骨髓检查组化免疫分型遗传学ppt课件

二、骨髓细胞学检查的内容、二、骨髓细胞学检查的内容、方法和临床意义方法和临床意义p293p293二、骨髓细胞学检查的内容、方法和临床意义p2931骨髓检查组化免疫分型遗传学ppt课件2骨髓检查组化免疫分型遗传学ppt课件3l 4 骨髓标本采集要求 标本采集的注意事项标本采集的注意事项：形态检查抽吸量不超过0.2ml；同时进行多项检查应优先抽吸形态检查标本；涂片厚薄适宜，不少于4张，并同时制作配套的血片；作好标记；如干抽，此时应考虑作骨髓活检；多部位或对有压痛点或根据X线检查提示进行穿刺，以提高阳性率。骨髓标本采集要求 5判断骨髓取材成功的标准判断骨髓取材成功的标准抽吸骨髓液时，病人有特殊酸痛感；有骨髓小粒和脂肪滴；显微镜下可见到骨髓特有细胞，如巨核细胞、成骨细胞、破骨细胞、浆细胞、组织嗜碱细胞、纤维细胞和大量红系、粒系幼稚细胞等。判断骨髓取材成功的标准抽吸骨髓液时，病人有特殊酸痛感；6骨髓涂片、染色：骨髓涂片、染色：骨髓涂片、染色：骨髓涂片、染色：WrightWrightWrightWright或或或或GiemsaGiemsaGiemsaGiemsa染色、双染色染色、双染色染色、双染色染色、双染色法法法法返回返回返回返回骨髓涂片、染色：Wright或Giemsa染色、双染色法返7二、骨髓细胞学检查的二、骨髓细胞学检查的内容、方法和临床意义内容、方法和临床意义、低倍镜检查、低倍镜检查1 1、确定骨髓标本的取材和涂片制作是否满意、确定骨髓标本的取材和涂片制作是否满意 骨髓穿刺液制成涂片后，肉眼观察，在涂尾部见到散骨髓穿刺液制成涂片后，肉眼观察，在涂尾部见到散在的约粟粒大小呈浅肉色半透明的在的约粟粒大小呈浅肉色半透明的骨髓小粒骨髓小粒及少量及少量脂脂肪小滴肪小滴；在显微镜下见到较多；在显微镜下见到较多骨髓特有的细胞骨髓特有的细胞如各系如各系幼稚细胞及巨核细胞等，是穿刺成功的标志。幼稚细胞及巨核细胞等，是穿刺成功的标志。如如骨髓小粒骨髓小粒较少或缺如，较少或缺如，骨髓特有成份骨髓特有成份减少，提减少，提示骨髓可能有不同的外周血液稀释，为取材不良示骨髓可能有不同的外周血液稀释，为取材不良 如如脂肪滴脂肪滴增多，则表示红髓成份减少，反映骨髓增多，则表示红髓成份减少，反映骨髓增生减低增生减低插图插图插图插图二、骨髓细胞学检查的内容、方法和临床意义、低倍镜检查插图8 2 2、判断骨髓增生程度（表、判断骨髓增生程度（表4-2-74-2-7）骨髓增生程度通常以骨髓中有核细胞的量来反映。骨髓增生程度通常以骨髓中有核细胞的量来反映。采用五级法采用五级法 2、判断骨髓增生程度（表4-2-7）9骨髓增生程度分级骨髓增生程度分级 有核细胞：成熟红细胞有核细胞占全部细胞百分率有核细胞/1000个成熟红细胞常见原因范围平均范围平均极度活跃1:0.52.01:150238.96521.07351.96白血病明显活跃1:5121:101043.78230.77114.51增生贫血增生活跃1.16321:20111021.5363.6735.34正常骨髓增生减低1:35701:500.517.4119.6110.53慢性再障明显减低1:3001:200100/HP返回返回返回返回骨髓增生程度分级(高倍镜）明显减低增生减低增生活跃明显活跃极113 3、观察巨核细胞、观察巨核细胞需要注意需要注意数量数量、成熟程度成熟程度、产血小板功能产血小板功能及其及其形态形态（包（包括血小板的形态）等四个方面。括血小板的形态）等四个方面。低倍镜下计数全部片膜的巨核细胞数。并转换油镜观察，低倍镜下计数全部片膜的巨核细胞数。并转换油镜观察，进行分类计数，注意巨核细胞及血小板的形态有无异进行分类计数，注意巨核细胞及血小板的形态有无异常。常。4 4、注意有无异常细胞、注意有无异常细胞如恶性组织细胞病的异常组织细胞、转移癌细胞、如恶性组织细胞病的异常组织细胞、转移癌细胞、GaucherGaucher细胞、细胞、Niemann-PickNiemann-Pick细胞等。细胞等。注意观察有无散在或成堆分布的体积较大、形态特殊的注意观察有无散在或成堆分布的体积较大、形态特殊的异常细胞出现，尤其应注意涂片尾部、边缘及骨髓小异常细胞出现，尤其应注意涂片尾部、边缘及骨髓小粒周围。粒周围。发现可疑异常细胞，应在油浸镜下观察加以确认。发现可疑异常细胞，应在油浸镜下观察加以确认。3、观察巨核细胞 12二、骨髓细胞学检查的二、骨髓细胞学检查的内容、方法和临床意义内容、方法和临床意义、油浸镜检查、油浸镜检查选择有核细胞分布均匀、结构清晰、着色良好的涂膜体选择有核细胞分布均匀、结构清晰、着色良好的涂膜体尾交界处部位作油浸镜检查。尾交界处部位作油浸镜检查。1 1、有核细胞分类计数、有核细胞分类计数在油浸镜下连续分数在油浸镜下连续分数200200个或个或500500个有核细胞，按细胞的不同系列个有核细胞，按细胞的不同系列和不同的发育阶段分别计数。然后计算出分别占有核细胞总数和不同的发育阶段分别计数。然后计算出分别占有核细胞总数的百分数。再累计粒系和红系总数，计算粒红比例（的百分数。再累计粒系和红系总数，计算粒红比例（G:EG:E）。）。分类计数时，巨核细胞及分裂、退化细胞不计入。分类计数时，巨核细胞及分裂、退化细胞不计入。2 2、观察细胞形态、观察细胞形态仔细观察各系列细胞的形态有无异常，包括注意成熟红细胞的形仔细观察各系列细胞的形态有无异常，包括注意成熟红细胞的形态有无异常，有无特殊异常细胞出现，必要时还需注意有无寄态有无异常，有无特殊异常细胞出现，必要时还需注意有无寄生虫。生虫。插图插图二、骨髓细胞学检查的内容、方法和临床意义、油浸镜检查插图13、检查结果的临床意义、检查结果的临床意义1 1、骨髓增生程度、骨髓增生程度，其临床意义如前表所述。，其临床意义如前表所述。，其临床意义如前表所述。，其临床意义如前表所述。2 2、骨髓中各系列细胞及其各发育阶段的、骨髓中各系列细胞及其各发育阶段的比例比例粒细胞系统：约占有核细胞的粒细胞系统：约占有核细胞的粒细胞系统：约占有核细胞的粒细胞系统：约占有核细胞的5050505060%60%60%60%红细胞系统：约占有核细胞的红细胞系统：约占有核细胞的红细胞系统：约占有核细胞的红细胞系统：约占有核细胞的20%20%20%20%粒红比例（粒红比例（粒红比例（粒红比例（G/EG/EG/EG/E）2.760.83:1(2-4:1)2.760.83:1(2-4:1)2.760.83:1(2-4:1)2.760.83:1(2-4:1)淋巴细胞系统：约占有核细胞的淋巴细胞系统：约占有核细胞的淋巴细胞系统：约占有核细胞的淋巴细胞系统：约占有核细胞的20%20%20%20%单核细胞系统：一般单核细胞系统：一般单核细胞系统：一般单核细胞系统：一般4%4%4%4%浆细胞系统：一般浆细胞系统：一般浆细胞系统：一般浆细胞系统：一般2%2%2%2%巨核细胞系统：巨核细胞系统：巨核细胞系统：巨核细胞系统：735735个为正常值个为正常值(1.5*3cm(1.5*3cm涂片）。涂片）。其他细胞：可见到极少量的非造血细胞成分其他细胞：可见到极少量的非造血细胞成分其他细胞：可见到极少量的非造血细胞成分其他细胞：可见到极少量的非造血细胞成分、检查结果的临床意义143、各系列细胞比例改变的临床意义各系列细胞比例改变的临床意义、粒细胞系与红细胞系比例（粒、粒细胞系与红细胞系比例（粒、粒细胞系与红细胞系比例（粒、粒细胞系与红细胞系比例（粒/红比例）红比例）红比例）红比例）1)1)1)1)、粒红比例正常、粒红比例正常、粒红比例正常、粒红比例正常：见于：见于：正常骨髓象；正常骨髓象；粒、红粒、红两系平等增多或减少，前者如红白血病，后者如两系平等增多或减少，前者如红白血病，后者如AAAA；粒、红两系细胞基本不变化的造血系统疾病，粒、红两系细胞基本不变化的造血系统疾病，如如MMMM、骨髓转移癌、骨髓转移癌、ITPITP等。等。2)2)2)2)、粒红比例增高、粒红比例增高、粒红比例增高、粒红比例增高：指粒：指粒/红比例大于红比例大于5:15:1。可见粒细。可见粒细胞系增多，或由红细胞系减少所致。常见于：胞系增多，或由红细胞系减少所致。常见于：急急性或慢性粒白血病；性或慢性粒白血病；急性化脓性感染、中性粒细急性化脓性感染、中性粒细胞性类白血病反应；胞性类白血病反应；纯红再障。纯红再障。3)3)3)3)、粒红比例减低、粒红比例减低、粒红比例减低、粒红比例减低：指粒：指粒/红比例小于红比例小于2:12:1。可见粒细。可见粒细胞系减少，或由红细胞系增多所致。常见于：胞系减少，或由红细胞系增多所致。常见于：粒粒细胞减少，如粒缺；细胞减少，如粒缺；红细胞系增多，如各种增生红细胞系增多，如各种增生性贫血、真红或继发性红细胞增多症等。性贫血、真红或继发性红细胞增多症等。3、各系列细胞比例改变的临床意义15、粒细胞系统粒细胞系统粒细胞系统粒细胞系统：1)1)1)1)、粒系细胞增多、粒系细胞增多、粒系细胞增多、粒系细胞增多：见于：见于：各型粒细胞白血病，各型粒细胞白血病，急性粒细胞白血病以原粒细胞及早幼粒细胞增多急性粒细胞白血病以原粒细胞及早幼粒细胞增多为主，为主，CMLCML以中性晚幼粒及杆状核粒细胞增多为以中性晚幼粒及杆状核粒细胞增多为主；主；大部分急性炎症和感染性疾病、中性粒细大部分急性炎症和感染性疾病、中性粒细胞性类白反应等，以中性晚幼粒及杆状核粒细胞胞性类白反应等，以中性晚幼粒及杆状核粒细胞增多为主。增多为主。2)2)2)2)、粒细胞减少、粒细胞减少、粒细胞减少、粒细胞减少：见于：见于AAAA、粒细胞缺乏症或粒细、粒细胞缺乏症或粒细胞减少症。胞减少症。、红细胞系统：、红细胞系统：、红细胞系统：、红细胞系统：1)1)红系增多：见于：红系增多：见于：各类增生性贫血如各类增生性贫血如溶血性溶血性贫血贫血、失血性贫血、失血性贫血、小细胞低色素性贫血小细胞低色素性贫血等，以等，以中幼红及晚幼红细胞增多为主；中幼红及晚幼红细胞增多为主；巨幼细胞巨幼细胞、粒细胞系统：16贫血贫血，以巨幼红细胞增多为主；，以巨幼红细胞增多为主；急性红白血病，急性红白血病，以原红及早幼红细胞增多为主，并常伴幼红细胞以原红及早幼红细胞增多为主，并常伴幼红细胞巨幼样变巨幼样变。2)2)2)2)、红系减少、红系减少、红系减少、红系减少：见于：见于AAAA（包括（包括PRCAPRCA），但部分），但部分CAACAA，骨髓呈灶性增生者，有时可见红系细胞比例增，骨髓呈灶性增生者，有时可见红系细胞比例增多。多。、淋巴细胞系统、淋巴细胞系统、淋巴细胞系统、淋巴细胞系统：1)1)1)1)、淋巴细胞绝对性增多、淋巴细胞绝对性增多、淋巴细胞绝对性增多、淋巴细胞绝对性增多：见于急淋和慢淋、恶：见于急淋和慢淋、恶性淋巴瘤、传淋和传单、其他病毒性感染、淋巴性淋巴瘤、传淋和传单、其他病毒性感染、淋巴细胞类白等。细胞类白等。2)2)2)2)、淋巴细胞相对性增多、淋巴细胞相对性增多、淋巴细胞相对性增多、淋巴细胞相对性增多：见于：见于AAAA、粒缺或粒细、粒缺或粒细胞减少症。胞减少症。、单核细胞系统、单核细胞系统、单核细胞系统、单核细胞系统：增多增多增多增多见于：见于：血液系统疾血液系统疾病如急单、急粒病如急单、急粒-单、单、MDSMDS、恶组、淋巴瘤等；、恶组、淋巴瘤等；某些感染性疾病结核病、布鲁菌病、原虫感染、某些感染性疾病结核病、布鲁菌病、原虫感染、贫血，以巨幼红细胞增多为主；急性红白血病，以原红及早幼红细17感染性心内膜炎等；感染性心内膜炎等；风湿性疾病如系统性红斑风湿性疾病如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎；狼疮、类风湿性关节炎；其他如恶性肿瘤、肝其他如恶性肿瘤、肝硬化、药物反应等。硬化、药物反应等。、浆细胞系统、浆细胞系统、浆细胞系统、浆细胞系统：增多增多增多增多见于：见于：MMMM、浆细胞白、浆细胞白血病、巨球蛋白血症、重链病等；血病、巨球蛋白血症、重链病等；反应性浆细反应性浆细胞增多如慢性炎症及感染性疾病、风湿性疾病、胞增多如慢性炎症及感染性疾病、风湿性疾病、恶性肿瘤、过敏性疾病等；恶性肿瘤、过敏性疾病等；AAAA、粒缺等。、粒缺等。、巨核细胞系统、巨核细胞系统、巨核细胞系统、巨核细胞系统：1)1)1)1)、增多、增多、增多、增多：ITPITP、EvansEvans综合征；综合征；骨髓增殖性骨髓增殖性疾病，如疾病，如CMLCML、真红、真红、ETET、IMFIMF等；等；脾功能亢进；脾功能亢进；巨核细胞白血病。巨核细胞白血病。2)2)2)2)、巨核细胞减少、巨核细胞减少、巨核细胞减少、巨核细胞减少：见于：见于AAAA、ALAL及其他骨髓浸润及其他骨髓浸润或破坏的疾病，以及急性感染、化学物或药物中或破坏的疾病，以及急性感染、化学物或药物中毒、放射病等。毒、放射病等。感染性心内膜炎等；风湿性疾病如系统性红斑狼疮、类风湿性关节18二、骨髓细胞学检查的二、骨髓细胞学检查的内容、方法和临床意义内容、方法和临床意义、血涂片的观察、血涂片的观察在检查骨髓时，需同时进行血涂片的观察在检查骨髓时，需同时进行血涂片的观察在检查骨髓时，需同时进行血涂片的观察在检查骨髓时，需同时进行血涂片的观察1 1 1 1、应注意、应注意、应注意、应注意WBCWBCWBCWBC分类计数及形态观察；分类计数及形态观察；分类计数及形态观察；分类计数及形态观察；2 2 2 2、注意成熟、注意成熟、注意成熟、注意成熟RBCRBCRBCRBC的形态有无异常。有核红。的形态有无异常。有核红。的形态有无异常。有核红。的形态有无异常。有核红。3 3 3 3、估计、估计、估计、估计PLtPLtPLtPLt数量及注意其形态有无异常；数量及注意其形态有无异常；数量及注意其形态有无异常；数量及注意其形态有无异常；4 4 4 4、观察、观察、观察、观察寄生虫寄生虫寄生虫寄生虫有无（有无（有无（有无（如疟原虫）如疟原虫）。、填写检查报告单、填写检查报告单根据骨髓象和血象检查结果，按检查报告单的要求，根据骨髓象和血象检查结果，按检查报告单的要求，根据骨髓象和血象检查结果，按检查报告单的要求，根据骨髓象和血象检查结果，按检查报告单的要求，逐项详细填写及描述骨髓象、血象表现的特征，结逐项详细填写及描述骨髓象、血象表现的特征，结逐项详细填写及描述骨髓象、血象表现的特征，结逐项详细填写及描述骨髓象、血象表现的特征，结合临床资料提出形态学诊断意见。合临床资料提出形态学诊断意见。合临床资料提出形态学诊断意见。合临床资料提出形态学诊断意见。二、骨髓细胞学检查的内容、方法和临床意义、血涂片的观察19低倍镜观察（取材低倍镜观察（取材低倍镜观察（取材低倍镜观察（取材 涂片涂片涂片涂片 有核细胞增生有核细胞增生有核细胞增生有核细胞增生 巨核细胞巨核细胞巨核细胞巨核细胞 病理细胞）病理细胞）病理细胞）病理细胞）油镜观察油镜观察油镜观察油镜观察 骨髓有核细胞分类计数骨髓有核细胞分类计数骨髓有核细胞分类计数骨髓有核细胞分类计数200200500500个个个个 细胞系形态学观察细胞系形态学观察细胞系形态学观察细胞系形态学观察 粒系粒系粒系粒系 红系红系红系红系 单核系单核系单核系单核系 淋巴系淋巴系淋巴系淋巴系 浆系浆系浆系浆系 其他细胞其他细胞其他细胞其他细胞 计算结果（各细胞系百分比计算结果（各细胞系百分比计算结果（各细胞系百分比计算结果（各细胞系百分比 粒红比值）粒红比值）粒红比值）粒红比值）观察血片观察血片观察血片观察血片 组织化学染色组织化学染色组织化学染色组织化学染色 填写骨髓图文结果报告单填写骨髓图文结果报告单填写骨髓图文结果报告单填写骨髓图文结果报告单 （骨髓细胞特征（骨髓细胞特征（骨髓细胞特征（骨髓细胞特征 血片细胞特征血片细胞特征血片细胞特征血片细胞特征 组化特征组化特征组化特征组化特征 ）骨髓片存档保存骨髓片存档保存骨髓片存档保存骨髓片存档保存骨髓象分析步骤示意图骨髓象分析步骤示意图低倍镜观察（取材 涂片 有核细胞增生 巨核细胞 病理细20返回返回返回21三、血细胞的细胞化学染色三、血细胞的细胞化学染色 意义意义：1、有助于了解各种血细胞的化学组成及病理生理改变。2、可用作血细胞类型的鉴别。3、以及对某些血液病的诊断和鉴别诊断，疗效观察、发病机制探讨等均有一定价值。三、血细胞的细胞化学染色意义：22（一）过氧化物酶染色（一）过氧化物酶染色（POX）【原原理理】血细胞中的过氧化物酶（peroxidase，POX）能分解试剂中的底物H2O2，释出新生态氧，使无色联苯胺氧化为蓝色联苯胺，后者与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色的颗粒，沉着于细胞质中。【结结果果】胞质中无蓝黑色颗粒者为阴性反应，出现细小颗粒、分布稀疏者为弱阳性反应，颗粒粗大而密集者为强阳性反应。【临临床床意意义义】过氧化物酶染色主要用于急急性性白白血血病病类类型型的的鉴别鉴别。急急性性粒粒细细胞胞白白血血病病时，白血病细胞多呈强阳性反应；急急性性单单核核细细胞胞白白血血病病时呈弱阳性或阴性反应；急急性性淋淋巴巴细胞白血病细胞白血病则呈阴性反应。因此，POX染色对急急性性粒粒细细胞胞白白血血病病与急急性性淋淋巴巴细细胞白血病胞白血病的鉴别最有价值。（一）过氧化物酶染色（POX）【原理】血细胞中的过氧化物酶23骨髓片骨髓片POXPOX染色染色骨髓片POX染色24骨髓片POX染色APL：呈强阳性反应AML-M4：部分呈阳性反应，部分成弱阳性反应AML-M5：呈弱阳性ALL：呈阴性，3+4+。3、铁粒幼细胞性贫血铁粒幼细胞性贫血时，铁粒幼细胞增多，并可见到环状铁粒幼细胞。【参考值】41细胞外铁观察细胞外铁观察l阳性为蓝绿色沉淀阳性为蓝绿色沉淀+血色病+AA、铁粒幼贫血+感染+AA、铁粒幼贫血+NBM正常骨髓IDA细胞外铁观察阳性为蓝绿色沉淀+42骨髓铁染色（骨髓铁染色（FeFe）MDS-RAS铁染色，图中所指为环形铁粒幼红细胞铁染色，图中所指为环形铁粒幼红细胞 骨髓铁染色（Fe）MDS-RAS铁染色，图中所指为环形铁粒幼43表表表表4-2-104-2-104-2-104-2-10几种常见急性白血病的细胞化学染色结果几种常见急性白血病的细胞化学染色结果几种常见急性白血病的细胞化学染色结果几种常见急性白血病的细胞化学染色结果急淋急粒急单红白血病POXPOX+视合并的白细胞视合并的白细胞视合并的白细胞视合并的白细胞类型而定类型而定类型而定类型而定SBSB+同上同上同上同上AS-D NCEAS-D NCE+同上同上同上同上-NAE-NAE+同上同上同上同上-NAE-NaF-NAE-NaF不被不被不被不被NaFNaF抑制抑制抑制抑制被被被被NaFNaF抑制抑制抑制抑制同上同上同上同上NAPNAP增加增加增加增加减少减少减少减少正常或增加正常或增加正常或增加正常或增加 同上同上同上同上PASPAS +表4-2-10几种常见急性白血病的细胞化学染色结果急淋急粒急44四、骨髓细胞免疫学分型四、骨髓细胞免疫学分型 细胞免疫分型也称细胞免疫标记（表细胞免疫分型也称细胞免疫标记（表型）检测，它是用单克隆抗体及免疫学型）检测，它是用单克隆抗体及免疫学技术对细胞膜表面和技术对细胞膜表面和/或细胞质存在的特或细胞质存在的特异性抗原进行检测，借以分析细胞所属异性抗原进行检测，借以分析细胞所属系列，分化程度和功能状态的一种方法。系列，分化程度和功能状态的一种方法。四、骨髓细胞免疫学分型 细胞免疫分型也称细胞免疫标记45骨髓细胞免疫学分型骨髓细胞免疫学分型l l（一）检测方法1 1、免疫荧光法免疫荧光法(immunof luoresence(immunof luoresence technigue)technigue)2 2、免疫酶染色法免疫酶染色法l l（1 1）APAAPAPAAP法法l l（2 2）PAPPAP法法l l（3 3）ABCABC法法l l（二）细胞免疫分型的临床应用1 1 1 1、有助于识别不同系列的细胞、有助于识别不同系列的细胞、有助于识别不同系列的细胞、有助于识别不同系列的细胞。如识别髓。如识别髓骨髓细胞免疫学分型（一）检测方法46骨髓细胞免疫学分型骨髓细胞免疫学分型 系细胞的抗体有系细胞的抗体有CDCD1313、CDCD1414、CDCD1515、CDCD3232、CDCD3333、CDCD6565、CDCD9191、CDCD156156、CDCD166166等。识别淋巴细胞等。识别淋巴细胞系列的抗体有：系列的抗体有：CDCD1 1、CDCD2 2、CDCD3 3、CDCD4 4、CDCD5 5、CDCD7 7、CDCD8 8、CDCD9 9、CDCD1010、CDCD1919、CDCD2020、CDCD5252、CDCD7777等。识别巨核细胞和血小板的抗体有等。识别巨核细胞和血小板的抗体有CDCD4141、CDCD4242、CDCD6161等。识别红细胞系列的抗体常用等。识别红细胞系列的抗体常用血型糖蛋白血型糖蛋白A A或或B B。2 2 2 2、识别不同的淋巴细胞识别不同的淋巴细胞识别不同的淋巴细胞识别不同的淋巴细胞l l识别成熟识别成熟T T淋巴细胞的抗体有淋巴细胞的抗体有CD2CD2、CD3CD3、CD7CD7、CD8CD8等。识别成熟等。识别成熟B B淋巴细胞的抗体淋巴细胞的抗体骨髓细胞免疫学分型 系细胞的抗体有CD13、CD14、CD147骨髓细胞免疫学分型骨髓细胞免疫学分型l l有有CDCD1919、CDCD2020、CDCD2222等。识别等。识别NKNK细胞的抗体有细胞的抗体有CDCD1616、CDCD5656等。等。l l识别不同的淋巴细胞除检测细胞表面的抗原外，识别不同的淋巴细胞除检测细胞表面的抗原外，还可以检测细胞表面的受体及细胞表面其他分子，还可以检测细胞表面的受体及细胞表面其他分子，如如TCRTCR、MHCMHC等。等。3 3 3 3、用于检测用于检测用于检测用于检测T T T T淋巴细胞亚群淋巴细胞亚群淋巴细胞亚群淋巴细胞亚群l l临床上常用临床上常用CDCD3 3、CDCD4 4和和CDCD8 8单抗检测全单抗检测全T T（CDCD3 3）细）细胞，并可将外周淋巴器官和血液中胞，并可将外周淋巴器官和血液中T T细胞分为细胞分为THTH（CDCD4 4+，CDCD8 8-）和）和TSTS（CDCD4 4-、CDCD8 8+）两个主要亚）两个主要亚群，计算群，计算TH/TSTH/TS比值作为比值作为骨髓细胞免疫学分型有CD19、CD20、CD22等。识别NK48骨髓细胞免疫学分型骨髓细胞免疫学分型l l机体免疫状态、某些疾病诊断、病期分析、监测机体免疫状态、某些疾病诊断、病期分析、监测治疗和判断预后的参数。治疗和判断预后的参数。4 4 4 4、用于识别不同分化阶段的细胞用于识别不同分化阶段的细胞用于识别不同分化阶段的细胞用于识别不同分化阶段的细胞l lCD34+CD34+、CD90+CD90+、Lin-Lin-被认为是造血干细胞的主要被认为是造血干细胞的主要标志；标志；CD34+CD34+、CD33+CD33+为造血干细胞向髓系定向的为造血干细胞向髓系定向的标志；标志；CD34+CD34+、TDT+TDT+、CD10+CD10+、CD7+CD7+为为T T淋巴细胞淋巴细胞系祖细胞标志；系祖细胞标志；CD34+CD34+、CD19+CD19+为为B B淋巴细胞系祖淋巴细胞系祖细胞标志。细胞标志。l l根据不同抗体组合可根据不同抗体组合可T T、B B淋巴细胞区分为不同分淋巴细胞区分为不同分化阶段。（参照表）化阶段。（参照表）骨髓细胞免疫学分型机体免疫状态、某些疾病诊断、病期分析、监测49骨髓细胞免疫学分型骨髓细胞免疫学分型5 5 5 5、有助于识别不同功能状态的细胞有助于识别不同功能状态的细胞有助于识别不同功能状态的细胞有助于识别不同功能状态的细胞，如记忆，如记忆T T细胞细胞高表达高表达CDCD4545RORO、不表达、不表达CDCD4545RARA。活化。活化T T细胞不表达细胞不表达CDCD4545RARA，而，而CDCD2525、CDCD2 2、CDCD4545RORO、CDCD5454、CDCD5858等均强表等均强表达。达。6 6 6 6、有助于对不同系列和不同分化阶段的细胞进行分有助于对不同系列和不同分化阶段的细胞进行分有助于对不同系列和不同分化阶段的细胞进行分有助于对不同系列和不同分化阶段的细胞进行分离和研究离和研究离和研究离和研究。用免疫荧光法标记和活细胞可经流式细。用免疫荧光法标记和活细胞可经流式细胞仪或免疫磁珠法将其分离出来，并使对他们的研胞仪或免疫磁珠法将其分离出来，并使对他们的研究成为可能。究成为可能。骨髓细胞免疫学分型5、有助于识别不同功能状态的细胞，如记忆T50骨髓细胞免疫学分型骨髓细胞免疫学分型7 7 7 7、可用于各种白血病细胞的免疫表型分析可用于各种白血病细胞的免疫表型分析可用于各种白血病细胞的免疫表型分析可用于各种白血病细胞的免疫表型分析（见（见“急性急性白血病免疫表型特点白血病免疫表型特点”一节）。一节）。8 8 8 8、可用于白血病微小残留病的检查可用于白血病微小残留病的检查可用于白血病微小残留病的检查可用于白血病微小残留病的检查 一个完全缓解的白血病病人骨髓细胞中，若出现一个完全缓解的白血病病人骨髓细胞中，若出现CDCD1919、CDCD2222、CDCD1010、CDCD7 7、CDCD5 5、CDCD1313、CDCD3737、CDCD3434等任何一种抗原阳性同时等任何一种抗原阳性同时伴有伴有TdTTdT+则诊断微小残留病存在。敏感性可高达则诊断微小残留病存在。敏感性可高达1010-4-4水平。水平。（三）急性白血病细胞免疫表型特点1 1、ALLALL与与AMLAML细胞免疫表型特点细胞免疫表型特点骨髓细胞免疫学分型7、可用于各种白血病细胞的免疫表型分析（见51骨髓细胞免疫学分型骨髓细胞免疫学分型2 2 2 2、急性淋巴细胞白血病（、急性淋巴细胞白血病（、急性淋巴细胞白血病（、急性淋巴细胞白血病（ALLALLALLALL）免疫表型特点）免疫表型特点）免疫表型特点）免疫表型特点3 3 3 3、急性髓细胞白血病免疫表型特点、急性髓细胞白血病免疫表型特点、急性髓细胞白血病免疫表型特点、急性髓细胞白血病免疫表型特点4 4 4 4、免疫学分类对于双表型白血病、慢性淋巴、免疫学分类对于双表型白血病、慢性淋巴、免疫学分类对于双表型白血病、慢性淋巴、免疫学分类对于双表型白血病、慢性淋巴细胞白血病（细胞白血病（细胞白血病（细胞白血病（CLLCLLCLLCLL）、毛细胞白血病、慢性）、毛细胞白血病、慢性）、毛细胞白血病、慢性）、毛细胞白血病、慢性粒细胞白血病急变期细胞的分类和诊断也具粒细胞白血病急变期细胞的分类和诊断也具粒细胞白血病急变期细胞的分类和诊断也具粒细胞白血病急变期细胞的分类和诊断也具有重要作用。有重要作用。有重要作用。有重要作用。骨髓细胞免疫学分型2、急性淋巴细胞白血病（ALL）免疫表型特52ALL和和AML的免疫表型的免疫表型CD7 CD7 CD13 CD13 CD1CD19 9 CD33 CD33 HLA-HLA-DR DR TdT TdT MPOMPOe e AML AML-/+-/+a a +-+-c c +B-B-ALL ALL-+-+d d -T-T-ALL ALL+-b b +-注：注：注：注：a.CD7 a.CD7对少部分（对少部分（对少部分（对少部分（10%10%）AMLAML可阳性可阳性可阳性可阳性 b.10%T-ALL b.10%T-ALL病例病例病例病例HLA-DRHLA-DR可阳性表达可阳性表达可阳性表达可阳性表达 c.TdT c.TdT在少数（在少数（在少数（在少数（20%20%）AMLAML（M1M1）阳性）阳性）阳性）阳性 d.TdT d.TdT对大多数成熟对大多数成熟对大多数成熟对大多数成熟B-ALLB-ALL是阴性是阴性是阴性是阴性ALL和AML的免疫表型CD7 CD13 CD19 CD3353急性淋巴细胞白血病的免疫表型特点急性淋巴细胞白血病的免疫表型特点系列系列系列系列亚型亚型亚型亚型主要的抗原标记主要的抗原标记主要的抗原标记主要的抗原标记系列系列系列系列亚型亚型亚型亚型主要的抗原标主要的抗原标主要的抗原标主要的抗原标记记记记B B B B系列系列系列系列早期早期早期早期B B B B型型型型CD19CD19CD19CD19+,CD10,CD10,CD10,CD10T T T T系列系列系列系列前前前前T T T T型型型型CD7CD7CD7CD7+,CD2,CD2,CD2,CD2普通型普通型普通型普通型CD19CD19CD19CD19+,CD10,CD10,CD10,CD10+T T T T细胞细胞细胞细胞型型型型CD7CD7CD7CD7+,CD2,CD2,CD2,CD2+前前前前B B B B型型型型CD19CD19CD19CD19+,胞质胞质胞质胞质链链链链+B B B B细胞型细胞型细胞型细胞型CD19CD19CD19CD19+,胞膜胞膜胞膜胞膜IgIgIgIg+急性淋巴细胞白血病的免疫表型特点系列亚型主要的抗原标记系列亚54急性非急性非淋巴细胞淋巴细胞白血病的免疫表型特白血病的免疫表型特点点亚型亚型亚型亚型典型的抗原标记典型的抗原标记典型的抗原标记典型的抗原标记亚型亚型亚型亚型典型的抗原标记典型的抗原标记典型的抗原标记典型的抗原标记MM0 0CD34,33,13CD34,33,13+MM4 4CD34,33,15,14,13CD34,33,15,14,13+MM1 1同上同上同上同上MM5 5CD33,15,14,13CD33,15,14,13+MM2 2CD34,33,15,13CD34,33,15,13+MM6 6CD33,CD33,血型糖蛋白血型糖蛋白血型糖蛋白血型糖蛋白A AMM3 3CD33,13CD33,13+（HLA-DRHLA-DR阴性）阴性）阴性）阴性）MM7 7CD33,41,42,61CD33,41,42,61+急性非淋巴细胞白血病的免疫表型特点亚型典型的抗原标记亚型典型55免疫组织化学染色免疫组织化学染色 AML-M AML-M2 2（CDCD3333阳性，呈棕黄色沉淀）阳性，呈棕黄色沉淀）免疫组织化学染色 AML-M2（CD33阳性，呈棕黄色56免疫分型（流式细胞仪）免疫分型（流式细胞仪）AML-MAML-M0 0（CD5CD5、7 7、1010、1919、1414、3636、GlyAGlyA阴性）阴性）阴性）阴性）（CD13 CD13、3434、3838、3333、MPOMPO、HLA-DRHLA-DR阳性）阳性）阳性）阳性）免疫分型（流式细胞仪）AML-M0（CD5、7、10、19、57五、细胞遗传学分析五、细胞遗传学分析五、细胞遗传学分析58细胞遗传学分析细胞遗传学分析 自从自从2020世纪世纪7070年代以来由于染色体分带技术年代以来由于染色体分带技术的出现，尤其是高分辨显带技术的应用，细胞遗的出现，尤其是高分辨显带技术的应用，细胞遗传学研究在血液学领域内才得以迅速发展，特别传学研究在血液学领域内才得以迅速发展，特别是在恶性血液病的研究中不但确定了某些染色体是在恶性血液病的研究中不但确定了某些染色体异常与疾病发生、发展、诊断、治疗及预后有密异常与疾病发生、发展、诊断、治疗及预后有密切关系，而且染色断裂点也往往成为寻找癌基因切关系，而且染色断裂点也往往成为寻找癌基因或抑癌基因的标志。或抑癌基因的标志。因此血细胞染色体的检查与分析对因此血细胞染色体的检查与分析对遗传性血遗传性血遗传性血遗传性血液病液病液病液病和和恶性血液病恶性血液病恶性血液病恶性血液病的诊断、分型及病因和发病机的诊断、分型及病因和发病机制的研究有重要价值，也为制的研究有重要价值，也为遗传咨询遗传咨询遗传咨询遗传咨询、优生优育优生优育优生优育优生优育提供依据。提供依据。细胞遗传学分析 自从20世纪70年代以来由于染色体分带59（一）染色体检查方法（一）染色体检查方法 见第十章分子生物学检查中第三节染见第十章分子生物学检查中第三节染色体检查。色体检查。（一）染色体检查方法 见第十章分子生物学检60（二）染色体分析（二）染色体分析通常有两个或两以上的细胞分裂相中检出同通常有两个或两以上的细胞分裂相中检出同通常有两个或两以上的细胞分裂相中检出同通常有两个或两以上的细胞分裂相中检出同一条染色体增加或结构异常；有三个或三个以一条染色体增加或结构异常；有三个或三个以一条染色体增加或结构异常；有三个或三个以一条染色体增加或结构异常；有三个或三个以上细胞分裂相中有同一条染色体丢失才能作为上细胞分裂相中有同一条染色体丢失才能作为上细胞分裂相中有同一条染色体丢失才能作为上细胞分裂相中有同一条染色体丢失才能作为一个染色体异常克隆。一个染色体异常克隆。一个染色体异常克隆。一个染色体异常克隆。1 1、染色体命名、染色体命名人体正常细胞有人体正常细胞有人体正常细胞有人体正常细胞有46464646条染色体，根据人类细胞条染色体，根据人类细胞条染色体，根据人类细胞条染色体，根据人类细胞遗传学命名的国际体制（遗传学命名的国际体制（遗传学命名的国际体制（遗传学命名的国际体制（ISCNISCNISCNISCN），按其长短和），按其长短和），按其长短和），按其长短和着丝粒的位置编为着丝粒的位置编为着丝粒的位置编为着丝粒的位置编为A A A AG 7G 7G 7G 7组，包括组，包括组，包括组，包括1 1 1 122222222号常号常号常号常染色体及染色体及染色体及染色体及X X X X和和和和Y Y Y Y性染色体；根据显带特点，将染性染色体；根据显带特点，将染性染色体；根据显带特点，将染性染色体；根据显带特点，将染色体划区分布，一般用色体划区分布，一般用色体划区分布，一般用色体划区分布，一般用4 4 4 4个符号表示特定区带，个符号表示特定区带，个符号表示特定区带，个符号表示特定区带，如如如如“8q22”“8q22”“8q22”“8q22”则代表则代表则代表则代表8 8 8 8号染色体长臂号染色体长臂号染色体长臂号染色体长臂2 2 2 2区区区区2 2 2 2带。带。带。带。（二）染色体分析通常有两个或两以上的细胞分裂相中检出同一条染61（二）染色体分析（二）染色体分析2 2 2 2、核型分析及书写、核型分析及书写、核型分析及书写、核型分析及书写核型是指中期分裂相的全部染色体按核型是指中期分裂相的全部染色体按核型是指中期分裂相的全部染色体按核型是指中期分裂相的全部染色体按DanversDanversDanversDanvers体制体制体制体制排列而成。其格式书写顺序是：染色体数目、性染排列而成。其格式书写顺序是：染色体数目、性染排列而成。其格式书写顺序是：染色体数目、性染排列而成。其格式书写顺序是：染色体数目、性染色体、染色体异常。各项之间以逗号隔开，性染色色体、染色体异常。各项之间以逗号隔开，性染色色体、染色体异常。各项之间以逗号隔开，性染色色体、染色体异常。各项之间以逗号隔开，性染色体以大写的体以大写的体以大写的体以大写的X X X X与与与与Y Y Y Y表示，各染色变异以小写字母表示，表示，各染色变异以小写字母表示，表示，各染色变异以小写字母表示，表示，各染色变异以小写字母表示，见表见表见表见表5-15-15-15-1。一个完整核型书写方法如下：。一个完整核型书写方法如下：。一个完整核型书写方法如下：。一个完整核型书写方法如下：47474747，XYXYXYXY，+8+8+8+8，t(9;22)(q34;q11)t(9;22)(q34;q11)t(9;22)(q34;q11)t(9;22)(q34;q11)。表示。表示。表示。表示47474747条染色体，增加了条染色体，增加了条染色体，增加了条染色体，增加了一条一条一条一条8 8 8 8号染色体，第号染色体，第号染色体，第号染色体，第9 9 9 9号与第号与第号与第号与第22222222号染色体之间易位，号染色体之间易位，号染色体之间易位，号染色体之间易位，断裂点分别在第断裂点分别在第断裂点分别在第断裂点分别在第9 9 9 9号染色体长臂号染色体长臂号染色体长臂号染色体长臂3 3 3 3区区区区4 4 4 4带和第带和第带和第带和第22222222号染号染号染号染色体长臂色体长臂色体长臂色体长臂1 1 1 1区区区区1 1 1 1带。带。带。带。（二）染色体分析2、核型分析及书写62（二）染色体分析（二）染色体分析3 3、染色体畸变、染色体畸变包括数目畸变和结构畸变二类。包括数目畸变和结构畸变二类。包括数目畸变和结构畸变二类。包括数目畸变和结构畸变二类。正常人体正常人体正常人体正常人体细胞有细胞有细胞有细胞有23232323对染色体，其中对染色体，其中对染色体，其中对染色体，其中23232323条来自父方，另条来自父方，另条来自父方，另条来自父方，另23232323条来自母方，即含有两个染色体组或称为条来自母方，即含有两个染色体组或称为条来自母方，即含有两个染色体组或称为条来自母方，即含有两个染色体组或称为二倍体（二倍体（二倍体（二倍体（2n2n2n2n）。）。）。）。（三）临床常见白血病的染色体改变（三）临床常见白血病的染色体改变临床常见白血病的染色体改变见表。临床常见白血病的染色体改变见表。临床常见白血病的染色体改变见表。临床常见白血病的染色体改变见表。（二）染色体分析3、染色体畸变（三）临床常见白血病的染色体改63急性髓细胞白血病的急性髓细胞白血病的MIC分型分型 核型核型核型核型 FABFAB形态形态形态形态 MICMIC建议分型建议分型建议分型建议分型 t(8;21)(q22;q22)t(8;21)(q22;q22)M2 M2 M2/t(8;21)M2/t(8;21)t(15:17)(q22;q11-12)t(15:17)(q22;q11-12)M3M3，M3v M3v M3/t(15:17)M3/t(15:17)t/del(11)(q23)t/del(11)(q23)M5aM5a（M5b,M4M5b,M4）M5a/t(11q)M5a/t(11q)Inv/del(16)(q22)Inv/del(16)(q22)M4Eo M4Eo M4Eo/inv(16)M4Eo/inv(16)t(9;22)(q34;q11)t(9;22)(q34;q11)M1M1（M2M2）M1/t(9;22)M1/t(9;22)t(6;9)(p21-22;q34)t(6;9)(p21-22;q34)M2M2或或或或M4M4伴嗜碱粒细胞增多伴嗜碱粒细胞增多伴嗜碱粒细胞增多伴嗜碱粒细胞增多 M2/t(6;9)M2/t(6;9)inv(3)(q21q26)inv(3)(q21q26)M1(M2M1(M2、M4M4、M7)M7)伴血小板增多伴血小板增多伴血小板增多伴血小板增多 M1/inv(3)M1/inv(3)t(8;16)(p11;p13)t(8;16)(p11;p13)M5bM5b伴吞噬细胞增多伴吞噬细胞增多伴吞噬细胞增多伴吞噬细胞增多 M5b/t(8;16)M5b/t(8;16)t/del(12)(p12-13)t/del(12)(p12-13)M2M2伴嗜碱粒细胞增多伴嗜碱粒细胞增多伴嗜碱粒细胞增多伴嗜碱粒细胞增多 M2Baso/t(12p)M2Baso/t(12p)急性髓细胞白血病的MIC分型 核型 FAB形态 MIC建议分64Ph染色体染色体 是CML的特征性异常染色体，检出率为90-95%，其中绝大多数为t(9;22)(q34;q11),称为典型易位。Ph染色体 是CML的特征性异常染色体，检出率为906548,XY,+4,t(9;22),+Ph48,XY,+4,t(9;22),+Ph66急性淋巴细胞白血病的急性淋巴细胞白血病的MIC分型分型 ALLALL亚型亚型亚型亚型 免疫表型免疫表型免疫表型免疫表型 细胞遗传学细胞遗传学细胞遗传学细胞遗传学 预后预后预后预后早早早早B-ALL B-ALL TdT+TdT+、CD19+CD19+、CD10+CD10+t(9;22)(q34;q11)t(9;22)(q34;q11)预后较好预后较好预后较好预后较好前前前前前前前前B-ALL B-ALL TdT+TdT+、CD19+CD19+、CD10-CD10-11q23 11q23 预后较好预后较好预后较好预后较好B-ALL B-ALL TdT+TdT+、CD20+CD20+、SIg+SIg+t(8;14)(q24;q11)t(8;14)(q24;q11)预后不良预后不良预后不良预后不良T-ALL T-ALL t(11;14)(p13;q11)t(11;14)(p13;q11)预后较好预后较好预后较好预后较好T-ALL T-ALL t(1;14)(p32;q11)t(1;14)(p32;q11)同上同上同上同上T-ALL T-ALL t(10;14)(q24;q11)t(10;14)(q24;q11)同上同上同上同上T-ALL T-ALL t(8;14)(q24;q11)t(8;14)(q24;q11)预后不良预后不良预后不良预后不良急性淋巴细胞白血病的MIC分型 ALL亚型 免疫表型 细胞遗67多看 1、数量 2、种类 六、如何学好血液细胞形态学如何学好血液细胞形态学多看六、如何学好血液细胞形态学68多讨论 1、同事 2、老师多讨论69多读书（细胞形态、发病情况）1、常见病 2、罕见病多读书（细胞形态、发病情况）70多请教 1、教师 2、图谱多请教71多会诊 1、同级医院 2、上级医院多会诊72多沟通 1、临床 2、病人多沟通73多观察 1、细胞少时（TB、R-S细胞）2、细胞多时（特殊类型：如红细胞样瘤细胞）多观察74p经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量pStudyConstantly,AndYouWillKnowEverything.TheMoreYouKnow,TheMorePowerfulYouWillBe写在最后经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量写75谢谢大家荣幸这一路，与你同行ItS An Honor To Walk With You All The Way演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日 谢谢大家演讲人：XXXXXX 76