第七章黄酮类化合物课件

第七章第七章 黄酮类化合物黄酮类化合物（Flavonoids）1、概述、概述2、黄酮类化合物的理化性质及显色反应、黄酮类化合物的理化性质及显色反应3、黄酮类化合物的提取与分离、黄酮类化合物的提取与分离4、黄酮类化合物的检识与结构鉴定、黄酮类化合物的检识与结构鉴定5、结构研究实例、结构研究实例1.一、概述一、概述黄酮类化合物广泛存在于自然界黄酮类化合物广泛存在于自然界黄酮类化合物多具有颜色黄酮类化合物多具有颜色在自然界中，黄酮类化合物的主要存在形式是与糖结合成苷，在自然界中，黄酮类化合物的主要存在形式是与糖结合成苷，也有游离体也有游离体黄酮类化合物的生理活性多种多样：截止黄酮类化合物的生理活性多种多样：截止2003年，总数超过年，总数超过9000个个2.（一）基本结构与分类（一）基本结构与分类1、定义：、定义：黄酮类化合物主要是指基本母核为黄酮类化合物主要是指基本母核为2-苯基色原酮类化合物苯基色原酮类化合物（狭义）（狭义）3.黄黄酮酮类类化化合合物物泛泛指指两两个个具具有有酚酚羟羟基基的的苯苯环环（A-与与B-核核）通过中央的三碳原子相互连接而形成的一系列化合物（广义）通过中央的三碳原子相互连接而形成的一系列化合物（广义）4.2、结构分类：、结构分类：二氢查耳酮类二氢查耳酮类（Dihydrochalcones）黄烷黄烷-3-3，4-4-二醇类二醇类（Flavan-3,4-diols）查耳酮类查耳酮类（Chalcones）二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类（Flavanonols）二氢异黄酮类二氢异黄酮类（Isoflavanones ）二氢黄酮类二氢黄酮类（Flavanones）异黄酮类异黄酮类（Isoflavones）黄酮醇类黄酮醇类（Flavonol）黄酮类黄酮类（Flavones）三碳链部分三碳链部分三碳链部分三碳链部分名称名称名称名称名称名称名称名称三碳链部分三碳链部分三碳链部分三碳链部分 黄烷黄烷-3-3-醇类醇类（Flavan-3-ols）橙酮类橙酮类（Aurones)双苯吡酮类双苯吡酮类（Xanthones)5.1 1）黄酮（醇）类）黄酮（醇）类 flavones（flavonol）黄酮黄酮 黄酮醇黄酮醇母核：母核：6.木犀草素木犀草素（luteolin）抗菌作用，存在于菊花、浮萍、抗菌作用，存在于菊花、浮萍、忍冬藤等中药中忍冬藤等中药中 代表化合物：代表化合物：7.槲皮素槲皮素用于治疗气管炎抗用于治疗气管炎抗炎及止咳祛痰作用炎及止咳祛痰作用 用用于于治治疗疗毛毛细细血血管管脆脆弱弱引引起起的的出出血血病病，并并用用作作高高血血压压的的辅辅助治疗剂。助治疗剂。3芸香糖芸香糖 芦丁芦丁（Rutin）（芸香苷）（芸香苷）代表化合物：代表化合物：8.2）二氢黄酮（醇）类）二氢黄酮（醇）类 flavanoes（flavanononls）二氢黄酮二氢黄酮 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 9.代表化合物：代表化合物：橙皮素橙皮素橙皮苷橙皮苷10.3）异黄酮（）异黄酮（isoflavones）、二氢异黄酮）、二氢异黄酮（isoflavanones)类类母核：母核：异黄酮异黄酮二氢异黄酮二氢异黄酮11.大豆素大豆素大豆苷大豆苷葛根素葛根素代表化合物：代表化合物：12.4 4）查耳酮）查耳酮(chalcones)、二氢查耳酮、二氢查耳酮(dihydrochalcones)类类母核：母核：查耳酮查耳酮 二二氢查耳酮氢查耳酮 13.在酸性条件下，在酸性条件下，2-OH查耳酮转变为无色的二氢黄酮，查耳酮转变为无色的二氢黄酮，碱化后，转为深黄色的碱化后，转为深黄色的2-OH查耳酮，二者可相互转化。查耳酮，二者可相互转化。2-OH查耳酮查耳酮二氢黄酮二氢黄酮14.5）双黄酮）双黄酮 二分子黄酮衍生物聚合生成的二聚物，多分布于裸子二分子黄酮衍生物聚合生成的二聚物，多分布于裸子植物，尤以松柏纲、银杏纲和凤尾纲等植物中最普遍。植物，尤以松柏纲、银杏纲和凤尾纲等植物中最普遍。C-C连结连结 C 5-C8、C 8-C8连接方式连接方式 醚链连结醚链连结 C4-O-C615.银杏叶中银杏素（银杏叶中银杏素（gikgetin）具有解痉、降压、扩冠作用。）具有解痉、降压、扩冠作用。16.6）花色素类（）花色素类（anthocyanidins）天竺葵素天竺葵素 矢车菊素矢车菊素 飞燕草素飞燕草素17.7）黄烷醇类）黄烷醇类黄烷黄烷3 3醇类醇类（flavan3ols）黄烷黄烷3 3、4 4二醇类二醇类（flavan3、4diols）3 3醇醇 3 3、4 4二醇类二醇类18.儿茶素儿茶素抗脂肪肝作用、抗癌和抗脂肪肝作用、抗癌和Vp样作用样作用19.8）双苯吡酮类（）双苯吡酮类（Xanthones）芸果香叶中异芒果素芸果香叶中异芒果素（isomengiferin）具有止咳祛痰具有止咳祛痰20.9 9）橙酮类（奥弄）（）橙酮类（奥弄）（aurones）植物硫磺菊中硫磺菊素植物硫磺菊中硫磺菊素（Sulphuretin）21.3、黄酮类化合物中常见的取代基、黄酮类化合物中常见的取代基羟基羟基甲氧基甲氧基亚甲二氢基亚甲二氢基 OCH2O-异戊烯基异戊烯基常和糖形成苷常和糖形成苷22.黄酮苷：黄酮苷：糖的种类：糖的种类：单糖苷单糖苷双糖苷双糖苷三糖苷三糖苷酰化糖苷酰化糖苷糖的连接方式：糖的连接方式：O-糖苷糖苷C-糖苷糖苷23.黄酮苷中常见的单糖：黄酮苷中常见的单糖：24.黄酮苷中常见的双糖：黄酮苷中常见的双糖：25.4、黄酮类化合物命名、黄酮类化合物命名26.27.（二）黄酮类化合物的生物合成基本途径（二）黄酮类化合物的生物合成基本途径28.29.30.（三）黄酮类化合物的生理活性（三）黄酮类化合物的生理活性1、对心血管系统的作用、对心血管系统的作用 芦芦丁丁、橙橙皮皮苷苷、d-儿儿茶茶素素等等：维维生生素素P一一样样作作用用，降降低低血血管管脆脆性性及及异异常常的的通通透透性性，可可用用作作防防治治高高血血压压及及动动脉脉硬硬化化的的辅辅助助治治疗剂。疗剂。芦丁、槲皮素、葛根素等：扩冠作用，临床用于治疗冠心病芦丁、槲皮素、葛根素等：扩冠作用，临床用于治疗冠心病31.2、抗肝脏毒性作用、抗肝脏毒性作用 临床用来治疗急性、慢性肝炎、肝硬化及代谢中毒性肝损伤临床用来治疗急性、慢性肝炎、肝硬化及代谢中毒性肝损伤32.3、抗癌作用、抗癌作用 33.4、雌性激素样作用、雌性激素样作用 34.5、抗菌及抗病毒作用、抗菌及抗病毒作用 木犀草素、黄芹苷等：木犀草素、黄芹苷等：一定程度的抗菌作用一定程度的抗菌作用 槲皮素、二氢槲皮素及山萘酚等：槲皮素、二氢槲皮素及山萘酚等：抗病毒作用抗病毒作用6、解痉作用、解痉作用 异异甘甘草草素素及及大大豆豆素素等等具具有有类类似似罂罂粟粟碱碱解解除除平平滑滑肌肌痉痉挛挛作作用用，大大豆豆苷苷、葛葛根根黄黄素素等等葛葛根根黄黄酮酮类类成成分分可可以以缓缓解解高高血血压压患患者者的的头头痛等症状。痛等症状。7、泻下作用、泻下作用 35.二、黄酮类化合物的理化性质及显色反应二、黄酮类化合物的理化性质及显色反应（一）性状（一）性状性状：性状：多为结晶性固体，少数（如黄酮苷类）为无定形粉末。多为结晶性固体，少数（如黄酮苷类）为无定形粉末。旋光性：旋光性：二二氢氢黄黄酮酮、二二氢氢黄黄酮酮醇醇、黄黄烷烷及及黄黄烷烷醇醇有有旋旋光光性性。苷苷类类由于在结构中引入糖的分子，故均有旋光性，且多为左旋。由于在结构中引入糖的分子，故均有旋光性，且多为左旋。36.颜色：颜色：黄黄酮酮类类化化合合物物的的颜颜色色与与分分子子中中是是否否存存在在交交叉叉共共轭轭体体系系及及助色团（助色团（-OH、-CH3）等的类型、数目及取代位置有关。）等的类型、数目及取代位置有关。7-位位或或4-位位引引入入-OH、-OCH3等等供供电电基基，而而使使化化合合物物的的颜色加深颜色加深37.黄酮、黄酮醇及其苷类：黄酮、黄酮醇及其苷类：灰黄灰黄-黄色黄色查耳酮：查耳酮：黄黄-橙黄色橙黄色二氢黄酮、二氢黄酮醇：二氢黄酮、二氢黄酮醇：不显色不显色异黄酮类：异黄酮类：显微黄色显微黄色花色苷及其苷元：花色苷及其苷元：红（红（pH8.5）38.（二）溶解度（二）溶解度苷元：苷元：难难溶溶或或不不溶溶于于水水，易易溶溶于于有有机机溶溶剂剂及及稀稀碱碱液液中中。黄黄酮酮、黄黄酮酮醇醇、查查尔尔酮酮等等平平面面型型分分子子难难溶溶于于水水；二二氢氢黄黄酮酮、二二氢氢黄黄酮醇等因系非平面型分子，水溶性稍大。酮醇等因系非平面型分子，水溶性稍大。黄酮苷：黄酮苷：溶溶于于水水、乙乙醇醇、甲甲醇醇等等强强极极性性溶溶剂剂中中，羟羟基基越越多多，糖糖链链越长，则水溶性越大。越长，则水溶性越大。39.（三）酸性和碱性（三）酸性和碱性1、酸性：、酸性：因因分分子子中中多多有有酚酚羟羟基基，故故显显酸酸性性，可可溶溶于于碱碱性性水水溶溶液液、吡吡啶啶、甲甲酰酰胺胺及及二二甲甲基基甲甲酰酰胺胺中中。酚酚羟羟基基数数目目及及位位置置对对酸酸性性影响：影响：7或或4-OH 5-OH 一般酚一般酚OH 7,4-OH 7或或4-OH 一般酚一般酚OH 5-OH40.41.2、碱性：、碱性：吡吡喃喃酮酮环环上上的的1-1-位位氧氧原原子子，因因有有未未共共用用的的电电子子对对，故故表表现现微微弱弱的的碱碱性性，可可与与强强无无机机酸酸，如如浓浓硫硫酸酸、盐盐酸酸等等生生成成盐盐，但生成的盐极不稳定，加水后即可分解。但生成的盐极不稳定，加水后即可分解。黄黄酮酮类类化化合合物物溶溶于于浓浓硫硫酸酸中中生生成成的的盐盐，常常常常表表现现特特殊殊的的颜色，可用于鉴别。颜色，可用于鉴别。某某些些甲甲氧氧基基黄黄酮酮溶溶于于浓浓盐盐酸酸中中显显深深黄黄色色，且且可可与与生生物物碱碱沉淀试剂生成沉淀。沉淀试剂生成沉淀。42.（四）显色反应（四）显色反应1、还原反应：、还原反应：（1）盐酸）盐酸-镁粉反应镁粉反应43.（2 2）四氢硼钠反应）四氢硼钠反应44.2、金属盐类试剂的络合反应：、金属盐类试剂的络合反应：有有上上述述结结构构的的化化合合物物与与铝铝盐盐、铅铅盐盐、锆锆盐盐、镁镁盐盐等等试试剂剂反应生成有色络合物反应生成有色络合物45.（1）三氯化铝显色反应：）三氯化铝显色反应：与与AlCl3反应显黄色或黄色加深，反应显黄色或黄色加深，UV下呈现荧光增强。下呈现荧光增强。46.（2）镁盐（）镁盐（Mg(OAc)2)：二氢黄酮（醇）：紫外灯下呈天蓝色荧光二氢黄酮（醇）：紫外灯下呈天蓝色荧光。（3）铅盐）铅盐 黄黄-红色沉淀红色沉淀 醋酸铅：邻二酚羟基黄酮醋酸铅：邻二酚羟基黄酮 碱式醋酸铅：所有黄酮碱式醋酸铅：所有黄酮47.（4）锆盐）锆盐-枸橼酸显色反应：枸橼酸显色反应：二氯氧锆（二氯氧锆（ZrOCl2)。3-或或5-OH黄酮：生成黄色络合物黄酮：生成黄色络合物 3-OH络合物比络合物比5-OH络合物稳定络合物稳定 加入枸橼酸（柠檬酸）加入枸橼酸（柠檬酸）5-OH络合物解离络合物解离48.用显色反应鉴别下列化合物：用显色反应鉴别下列化合物：49.（5）氨性氯化锶（）氨性氯化锶（SrCl2)反应：反应：在氨性甲醇溶液中，邻二酚羟基黄酮类化合物生成绿色在氨性甲醇溶液中，邻二酚羟基黄酮类化合物生成绿色-棕色棕色-黑色沉淀。黑色沉淀。（6）三氯化铁（）三氯化铁（FeCl3）反应）反应 酚羟基化合物：含有氢键缔合的酚羟基，颜色才明显酚羟基化合物：含有氢键缔合的酚羟基，颜色才明显50.3、硼酸显色反应、硼酸显色反应51.4、碱性试剂显色反应、碱性试剂显色反应 显黄色或黄色加深，显黄色或黄色加深，UV下显荧光或荧光增强。下显荧光或荧光增强。（1）NaOH （2）NH4OH：处理后的变色在空气中褪去。：处理后的变色在空气中褪去。52.总结：总结：盐酸盐酸-镁粉：黄酮（醇）、二氢黄酮镁粉：黄酮（醇）、二氢黄酮四氢硼钠：二氢黄酮四氢硼钠：二氢黄酮AlCl3反应：反应：3-OH、5-OH和邻二酚羟基和邻二酚羟基Mg(OAc)2反应：二氢黄酮（醇）反应：二氢黄酮（醇）ZrOCl2+柠檬酸：判断柠檬酸：判断3-OH或或5-OH硼酸显色反应：硼酸显色反应：5-OH黄酮或黄酮或2-OH查耳酮查耳酮碱性试剂显色反应：黄酮类化合物碱性试剂显色反应：黄酮类化合物53.习题：习题：写出下列化合物的结构式并用化学反应鉴别写出下列化合物的结构式并用化学反应鉴别1、5,7,4-三羟基三羟基-黄酮醇和黄酮醇和5,7,3,4-三羟基三羟基-黄酮醇黄酮醇2、5,7,4-三羟基三羟基-黄酮和黄酮和5,7,4-三羟基三羟基-黄酮黄酮3、5,7,4-三羟基三羟基-异黄酮异黄酮-7-O-葡萄糖苷葡萄糖苷54.三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离（一）提取（一）提取 黄黄酮酮类类化化合合物物在在花花、叶叶、果果等等组组织织中中，一一般般多多以以苷苷的的形形式存在，式存在，而在木部坚硬组织中，则多以游离苷元形式存在。而在木部坚硬组织中，则多以游离苷元形式存在。苷及极性稍大的苷元提取溶剂：苷及极性稍大的苷元提取溶剂：丙酮、醋酸乙酯、乙醇、甲醇、水或极性较大的混合溶剂丙酮、醋酸乙酯、乙醇、甲醇、水或极性较大的混合溶剂苷元提取溶剂：苷元提取溶剂：氯仿、乙醚、醋酸乙酯等氯仿、乙醚、醋酸乙酯等甲氧基苷元提取溶剂：甲氧基苷元提取溶剂：苯苯55.常用粗提物的精制方法：常用粗提物的精制方法：溶剂萃取法溶剂萃取法 碱提取酸沉淀法碱提取酸沉淀法 炭粉吸附法炭粉吸附法56.1、溶剂萃取法：、溶剂萃取法：利用黄酮与杂质极性的不同，选用不同的溶剂进行萃取利用黄酮与杂质极性的不同，选用不同的溶剂进行萃取可达到精制纯化的目的。可达到精制纯化的目的。药材醇提液药材醇提液脂溶性杂质脂溶性杂质叶绿素、胡萝卜素等叶绿素、胡萝卜素等黄酮苷元黄酮苷元黄酮苷黄酮苷悬浮于水中悬浮于水中石油醚石油醚氯仿氯仿正丁醇正丁醇一方面去除杂质，另一方面将黄酮按极性大小分离。一方面去除杂质，另一方面将黄酮按极性大小分离。57.2、碱提取酸沉淀法：、碱提取酸沉淀法：由于黄酮苷易溶于碱性水，故可用碱性水提取，然后加由于黄酮苷易溶于碱性水，故可用碱性水提取，然后加酸使之沉淀出来。酸使之沉淀出来。58.石灰乳提取黄酮类化合物的优缺点：石灰乳提取黄酮类化合物的优缺点：优点：优点：使含有多羟基的鞣质，或含有羧基的果胶、粘液质等水溶使含有多羟基的鞣质，或含有羧基的果胶、粘液质等水溶性的杂质生成钙盐沉淀，不被溶出，有利于浸出液的纯化。性的杂质生成钙盐沉淀，不被溶出，有利于浸出液的纯化。缺点：缺点：浸出效果可能不如稀浸出效果可能不如稀NaOH水溶液，且有些黄酮类化合物水溶液，且有些黄酮类化合物可能与钙结合成不溶性物质不被溶出。可能与钙结合成不溶性物质不被溶出。注意：注意：在碱提酸沉法中，酸、碱的浓度不宜过高。碱性过高，破在碱提酸沉法中，酸、碱的浓度不宜过高。碱性过高，破坏母核；酸性过强，生成洋盐、坏母核；酸性过强，生成洋盐、59.3、碳粉吸附法：、碳粉吸附法：主要适用于苷类。可用沸水、沸甲醇、主要适用于苷类。可用沸水、沸甲醇、7%酚酚/水、水、15%酚酚/醇洗脱，大部分黄酮苷类可被醇洗脱，大部分黄酮苷类可被7%酚酚/水洗下。水洗下。60.（二）分离（二）分离 柱色谱柱色谱 梯度梯度pH萃取法萃取法 根据分子中某些特定官能团进行分离根据分子中某些特定官能团进行分离61.1）柱色谱法）柱色谱法 常用吸附剂或载体有硅胶、聚酰胺及纤维素粉等，也有常用吸附剂或载体有硅胶、聚酰胺及纤维素粉等，也有用氧化铝、氧化镁及硅藻土。用氧化铝、氧化镁及硅藻土。（1）硅胶柱色谱：）硅胶柱色谱：应用范围最广，主要适用于苷元，常用应用范围最广，主要适用于苷元，常用CHCl3-MeOH作作为流动相。当用为流动相。当用CHCl3-MeOH-H2O为流动相时，对于分离为流动相时，对于分离一些极性较大的苷类也适用。一些极性较大的苷类也适用。62.硅胶柱色谱，以硅胶柱色谱，以CHCl3-MeOH作为流动相时，硅胶柱上作为流动相时，硅胶柱上各种溶剂的洗脱能力：各种溶剂的洗脱能力：石油醚石油醚苯苯氯仿氯仿乙醚乙醚醋酸乙酯醋酸乙酯吡啶吡啶丙酮丙酮乙醇乙醇甲醇甲醇水水63.（2）聚酰胺柱色谱：）聚酰胺柱色谱：原理：原理：通过分子中的酰胺羰基与黄酮类化合物分子上的酚羟基通过分子中的酰胺羰基与黄酮类化合物分子上的酚羟基形成氢键缔合而产生吸附作用。形成氢键缔合而产生吸附作用。吸附的强度取决于分子中羟基的数目、位置及溶剂与黄吸附的强度取决于分子中羟基的数目、位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。聚酰胺柱上溶剂的洗脱能力：聚酰胺柱上溶剂的洗脱能力：水水 甲醇甲醇丙酮丙酮NaOH水溶液水溶液甲酰胺甲酰胺二甲基甲酰胺二甲基甲酰胺二糖苷二糖苷单糖苷单糖苷苷元苷元母核上增加母核上增加-OH，洗脱速度减慢（注意形成分子内氢键的特洗脱速度减慢（注意形成分子内氢键的特殊情况）殊情况）65.异黄酮异黄酮 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 黄酮黄酮 黄酮醇黄酮醇66.分子中芳香核、共轭双键多者吸附力强分子中芳香核、共轭双键多者吸附力强 如：查尔醇如：查尔醇 单糖苷单糖苷 双糖苷双糖苷 水性溶剂：双糖苷水性溶剂：双糖苷 单糖苷单糖苷 苷元苷元77.2、薄层色谱法、薄层色谱法 一般采用吸附薄层，吸附剂大多用硅胶和聚酰胺。一般采用吸附薄层，吸附剂大多用硅胶和聚酰胺。（1）硅胶薄层色谱：）硅胶薄层色谱：用于分离与鉴定弱极性黄酮类化合物用于分离与鉴定弱极性黄酮类化合物 分离苷元常用展开剂：甲苯分离苷元常用展开剂：甲苯-甲酸甲酯甲酸甲酯-甲酸、氯仿甲酸、氯仿-甲醇等。甲醇等。（2）聚酰胺薄层色谱：）聚酰胺薄层色谱：分离含游离酚羟基的黄酮苷与苷元。分离含游离酚羟基的黄酮苷与苷元。展开剂：展开剂：具有较强的极性，大多含有醇、酸或水具有较强的极性，大多含有醇、酸或水 如：如：乙醇乙醇-水（水（3:2）水水-乙醇乙醇-甲酸甲酸-乙酰丙酮（乙酰丙酮（5:1.5:1:0.5)78.3、高效薄层色谱法、高效薄层色谱法 分分离离和和检检识识效效果果比比TLC好。好。79.聚酰胺薄层聚酰胺薄层（乙醇（乙醇/水）水）80.（二）紫外及可见光谱在黄酮类鉴定中的应用（二）紫外及可见光谱在黄酮类鉴定中的应用一般研究程序：一般研究程序：测定试样在甲醇溶液中的测定试样在甲醇溶液中的UV光谱光谱测测定定试试样样在在甲甲醇醇溶溶液液中中加加入入各各种种诊诊断断试试剂剂后后得得到到的的UV及及可可见光谱见光谱各种各种UV-可见光谱图的对比分析可见光谱图的对比分析81.1、在甲醇中的紫外光谱、在甲醇中的紫外光谱-判断骨架类型判断骨架类型82.1）黄酮及黄酮醇类：带）黄酮及黄酮醇类：带I与带与带II图形相似图形相似（1）区别：带）区别：带I位置不同：位置不同：黄酮类：黄酮类：304-350 nm黄酮醇（黄酮醇（3-OH游离）：游离）：352-385 nm黄酮醇（黄酮醇（3-OH取代）：取代）：328-357 nm83.（2）变化规律：）变化规律：带带I：母核上引入母核上引入OH或或OCH3等供电基，红移等供电基，红移 3，5，7-三羟基黄酮（高良姜素）三羟基黄酮（高良姜素）359 3，5，7，4-四羟基黄酮（山奈酚）四羟基黄酮（山奈酚）367 3，5，7，3，4-五羟基黄酮（槲皮素）五羟基黄酮（槲皮素）370 3，5，7，3，4，5-六羟基黄酮（杨梅素）六羟基黄酮（杨梅素）374红红 移移84.带带II：主要受主要受A环影响，环影响，A-环上引入环上引入OH或或OCH3，红移；，红移；B-环上引入环上引入OH或或OCH3，仅改变峰形，仅改变峰形 A：黄酮黄酮 250 7-羟基黄酮羟基黄酮 252 5-羟基黄酮及羟基黄酮及5，7-二羟基黄酮二羟基黄酮 262 5，6，7-三羟基黄酮三羟基黄酮 274 5，7，8-三羟基黄酮三羟基黄酮 281红红 移移85.B：4氧取代：氧取代：单峰单峰 3，4二氧取代二氧取代 双峰（或肩峰）双峰（或肩峰）-OH：甲基化或苷化，紫移，特别是带：甲基化或苷化，紫移，特别是带I -OH：乙酰化，作用消失：乙酰化，作用消失86.2）查耳酮及橙酮：带）查耳酮及橙酮：带I很强，而带很强，而带II较弱较弱查耳酮：查耳酮：带带II：220-270 nm 带带I：340-390 引入引入OH或或OCH3，红移，尤其带，红移，尤其带I，2-OH影响最大影响最大 查耳酮查耳酮 312 4-羟基查耳酮羟基查耳酮 320 4-羟基查耳酮羟基查耳酮 350 2，4，4-三羟基查耳酮三羟基查耳酮 37087.88.3）异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇：）异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇：带带II 带带I，带，带I表现为肩峰表现为肩峰 异黄酮：带异黄酮：带II 245-270 nm 二氢黄酮、二氢黄酮醇：带二氢黄酮、二氢黄酮醇：带II：270-295 nm89.90.各类黄酮类化合物的各类黄酮类化合物的UV光谱数据：光谱数据：91.2、加入诊断试剂后的紫外光谱、加入诊断试剂后的紫外光谱 确定取代基确定取代基OH位置位置1）MeOH+MeONa 确定确定4-OH、3-OH 4-OH 带带I红移红移40-60 nm 峰强增强峰强增强 3-OH 带带I红移红移50-60 nm 强度下降强度下降 3，4-OH 带带I几分钟后衰减（几分钟后衰减（dec.）7-OH 带带I、带、带II之间（之间（320-330）肩峰）肩峰 92.93.94.95.96.2）MeOH+NaOAc 确定确定7-OH 7-OH 带带II红移红移5-20 nm97.98.3）MeOH+NaOAc+H3BO3 确定邻二酚确定邻二酚OH B环邻二酚环邻二酚OH 带带I红移红移12-30 nm A环邻二酚环邻二酚OH 带带II 红移红移5-10 nm99.100.4）MeOH+AlCl3及及AlCl3/HCl 确定确定3-OH,5-OH,邻二酚邻二酚OH络络合合物物稳稳定定性性：3-OH（黄黄酮酮醇醇）5-OH(黄黄酮酮）5-OH（二二氢氢黄酮）黄酮）邻二酚羟邻二酚羟 3-OH（二氢黄酮醇）（二氢黄酮醇）101.102.103.104.105.三）氢核磁共振在黄酮类结构分析中的应用三）氢核磁共振在黄酮类结构分析中的应用常用试剂：常用试剂：CDCl3,DMSO-d6,pyridine-d5等。等。DMSO-d6优点：优点：酚酚-OH信信号号区区别别明明显显，如如3、5、7-三三羟羟基基黄黄酮酮分分别别出出现现在在12.40（5-OH），10.93（7-OH），9.70（3-OH）ppm,+D2O消失。消失。缺点：缺点：沸点太高沸点太高可能使某些黄酮分解；可能使某些黄酮分解；易易吸吸水水，常常将将黄黄酮酮类类化化合合物物作作成成三三甲甲基基硅硅醚醚衍衍生生物物，溶溶于于CCl4中进行测定。中进行测定。106.1、A环质子环质子1）5，7-二羟基黄酮类化合物二羟基黄酮类化合物 H-6及及H-8分别作为二重峰（分别作为二重峰（J=2.5 Hz）出现在：出现在：5.7-6.9，H-6比比H-8位于高场。位于高场。7-OH成苷后，成苷后，H-6及及H-8均向低场位移。均向低场位移。107.108.2）7-羟基黄酮类化合物羟基黄酮类化合物 H-5：碳碳基基负负屏屏蔽蔽区区域域，比比其其他他芳芳香香质质子子位位于于低低场场，出出现现在在8.0附近，附近，J=9.0 Hz H-6:6.3-7.1，dd,J=2.5,9.0 Hz H-8:6.3-7.1，d,J=2.5 Hz109.110.111.2、B环质子环质子1）4-氧取代黄酮类化合物氧取代黄酮类化合物 H-2，6：7.1-8.1，d,J=8.5 Hz H-3，5：6.5-7.1，d,J=8.5 Hz112.113.2）3,4-二氧取代黄酮及黄酮醇二氧取代黄酮及黄酮醇 H-5：6.7-7.1，d,J=8.5 Hz H-2：7.2-7.9，d,J=2.5 Hz H-6：7.2-7.9，dd,J=2.5,8.5 Hz114.115.3）3,4,5-三氧取代黄酮类化合物三氧取代黄酮类化合物 H-2，H-6：6.5-7.5，s (3-或或5-取代不同时，取代不同时，d,J=2.0 Hz116.4）B环无取代黄酮类化合物环无取代黄酮类化合物 H-2，H-6：在较低场在较低场 H-3，4,5：在较高场在较高场117.3、C环质子环质子-区别不同类型黄酮类化合物的主要依据区别不同类型黄酮类化合物的主要依据1）黄酮类）黄酮类 H-3，6.30,s2）异黄酮类）异黄酮类 H-2，7.60-7.80，（，（DMSO-d6,8.5-8.7),s118.3）二氢黄酮类）二氢黄酮类 H-2：5.0-5.5，dd,Jtrans=11.0 Hz,Jcis=5.0Hz H-3：中心在：中心在2.8，-H（dd,J=17,11 Hz)-H（dd,J=17,5 Hz)119.4）四氢黄酮醇类（天然存在）四氢黄酮醇类（天然存在OH均为均为构型）构型）H-2,4.9，d,J=11.0 Hz H-3,4.3 d,J=11.0 Hz120.5）查耳酮类）查耳酮类 H-,6.7-7.4，d,J=17.0 Hz H-,7.3-7.7，d,J=17.0 Hz121.6）橙酮类）橙酮类 苄基质子：苄基质子：6.5-6.7，s122.4、糖上质子、糖上质子1）糖糖与与苷苷元元相相连连时时，糖糖上上端端基基C上上的的H（H-1）比比其其它它糖糖上上的的质质子子位位于于较较低低场场。通通过过端端基基H的的位位置置可可以以提提供供糖糖的的种种类类、数数量、成苷位置等信息。量、成苷位置等信息。黄酮醇黄酮醇3-O-苷苷 H-1：5.7-6.0其他位置成苷其他位置成苷 H-1：4.0-5.2123.2）糖上乙酰氧基质子）糖上乙酰氧基质子 糖糖上上乙乙酰酰氧氧基基质质子子位位于于1.65-2.10，芳芳香香环环上上的的乙乙酰酰氧氧基基质子位于质子位于2.30-2.50。3）鼠李糖上甲基质子）鼠李糖上甲基质子 0.80-1.20，d,J=6.5124.5、其它质子、其它质子 6，8-CH3：2.0-2.5，（，（6位比位比8位高位高0.2 ppm）OCH3:3.5-4.1 OH:8;5-OH,12125.四）四）13C NMR在黄酮类化合物结构鉴定中的应用在黄酮类化合物结构鉴定中的应用126.1、黄酮类化合物骨架类型的鉴定、黄酮类化合物骨架类型的鉴定127.2、值范围值范围1）羰基碳）羰基碳 170-2102）芳香碳）芳香碳 102-165 有氧取代碳：有氧取代碳：130-165 无氧取代碳：无氧取代碳：102-1303）脂肪碳）脂肪碳 糖上碳：糖上碳：60-108 端基碳：端基碳：90-108，rham-CH3 17 二氢黄酮（二氢黄酮（C-2,C-3）：）：40-80 芳香环上甲氧基：芳香环上甲氧基：55-60 芳香环上甲基碳和乙酰基上甲基碳：芳香环上甲基碳和乙酰基上甲基碳：20128.129.3、黄酮类化合物取代方式的确定黄酮类化合物取代方式的确定 黄黄酮酮类类化化合合物物中中芳芳香香碳碳原原子子的的信信号号特特征征可可以以用用来来确确定定取取代基的取代图式，但是不能确定骨架的类型。代基的取代图式，但是不能确定骨架的类型。130.4、氧苷中糖的连接位置氧苷中糖的连接位置1）糖端基碳的苷化位移）糖端基碳的苷化位移 糖上端基碳的苷化位移为糖上端基碳的苷化位移为+4.0-+6.0 ppm。2）苷元的苷化位移）苷元的苷化位移 苷苷化化后后直直接接相相连连的的碳碳原原子子向向高高场场位位移移，邻邻位位及及对对位位碳碳原原子向低场位移，对位子向低场位移，对位变化大而稳定。变化大而稳定。131.132.例：某淡黄色粉末例：某淡黄色粉末133.134.五）质谱在黄酮类结构测定中的应用五）质谱在黄酮类结构测定中的应用1、黄酮苷元的电子轰击质谱（、黄酮苷元的电子轰击质谱（EI-MS）135.136.137.2、黄酮醇类裂解途径、黄酮醇类裂解途径138.3、黄酮苷的场解吸质谱（、黄酮苷的场解吸质谱（FD-MS）FD-MS,Cl-MS,FAB-MS 给出苷中苷元和糖的信息，得不到苷元碎片。给出苷中苷元和糖的信息，得不到苷元碎片。139.140.141.142.练习题：练习题：从从杜杜促促叶叶中中用用色色谱谱方方法法分分离离得得到到一一个个黄黄色色晶晶体体，Molish反反应应阳阳性性，盐盐酸酸-镁镁粉粉反反应应呈呈紫紫红红色色，薄薄层层水水解解检检识识出出葡葡萄萄糖。糖。UV max nm:MeOH:266,352 NaOMe:274,400 AlCl3:273,344,395 NaOAc:274,383 FAB-MS:m/z 448,285 试试推推断断该该化化合合物物的的结结构构，并并写写出出过过程程，进进上上步步确确证证结结构构还需哪些方面的工作。还需哪些方面的工作。143.