法示意图A A获取组织获取组织 B B分离、培养种子细胞分离、培养种子细胞C C制备三维支架制备三维支架D D将种子细胞种植于支架将种子细胞种植于支架 E E将细胞将细胞-支架复合物植入组织缺损处支架复合物植入组织缺损处细胞培养神经干细胞培养细胞培养神经干细胞培养(九九)组织细胞定量术组织细胞定量术1 1显微分光光度术显微分光光度术 应用显微分光光度计应用显微分光光度计(microspectrophotometer)(microspectrophotometer)对组织对组织和细胞内化学成分进行定量分析。和细胞内化学成分进行定量分析。2 2形态计量术形态计量术 运用数学和统计学原理对组织细胞内各种成分的数量、运用数学和统计学原理对组织细胞内各种成分的数量、体积、表面积等的测量体积、表面积等的测量 。目前多应用图像分析。目前多应用图像分析。3 3流式细胞术流式细胞术 应用流式细胞仪进行细胞定量分析和细胞分类研究。应用流式细胞仪进行细胞定量分析和细胞分类研究。三、组织学的学习方法三、组织学的学习方法1.1.理论联系实际理论联系实际 2.2.结构与功能关系结构与功能关系 3.3.断面与立体的关系断面与立体的关系 4.4.建立动态变化的概念建立动态变化的概念 5.5.善于总结，掌握规律善于总结，掌握规律 写在最后写在最后成功的基成功的基础在于好的学在于好的学习习惯The foundation of success lies in good habits33 结束语当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的，所以不要放弃，坚持就是正确的。When You Do Your Best,Failure Is Great,So DonT Give Up,Stick To The End演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日