第九章发育毒性与致畸作用课件

第九章第九章发育毒性与致畸作用发育毒性与致畸作用 .2本章内容：本章内容：概述概述发育毒性与致畸性发育毒性与致畸性致畸（发育毒性）作用机制致畸（发育毒性）作用机制发育毒性和致畸作用试验与评价发育毒性和致畸作用试验与评价.教学目的与要求教学目的与要求掌握掌握基本概念和发育毒性的终点、发育各阶段发育基本概念和发育毒性的终点、发育各阶段发育毒性作用的特点；毒性作用的特点；发育毒性的剂量发育毒性的剂量-反应模式和阈值的概念。反应模式和阈值的概念。熟悉熟悉发育毒性（致畸作用）的机制。发育毒性（致畸作用）的机制。发育毒性与致畸作用试验与评价；发育毒性与致畸作用试验与评价；了解了解母体毒性与发育毒性；母体毒性与发育毒性；发育毒性资料的使用。发育毒性资料的使用。3.第一节第一节概述概述.外源化学物外源化学物外源化学物外源化学物生殖过程生殖过程生殖过程生殖过程生殖毒性生殖毒性生殖毒性生殖毒性(reproductive toxicity)(reproductive toxicity)生殖毒理学生殖毒理学生殖毒理学生殖毒理学(reproductive toxicology)(reproductive toxicology)发育过程发育过程发育过程发育过程发发育毒性育毒性育毒性育毒性(developmental toxicity)(developmental toxicity)发发育毒理学育毒理学育毒理学育毒理学(developmental toxicology)(developmental toxicology)第一节第一节概述概述.第一节第一节概述概述发育毒理学发育毒理学（development toxicologydevelopment toxicology）是是研研究究出出生生前前暴暴露露于于环环境境有有害害因因子子导导致致的的异异常常发发育育结结局局及及有有关关的的作作用用机机制制、发发病病原原理、影响因素和毒物动力学等。理、影响因素和毒物动力学等。是是毒毒理理学学的的重重要要分分支支学学科科，评评定定方方法法称称为为发育毒性试验发育毒性试验,其中主要为致畸试验。其中主要为致畸试验。6.第一节第一节概概述述从畸胎学到发育毒理学从畸胎学到发育毒理学畸胎学（古代）畸胎学（古代）现代实验畸胎学（现代实验畸胎学（19世纪）世纪）发育毒理学发育毒理学7.畸胎学（古代）畸胎学（古代）独眼巨人独眼巨人海妖海妖古埃及、古巴比伦、中国、古印度古埃及、古巴比伦、中国、古印度6500 B.C.记载畸胎；记载畸胎；1651年，年，William Harvey提出发育受提出发育受阻学说，阻学说，认为认为“畸形起因于器官或结畸形起因于器官或结构的不完全发育构的不完全发育”。.1919世纪初期，世纪初期，对哺乳动物进行了实验畸胎学研究。对哺乳动物进行了实验畸胎学研究。对哺乳动物进行了实验畸胎学研究。对哺乳动物进行了实验畸胎学研究。现代实验畸胎学（现代实验畸胎学（19世纪）世纪）物理因素物理因素（震动、倒置、针刺）（震动、倒置、针刺）化学因素化学因素产生了畸形小鸡产生了畸形小鸡神经管缺陷神经管缺陷无脑畸形无脑畸形脊柱裂脊柱裂独眼畸形独眼畸形作用时间在决定畸形类型方面比损伤性质更为重要。.现代实验畸胎学（现代实验畸胎学（19世纪）世纪）2020世世纪纪初初，发发现现很很多多环环境境因因素素（温温度度、微微生生物物毒毒素素、药药物）可以干扰鸟类、爬虫类、鱼和两栖类的发育。物）可以干扰鸟类、爬虫类、鱼和两栖类的发育。19351935年年，HaleHale首首次次报报道道：VitAVitA缺缺乏乏母母猪猪后后代代突突眼眼、腭腭裂畸形发生；裂畸形发生；10.致畸研究简史致畸研究简史年份年份原因原因异常类型异常类型1935年年Vit A缺乏缺乏母猪后代突眼和腭裂畸形。母猪后代突眼和腭裂畸形。1940年年澳大利亚风疹大流行，孕澳大利亚风疹大流行，孕妇感染风疹病毒妇感染风疹病毒婴儿先天性白内障、耳聋、智力发育不婴儿先天性白内障、耳聋、智力发育不全、先天性心脏病发生率显著增高。全、先天性心脏病发生率显著增高。1945年年日本广岛、长崎原子弹核日本广岛、长崎原子弹核辐射辐射胎儿小头畸形、智力低下，一年死亡率胎儿小头畸形、智力低下，一年死亡率高达高达25%。1950年年甲基汞中毒（日本）甲基汞中毒（日本）先天性水俣病。先天性水俣病。1960-1962年年孕妇服用沙利度胺孕妇服用沙利度胺出现上万例海豹畸形胎儿。出现上万例海豹畸形胎儿。1968年年多氯联苯污染米糠油事件多氯联苯污染米糠油事件孕妇出现死产、早产或产下孕妇出现死产、早产或产下“油症儿油症儿”1969年年孕妇服用乙烯雌酚孕妇服用乙烯雌酚女性后代青春期阴道和宫颈透明细胞癌；女性后代青春期阴道和宫颈透明细胞癌；男性附睾囊肿、睾丸囊性硬结等异常。男性附睾囊肿、睾丸囊性硬结等异常。1970s母亲或父亲饮酒母亲或父亲饮酒胎儿酒精综合征胎儿酒精综合征11.1959年，年，日本水俣湾，汞废水污染引发先天水俣病。日本水俣湾，汞废水污染引发先天水俣病。.19601960年年前前后后，英英、德德、日日本本等等国国妇妇女女 “反反应应停停”（thalidomidethalidomide）事件。）事件。.14酒酒精精综综合合征征胎儿酒精综合征胎儿酒精综合征（fetal alcohol syndrome,FAS）p由由父父母母嗜嗜酒酒引引起起的的后后代代出出生生缺缺陷陷，典典型型的的表表现现为为面面部部畸畸形形、宫宫内内和和产产后后生生产产迟迟缓缓、精精神神运运动动和和智智力力发发育育障碍等。障碍等。.第一节第一节概述概述现代代研研究究发现，人人类成成功功妊妊娠娠结局局的的比比率率出出人人意意料料的的低，只有不到半数的受孕能低，只有不到半数的受孕能产生完全正常的健康生完全正常的健康婴儿。儿。美美国国统计资料料表表明明，着着床床后后丢失失（流流产和和死死胎胎）31%，婴儿儿出出生生时严重重畸畸形形23%，轻微微畸畸形形14%，低低出出生生体体重重7%，1岁前死亡率前死亡率1.4%，神，神经功能异常功能异常1617%。我我国国每每年年有有3040万万名名严重重先先天天畸畸形形儿儿出出生生，其其中中很很大大比例在一年内死亡。比例在一年内死亡。.第二节第二节发育毒性与致畸性发育毒性与致畸性.一、基本概念一、基本概念畸形畸形（Malformation）：）：发育生物体解剖学上发育生物体解剖学上形态结构的缺陷。对外观、生理功能和（或）寿命有影形态结构的缺陷。对外观、生理功能和（或）寿命有影响响。19严重畸形严重畸形（Major Malformation）轻微畸形轻微畸形（Minor Malformation）致畸原（致畸原（teratogenteratogen）：）：能引起畸形的环境因子。能引起畸形的环境因子。致畸作用（致畸作用（teratogenesisteratogenesis）：）：致畸物引起后代结构畸致畸物引起后代结构畸形的过程。形的过程。致畸性（致畸性（teratogenicityteratogenicity）：）：致畸物引起后代畸形的能致畸物引起后代畸形的能力。力。.20一、基本概念一、基本概念变变异异（variation）：由由遗遗传传和和遗遗传传外外因因素素控控制制的的外观变化，或者由于分化改变而引起差异（外观变化，或者由于分化改变而引起差异（deviationdeviation）。）。子子代代与与亲亲代代之之间间或或子子代代的的个个体体之之间间，出出现现不不完完全全相相同同的现象。的现象。一般是小的或次要的结构改变。一般是小的或次要的结构改变。不影响任何生理功能。不影响任何生理功能。变变异异：同同种种生生物物世世代代之之间间或或同同代代生生物物不不同同个个体体之之间间在在形形态、生理等方面表现出来的差异。态、生理等方面表现出来的差异。-来源：来源：汉语同韵大词典汉语同韵大词典.一、基本概念一、基本概念21胚体胚体-胎体毒性胎体毒性胚胚体体毒毒性性（embryotoxicityembryotoxicity）：外外源源性性理理化化因因子子对对孕孕体着床前后到器官形成期结束时的有害影响。体着床前后到器官形成期结束时的有害影响。胎胎体体毒毒性性或或胎胎儿儿毒毒性性（fetoxicityfetoxicity）：外外源源性性理理化化因因子对孕体器官形成期结束以后的有害影响。子对孕体器官形成期结束以后的有害影响。胚胎毒性（胚胎毒性（embryo-fetal toxicityembryo-fetal toxicity）.发育生物体死亡（发育生物体死亡（Death of the Developing Organism）生长改变（生长改变（Altered Growth-Growth Retardation)结构异常（结构异常（Structural Abnormality）功能缺陷（功能缺陷（Functional Deficiency）一、基本概念一、基本概念发发育育毒毒性性（Developmental toxicity）：出出生生前前后后接接触触有有害害因因素素，子子代代个个体体发发育育为为成成体体之之前前诱诱发发的的任任何何有有害害影影响。主要表现：响。主要表现：22着床着床受精卵未发育即死亡受精卵未发育即死亡胚泡未着床即死亡胚泡未着床即死亡早早孕丢失早早孕丢失被吸收或自然流产被吸收或自然流产前前发育至某一阶段死亡发育至某一阶段死亡后后死胎死胎早期早期晚期晚期包括生理、生化、免疫、行为、智力等方面的异常。包括生理、生化、免疫、行为、智力等方面的异常。当胎儿生长发育指标低于正常对照均值当胎儿生长发育指标低于正常对照均值2个标准差时，可认定为生长迟缓。个标准差时，可认定为生长迟缓。.一、基本概念一、基本概念出生缺陷（出生缺陷（birth defectbirth defect）指婴儿出生前即已形成的发育障碍，包括形态结构异指婴儿出生前即已形成的发育障碍，包括形态结构异常（畸形）和功能缺陷（如智力低下，代谢和行为的异常（畸形）和功能缺陷（如智力低下，代谢和行为的异常）。常）。先天性心脏病、唇腭裂、神经管畸形、尿道下裂、隐睾先天性心脏病、唇腭裂、神经管畸形、尿道下裂、隐睾症、低出生体重等。症、低出生体重等。23.一、基本概念一、基本概念不良妊娠结局不良妊娠结局（adverse pregnancy outcomes）指妊娠后不能产生外观和功能正常的子代，包括所有的指妊娠后不能产生外观和功能正常的子代，包括所有的不良结果，如流产、死胎、死产、宫内生长迟缓、发育异不良结果，如流产、死胎、死产、宫内生长迟缓、发育异常、新生儿和婴幼儿期死亡等。常、新生儿和婴幼儿期死亡等。24.二、发育毒性作用的特点和影响因素二、发育毒性作用的特点和影响因素*p机机体体不不同同系系统统和和器器官官的的形形成成与与发发育育不不完完全全同同步步；分分娩娩时时多多数数器器官官胎胎儿儿期期发发育育成成熟熟，但但神神经经系系统统、生生殖殖系系统统直直到到儿童期、少年期、性成熟期才告完成。儿童期、少年期、性成熟期才告完成。p不同化学毒物作用于不同发育阶段，产生不同效应；不同化学毒物作用于不同发育阶段，产生不同效应；p最容易引起畸形的阶段是器官形成期。最容易引起畸形的阶段是器官形成期。25（一）发育各阶段发育毒性作用的特点和致畸敏感期（一）发育各阶段发育毒性作用的特点和致畸敏感期.（一）发育各阶段发育毒性作用的特点和致畸敏感期（一）发育各阶段发育毒性作用的特点和致畸敏感期1.着床前期着床前期2.器官形成期器官形成期3.胎儿期胎儿期4.围生期和出生后的发育期围生期和出生后的发育期26二、发育毒性作用的特点和影响因素二、发育毒性作用的特点和影响因素*.1.1.着床前期着床前期从受精时算起，到完成着床之前从受精时算起，到完成着床之前;人类为第人类为第11121112天，啮齿类动物为前天，啮齿类动物为前6 6天天;很少发生特异的致畸效应很少发生特异的致畸效应 ，未分化细胞受化学毒物未分化细胞受化学毒物损伤而致胚泡死亡损伤而致胚泡死亡，又称，又称着床前丢失着床前丢失;也有着床前期接触毒物导致胎儿畸形的例子也有着床前期接触毒物导致胎儿畸形的例子,如环氧如环氧乙烷，甲基亚硝脲等；乙烷，甲基亚硝脲等；27（一）发育各阶段发育毒性作用的特点和致畸敏感期（一）发育各阶段发育毒性作用的特点和致畸敏感期二、发育毒性作用的特点和影响因素二、发育毒性作用的特点和影响因素*.二、发育毒性作用的特点和影响因素二、发育毒性作用的特点和影响因素*2.器官形成期器官形成期孕体着床后直到硬腭闭合的一段时间；孕体着床后直到硬腭闭合的一段时间；致畸敏感期或致畸作用危险期；致畸敏感期或致畸作用危险期；此阶段受损后果：此阶段受损后果：28（一）发育各阶段发育毒性作用的特点和致畸敏感期（一）发育各阶段发育毒性作用的特点和致畸敏感期器官结构畸形（最突出）器官结构畸形（最突出）胚胎死亡和生长迟缓胚胎死亡和生长迟缓 吸收胎（吸收胎（resorptionresorption）流产（流产（abortionabortion）为什么为什么“反应停反应停”事件的典型后果是海豹畸形事件的典型后果是海豹畸形？.3.胎儿期胎儿期器器官官形形成成结结束束（以以硬硬腭腭闭闭合合为为标标志志）后后即即进进入入胎胎儿儿期期（人类从第（人类从第56 58天起），直到分娩。天起），直到分娩。胎儿期以组织分化、生长和生理学的成熟为主。胎儿期以组织分化、生长和生理学的成熟为主。胎胎儿儿期期外外源源化化学学物物的的不不良良作作用用主主要要表表现现为为：全全身身生生长长迟迟缓缓、特特异异的的功功能能障障碍碍（免免疫疫、中中枢枢神神经经系系统统、生生殖殖）、经胎盘致癌和偶见死胎。经胎盘致癌和偶见死胎。29（一）发育各阶段发育毒性作用的特点和致畸敏感期（一）发育各阶段发育毒性作用的特点和致畸敏感期二、发育毒性作用的特点和影响因素二、发育毒性作用的特点和影响因素*.4.围生期和出生后的发育期围生期和出生后的发育期研研究究较较多多的的是是发发育育免免疫疫毒毒性性、神神经经行行为为发发育育异异常和儿童期肿瘤。常和儿童期肿瘤。围生期还是一生中对致癌物最敏感的时期；围生期还是一生中对致癌物最敏感的时期；30（一）发育各阶段发育毒性作用的特点和致畸敏感期（一）发育各阶段发育毒性作用的特点和致畸敏感期二、发育毒性作用的特点和影响因素二、发育毒性作用的特点和影响因素*.二、发育毒性作用的特点和影响因素二、发育毒性作用的特点和影响因素*（二）发育毒性的剂量（二）发育毒性的剂量-反应模式和阈值问题反应模式和阈值问题311.1.在在远远低低于于胚胚胎胎致致死死剂剂量量下下即即可可出出现现致致畸畸，甚甚至至全全窝窝致致畸畸。（高高度致畸，较少见）度致畸，较少见）2.2.除除了了在在较较高高剂剂量量几几乎乎全全窝窝胚胚胎胎死死亡亡外外，正正常常胎胎、生生长长迟迟缓缓和和结结构畸形同时存在。（较常见）构畸形同时存在。（较常见）3.3.有有生生长长迟迟缓缓和和胚胚胎胎致致死死但但没没有有畸形发生。畸形发生。.（三）发育毒性的物种差异（三）发育毒性的物种差异l一一种种化化学学物物对对不不同同物物种种的的致致畸畸作作用用可可能能不不一一致致，对对不不同同动动物物并并不不一一定定都都具具有有致致畸畸作作用用，引引起起畸畸形形的类型也可能不同。的类型也可能不同。l造造成成差差异异的的原原因因：不不同同物物种种之之间间代代谢谢变变化化、胎胎盘盘种类、胚胎发育速度和方式存在差异。种类、胚胎发育速度和方式存在差异。32二、发育毒性作用的特点和影响因素二、发育毒性作用的特点和影响因素*.三、母体毒性与发育毒性三、母体毒性与发育毒性（一）母体因素对发育毒性的影响（一）母体因素对发育毒性的影响p母体毒性母体毒性（matermal toxicity）是是指化学毒物对孕母产指化学毒物对孕母产生的损伤作用，表现为生的损伤作用，表现为增重减慢、功能异常、临床症状，增重减慢、功能异常、临床症状，甚至死亡。甚至死亡。目前常用目前常用增重减慢增重减慢和和死亡率死亡率来表示。来表示。p影影响响发发育育的的母母体体因因素素包包括括：遗遗传传、疾疾病病、营营养养、应应激激、对胎盘的对胎盘的毒性。毒性。33.三、母体毒性与发育毒性三、母体毒性与发育毒性（二）母体毒性与发育毒性的关系（二）母体毒性与发育毒性的关系1.1.具有胚胎毒性，但无母体毒性。具有胚胎毒性，但无母体毒性。2.2.出现胚胎毒性也出现母体毒性。出现胚胎毒性也出现母体毒性。3.3.具有母体毒性，但不具有致畸作用。具有母体毒性，但不具有致畸作用。4.4.在一定剂量下即无母体毒性，也不表现胚胎毒在一定剂量下即无母体毒性，也不表现胚胎毒性。性。34.四、父源性发育毒性四、父源性发育毒性（一）父源性发育毒性的主要表现（一）父源性发育毒性的主要表现l父源性出生缺陷（父源性出生缺陷（Paternal Birth DefectPaternal Birth Defect）：）：遗传缺陷、遗传缺陷、年龄、环境暴露因素等通过父亲对发育个体产生不良影响。年龄、环境暴露因素等通过父亲对发育个体产生不良影响。l引起父原性出生缺陷的因素：引起父原性出生缺陷的因素：遗传缺陷遗传缺陷年龄因素年龄因素外界暴露因素（职业和环境暴露、化疗和放疗、不良嗜外界暴露因素（职业和环境暴露、化疗和放疗、不良嗜好）好）35.四、父源性发育毒性四、父源性发育毒性（一）父源性发育毒性的主要表现（一）父源性发育毒性的主要表现l父源性发育毒性的主要表现：父源性发育毒性的主要表现：自然流产或出生缺陷自然流产或出生缺陷儿童期肿瘤儿童期肿瘤男女出生比例失调。男女出生比例失调。36.五、已知的人类发育毒物或致畸物五、已知的人类发育毒物或致畸物37见表见表9-3 已知的人类发育毒物或致畸物已知的人类发育毒物或致畸物.第三节第三节 致畸（发育毒性）作用机致畸（发育毒性）作用机制制 38.致畸（发育毒性）作用机制：致畸（发育毒性）作用机制：基因突变与染色体畸变基因突变与染色体畸变干扰基因表达干扰基因表达 细胞损伤与死亡细胞损伤与死亡 干扰细胞干扰细胞-细胞交互作用细胞交互作用39.致畸（发育毒性）作用机制：致畸（发育毒性）作用机制：通过胎盘毒性引起发育毒性通过胎盘毒性引起发育毒性干扰母体稳态干扰母体稳态发育免疫毒性机制发育免疫毒性机制发育神经毒性机制发育神经毒性机制40.第四节第四节 发育毒性和致畸作用试验与评价发育毒性和致畸作用试验与评价*.哺乳动物发育毒性试验哺乳动物发育毒性试验 人群流行病学调查人群流行病学调查发育毒性替代实验发育毒性替代实验 化学毒物的结构与活性资料化学毒物的结构与活性资料外源化学物发育毒性的评价外源化学物发育毒性的评价.一、动物发育毒性试验一、动物发育毒性试验*v三三段段生生殖殖毒毒性性试验，1966年年，美美国国FDA提提出出。（评价价药物的生殖物的生殖发育毒性）育毒性）v 一一代代或或多多代代生生殖殖毒毒性性试验，由由美美国国EPA提提出出，用用于于评价食品添加价食品添加剂、农药及其他化学物及其他化学物。.44生殖发育过程及三段生殖毒性试验生殖发育过程及三段生殖毒性试验断乳断乳分娩分娩硬腭闭合硬腭闭合着床着床受孕受孕检查生殖功能检查生殖功能配子发育与成熟配子发育与成熟交配行为交配行为受精受精检查雌性动物检查雌性动物生殖功能、胚生殖功能、胚胎着床前发育胎着床前发育着床着床雌性动物生殖雌性动物生殖功能、胎体发功能、胎体发育、器官形成育、器官形成雌性动物生殖雌性动物生殖功能、胎体发功能、胎体发育生长、器官育生长、器官发育生长发育生长雌性动物生殖雌性动物生殖功能、新生仔对功能、新生仔对宫外生活的适应宫外生活的适应断乳前的发育生长断乳前的发育生长断乳后的生长发育断乳后的生长发育独立生活的适应独立生活的适应达到完全的性功能达到完全的性功能生育力和早期胚胎发育毒性生育力和早期胚胎发育毒性(一般生殖毒性试验一般生殖毒性试验)胚体胚体-胎体毒性试验胎体毒性试验（致畸试验）（致畸试验）出生前后发育毒性出生前后发育毒性（围产期毒性试验）（围产期毒性试验）.三段生殖毒性试验示意图三段生殖毒性试验示意图45I I段：段：生育力和早期胚胎发育毒性试验生育力和早期胚胎发育毒性试验(一般生殖毒性试验一般生殖毒性试验)段：段：胚体胚体-胎体毒性试验胎体毒性试验(致畸试验致畸试验)段：段：出生前后发育毒性试验出生前后发育毒性试验(围生期毒性试验围生期毒性试验).三段生殖毒性试验三段生殖毒性试验.雌鼠受孕成功的判定：雌鼠受孕成功的判定：.48胎盘兰显示妊娠胎盘兰显示妊娠5d5d小鼠子宫着床点小鼠子宫着床点1.1.缺指、短指畸形；缺指、短指畸形；2.2.短肢畸形，生长迟缓；短肢畸形，生长迟缓；3.3.缺肢畸形；缺肢畸形；4.4.枕骨发育不良，脑膨出枕骨发育不良，脑膨出.胎鼠取出的过程胎鼠取出的过程胎鼠内脏检查胎鼠内脏检查胎鼠骨骼检查胎鼠骨骼检查.（一）发育毒性的流行病学（一）发育毒性的流行病学p导致罕见不良妊娠结局的事件导致罕见不良妊娠结局的事件p多数情况通过病历对照研究或队列研究寻找关联关系；多数情况通过病历对照研究或队列研究寻找关联关系；p目的：目的：寻找寻找导致出生缺陷的原因导致出生缺陷的原因；了解了解出生缺陷的发生趋势；出生缺陷的发生趋势；引起公众注意，并保护公众健康引起公众注意，并保护公众健康。二、流行病学研究和人类发育毒物的确定二、流行病学研究和人类发育毒物的确定.（二）人类发育毒物的确定（二）人类发育毒物的确定p据据估估计计目目前前经经过过动动物物致致畸畸实实验验化化学学物物有有41004100多多种种，约约66%66%没没有有致致畸畸作作用用，7%7%对对一一种种以以上上动动物物有有致致畸畸作作用用，18%18%对大多数受试动物有致畸性，对大多数受试动物有致畸性，9%9%结果可疑。结果可疑。p因因为为没没有有完完全全合合适适的的动动物物模模型型，在在确确定定人人类类新新的的致致畸畸物物时时，不不能能把把动动物物实实验验的的结结果果轻轻易易外外推推到到人人，而而应应以以流行病学研究和有控制的临床研究结果为主要依据。流行病学研究和有控制的临床研究结果为主要依据。二、流行病学研究和人类发育毒物的确定二、流行病学研究和人类发育毒物的确定.（二）人类发育毒物的确定（二）人类发育毒物的确定二、流行病学研究和人类发育毒物的确定二、流行病学研究和人类发育毒物的确定确认人类致畸物的标准：确认人类致畸物的标准：1.一种特殊的缺陷或几种缺陷并发（综合征）的频率增加；一种特殊的缺陷或几种缺陷并发（综合征）的频率增加；2.缺陷的增加与某种已知的环境改变相关联（如一种新药缺陷的增加与某种已知的环境改变相关联（如一种新药的广泛使用）；的广泛使用）；3.在妊娠的特殊阶段已知暴露于某种环境改变，产生有特在妊娠的特殊阶段已知暴露于某种环境改变，产生有特征性缺陷的综合征；征性缺陷的综合征；4.缺少妊娠是引起特征性缺陷的其他共同的因子。缺少妊娠是引起特征性缺陷的其他共同的因子。.（三）致畸物及发育毒物的危险性分类（三）致畸物及发育毒物的危险性分类二、流行病学研究和人类发育毒物的确定二、流行病学研究和人类发育毒物的确定基准基准A A类类B B类类C C类类D D类类1.1.最小母体中毒最小母体中毒剂量与最小致畸剂量与最小致畸剂量的比值剂量的比值远大于远大于1 111或两剂量间或两剂量间有很大重叠有很大重叠11母体中毒时物母体中毒时物致畸致畸2.2.畸胎率畸胎率高，与剂量有高，与剂量有关关高，与剂量无高，与剂量无关关低，与剂量有低，与剂量有关关3.3.较低剂量时畸较低剂量时畸形的类型形的类型有特定的器官有特定的器官系统系统一般为多发性，一般为多发性，也可能有特定也可能有特定的特点的特点无特异性，广无特异性，广泛多发泛多发4.4.靶细胞靶细胞特定细胞特定细胞特定细胞特定细胞泛化、非特定泛化、非特定细胞细胞不详不详5.5.安全系数范围安全系数范围 400400300300250250100100表表9-5 9-5 化学物致畸作用的分类（化学物致畸作用的分类（ILSIILSI）.1.1.大鼠全胚胎培养大鼠全胚胎培养（whole embryo culture,WEC）2.2.胚胎细胞微团培养胚胎细胞微团培养（micromass culture)3.3.小鼠胚胎干细胞实验小鼠胚胎干细胞实验(mouse embryonic stem cell test，EST)4.4.发育毒性的体内预筛实验发育毒性的体内预筛实验（C.K试验）试验）三、发育毒性的的初筛和替代实验三、发育毒性的的初筛和替代实验WEC:从从孕孕期期第第910天天大大鼠鼠子子宫取取出出胚胚胎胎，剥剥去去Reichert膜膜，放放入入培培养养液液中中加加入入受受试物物，在在含含O2、CO2、N2环境境中中旋旋转培培养养。观察察胚胚胎胎发育育情情况况，记录胚胚胎胎存存活活，检测胚胚芽芽、卵卵黄黄囊囊直直径径、体体节和和体体长等等。用用于于筛试化化学学物的物的发育毒性、探育毒性、探讨其其剂量反量反应关系和作用机制。关系和作用机制。胚胚胎胎细胞胞微微团培培养养（MMC）:孕孕期期第第11天天的的大大鼠鼠胚胚胎胎取取得得代代表表CNS的的原原代代中中脑细胞胞微微团、肢肢芽芽区区或或其其他他区区的的细胞胞微微团，在在培培养养瓶瓶中中分分别加加入入不不同同浓度度的的受受试物物共共同同培培养养5天。天。评价化学毒物的价化学毒物的细胞毒性和胞毒性和发育毒性。育毒性。小小鼠鼠胚胚胎胎干干细胞胞实验（EST）:小小鼠鼠胚胚泡泡内内细胞胞团衍衍生生的的胚胚胎胎干干细胞胞在在特特定定条条件件下下，可可定定向向分分化化为机机体体多多种种细胞胞，因因此此可可作作为生生物物测试系系统，用用于于哺哺乳乳动物物细胞胞分分化化、组织形成形成过程的程的发育毒性研究。育毒性研究。.思考题：发育毒性的概念是什么？影响发育毒性的因素有哪些？发育毒性的概念是什么？影响发育毒性的因素有哪些？外源化学物引起发育毒性的机制可能有哪些？外源化学物引起发育毒性的机制可能有哪些？如何评价外源化学物的发育毒性？如何评价外源化学物的发育毒性？55.小小结结The end!.