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球球 菌菌种类种类:革兰阳性革兰阳性 葡萄球菌属、链球菌属（链球菌、肺炎葡萄球菌属、链球菌属（链球菌、肺炎链球菌）、肠球菌属、微球菌属等链球菌）、肠球菌属、微球菌属等革兰阴性革兰阴性 奈瑟菌属、布兰汉菌属奈瑟菌属、布兰汉菌属四种革兰阳性菌的比较四种革兰阳性菌的比较葡萄球菌属葡萄球菌属微球属微球属链球菌属链球菌属气球菌属气球菌属排列方式排列方式葡萄串状、葡萄串状、四联或成对四联或成对链状链状成双或四联成双或四联触酶试验触酶试验+-弱弱+氧化氧化/发发酵酵发酵发酵氧化氧化发酵发酵发酵发酵厌氧生长厌氧生长+不生长不生长+弱弱葡萄球菌属葡萄球菌属最常见的化脓性球菌最常见的化脓性球菌医务人员的葡萄球菌带菌率高医务人员的葡萄球菌带菌率高革兰阳性、葡萄串状排列革兰阳性、葡萄串状排列产生不同的脂溶性色素产生不同的脂溶性色素触酶试验阳性触酶试验阳性发酵葡萄糖发酵葡萄糖金黄色葡萄球菌是主要致病菌金黄色葡萄球菌是主要致病菌形态染色形态染色革兰阳性球菌、葡萄串状排列革兰阳性球菌、葡萄串状排列无鞭毛、无芽孢、一般不形成荚膜无鞭毛、无芽孢、一般不形成荚膜葡萄球菌革兰染色镜下图葡萄球菌革兰染色镜下图染色性：染色性：形态：形态：排列：排列：培养特性培养特性 生长条件生长条件需氧、兼性厌氧需氧、兼性厌氧营养要求不高，普通培养基上生长良好营养要求不高，普通培养基上生长良好耐盐，耐盐，1015NaCl上能生长上能生长培养特性培养特性 生长现象生长现象液体培养基：均匀混浊、少许沉淀液体培养基：均匀混浊、少许沉淀固体培养基：中等大小菌落、圆形、凸固体培养基：中等大小菌落、圆形、凸起、边缘整齐、光滑、湿润的起、边缘整齐、光滑、湿润的S型菌落型菌落常用培养基及菌落特征常用培养基及菌落特征血平板（营养培养基）血平板（营养培养基）：中等大小、光滑型菌落、脂溶性色素色素、中等大小、光滑型菌落、脂溶性色素色素、透明溶血环（致病葡萄球菌）透明溶血环（致病葡萄球菌）高盐甘露醇平板（选择鉴别培养基）高盐甘露醇平板（选择鉴别培养基）：淡橙黄色菌落（致病葡萄球菌）淡橙黄色菌落（致病葡萄球菌）卵黄高盐琼脂平板（选择鉴别培养基）卵黄高盐琼脂平板（选择鉴别培养基）：菌落周围形成白色沉淀圈（致病葡萄球菌）菌落周围形成白色沉淀圈（致病葡萄球菌）生化反应生化反应触酶试验：触酶试验：+葡萄糖氧化发酵试验：发酵葡萄糖氧化发酵试验：发酵+甘露醇分解试验：甘露醇分解试验：+（致病菌株）（致病菌株）抗原构造抗原构造葡萄球菌葡萄球菌A蛋白（蛋白（SPA）存在于金黄色葡萄球菌细胞壁存在于金黄色葡萄球菌细胞壁可与人和其它哺乳动物可与人和其它哺乳动物IgGFc段非特异性段非特异性结合，应用于结合，应用于协同凝集试验协同凝集试验抵抗吞噬细胞的吞噬抵抗吞噬细胞的吞噬多糖抗原多糖抗原具有型的特异性具有型的特异性,有助于金葡菌感染的诊有助于金葡菌感染的诊断断分类和分型分类和分型 葡萄球菌包括葡萄球菌包括32种及亚种种及亚种根据产生色素的不同分类根据产生色素的不同分类根据产生凝固酶与否进行分类根据产生凝固酶与否进行分类按噬菌体分型法分类按噬菌体分型法分类葡萄球菌传统分类葡萄球菌传统分类金黄色金黄色葡萄球菌葡萄球菌表皮表皮葡萄球菌葡萄球菌腐生腐生葡萄球菌葡萄球菌产生溶血毒素产生溶血毒素+产生凝固酶产生凝固酶+产生耐热产生耐热DNA酶酶+产生产生SPA+新生霉素敏感性新生霉素敏感性SSR致病性致病性强强弱弱无无金葡菌噬菌体分型金葡菌噬菌体分型分型：分五个群，共分型：分五个群，共22型型意义：追踪传染源意义：追踪传染源抵抗力抵抗力是抵抗力最强的无芽孢细菌是抵抗力最强的无芽孢细菌耐干燥耐干燥对龙胆紫敏感对龙胆紫敏感易形成耐药性：耐甲氧西林金黄色葡萄易形成耐药性：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（球菌（MRSA）已成为医院感染最常见）已成为医院感染最常见的致病菌的致病菌致病物质致病物质凝固酶凝固酶葡萄球菌溶素葡萄球菌溶素杀白细胞素杀白细胞素肠毒素肠毒素剥脱毒素剥脱毒素毒性休克综合征毒素毒性休克综合征毒素1凝固酶凝固酶游离凝固酶：游离凝固酶：采用试管法检测采用试管法检测结合凝固酶：结合凝固酶：采用玻片法检测采用玻片法检测金葡菌凝固酶试验均为阳性金葡菌凝固酶试验均为阳性凝固酶试验是鉴定金葡菌的重要标志凝固酶试验是鉴定金葡菌的重要标志游离凝固酶游离凝固酶协同因子协同因子凝血酶凝血酶纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白纤维蛋白血浆凝固血浆凝固结合凝固酶（位于菌体表面）结合凝固酶（位于菌体表面）纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白纤维蛋白细菌凝集细菌凝集所致疾病所致疾病侵袭性疾病侵袭性疾病化脓性感染：疖、痈、甲沟炎、中耳炎、化脓性感染：疖、痈、甲沟炎、中耳炎、脑膜炎、败血症等脑膜炎、败血症等毒素性疾病：毒素性疾病：食物中毒、假膜性肠炎等食物中毒、假膜性肠炎等免疫性免疫性有一定天然免疫力有一定天然免疫力病后获得的免疫力作用不强、不持久病后获得的免疫力作用不强、不持久微生物学检验细菌鉴定的基本程序细菌鉴定的基本程序标本标本直接涂片直接涂片革兰染色镜检革兰染色镜检分离培养分离培养取可疑菌落取可疑菌落鉴定试验和药敏试验鉴定试验和药敏试验结果报告结果报告标本采集标本采集根据病种不同，采集不同标本根据病种不同，采集不同标本 脓液、创伤分泌液、穿刺液、血液、尿脓液、创伤分泌液、穿刺液、血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便液、痰液、脑脊液、粪便检验程序检验程序脓、穿刺液、尿液、痰脓、穿刺液、尿液、痰脑脊液脑脊液血液血液粪便、呕吐物粪便、呕吐物增菌培养增菌培养分离培养分离培养分离培养分离培养分离培养分离培养直接涂片染色直接涂片染色鉴定试验和药敏试验鉴定试验和药敏试验菌落涂片染色菌落涂片染色血浆凝固酶血浆凝固酶耐热核酸酶耐热核酸酶药敏试验药敏试验其它试验其它试验报告报告金葡菌脓标本检验程序金葡菌脓标本检验程序脓标本脓标本分离培养分离培养(血平板血平板)直接涂片染色直接涂片染色鉴定试验和药敏试验鉴定试验和药敏试验报告报告血浆凝固酶血浆凝固酶耐热核酸酶耐热核酸酶药敏试验药敏试验其它试验其它试验涂片染色涂片染色检验方法检验方法直接镜检直接镜检方法方法:取标本直接涂片取标本直接涂片,革兰染色后镜检革兰染色后镜检初步报告初步报告:“查见革兰阳性葡萄串状排列球菌，疑似查见革兰阳性葡萄串状排列球菌，疑似葡萄球菌葡萄球菌”“查见革兰阳性球菌查见革兰阳性球菌”检验方法检验方法分离培养分离培养脓、痰、脑脊液标本脓、痰、脑脊液标本接种血平板接种血平板菌落特征：光滑型、中等大小、脂溶性菌落特征：光滑型、中等大小、脂溶性色素、透明溶血环（色素、透明溶血环（-溶血环）溶血环）检验方法检验方法分离培养分离培养粪便标本粪便标本高盐甘露醇平板高盐甘露醇平板菌落特征：光滑型、中等大小、淡黄色菌落特征：光滑型、中等大小、淡黄色菌落菌落检验方法检验方法分离培养分离培养血标本血标本增菌（葡萄糖肉汤）增菌（葡萄糖肉汤）分分离培养（血平板）离培养（血平板）生长现象：混浊、胶胨状凝固、溶血生长现象：混浊、胶胨状凝固、溶血金葡菌的鉴定依据金葡菌的鉴定依据血平板上金黄色色素、血平板上金黄色色素、-溶血环溶血环血浆凝固酶血浆凝固酶 +发酵甘露醇发酵甘露醇 +耐热核酸酶耐热核酸酶 +凝固酶阴性葡萄球菌（凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）条件致病菌条件致病菌医院内感染的重要病原菌医院内感染的重要病原菌对多种抗生素耐药对多种抗生素耐药耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）是院内感染的重要病原菌之一，）是院内感染的重要病原菌之一，MRSA、MRCNS对多种抗生素耐药，对多种抗生素耐药，MRSA不仅对青霉素类、头孢菌素类等不仅对青霉素类、头孢菌素类等内酰胺类抗菌药物耐药，同时也对四环素、内酰胺类抗菌药物耐药，同时也对四环素、红霉素、氯霉素、克林霉素及庆大霉素等红霉素、氯霉素、克林霉素及庆大霉素等常用抗菌药物耐药，对利褔平和磺胺的耐常用抗菌药物耐药，对利褔平和磺胺的耐药率也达药率也达30，但通常对万古霉素敏感。，但通常对万古霉素敏感。MRSA、MRCNS常常引起院内感染与播散，常常引起院内感染与播散，且难于治疗和控制，病死率高。且难于治疗和控制，病死率高。有资料表明两者的耐药谱及机理都有许有资料表明两者的耐药谱及机理都有许多相似的地方，其传播方式是患者多相似的地方，其传播方式是患者医护人员医护人员患者之间的传播，特别是患者之间的传播，特别是医护人员手的传播，这些带菌者是有可医护人员手的传播，这些带菌者是有可能成为传染源，推测病房医护人员能成为传染源，推测病房医护人员MRSA,MRCNS带菌可能是由于长期工带菌可能是由于长期工作在病房，接触患者较多所致。作在病房，接触患者较多所致。鉴定试验鉴定试验：血浆凝固酶试验：血浆凝固酶试验玻片法：检测结合型血浆凝固酶，简便玻片法：检测结合型血浆凝固酶，简便快速快速试管法：检测游离型血浆凝固酶，灵敏试管法：检测游离型血浆凝固酶，灵敏生理盐水生理盐水待检细菌待检细菌新鲜兔血浆新鲜兔血浆协同凝集试验协同凝集试验金葡菌金葡菌SPASPA 细胞膜细胞膜细胞质细胞质细胞壁细胞壁
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