酶与维生素课件

酶与维生素课件1酶与维生素课件2定义定义:酶酶(Enzyme)是生物体活细胞产生的具有是生物体活细胞产生的具有特殊催化活性和特定空间构象的生物大分子，特殊催化活性和特定空间构象的生物大分子，包括蛋白质及核酸，又称为生物催化剂。包括蛋白质及核酸，又称为生物催化剂。绝大多数的酶都是蛋白质。酶催化的生物化学反应，称为酶促反应。在酶的催化下发生化学变化的物质为底物。定义:酶(Enzyme)是生物体活细胞产生的具有特殊催化活3酶与维生素课件4酶与维生素课件5酶与维生素课件6第三节第三节 酶的命名和分类酶的命名和分类 每种酶都有两个名字：习惯名称和系统名称。每种酶都有两个名字：习惯名称和系统名称。一习惯命名法：一习惯命名法：二国际系统命名法：二国际系统命名法：第三节 酶的命名和分类7酶与维生素课件8乙醇脱氢酶的编码是：乙醇脱氢酶的编码是：EC1.1.1.1 EC1.1.1.1 第一个第一个“1”“1”第第1 1大类，即氧化还原酶类；大类，即氧化还原酶类；第二个第二个“1”“1”第第1 1亚类，供氢体为亚类，供氢体为CHOHCHOH；第三个第三个“1”“1”第第1 1亚亚类，受氢体为亚亚类，受氢体为NADNAD+；第四个第四个“1”“1”在亚亚类中的顺序号。在亚亚类中的顺序号。乙醇脱氢酶的编码是：EC1.1.1.1 9 国际酶学委员会（国际酶学委员会（Enzyme Commission,ECEnzyme Commission,EC）将所有的将所有的酶按它们所催化的反应的性质分为六大类。酶按它们所催化的反应的性质分为六大类。分类分类序号序号酶的类型酶的类型催化反应的性质催化反应的性质举举 例例1 1氧化还原酶类氧化还原酶类(oxidoreductase)脱氢酶、氧化酶、过氧脱氢酶、氧化酶、过氧化物酶、加氧酶化物酶、加氧酶2 2转移酶类转移酶类(transferase)谷丙转氨酶、已糖激酶谷丙转氨酶、已糖激酶3 3水解酶类水解酶类(hydrolase)酯酶、蛋白酶、淀粉酶酯酶、蛋白酶、淀粉酶AH2+BA+BH2AR+BA+BRAB+H2OAOH+BH 国际酶学委员会（Enzyme Commission,10 国际酶学委员会（国际酶学委员会（Enzyme Commission,ECEnzyme Commission,EC）将所有的将所有的酶按它们所催化的反应的性质分为六大类。酶按它们所催化的反应的性质分为六大类。分类分类序号序号酶的类型酶的类型催化反应的性质催化反应的性质举举 例例4 4裂解酶类裂解酶类(lyase)醛缩酶、水合酶、脱氨醛缩酶、水合酶、脱氨酶、脱羧酶酶、脱羧酶5 5异构酶类异构酶类(isomerase)差向异构酶、顺反异构差向异构酶、顺反异构酶、酮醛异构酶酶、酮醛异构酶6 6合成酶类合成酶类(连接酶连接酶类类)()(ligase)羧化酶、氨酰羧化酶、氨酰-tRNA合合成酶、天冬酰胺合成酶成酶、天冬酰胺合成酶ABXYA BXYAAABABATPADPPi 国际酶学委员会（Enzyme Commission,11酶与维生素课件12酶与维生素课件13酶与维生素课件14酶与维生素课件15酶与维生素课件16酶与维生素课件171.1.“锁与钥匙锁与钥匙”学说：学说：1894年年E.Fischer 提出：提出：S分子或其一部分像钥匙一分子或其一部分像钥匙一样楔入样楔入E活性中心部位。活性中心部位。此学说强调此学说强调E与与S结构互相吻合结构互相吻合(刚性模板刚性模板)。二关于酶作用专一性的假说二关于酶作用专一性的假说1.“锁与钥匙”学说：1894年E.Fischer 提出：182.“2.“诱导契合诱导契合”假说假说 该学说认为酶表面并没有一种与底物互补该学说认为酶表面并没有一种与底物互补的固定形状，而只是由于底物的诱导才形成的固定形状，而只是由于底物的诱导才形成了互补构象。了互补构象。2.“诱导契合”假说 该学说认为酶表面并没有一种与底物互补19酶与维生素课件20一酶活力的测定：一酶活力的测定：1 1酶活力（活性）：酶活力（活性）：2 2酶的活力单位：酶的活力单位：定义：定义：国际单位（国际单位（IUIU）（）（19611961年）：年）：在最适反应条件（在最适反应条件（2525）下，每分钟内催化）下，每分钟内催化 1mol1mol底物转化为产物所需的酶量定为一个酶活力单底物转化为产物所需的酶量定为一个酶活力单位，即位，即1 IU=1mol/min1 IU=1mol/min。KatalKatal（KatKat）单位：）单位：在最适条件下，每秒钟能催化在最适条件下，每秒钟能催化1mol1mol底物转化为底物转化为产物所需的酶量为产物所需的酶量为1 Kat1 Kat单位（单位（1Kat=1mol/S1Kat=1mol/S）。）。1Kat=6010 1Kat=60106 6 IU IU，1IU=16.7 nKat 1IU=16.7 nKat。一酶活力的测定：213 3酶的比活力：酶的比活力：每每mgmg蛋白质所含的酶活力。表示酶的纯度，也表蛋白质所含的酶活力。表示酶的纯度，也表示单位质量蛋白质的催化能力。示单位质量蛋白质的催化能力。比活力比活力 =U/mg=U/mg蛋白蛋白 =总活力总活力U/U/总蛋白总蛋白mgmg4 4酶活力的测定方法：酶活力的测定方法：（1 1）分光光度法：）分光光度法：（2 2）荧光法：）荧光法：（3 3）同位素测定法：）同位素测定法：（4 4）电化学法：）电化学法：3酶的比活力：22酶与维生素课件23第一节第一节 底物浓度对酶促反应速率的影响底物浓度对酶促反应速率的影响 第一节 底物浓度对酶促反应速率的影响 24 为为了了要要解解释释这这一一现现象象，19031903年年由由HenriHenri和和WurtzWurtz提提出出了了中中间间络络合合物物学学说说：当当酶酶催催化化某某一一化化学学反反应应时时，酶酶首首先先与与底底物物结结合合生生成成中中间间复复合合物物（ESES），然然后后生生成成产产物（物（P P），并释放出酶：），并释放出酶：一中间络合物学说：一中间络合物学说：为了要解释这一现象，1903年由Henri和Wurt25（1 1）当当底底物物浓浓度度小小时时，酶酶未未被被底底物物饱饱和和，反反应应速率取快于底物浓度，为一级反应；速率取快于底物浓度，为一级反应；（2 2）底底物物浓浓度度变变大大，ESES生生成成较较多多，反反应应速速率率取取快于快于ESES的浓度，为混合级反应；的浓度，为混合级反应；（3 3）当当底底物物浓浓度度相相当当高高时时，酶酶全全部部被被底底物物饱饱和和，反反应应速速度度不不会会因因底底物物浓浓度度增增加加而而提提高高，反反应应为为0 0级。级。（1）当底物浓度小时，酶未被底物饱和，反应速率取快于底物浓度26 Michaelis&MentenMichaelis&Menten推导米氏方程推导米氏方程。二酶促反应的动力学方程式二酶促反应的动力学方程式 1.1.米氏方程的推导米氏方程的推导V=Vmax S Km+S KsKsKs为为ESES的解离常数的解离常数（Ks=kKs=k2 2/k/k1 1）Michaelis&Menten推导米氏方程。二27EE 酶总量；酶总量；EEt t 反应后反应后t t时的酶量；时的酶量；ESES 中间产物浓度中间产物浓度Et E-E-ESES19251925年年Briggs Briggs and and HaldaneHaldane提提出出了了稳稳态态理理论论，对对米米氏方程做了一项重要的修正氏方程做了一项重要的修正：（1 1）反应分二步进行：）反应分二步进行：E酶总量；Et反应后t时的酶量；Et 28(2)(2)反应体系处于稳态反应体系处于稳态 即即ESES不变不变 ESES的生成量的生成量 =ES=ES的分解量。的分解量。(2)反应体系处于稳态 即ES不变 ES的生成量=29酶与维生素课件30刚反应时，若形成的速度为刚反应时，若形成的速度为v,v,则则v v1 1 k k1 1 EEt t SS k k1 1（E E）-（ESES）S (1)S (1)ESES消失速度：消失速度：v v2 2 k k2 2ES;vES;v3 3 k k3 3ESESv v23 23 k k2 2 ESES k k3 3ES ES （k k2 2 k k3 3）ES (2)ES (2)刚反应时，若形成的速度为v,则ES消失速度：31ESES的生成量的生成量 =ES=ES的分解量的分解量即：即：v v1 1=v=v2323k k1 1（E E）-（ESES）S S=ES=ES（k k2 2 k k3 3）（E E）-（ESES）S/S/ES=ES=（k k2 2 k k3 3）/k/k1 1 (3)(3)设设 K Km m=(k=(k2 2+k+k3 3)/k)/k1 1 将将(3)(3)重排得重排得ES=ES/KES=ES/Km m S S (4)(4)ES的生成量=ES的分解量32S ES EE=ES,E=ES,Vmax=KVmax=K3 3ES=KES=K3 3E E （7 7）将（将（7 7）式代入（）式代入（6 6）式）式v=kv=k3 3ES ES （5 5）v=kv=k3 3ES/Km ES/Km SS （6 6）V=Vmax S Km+S S Ev=k3ES 33K Km m米氏常数，当酶反应速率达到最大反应速率一半时的底米氏常数，当酶反应速率达到最大反应速率一半时的底物浓度，单位：物浓度，单位：mol/Lmol/L；K Km m=(k=(k2 2+k+k3 3)/k)/k1 1 K Km m是酶的特征常数，近似表示酶与底物的亲和力。是酶的特征常数，近似表示酶与底物的亲和力。（1 1）当）当SSKmKm时，反应速率与底物浓度成正比，时，反应速率与底物浓度成正比，v v与与SS的的关系符合一级动力学。酶没有全部被底物所饱和。关系符合一级动力学。酶没有全部被底物所饱和。（2 2）当）当SSKmKm时，反应速率已达到最大速率，这时酶全部时，反应速率已达到最大速率，这时酶全部被底物所饱和，被底物所饱和，v v与与SS无关，符合无关，符合0 0级动力学，只有在此级动力学，只有在此条件下才能正确测得酶活力。条件下才能正确测得酶活力。（3 3）当）当S=KmS=Km时，反应速率为最大速率的一半，因此时，反应速率为最大速率的一半，因此KmKm就就代表反应速率达到最大反应速率一半时的底物浓度。代表反应速率达到最大反应速率一半时的底物浓度。Km米氏常数，当酶反应速率达到最大反应速率一半时的底物浓度34 Km=S Km=S 35 2.2.动力学参数的意义动力学参数的意义（1 1）米氏常数的意义：）米氏常数的意义：KmKm是酶的一个特性常数：是酶的一个特性常数：KmKm可以判断酶的专一性和天然底物：可以判断酶的专一性和天然底物：若已知某个酶的若已知某个酶的KmKm，就可计算出在某一，就可计算出在某一底物浓度时的反应速率相当于底物浓度时的反应速率相当于VmaxVmax的百的百分数。分数。KmKm可以帮助推断某一代谢反应的方向和途径：可以帮助推断某一代谢反应的方向和途径：（2 2）VmaxVmax和和k k3 3（kcatkcat）的意义：）的意义：当当SS很大时，很大时，Vmax=kVmax=k3 3EE，说明，说明VmaxVmax与与EE成线性关系，成线性关系，而直线的斜率为而直线的斜率为k k3 3，为一级反应速率常数。，为一级反应速率常数。K K3 3表示当酶被底物表示当酶被底物饱和时每秒钟每个酶分子转换底物的分子数，这个常数又叫做饱和时每秒钟每个酶分子转换底物的分子数，这个常数又叫做转换数（转换数（TNTN），），通称为通称为催化常数（催化常数（kcatkcat），），kcatkcat越大，表示酶越大，表示酶的催化效率越高。的催化效率越高。2.动力学参数的意义（1）米氏常数的意义：36（3 3）k kcatcat/Km/Km的意义：在生理条件下，大多数酶的意义：在生理条件下，大多数酶并不被底物所饱和，在体内并不被底物所饱和，在体内S/KmS/Km的比值通常的比值通常介于介于0.01-1.00.01-1.0之间。之间。Vmax=kVmax=kcatcatEET T 当当SKmS ES EE=ES,E=ES,Vmax=KVmax=K3 3ES=KES=K3 3E E （7 7）将（将（7 7）式代入（）式代入（6 6）式）式v=kv=k3 3ES ES （5 5）v=kv=k3 3ES/Km ES/Km SS （6 6）V=Vmax S Km+S S Ev=k3ES 39V=Vmax S Km+S 3.3.米氏方程中常数的测定米氏方程中常数的测定所以采用双倒数作图法：即所以采用双倒数作图法：即 1/v-1/S 1/v-1/S 作图作图 双倒数作图法（双倒数作图法（Lineweaver-Burk Plot)Lineweaver-Burk Plot)：V Vmaxmax难以测定，不能从难以测定，不能从v v V/2V/2处求得，处求得，从而导致从而导致K Km m也难确定。也难确定。V=Vmax S Km+S 3.米氏方40酶与维生素课件41酶与维生素课件42第二节第二节 pH对酶反应速度的影响对酶反应速度的影响 pHpH对酶反应速度的影响较大。其原因有：对酶反应速度的影响较大。其原因有：极度极度pHpH的条件引起酶蛋白的变性。的条件引起酶蛋白的变性。pHpH影响底物的解离，从而影响酶与底物的结合。影响底物的解离，从而影响酶与底物的结合。pHpH影响酶分子解离状态。影响酶分子解离状态。每种酶只能在一定的每种酶只能在一定的pHpH范围内表现出它的活性，范围内表现出它的活性，且在某一且在某一pHpH值范围内活性最高，其两侧活性都下降。值范围内活性最高，其两侧活性都下降。酶促反应具有一最适酶促反应具有一最适pHpH。第二节 pH对酶反应速度的影响 pH对酶反应速度的影响较大43 2 8 10 pH2 8 10 pH酶的活性A:胃蛋白酶胃蛋白酶;B:葡萄糖葡萄糖-6-磷酸酶磷酸酶AB最适PH 2 8 10 pH酶A44一些一些酶的最适的最适 pH pH 值 酶 最适 pH胃蛋白酶 1.8过氧化氢酶 7.6胰蛋白酶 7.7延胡索酸酶 7.8核糖核酸酶 7.8精氨酸酶 9.8最适最适pH：在在一定条件一定条件 下下,酶具有最大的酶具有最大的催化活性的催化活性的pH值。值。一些酶的最适 pH 值 酶 最适 45温度对酶反应速度的影响具有双重性：温度对酶反应速度的影响具有双重性：随着温度的升高，酶蛋白会失活，使反应随着温度的升高，酶蛋白会失活，使反应速度下降速度下降 随着温度的升高，反应速度会加快随着温度的升高，反应速度会加快第三节第三节温度对酶反应速度的影响温度对酶反应速度的影响 因此，在这双重因素的综合作用下，酶促反因此，在这双重因素的综合作用下，酶促反应具有一最适温度。应具有一最适温度。温度对酶反应速度的影响具有双重性：随着温度的升高，酶蛋白会失46 不同酶的最适温度也不一样。动物酶的最适温度一般在不同酶的最适温度也不一样。动物酶的最适温度一般在不同酶的最适温度也不一样。动物酶的最适温度一般在不同酶的最适温度也不一样。动物酶的最适温度一般在35-4035-4035-4035-40，植物酶为，植物酶为，植物酶为，植物酶为40-5040-5040-5040-50。少数酶可达少数酶可达6060以上，如：细菌以上，如：细菌淀粉水解酶的最适温度淀粉水解酶的最适温度9090以上。以上。嗜热细菌：嗜热细菌：TaqTaq聚合酶最适聚合酶最适温度温度7070，9393不失活。不失活。酶酶酶酶的的的的最最最最适适适适温温温温度度度度并并并并非非非非酶酶酶酶的的的的特特特特征征征征性性性性常常常常数数数数，它它它它与与与与底底底底物物物物、作作作作用用用用时时时时间间间间等因素有关。等因素有关。等因素有关。等因素有关。不同酶的最适温度也不一样。动物酶的最适温度一般在3547第四节第四节酶浓度对酶反应速度的影响酶浓度对酶反应速度的影响 在一般的酶促反应中，常常在一般的酶促反应中，常常SESE，酶反应，酶反应速度达到最大反应速度。速度达到最大反应速度。当当SESE，由于由于V Vmaxmax=kE=kE0，反应速度与酶反应速度与酶浓度成正比。浓度成正比。酶浓度曲线酶浓度曲线第四节 酶浓度对酶反应速度的影响 在一般的酶促反应中48第五节第五节激活剂对酶反应速度的影响激活剂对酶反应速度的影响激活剂：能提高酶活性的物质。激活剂：能提高酶活性的物质。无机离子：无机离子：主要是金属离子，它们有的本身就是酶的辅助主要是金属离子，它们有的本身就是酶的辅助因子，有的是酶的辅助因子的必要成分。因子，有的是酶的辅助因子的必要成分。如如:激酶需要激酶需要MgMg2+2+激活激活 唾液淀粉酶需要唾液淀粉酶需要ClCl-激活激活主要的激活剂有：主要的激活剂有：第五节 激活剂对酶反应速度的影响激活剂：能提高酶活性的物49有机小分子：有机小分子：一一些些还还原原剂剂，如如抗抗坏坏血血酸酸、半半胱胱氨氨酸酸，使使含含-SH-SH的酶处于还原态的酶处于还原态 金金属属螯螯合合剂剂，如如EDTA(EDTA(乙乙二二胺胺四四乙乙酸酸)，可可络络合合一一些些重重金金属属杂杂质质，解解除除它它们们对对酶酶的的抑抑制制，从从而而使使酶酶活升高。活升高。有机小分子：50抑制作用：有些物质与酶结合后，引起酶的活性中心抑制作用：有些物质与酶结合后，引起酶的活性中心或必需基团的化学性质发生改变，从而使或必需基团的化学性质发生改变，从而使酶活力降低或丧失。酶活力降低或丧失。第六节第六节 酶的抑制剂酶的抑制剂抑制作用：有些物质与酶结合后，引起酶的活性中心或必需基团的化51抑制作用可分为两大类：抑制作用可分为两大类：可逆抑制作用和不可逆抑制作用可逆抑制作用和不可逆抑制作用 失活作用：凡可使酶蛋白变性而引起酶活力失活作用：凡可使酶蛋白变性而引起酶活力丧失的作用。丧失的作用。抑制作用：凡使酶活力下降，但并不引起酶抑制作用：凡使酶活力下降，但并不引起酶蛋白变性的作用。蛋白变性的作用。抑制剂：能引起对酶的抑制作用的物质。抑制剂：能引起对酶的抑制作用的物质。抑制作用可分为两大类：失活作用：凡可使酶蛋白变性而引起酶活力52抑制程度的表示方法：一般用反应速率的变化来表示。抑制程度的表示方法：一般用反应速率的变化来表示。不加抑制剂时的反应速率为不加抑制剂时的反应速率为v0v0，加入抑制剂后的反应，加入抑制剂后的反应速率为速率为vivi，则表示：，则表示：（1 1）相对活力分数（残余活力分数）：）相对活力分数（残余活力分数）：a=va=vi i/v/v0 0（2 2）相对活力百分数（残余活力百分数）：）相对活力百分数（残余活力百分数）：a%=va%=vi i/v/v0 0 100%100%（3 3）抑制分数：指被抑制而失去活力的分数）抑制分数：指被抑制而失去活力的分数 i=1a=1vi=1a=1vi i/v/v0 0（4 4）抑制百分数：）抑制百分数：i%=i%=（1a1a）%=%=（1v1vi i/v/v0 0）%通常所谓抑制率是指抑制分数或抑制百分数。通常所谓抑制率是指抑制分数或抑制百分数。抑制程度的表示方法：一般用反应速率的变化来表示。不加抑制剂时53 可逆抑制作用可分为三种类型：可逆抑制作用可分为三种类型：1.1.竞争性抑制作用竞争性抑制作用 2.2.非竞争性抑制作用非竞争性抑制作用 3.3.反竞争性抑制作用反竞争性抑制作用 酶与抑制剂非共价地可逆结合，当用透析或超酶与抑制剂非共价地可逆结合，当用透析或超滤等方法除去抑制剂后酶的活性可以恢复，这种抑滤等方法除去抑制剂后酶的活性可以恢复，这种抑制作用叫可逆抑制作用。制作用叫可逆抑制作用。(一）可逆抑制作用一）可逆抑制作用 可逆抑制作用可分为三种类型：酶与抑制剂非共价54 某些抑制剂的化学结构与底物相似，与底物竞争某些抑制剂的化学结构与底物相似，与底物竞争酶的活性中心并与之结合，从而减少了酶与底物的酶的活性中心并与之结合，从而减少了酶与底物的结合，因而降低酶反应速度。这种作用称为竞争性结合，因而降低酶反应速度。这种作用称为竞争性抑制作用。抑制作用。(一）可逆抑制作用一）可逆抑制作用1.1.竞争性抑制作用竞争性抑制作用 某些抑制剂的化学结构与底物相似，与底物竞争酶的活性中心55(一）可逆抑制作用一）可逆抑制作用1.1.竞争性抑制作用竞争性抑制作用(一）可逆抑制作用1.竞争性抑制作用56例如，丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂。例如，丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂。这种抑制作用可通过增加底物浓度而使整个反应这种抑制作用可通过增加底物浓度而使整个反应平衡向生成产物的方向移动，因而能削弱或解除这种平衡向生成产物的方向移动，因而能削弱或解除这种抑制作用。抑制作用。(一）可逆抑制作用一）可逆抑制作用1.1.竞争性抑制作用竞争性抑制作用例如，丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂。这种抑制57琥珀酸琥珀酸延胡索酸延胡索酸丙二酸丙二酸琥珀酸延胡索酸丙二酸58ESESEPE EIESESEPEI59竞争性抑制中，竞争性抑制中，Vmax不变，不变，Km增大增大可通过增加底物浓度可通过增加底物浓度而使整个反应平衡向而使整个反应平衡向生成产物的方向移动，生成产物的方向移动，因而能削弱或解除这因而能削弱或解除这种抑制作用。种抑制作用。竞争性抑制中，可通过增加底物浓度而使整个反应平衡向生成产物的60Linewevery-Burk图 米氏方程Linewevery-Burk图 米氏方程61Lineweaver-Burk plot of competitive inhibitionLineweaver-Burk plot of compet62 某些抑制剂结合在酶活性中心以外的部位，因而与某些抑制剂结合在酶活性中心以外的部位，因而与底物和酶的结合无竞争，即底物与酶结合后还能与抑制底物和酶的结合无竞争，即底物与酶结合后还能与抑制剂结合，同样抑制剂与酶结合后还能与底物结合。但酶剂结合，同样抑制剂与酶结合后还能与底物结合。但酶分子上有了抑制剂后其催化功能基团的性质发生改变，分子上有了抑制剂后其催化功能基团的性质发生改变，从而降低了酶活性。这种作用称为非竞争性抑制作用。从而降低了酶活性。这种作用称为非竞争性抑制作用。2.非竞争性抑制作用这种抑制作用不能用增加底物浓度的方法来消除。这种抑制作用不能用增加底物浓度的方法来消除。(一）可逆抑制作用一）可逆抑制作用 某些抑制剂结合在酶活性中心以外的部位，因而与底物和酶632.非竞争性抑制作用非竞争性抑制剂，例如：金属络合剂，如EDTA、F-、CN-、N3-等，可以络合金属酶中的金属离子，从而抑制酶的活性。(一）可逆抑制作用一）可逆抑制作用2.非竞争性抑制作用非竞争性抑制剂，例如：(一）可逆抑制作64酶促反应动力学抑制剂酶促反应动力学抑制剂652.非竞争性抑制作用这种抑制作用不能用增加底物浓度的方法来消除。这种抑制作用不能用增加底物浓度的方法来消除。(一）可逆抑制作用一）可逆抑制作用2.非竞争性抑制作用这种抑制作用不能用增加底物浓度的方法来662.非竞争性抑制作用(一）可逆抑制作用一）可逆抑制作用Linewevery-Burk图 米氏方程2.非竞争性抑制作用(一）可逆抑制作用Linewevery67酶促反应动力学抑制剂酶促反应动力学抑制剂682.非竞争性抑制作用非竞争性抑制中，非竞争性抑制中，Vmax变小，变小，Km不变不变这种抑制作用不这种抑制作用不能用增加底物浓能用增加底物浓度的方法来消除。度的方法来消除。(一）可逆抑制作用一）可逆抑制作用2.非竞争性抑制作用非竞争性抑制中，这种抑制作用不能用增加693.反竞争性抑制作用 某些抑制剂不能与游离的酶结合，而只某些抑制剂不能与游离的酶结合，而只能在酶与底物结合成复合物后再与酶结合。能在酶与底物结合成复合物后再与酶结合。当酶分子上有了抑制剂后其催化功能被削弱。当酶分子上有了抑制剂后其催化功能被削弱。这种作用称为这种作用称为反竞争性抑制作用反竞争性抑制作用(uncompetitive inhibition)。(一）可逆抑制作用一）可逆抑制作用3.反竞争性抑制作用 某些抑制剂不能与游离的703.反竞争性抑制作用(一）可逆抑制作用一）可逆抑制作用3.反竞争性抑制作用(一）可逆抑制作用713.反竞争性抑制作用(一）可逆抑制作用一）可逆抑制作用3.反竞争性抑制作用(一）可逆抑制作用72(一）可逆抑制作用一）可逆抑制作用Summery(一）可逆抑制作用Summery73SummerySummery74(二）不可逆抑制作用二）不可逆抑制作用不可逆抑制剂不不可逆抑制剂不能用透析或超滤能用透析或超滤等方法去除。等方法去除。抑制剂以共价键不可逆地与酶相结合而抑抑制剂以共价键不可逆地与酶相结合而抑制酶的活性。这种抑制作用叫不可逆抑制作用。制酶的活性。这种抑制作用叫不可逆抑制作用。(二）不可逆抑制作用不可逆抑制剂不能用透析或超滤等方法去除。75常见的不可逆抑制剂：常见的不可逆抑制剂：碘乙酸（碘乙酸（ICH2COOH）是一种烷化剂，可使巯基烷化：是一种烷化剂，可使巯基烷化：E-SH+I-CH2COOH E-S-CH2COOH+HI 所以它是所以它是巯基酶巯基酶的抑制剂。的抑制剂。如抑制如抑制3-3-磷酸甘油醛脱氢酶、脲酶、磷酸甘油醛脱氢酶、脲酶、a a-淀粉酶等淀粉酶等(二）不可逆抑制作用二）不可逆抑制作用常见的不可逆抑制剂：碘乙酸（ICH2COOH）(二）76 有机磷化合物有机磷化合物 可使可使-OH磷酯化，所以它是活性中心有磷酯化，所以它是活性中心有Ser残基的残基的酶的抑制剂。酶的抑制剂。常见的有机磷农药，如敌敌畏、敌百虫，它们杀常见的有机磷农药，如敌敌畏、敌百虫，它们杀灭昆虫的机理就在于可抑制乙酰胆碱酯酶的活性，该灭昆虫的机理就在于可抑制乙酰胆碱酯酶的活性，该酶的作用是将神经递质乙酰胆碱水解，若它被抑制，酶的作用是将神经递质乙酰胆碱水解，若它被抑制，会导致乙酰胆碱的积累，使神经过度兴奋，引起昆虫会导致乙酰胆碱的积累，使神经过度兴奋，引起昆虫的神经系统功能失调而中毒致死。的神经系统功能失调而中毒致死。(二）不可逆抑制作用二）不可逆抑制作用 有机磷化合物(二）不可逆抑制作用77抑制作用的应用抑制作用的应用有机磷农药磺胺类药物的抑菌作用磺胺药：对氨基苯磺酰胺 竞争性抑制剂对氨基苯甲酸 叶酸的一部分 四氢叶酸的前身嘌呤核苷酸合成抑制作用的应用有机磷农药磺胺药：对氨基苯磺酰胺 78