生物技术抗体制药课件

资料仅供参考,不当之处，请联系改正。第一节 概述 1890189018901890年年年年BehringBehringBehringBehring和北里柴三郎和北里柴三郎和北里柴三郎和北里柴三郎 发现白喉抗毒素发现白喉抗毒素发现白喉抗毒素发现白喉抗毒素,建立了血清疗法建立了血清疗法建立了血清疗法建立了血清疗法,开创了抗体制药。开创了抗体制药。开创了抗体制药。开创了抗体制药。1937193719371937年年年年TiseliusTiseliusTiseliusTiselius用电泳法将用电泳法将用电泳法将用电泳法将 血清蛋白分离为白蛋白、血清蛋白分离为白蛋白、血清蛋白分离为白蛋白、血清蛋白分离为白蛋白、球蛋白，并证明抗体活性主要球蛋白，并证明抗体活性主要球蛋白，并证明抗体活性主要球蛋白，并证明抗体活性主要 存在于存在于存在于存在于球蛋白组分。球蛋白组分。球蛋白组分。球蛋白组分。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。抗体抗体抗体抗体是指能与相应抗原特异是指能与相应抗原特异是指能与相应抗原特异是指能与相应抗原特异性结合具有免疫功能的球蛋白。性结合具有免疫功能的球蛋白。性结合具有免疫功能的球蛋白。性结合具有免疫功能的球蛋白。抗体的产生抗体的产生抗体的产生抗体的产生：机体免疫系统：机体免疫系统：机体免疫系统：机体免疫系统受抗原刺激后，受抗原刺激后，受抗原刺激后，受抗原刺激后，B B B B淋巴细胞被活淋巴细胞被活淋巴细胞被活淋巴细胞被活化增殖和分化为浆细胞，由浆化增殖和分化为浆细胞，由浆化增殖和分化为浆细胞，由浆化增殖和分化为浆细胞，由浆细胞合成和分泌的球蛋白。细胞合成和分泌的球蛋白。细胞合成和分泌的球蛋白。细胞合成和分泌的球蛋白。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。20 20 20 20世纪世纪世纪世纪60606060年代发现多发性骨髓年代发现多发性骨髓年代发现多发性骨髓年代发现多发性骨髓瘤是浆细胞癌变形成的恶性增殖性瘤是浆细胞癌变形成的恶性增殖性瘤是浆细胞癌变形成的恶性增殖性瘤是浆细胞癌变形成的恶性增殖性疾病。病人血清中出现同抗体结构疾病。病人血清中出现同抗体结构疾病。病人血清中出现同抗体结构疾病。病人血清中出现同抗体结构类似的球蛋白，类似的球蛋白，类似的球蛋白，类似的球蛋白，统称为统称为统称为统称为免疫球蛋免疫球蛋免疫球蛋免疫球蛋白白白白（immunoglobulinimmunoglobulinimmunoglobulinimmunoglobulin，IgIgIgIg）。所以）。所以）。所以）。所以IgIgIgIg是化学结构的概念，而是化学结构的概念，而是化学结构的概念，而是化学结构的概念，而抗体抗体抗体抗体是生是生是生是生物学功能的概念。物学功能的概念。物学功能的概念。物学功能的概念。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。多克隆抗体多克隆抗体多克隆抗体多克隆抗体：病原微生：病原微生：病原微生：病原微生物含有多种抗原决定簇的抗物含有多种抗原决定簇的抗物含有多种抗原决定簇的抗物含有多种抗原决定簇的抗原物质，因此这些抗体制剂原物质，因此这些抗体制剂原物质，因此这些抗体制剂原物质，因此这些抗体制剂也是多种抗体的混合物，故也是多种抗体的混合物，故也是多种抗体的混合物，故也是多种抗体的混合物，故称多克隆抗体。称多克隆抗体。称多克隆抗体。称多克隆抗体。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。1975 1975 1975 1975年年年年KohlerKohlerKohlerKohler和和和和MilsteinMilsteinMilsteinMilstein首先首先首先首先利用利用利用利用B B B B淋巴细胞杂交瘤技术制备出淋巴细胞杂交瘤技术制备出淋巴细胞杂交瘤技术制备出淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体（monoclonal monoclonal monoclonal monoclonal antibody antibody antibody antibody McAbMcAbMcAbMcAb）。）。）。）。单克隆抗体具有高度特异性、单克隆抗体具有高度特异性、单克隆抗体具有高度特异性、单克隆抗体具有高度特异性、均一性、来源稳定、可大量生产等均一性、来源稳定、可大量生产等均一性、来源稳定、可大量生产等均一性、来源稳定、可大量生产等特点，为抗体制备和应用提供了全特点，为抗体制备和应用提供了全特点，为抗体制备和应用提供了全特点，为抗体制备和应用提供了全新的手段，还促进了基础和临床医新的手段，还促进了基础和临床医新的手段，还促进了基础和临床医新的手段，还促进了基础和临床医学的发展。学的发展。学的发展。学的发展。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。单克隆抗体作为抗体制剂，单克隆抗体作为抗体制剂，单克隆抗体作为抗体制剂，单克隆抗体作为抗体制剂，在临床上主要用与疾病的诊断和在临床上主要用与疾病的诊断和在临床上主要用与疾病的诊断和在临床上主要用与疾病的诊断和治疗。治疗。治疗。治疗。单克隆抗体检测与某些疾病单克隆抗体检测与某些疾病单克隆抗体检测与某些疾病单克隆抗体检测与某些疾病有关的抗原，辅助临床诊断。用有关的抗原，辅助临床诊断。用有关的抗原，辅助临床诊断。用有关的抗原，辅助临床诊断。用放射性核素标记单克隆抗体进行放射性核素标记单克隆抗体进行放射性核素标记单克隆抗体进行放射性核素标记单克隆抗体进行肿瘤显像，做免疫定位诊断。肿瘤显像，做免疫定位诊断。肿瘤显像，做免疫定位诊断。肿瘤显像，做免疫定位诊断。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。单克隆抗体用于临床治疗，单克隆抗体用于临床治疗，单克隆抗体用于临床治疗，单克隆抗体用于临床治疗，CD3CD3CD3CD3单克隆抗体作为免疫抑制剂单克隆抗体作为免疫抑制剂单克隆抗体作为免疫抑制剂单克隆抗体作为免疫抑制剂对器官移植免疫排斥有抑制作对器官移植免疫排斥有抑制作对器官移植免疫排斥有抑制作对器官移植免疫排斥有抑制作用。用。用。用。以单克隆抗体作为载体的药以单克隆抗体作为载体的药以单克隆抗体作为载体的药以单克隆抗体作为载体的药物对肿瘤进行定向治疗。物对肿瘤进行定向治疗。物对肿瘤进行定向治疗。物对肿瘤进行定向治疗。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。第二节 单克隆抗体 单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体是将抗体产生细是将抗体产生细是将抗体产生细是将抗体产生细胞与具有无限增殖能力的骨髓瘤胞与具有无限增殖能力的骨髓瘤胞与具有无限增殖能力的骨髓瘤胞与具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞相融合，通过有限稀释法及细胞相融合，通过有限稀释法及细胞相融合，通过有限稀释法及细胞相融合，通过有限稀释法及克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系而产生的。单克隆细胞系而产生的。单克隆细胞系而产生的。单克隆细胞系而产生的。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。一、抗原与动物免疫一、抗原与动物免疫一、抗原与动物免疫一、抗原与动物免疫 制备特定抗原的单克隆抗体，首制备特定抗原的单克隆抗体，首制备特定抗原的单克隆抗体，首制备特定抗原的单克隆抗体，首先要制备用于免疫的适当抗原，再用先要制备用于免疫的适当抗原，再用先要制备用于免疫的适当抗原，再用先要制备用于免疫的适当抗原，再用抗原进行动物免疫。抗原进行动物免疫。抗原进行动物免疫。抗原进行动物免疫。有的抗原可以用化学合成：地高辛有的抗原可以用化学合成：地高辛有的抗原可以用化学合成：地高辛有的抗原可以用化学合成：地高辛 多数抗原物为混合物须经免疫、筛多数抗原物为混合物须经免疫、筛多数抗原物为混合物须经免疫、筛多数抗原物为混合物须经免疫、筛选、克隆化。选、克隆化。选、克隆化。选、克隆化。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。为使杂交瘤细胞稳定，免疫为使杂交瘤细胞稳定，免疫为使杂交瘤细胞稳定，免疫为使杂交瘤细胞稳定，免疫动物和骨髓瘤细胞供体同一品系动物和骨髓瘤细胞供体同一品系动物和骨髓瘤细胞供体同一品系动物和骨髓瘤细胞供体同一品系动物进行免疫。动物进行免疫。动物进行免疫。动物进行免疫。目前常用的骨髓瘤细胞系多目前常用的骨髓瘤细胞系多目前常用的骨髓瘤细胞系多目前常用的骨髓瘤细胞系多来自来自来自来自BALB/cBALB/cBALB/cBALB/c小鼠和小鼠和小鼠和小鼠和 LOULOULOULOU大鼠，因大鼠，因大鼠，因大鼠，因此免疫动物也采用相应的品系。此免疫动物也采用相应的品系。此免疫动物也采用相应的品系。此免疫动物也采用相应的品系。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。免疫的方法免疫的方法免疫的方法免疫的方法采用体内免疫法和采用体内免疫法和采用体内免疫法和采用体内免疫法和体外免疫法。体外免疫法。体外免疫法。体外免疫法。体内免疫法体内免疫法体内免疫法体内免疫法适用于免疫原性强、适用于免疫原性强、适用于免疫原性强、适用于免疫原性强、抗原量较多时应用，一般用抗原量较多时应用，一般用抗原量较多时应用，一般用抗原量较多时应用，一般用8 8 8 812121212周周周周龄雌性鼠。龄雌性鼠。龄雌性鼠。龄雌性鼠。颗粒性抗原（如细菌细胞抗原）颗粒性抗原（如细菌细胞抗原）颗粒性抗原（如细菌细胞抗原）颗粒性抗原（如细菌细胞抗原）的免疫原性强，可不加佐剂，直接的免疫原性强，可不加佐剂，直接的免疫原性强，可不加佐剂，直接的免疫原性强，可不加佐剂，直接注入腹腔注入腹腔注入腹腔注入腹腔10101010个细胞进行初次免疫，个细胞进行初次免疫，个细胞进行初次免疫，个细胞进行初次免疫，间隔间隔间隔间隔1 1 1 13 3 3 3周，再追加免疫周，再追加免疫周，再追加免疫周，再追加免疫1 1 1 12 2 2 2次。次。次。次。7资料仅供参考,不当之处，请联系改正。可溶性抗原按每只小鼠可溶性抗原按每只小鼠可溶性抗原按每只小鼠可溶性抗原按每只小鼠10101010100g100g100g100g抗原与福氏完全佐剂等量混合后注抗原与福氏完全佐剂等量混合后注抗原与福氏完全佐剂等量混合后注抗原与福氏完全佐剂等量混合后注入腹腔内，进行初次免疫，间隔入腹腔内，进行初次免疫，间隔入腹腔内，进行初次免疫，间隔入腹腔内，进行初次免疫，间隔2 2 2 24 4 4 4周，再用不加佐剂原抗原追加周，再用不加佐剂原抗原追加周，再用不加佐剂原抗原追加周，再用不加佐剂原抗原追加免疫免疫免疫免疫1 1 1 12 2 2 2次。次。次。次。一般再采脾细胞前一般再采脾细胞前一般再采脾细胞前一般再采脾细胞前3 3 3 3日由静脉注射最日由静脉注射最日由静脉注射最日由静脉注射最后一次抗原。刺激后一次抗原。刺激后一次抗原。刺激后一次抗原。刺激B B B B细胞分裂。细胞分裂。细胞分裂。细胞分裂。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。脾内免疫法即在麻醉下直接将脾内免疫法即在麻醉下直接将脾内免疫法即在麻醉下直接将脾内免疫法即在麻醉下直接将 0.10.10.10.10.2ml0.2ml0.2ml0.2ml抗原注入脾脏进行抗原注入脾脏进行抗原注入脾脏进行抗原注入脾脏进行免疫。细胞抗原需免疫。细胞抗原需免疫。细胞抗原需免疫。细胞抗原需101010105 5 5 5个，个，可溶可溶可溶可溶性抗原需性抗原需性抗原需性抗原需10g10g10g10g。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。体外免疫法用于不能采用体体外免疫法用于不能采用体内免疫的情况下，如制备人源性内免疫的情况下，如制备人源性单克隆抗体；免疫源性极弱，易单克隆抗体；免疫源性极弱，易引起免疫抑制。引起免疫抑制。优点：需抗源量少，免疫期短，优点：需抗源量少，免疫期短，干扰因素少。干扰因素少。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。体外免疫法：用体外免疫法：用4 48 8周龄周龄BALB/cBALB/c 小鼠的脾脏制成单细胞悬液，再加小鼠的脾脏制成单细胞悬液，再加入适当抗原使其浓度达入适当抗原使其浓度达0.50.55g/ml,5g/ml,在在5%CO5%CO37 C 37 C 下培养下培养4 45 5天天,再分离脾细胞再分离脾细胞,进行细胞融进行细胞融合。合。o22o资料仅供参考,不当之处，请联系改正。二、细胞融合与杂交瘤细胞的二、细胞融合与杂交瘤细胞的二、细胞融合与杂交瘤细胞的二、细胞融合与杂交瘤细胞的 选择性培养选择性培养选择性培养选择性培养 细胞融合的方法：细胞融合的方法：细胞融合的方法：细胞融合的方法：脾细胞（脾细胞（脾细胞（脾细胞（110110）骨髓瘤细胞（骨髓瘤细胞（骨髓瘤细胞（骨髓瘤细胞（210210）混合）混合）混合）混合 聚乙二醇诱导下融合，聚乙二醇诱导下融合，聚乙二醇诱导下融合，聚乙二醇诱导下融合，2 2分钟，然后用分钟，然后用分钟，然后用分钟，然后用培养液将融合液缓慢稀释。培养液将融合液缓慢稀释。培养液将融合液缓慢稀释。培养液将融合液缓慢稀释。8877资料仅供参考,不当之处，请联系改正。用于细胞融合的骨髓瘤细胞应具有用于细胞融合的骨髓瘤细胞应具有用于细胞融合的骨髓瘤细胞应具有用于细胞融合的骨髓瘤细胞应具有融合率高，自身不分泌抗体，所产生融合率高，自身不分泌抗体，所产生融合率高，自身不分泌抗体，所产生融合率高，自身不分泌抗体，所产生的杂交瘤细胞分泌抗体能力强，长期的杂交瘤细胞分泌抗体能力强，长期的杂交瘤细胞分泌抗体能力强，长期的杂交瘤细胞分泌抗体能力强，长期稳定。稳定。稳定。稳定。PEGPEG相对分子量相对分子量相对分子量相对分子量40004000，浓度为，浓度为，浓度为，浓度为50%50%二甲基亚砜增加融合率。二甲基亚砜增加融合率。二甲基亚砜增加融合率。二甲基亚砜增加融合率。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。细胞融合后可产生多种融合。细胞融合后可产生多种融合。细胞融合后可产生多种融合。细胞融合后可产生多种融合。脾脾脾脾脾、脾脾、脾脾、脾脾、脾瘤、瘤瘤、瘤瘤、瘤瘤、瘤瘤融合细胞。瘤融合细胞。瘤融合细胞。瘤融合细胞。选择性培养选择性培养选择性培养选择性培养:培养基培养基培养基培养基 为为为为HATHAT培养液。培养液。培养液。培养液。次黄嘌呤次黄嘌呤次黄嘌呤次黄嘌呤(H)(H)氨甲喋呤氨甲喋呤氨甲喋呤氨甲喋呤(A)(A)胸腺嘧啶胸腺嘧啶胸腺嘧啶胸腺嘧啶(T)(T)配制。配制。配制。配制。A A阻断阻断阻断阻断DNADNA合成。合成。合成。合成。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。三、筛选阳性克隆与克隆化三、筛选阳性克隆与克隆化三、筛选阳性克隆与克隆化三、筛选阳性克隆与克隆化 筛选阳性克隆常用检测方法：筛选阳性克隆常用检测方法：筛选阳性克隆常用检测方法：筛选阳性克隆常用检测方法：免疫酶技术、免疫荧光技术、放射免疫免疫酶技术、免疫荧光技术、放射免疫免疫酶技术、免疫荧光技术、放射免疫免疫酶技术、免疫荧光技术、放射免疫技术等。技术等。技术等。技术等。克隆化是指单个细胞通过无性繁殖而获克隆化是指单个细胞通过无性繁殖而获克隆化是指单个细胞通过无性繁殖而获克隆化是指单个细胞通过无性繁殖而获得细胞集团的整个培养过程。得细胞集团的整个培养过程。得细胞集团的整个培养过程。得细胞集团的整个培养过程。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。ELISAELISAELISAELISAELISAELISA用于破伤风抗体的筛选用于破伤风抗体的筛选用于破伤风抗体的筛选用于破伤风抗体的筛选用于破伤风抗体的筛选用于破伤风抗体的筛选资料仅供参考,不当之处，请联系改正。四、杂交瘤细胞与抗体性状的鉴定四、杂交瘤细胞与抗体性状的鉴定四、杂交瘤细胞与抗体性状的鉴定四、杂交瘤细胞与抗体性状的鉴定 杂交瘤细胞鉴定：染色体分析。它是杂交瘤细胞鉴定：染色体分析。它是杂交瘤细胞鉴定：染色体分析。它是杂交瘤细胞鉴定：染色体分析。它是 鉴定的客观指标，了解分泌抗体的能力。鉴定的客观指标，了解分泌抗体的能力。鉴定的客观指标，了解分泌抗体的能力。鉴定的客观指标，了解分泌抗体的能力。单抗进行单抗进行单抗进行单抗进行IgIg类和亚类鉴定：类和亚类鉴定：类和亚类鉴定：类和亚类鉴定：用羊或兔抗用羊或兔抗用羊或兔抗用羊或兔抗IgIg不同类或亚类抗体，进行不同类或亚类抗体，进行不同类或亚类抗体，进行不同类或亚类抗体，进行免疫扩散或免疫扩散或免疫扩散或免疫扩散或ELISAELISA鉴定。鉴定。鉴定。鉴定。亲和力、特异性、纯度、分子量测定。亲和力、特异性、纯度、分子量测定。亲和力、特异性、纯度、分子量测定。亲和力、特异性、纯度、分子量测定。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。五、五、五、五、单克隆抗体的大量制备单克隆抗体的大量制备单克隆抗体的大量制备单克隆抗体的大量制备 体外培养法可获的体外培养法可获的体外培养法可获的体外培养法可获的10g/ml10g/ml10g/ml10g/ml抗体抗体抗体抗体 体内诱生法可获的体内诱生法可获的体内诱生法可获的体内诱生法可获的5 5 5 520mg/ml20mg/ml20mg/ml20mg/ml抗体抗体抗体抗体 用用用用BALB/cBALB/cBALB/cBALB/c小鼠。小鼠。小鼠。小鼠。降植烷降植烷降植烷降植烷 接种杂交瘤细胞接种杂交瘤细胞接种杂交瘤细胞接种杂交瘤细胞 取腹水取腹水取腹水取腹水 离心离心离心离心 上清。上清。上清。上清。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。六、六、六、六、单克隆抗体的纯化单克隆抗体的纯化单克隆抗体的纯化单克隆抗体的纯化 依单抗依单抗依单抗依单抗IgGIgGIgGIgG类和亚类不同，选各种不同类和亚类不同，选各种不同类和亚类不同，选各种不同类和亚类不同，选各种不同的纯化方法。的纯化方法。的纯化方法。的纯化方法。体内诱生法体内诱生法体内诱生法体内诱生法单克隆抗体的单克隆抗体的纯化方法：纯化方法：纯化方法：纯化方法：1 1 1 1离心离心离心离心 取上清，超滤，盐析。取上清，超滤，盐析。取上清，超滤，盐析。取上清，超滤，盐析。2 2 2 2分离分离分离分离 凝胶过滤用于凝胶过滤用于凝胶过滤用于凝胶过滤用于IgG IgMIgG IgMIgG IgMIgG IgM单抗纯化。单抗纯化。单抗纯化。单抗纯化。阴离子交换层析阴离子交换层析阴离子交换层析阴离子交换层析IgGIgGIgGIgG单抗纯化。单抗纯化。单抗纯化。单抗纯化。亲亲亲亲和层析和层析和层析和层析 IgGIgGIgGIgG单抗纯化。单抗纯化。单抗纯化。单抗纯化。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。第三节第三节第三节第三节 鼠源性鼠源性鼠源性鼠源性单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体的改造的改造的改造的改造 杂交瘤单抗为鼠源性，应用人体产杂交瘤单抗为鼠源性，应用人体产杂交瘤单抗为鼠源性，应用人体产杂交瘤单抗为鼠源性，应用人体产生人抗鼠抗体及毒副作用。对鼠源生人抗鼠抗体及毒副作用。对鼠源生人抗鼠抗体及毒副作用。对鼠源生人抗鼠抗体及毒副作用。对鼠源性的单抗进行基因加工和改造。性的单抗进行基因加工和改造。性的单抗进行基因加工和改造。性的单抗进行基因加工和改造。目的：降低免疫源性；降低相对分目的：降低免疫源性；降低相对分目的：降低免疫源性；降低相对分目的：降低免疫源性；降低相对分子量。子量。子量。子量。人人人人-鼠嵌合抗体、改形抗体鼠嵌合抗体、改形抗体鼠嵌合抗体、改形抗体鼠嵌合抗体、改形抗体 、小分、小分、小分、小分子抗体。子抗体。子抗体。子抗体。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。IgIgIgIg分子结构分子结构分子结构分子结构资料仅供参考,不当之处，请联系改正。IgIgIgIg分子的基因结构分子的基因结构分子的基因结构分子的基因结构资料仅供参考,不当之处，请联系改正。一、人鼠嵌合抗体一、人鼠嵌合抗体一、人鼠嵌合抗体一、人鼠嵌合抗体 抗原抗体结合功能抗原抗体结合功能抗体可变区（抗体可变区（V）同种性免疫源性同种性免疫源性抗体稳定区（抗体稳定区（C）在基因水平上将鼠源单抗的在基因水平上将鼠源单抗的H 和和L链可链可变区基因分离出来，分别与人变区基因分离出来，分别与人Ig的的H 和和L链的稳定区（链的稳定区（C）基因连接成人）基因连接成人-鼠鼠嵌合抗体的嵌合抗体的H 和和L链基因，再共转染骨链基因，再共转染骨髓瘤细胞，就能表达完整人髓瘤细胞，就能表达完整人-鼠嵌合抗鼠嵌合抗体。体。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。二、改形抗体（二、改形抗体（二、改形抗体（二、改形抗体（CDRCDR移植抗体）移植抗体）移植抗体）移植抗体）Ig Ig Ig Ig 分子中参与构成抗原结合部位的区分子中参与构成抗原结合部位的区分子中参与构成抗原结合部位的区分子中参与构成抗原结合部位的区域是域是域是域是H H H H和和和和L L L L链链链链V V V V区中的互补决定区（区中的互补决定区（区中的互补决定区（区中的互补决定区（CDRCDRCDRCDR区），而不是整个可变区。区），而不是整个可变区。区），而不是整个可变区。区），而不是整个可变区。H H H H和和和和L L L L链各链各链各链各有三个有三个有三个有三个CDRCDRCDRCDR，其它部分称框架区。，其它部分称框架区。，其它部分称框架区。，其它部分称框架区。用用用用鼠源单抗的鼠源单抗的鼠源单抗的鼠源单抗的CDRCDRCDRCDR序列替换人序列替换人序列替换人序列替换人Ig Ig Ig Ig 分子分子分子分子中中中中CDRCDRCDRCDR序列，则可使人的序列，则可使人的序列，则可使人的序列，则可使人的Ig Ig Ig Ig 分子具有分子具有分子具有分子具有鼠源单抗的抗原结合特异性。可消除鼠源单抗的抗原结合特异性。可消除鼠源单抗的抗原结合特异性。可消除鼠源单抗的抗原结合特异性。可消除免疫源性。免疫源性。免疫源性。免疫源性。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。三、小分子抗体三、小分子抗体三、小分子抗体三、小分子抗体 基因工程小分子抗体仅表达鼠源单抗的基因工程小分子抗体仅表达鼠源单抗的基因工程小分子抗体仅表达鼠源单抗的基因工程小分子抗体仅表达鼠源单抗的V V V V区片段，相对分子量为原抗体的区片段，相对分子量为原抗体的区片段，相对分子量为原抗体的区片段，相对分子量为原抗体的1/801/801/801/801/31/31/31/3。即保留。即保留。即保留。即保留CDRCDRCDRCDR区，而区，而区，而区，而Ig Ig Ig Ig 分子中的分子中的分子中的分子中的C C区区区区不表达。不表达。不表达。不表达。小分子抗体类型有：小分子抗体类型有：小分子抗体类型有：小分子抗体类型有：FabFabFabFab片段抗体片段抗体片段抗体片段抗体 FvFvFvFv抗体抗体抗体抗体 单链抗体单链抗体单链抗体单链抗体资料仅供参考,不当之处，请联系改正。单域抗体单域抗体单域抗体单域抗体最小识别单位最小识别单位最小识别单位最小识别单位单链抗体的优点：单链抗体的优点：单链抗体的优点：单链抗体的优点：可去除非特异性反应的竞争性表面可去除非特异性反应的竞争性表面可去除非特异性反应的竞争性表面可去除非特异性反应的竞争性表面蛋白，肿瘤显象背景更加清晰性。蛋白，肿瘤显象背景更加清晰性。蛋白，肿瘤显象背景更加清晰性。蛋白，肿瘤显象背景更加清晰性。易渗透肿瘤组织中增加药物治疗浓易渗透肿瘤组织中增加药物治疗浓易渗透肿瘤组织中增加药物治疗浓易渗透肿瘤组织中增加药物治疗浓度。度。度。度。免疫源性小，可消除人抗鼠的排异免疫源性小，可消除人抗鼠的排异免疫源性小，可消除人抗鼠的排异免疫源性小，可消除人抗鼠的排异反应。反应。反应。反应。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。单链抗体大多在大肠杆菌中单链抗体大多在大肠杆菌中单链抗体大多在大肠杆菌中单链抗体大多在大肠杆菌中表达，有三种形式：表达，有三种形式：表达，有三种形式：表达，有三种形式：直接在细胞质中表达；直接在细胞质中表达；直接在细胞质中表达；直接在细胞质中表达；与其它菌体融合表达融合与其它菌体融合表达融合与其它菌体融合表达融合与其它菌体融合表达融合蛋白；蛋白；蛋白；蛋白；分泌表达具有功能的单链分泌表达具有功能的单链分泌表达具有功能的单链分泌表达具有功能的单链抗体抗体抗体抗体。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。四、双功能抗体四、双功能抗体双功能抗体就是双特性抗体。它是一种双功能抗体就是双特性抗体。它是一种双功能抗体就是双特性抗体。它是一种双功能抗体就是双特性抗体。它是一种非天然性抗体。其结合抗原的两个臂非天然性抗体。其结合抗原的两个臂非天然性抗体。其结合抗原的两个臂非天然性抗体。其结合抗原的两个臂具有不同的特异性。具有不同的特异性。具有不同的特异性。具有不同的特异性。构建方法：构建方法：构建方法：构建方法：化学交联法化学交联法化学交联法化学交联法生物学方法（杂种生物学方法（杂种生物学方法（杂种生物学方法（杂种-杂交瘤）杂交瘤）杂交瘤）杂交瘤）基因工程法基因工程法基因工程法基因工程法资料仅供参考,不当之处，请联系改正。五、抗体融合蛋白五、抗体融合蛋白五、抗体融合蛋白五、抗体融合蛋白 抗体融合蛋白广义属双功能抗体。抗体融合蛋白广义属双功能抗体。抗体融合蛋白广义属双功能抗体。抗体融合蛋白广义属双功能抗体。类型：类型：类型：类型：配基配基配基配基-配基型融合蛋白；配基型融合蛋白；配基型融合蛋白；配基型融合蛋白；配基配基配基配基-Ig-Ig-Ig-Ig型嵌合蛋白；型嵌合蛋白；型嵌合蛋白；型嵌合蛋白；配基配基配基配基-Fv-Fv-Fv-Fv型融合蛋白；型融合蛋白；型融合蛋白；型融合蛋白；受体受体受体受体-Fv-Fv-Fv-Fv型融合蛋白；型融合蛋白；型融合蛋白；型融合蛋白；酶酶酶酶-抗体型融合蛋白；抗体型融合蛋白；抗体型融合蛋白；抗体型融合蛋白；