校准品的溯源问题综述课件

检验结果的溯源性与标准化检验结果的溯源性与标准化 检测方法的分类检测方法的分类分类有不同观点分类有不同观点,大致上可分三类：大致上可分三类：n确认方法（确认方法（Definitive methodDefinitive method）；）；n参考方法（参考方法（Reference methodReference method）；）；n常规方法（常规方法（Routine methodRoutine method）。Definitive Methodn能直接追溯到国际基本单位或基本常数，有坚实的理论基础和严格的数学表达的方法。它的精密度、准确度、测量范围和稳定性已经过严谨地研究与验证，具有最高水平。目前国际公认的化学测量权威方法有精密库仑法、同位素稀释质谱法、重量法、容量法、凝固点下降法Reference Methodn指具有较高的精密度和稳定性的方法，其准确度已用权威方法或不同原理的其它方法核验，证明不存在可察觉的方向性系统误差，可估计出其测量结果的总不确定度。IFCC对方法分类的定义对方法分类的定义n确认方法：经过详尽的研究，没有发现确认方法：经过详尽的研究，没有发现具有已知的不准确度的方法。具有已知的不准确度的方法。n参考方法：经过详尽的研究，表明仅具参考方法：经过详尽的研究，表明仅具有可以忽略不计的不准确度的方法。有可以忽略不计的不准确度的方法。n常规方法：具有系列书面的操作规程，常规方法：具有系列书面的操作规程，说明检验人员为获得结果所必需的操作说明检验人员为获得结果所必需的操作程序、材料和仪器等的方法。程序、材料和仪器等的方法。(1978 (1978年年IFCCIFCC认可文件认可文件)。葡萄糖测定葡萄糖测定方法的示例方法的示例n确认方法为同位素稀释质谱法（确认方法为同位素稀释质谱法（ID-MSID-MS）n参考方法为去蛋白的己糖激酶终点法参考方法为去蛋白的己糖激酶终点法n常规方法为葡萄糖氧化酶常规方法为葡萄糖氧化酶-过氧化物酶过氧化物酶-TrinderTrinder反应终点比色法。反应终点比色法。标准品定义标准品定义n标标准准品品：在在使使用用时时，完完全全依依据据称称量量确确定定用用量量，配配制制成成标标准准液液或或参参考考液液。即即内内含含已已知知加加入入量量分分析析物物的的溶溶液液，或或者者用用参参考考的的或或确确认认的的检检验验方方法法重重复复检检验验得得到到定定值值的的 溶溶 液液（美美 国国 HCFAHCFA法法 规规 Appendix Appendix C,Survey procedures,C,Survey procedures,PC122 PC122 导则文件）导则文件）参考品定义参考品定义nRMRM（Reference Reference materialmaterial）/（Reference Reference preparationpreparation）:具具有有已已知知或或设设定定的的定定量量特特性性（如如：浓浓度度，活活力力，强强度度，反反应应性性，应应答答性性）的的材材料料或或装装置置。它它的的一一个个或或多多个个特特性性值值已已被被充充分分和和完完整整地地确确定定。用用于于设设备备的的校校准准、测测定定方方法法的评估或对材料定值（的评估或对材料定值（VIM93-6.13VIM93-6.13）n认证参考材料认证参考材料(CRM):CRM):某参考材料，由技术上证某参考材料，由技术上证实的方法确认它的一个或多个值，并附有或可实的方法确认它的一个或多个值，并附有或可溯源于由公认团体签发的认可书或其它文件溯源于由公认团体签发的认可书或其它文件(NRSCL13)NRSCL13)一级参考品一级参考品nCertified Reference Materials（CRMs)是指用权威方法或用二种以上不同原理的标准方法以及其他准确可靠方法定值，不确定度具有国内最高水平，均匀性、稳定性良好的物质。它在溯源链中起着承上启下的作用，许多二级参考品就是通过一级参考品溯源至国家基准的。二级参考品二级参考品nReference Materials：是用与一级参考品进行比较测量的方法或一级参考品的定值方法定值，其不稳定度和均匀性未达到一级参考品水平，但能满足一般测量的需要。其定值通常采用相对测量法，即用相应的一级参考品来校准仪器，采用多种不同的分析方法（如标准曲线法、标准加入法、内标法）进行比较测量而确定其量值不确定度的水平。校准品校准品(Calibrator)n（三级）校准品：三级）校准品：由各公司建立定值方案，确保准确度的传递而形成公司专用的校准品值的参考品。所以，校准品是公司专有的，它在日常分析检测中被大量采用。参考品（标准品）参考品（标准品）n检验专用的参考品示例（一级）：检验专用的参考品示例（一级）：部分美国国家标准和检测研究院部分美国国家标准和检测研究院（NISTNIST）原国家标准局原国家标准局NBSNBS提供的提供的标准参考品标准参考品（StangdardStangdard Reference Reference MaterialMaterial，SRMSRM），），如：如：SRM927B SRM927B：牛血清白蛋白牛血清白蛋白 SRM916 SRM916：胆红素；胆红素；SRM918 SRM918：氯化钾；氯化钾；SRM912A SRM912A：尿素。尿素。二级参考品二级参考品n目前国际上提供的公认的检验专用参考目前国际上提供的公认的检验专用参考品有：品有：美国美国NISTNIST的的SRMSRM；欧洲共同体标准局（欧洲共同体标准局（BCRBCR）的的CRMCRM；世界卫生组织（世界卫生组织（WHOWHO）的参考品；的参考品；英国国立生物学及控制品研究院英国国立生物学及控制品研究院（NIBSCNIBSC）参考品等。参考品等。参考实验室的要求参考实验室的要求n参考实验室必须得到医学会的认可并接受其监督参考实验室必须得到医学会的认可并接受其监督n参参考考实实验验室室或或他他的的主主办办者者必必须须证证实实：愿愿意意提提供供有有资资格格和和经经验验丰丰富富的的人人员员参参与与工工作作，具具有有必必要要的的手手段段（场地、设备等）（场地、设备等）n提供各种经费支持提供各种经费支持n若若参参考考实实验验室室有有主主办办者者，她她应应是是具具法法定定资资格格的的科科学学/医医学学协协会会，一一个个相相应应的的研研究究所所或或是是一一个个政政府府部部门门机机构构。但但是是，和和实实验验室室所所在在机机构构行行使使的的行行政政职职责责无无任任何必然的关系何必然的关系n和试剂、标准、控制品、仪器厂商和试剂、标准、控制品、仪器厂商/进口商无关进口商无关n条件不符，可撤销认可条件不符，可撤销认可参考实验室的参考实验室的要求要求n由由医医学学会会指指定定，任任期期2 2年年。参参考考实实验验室室履履行行本本准准则则，应应和和具具法法定定资资格格的的医医学学或或科科技技学学会会合合作作。若若不不符符合合先先决决条条件件，可可在在任任何何时候被取消。时候被取消。n参参考考实实验验室室是是科科技技实实验验室室，具具有有所所有有必必须须设设备备和和技技术术，保保证证分分析析结结果果的的可可靠靠性性。其其负负责责人人有有专专门门知知识识和和经经验验，具具发发展展和和试试验验新方法的能力，有有关参考方法的论著。新方法的能力，有有关参考方法的论著。n不允许对建立参考方法值有关的工作做广不允许对建立参考方法值有关的工作做广告。告。参考实验室参考实验室n世界上被医学检验界认可的参考实验室，世界上被医学检验界认可的参考实验室，并不是可以对所有检验项目都可以使用并不是可以对所有检验项目都可以使用参考方法对委托样品进行测定定值。他参考方法对委托样品进行测定定值。他们只是在一个或几个项目上具有参考实们只是在一个或几个项目上具有参考实验室的资格。验室的资格。参考方法、参考品和参考实验室参考方法、参考品和参考实验室n如美国如美国Dr.DoumasDr.Doumas BT BT，在总蛋白、胆红在总蛋白、胆红素标准化中的贡献，获得全世界公认。素标准化中的贡献，获得全世界公认。他的实验室为专做样品总蛋白和总胆红他的实验室为专做样品总蛋白和总胆红素的参考实验室。完全为手工操作，人素的参考实验室。完全为手工操作，人员要求高，效率低，收费昂贵。员要求高，效率低，收费昂贵。n该实验室使用该实验室使用DoumasDoumas双缩脲法进行总蛋双缩脲法进行总蛋白测定时，使用美国白测定时，使用美国SRM927BSRM927B为蛋白标为蛋白标准。准。参考实验室参考实验室n所有确认方法和参考方法都是手工的操作方法。所有确认方法和参考方法都是手工的操作方法。n使用自动分析仪的方法，尽管在检测原理上和使用自动分析仪的方法，尽管在检测原理上和参考方法相同，但不属于参考方法。如：自动参考方法相同，但不属于参考方法。如：自动分析仪上葡萄糖的己糖激酶动态法。反应原理分析仪上葡萄糖的己糖激酶动态法。反应原理和参考方法相同，但是，没有去除蛋白，不是和参考方法相同，但是，没有去除蛋白，不是终点法；且是在自动分析仪上操作。终点法；且是在自动分析仪上操作。n即使完全按照参考方法检测，如果不是即使完全按照参考方法检测，如果不是参考实参考实验室验室的检测，亦无法确认结果的可靠性。的检测，亦无法确认结果的可靠性。临床检验的目的与传统临床检验的目的与传统n目的：对病人新鲜标本检验报告可靠的目的：对病人新鲜标本检验报告可靠的结果。结果。n传统：对收集的患者标本只做一次检验，传统：对收集的患者标本只做一次检验，就发出报告。就发出报告。n两个基本要求两个基本要求:精密度：重复性好；精密度：重复性好；准确度：和参考方法具有可比性。准确度：和参考方法具有可比性。溯源性（溯源性（Traceabilityraceability）n通通过过一一条条具具有有规规定定不不确确定定度度的的不不间间断断的的比比较较链链，使使测测量量结结果果或或测测量量标标准准的的值值能能够够与与规规定定的的参参考考标标准准，通通常常是是与与国国家家标标准准或或国国际际标标准准联联系系起起来来的的特特性性。VIMVIM：19931993，定义定义6.106.10 溯源的困难性溯源的困难性n临床检验公认：在参考实验室内，由具临床检验公认：在参考实验室内，由具有认可资格的操作人员使用参考方法、有认可资格的操作人员使用参考方法、或以参考品为标准，对新鲜标本进行的或以参考品为标准，对新鲜标本进行的检测结果是参考值结果。检测结果是参考值结果。n参考实验室的所有参考方法是手工方法；参考实验室的所有参考方法是手工方法；或使用参考品校准的方法，在实现参考或使用参考品校准的方法，在实现参考值的传递上非常烦琐。在日常检测中，值的传递上非常烦琐。在日常检测中，无法使用这样的参考方法或参考品进行无法使用这样的参考方法或参考品进行大量病人标本的检测，出报告。大量病人标本的检测，出报告。现实的需求现实的需求n让常规的检测系统，对病人标本的检测，在让常规的检测系统，对病人标本的检测，在计量单位一致的前提下，得到和参考系列计量单位一致的前提下，得到和参考系列相相同的检测量值同的检测量值。这就是通过一条。这就是通过一条不间断的比不间断的比较链（方法学比较）较链（方法学比较），使检测结果或检测标，使检测结果或检测标准的值能够与规定的参考标准，通常是与国准的值能够与规定的参考标准，通常是与国家标准或国际标准；或和参考方法检测值联家标准或国际标准；或和参考方法检测值联系起来。为此，生产厂商必须对完成检测涉系起来。为此，生产厂商必须对完成检测涉及的检测系统各组分（仪器、试剂、校准品、及的检测系统各组分（仪器、试剂、校准品、和操作程序）进行严格的标准化程序，实现和操作程序）进行严格的标准化程序，实现溯源性。溯源性。临床检验的标准化临床检验的标准化n为了实现临床检验结果的溯源性，为了实现临床检验结果的溯源性，检测系统的生产厂商的所有努力，检测系统的生产厂商的所有努力，进行有秩序的特定活动所制定并实进行有秩序的特定活动所制定并实施各项规则的过程为标准化。施各项规则的过程为标准化。临床检验的特点临床检验的特点 1 1检验的检测对象是病人标本，而且检验的检测对象是病人标本，而且一定绝大多数是新鲜的标本。实验室使一定绝大多数是新鲜的标本。实验室使临床和病人满意的是检验结果的可靠性。临床和病人满意的是检验结果的可靠性。实现结果可靠性的质量管理有许多内容实现结果可靠性的质量管理有许多内容在保证收集和处理的标本质量、在检验在保证收集和处理的标本质量、在检验后不存在处理检测数据和发出报告的差后不存在处理检测数据和发出报告的差错前提下，获得可靠结果的主要阶段是错前提下，获得可靠结果的主要阶段是分析过程的质量。分析过程的质量。2 2临床检验的习惯是对临床检验的习惯是对每份病人标本每份病人标本只做一次检测，就发出报告；而且，每只做一次检测，就发出报告；而且，每个标本内究竟内含多少分析物无法知道个标本内究竟内含多少分析物无法知道。因此，度量检验的分析质量不能以工业因此，度量检验的分析质量不能以工业上的多次采样、多次检测或测量、取均上的多次采样、多次检测或测量、取均值和预定标准比较等方式来观察。值和预定标准比较等方式来观察。3 3病人结果可靠性的含义是准确度。病人结果可靠性的含义是准确度。定义：定义：检测结果和被检测物检测结果和被检测物/分析物真值分析物真值间的一致性。间的一致性。a.a.作为结果，在真值和该值间的差异，通作为结果，在真值和该值间的差异，通常表示为相同的计量单位；此时，表示常表示为相同的计量单位；此时，表示差异的更确切的词为差异的更确切的词为“不准确度不准确度”。b.b.可以使用可以使用“可接受的参考值可接受的参考值”替代替代“真真值值”。c.c.特别是对每个标本只作一次测定时，特别是对每个标本只作一次测定时，差差异异不仅包括分析过程的不准确度，也包不仅包括分析过程的不准确度，也包括了分析过程的不精密度括了分析过程的不精密度。NCCLSNCCLS 4 4检验质量的首要问题检验质量的首要问题:分析过程（检测）精密度。分析过程（检测）精密度。定义：定义：各个重复检测值间的一致性各个重复检测值间的一致性。度量精密度的指标是不精密度。度量精密度的指标是不精密度。也即：临床要求结果的重复性好。也即：临床要求结果的重复性好。自动化分析仪的优点自动化分析仪的优点a.a.非常显著地非常显著地改善了改善了重复性重复性,即精密度的即精密度的水平水平。b.b.极大地提高了检验的效率和质量极大地提高了检验的效率和质量实现溯源的前提实现溯源的前提n保持检验必需的自动化仪器、试剂、校保持检验必需的自动化仪器、试剂、校准品、和操作程序的固定组合。准品、和操作程序的固定组合。n要使检验结果的量值和参考系统结果一要使检验结果的量值和参考系统结果一致，也就是对涉及检验的检测系统各组致，也就是对涉及检验的检测系统各组分的标准化。分的标准化。检测系统检测系统n完成一个检验项目检测所涉及的仪器、试剂、完成一个检验项目检测所涉及的仪器、试剂、校准品、操作程序、质量控制、保养计划等的校准品、操作程序、质量控制、保养计划等的组合，称为检测系统。若是手工操作，还必须组合，称为检测系统。若是手工操作，还必须包括具体的操作人员包括具体的操作人员n只有使检测系统的组合固定下来，才能使检验只有使检测系统的组合固定下来，才能使检验结果具有明确的性能。结果具有明确的性能。n实现检验结果溯源性的重要前提，也只能在检实现检验结果溯源性的重要前提，也只能在检测系统中予以体现。测系统中予以体现。标准化的各要素标准化的各要素校准品校准品试剂试剂分析仪分析仪检测系统的要素检测系统的要素检测系统的分析性能检测系统的分析性能 衡量一个检测系统（检验方法）的衡量一个检测系统（检验方法）的基本分析性能有基本分析性能有4 4点：点：不精密度、不精密度、不准确度、不准确度、病人结果可报告范围、病人结果可报告范围、分析灵敏度。分析灵敏度。校准品校准品试剂试剂 仪器仪器病人标本检验结果病人标本检验结果按指导和规范校准按指导和规范校准按检测程序按检测程序 检测检测具溯源性和可比性具溯源性和可比性病人标本结果的溯源性病人标本结果的溯源性n使用了自动化分析仪，日常检验的精密度得到使用了自动化分析仪，日常检验的精密度得到了显著的提高了显著的提高n优良试剂盒的病人结果的可报告范围也可以满优良试剂盒的病人结果的可报告范围也可以满足临床要求足临床要求n大多常规检验项目没有对极低浓度的临床要求大多常规检验项目没有对极低浓度的临床要求n结果的可靠性的关键是准确度结果的可靠性的关键是准确度，即对校准品值即对校准品值的调节。因此，实现新鲜病人标本结果的溯源的调节。因此，实现新鲜病人标本结果的溯源性，成为使校准品值实现溯源性。性，成为使校准品值实现溯源性。标准品标准品(Standard)Standard)传统的临床检验，要使检验结果可靠或传统的临床检验，要使检验结果可靠或有依据，往往有一个标准品有依据，往往有一个标准品。n标准品的定值由称量和容积计算确定。标准品的定值由称量和容积计算确定。检定不合格即报废，决不可将实测值替检定不合格即报废，决不可将实测值替代修正。代修正。基质效应基质效应(Matrix effect)检测系统检测标本中的分析物时检测系统检测标本中的分析物时,处于分处于分析物周围的所有非分析物质析物周围的所有非分析物质(基体基体)对分对分析物参与反应的影响析物参与反应的影响.基质效应的再认识基质效应的再认识(1)n n包括总的干扰，同一基体状态的包括总的干扰，同一基体状态的ME随方随方法和检测条件而异法和检测条件而异n nME是绝对的是绝对的n n严格起来，不同批号试剂，其严格起来，不同批号试剂，其ME不一样不一样n n度量有无度量有无ME，最佳样品是人新鲜标本最佳样品是人新鲜标本n n明了单一标准液、校准品、控制品和新鲜明了单一标准液、校准品、控制品和新鲜标本间的区别标本间的区别基质效应的再认识基质效应的再认识(2)n n不应再用单一标准液校准或标化结果不应再用单一标准液校准或标化结果n n不用控制品作校准品校准仪器不用控制品作校准品校准仪器n n不可将定值血清靶值或均值作为自己的均值不可将定值血清靶值或均值作为自己的均值n n仅以控制品测定值相似或等于定值，不足以仅以控制品测定值相似或等于定值，不足以说明方法的准确度说明方法的准确度n n校准品必须专用于某一检测系统校准品必须专用于某一检测系统n n同一校准品用于不同仪器时，应该有不同的同一校准品用于不同仪器时，应该有不同的校准值校准值校准品和定值校准品和定值 为了克服因纯标准液和病人样品间为了克服因纯标准液和病人样品间的基体差异，对检验结果的严重误的基体差异，对检验结果的严重误差，差，2020年前开始引用具有与病人样年前开始引用具有与病人样品基体相似的校准品替代标准品，品基体相似的校准品替代标准品，用于日常工作。用于日常工作。校准品校准品n尽管校准品的主要来源是人的血清，尽管校准品的主要来源是人的血清，为了使校准品内的一些分析物水平为了使校准品内的一些分析物水平达到某个程度，而且形成稳定的产达到某个程度，而且形成稳定的产品，所有的校准品、控制品、室间品，所有的校准品、控制品、室间调查品等都是调查品等都是处理过的血清处理过的血清。和原。和原来的天然血清间又产生了新的基体来的天然血清间又产生了新的基体差异。差异。校准品校准品（1 1）校准值随方法而异）校准值随方法而异 校准品中被检分析物的含量无法由校准品中被检分析物的含量无法由称量法和容量法确定，只能依赖于称量法和容量法确定，只能依赖于分析方法。校准品的校准值必须取分析方法。校准品的校准值必须取决于分析方法或检测体系。决于分析方法或检测体系。最佳校准品最佳校准品新鲜病人标本是最佳校准品新鲜病人标本是最佳校准品原因：所有用于检验中的检测方法、原因：所有用于检验中的检测方法、仪器、试剂等都是用来检测病人新仪器、试剂等都是用来检测病人新鲜标本的，不是用来检测校准品这鲜标本的，不是用来检测校准品这样的处理过样品。样的处理过样品。最佳校准品最佳校准品n如果先用公认的参考方法检测病人标本，如果先用公认的参考方法检测病人标本，再以具有参考值的病人标本去校准某检再以具有参考值的病人标本去校准某检测系列（包括方法、试剂、仪器），此测系列（包括方法、试剂、仪器），此时该检测系列再检测其他新鲜病人标本时该检测系列再检测其他新鲜病人标本时，被检测的病人标本结果的溯源性可时，被检测的病人标本结果的溯源性可上溯至公认的参考方法。也即新鲜病人上溯至公认的参考方法。也即新鲜病人标本是校准检测体系的最佳校准品。标本是校准检测体系的最佳校准品。校准品的矛盾n新鲜病人标本的局限性，加工的稳定血新鲜病人标本的局限性，加工的稳定血清将成为商品化的校准品材料。清将成为商品化的校准品材料。n所有商业校准品都是处理过的样品，所有商业校准品都是处理过的样品，和新鲜病人标本有基体差异。和新鲜病人标本有基体差异。商业校准品的问题商业校准品的问题 若若使使用用公公认认的的参参考考方方法法去去标标化化测测定定校校准准品品，测测定定值值是是可可靠靠的的，但但使使用用该该测测定定值值去去校校准准常常规规的的检检测测系系列列时时，校校准准品品中中被被检检分分析析物物参参与与反反应应时时的的表表现现明明显显不不同同于于新新鲜鲜病病人人标标本本，校校准准品品的的测测定定值值不不能能将将参参考考方方法法系系列列的的准准确确度度通通过校准品传递给病人标本过校准品传递给病人标本。理解校准品理解校准品n使用校准品的目的，是使检测系统对病人标使用校准品的目的，是使检测系统对病人标本检测结果，实现溯源性。本检测结果，实现溯源性。(在计量单位一致在计量单位一致的前提下，检验结果的量值和参考系统对病的前提下，检验结果的量值和参考系统对病人标本检测的结果量值具有可比性。人标本检测的结果量值具有可比性。）n校准品定值方案在系列标准化内容中，是一校准品定值方案在系列标准化内容中，是一个最突出的课题。个最突出的课题。n实现病人结果的溯源性，必须在校准品定值实现病人结果的溯源性，必须在校准品定值过程中，自始至终使用病人新鲜标本。过程中，自始至终使用病人新鲜标本。n坚持使用方法学比较实验，反复传递和验证坚持使用方法学比较实验，反复传递和验证结果的可靠性。结果的可靠性。校准品定值的方法步骤校准品定值的方法步骤n以具有参考值的新鲜病人标本去校准某以具有参考值的新鲜病人标本去校准某检测系统（包括方法、试剂、仪器）后，检测系统（包括方法、试剂、仪器）后，检测系统再去检测候选的校准品（处理检测系统再去检测候选的校准品（处理过样品），得到的检测值为初始校准值过样品），得到的检测值为初始校准值n以初始校准值反过来再校准组合的检测以初始校准值反过来再校准组合的检测系统后，该检测系统又去检测病人的新系统后，该检测系统又去检测病人的新鲜标本。鲜标本。n观察病人标本的检测值是否和参考方法观察病人标本的检测值是否和参考方法的测定值具良好的可比性。的测定值具良好的可比性。校准品定值的调整校准品定值的调整n不断地调整校准值不断地调整校准值，直至用该校准值校，直至用该校准值校准指定的检测系统后，检测系统再检测准指定的检测系统后，检测系统再检测病人标本，得到的测定值和病人标本的病人标本，得到的测定值和病人标本的参考方法测定值具有满意的可比性，此参考方法测定值具有满意的可比性，此时可以确认校准品的校准值。时可以确认校准品的校准值。公司校准品标准化的大致内容和步骤公司校准品标准化的大致内容和步骤 1 1建立建立“公司一级参考品公司一级参考品”准准备备多多个个混混和和血血清清，经经离离心心、过过滤滤等等处处理后，各个混和血清分装成小包装。理后，各个混和血清分装成小包装。-70-70保保存存。试试验验说说明明，这这样样保保存存的的血血清复融后具有的性能和新鲜血清相似。清复融后具有的性能和新鲜血清相似。这这些些血血清清组组构构成成公公司司产产品品标标准准化化的的“公公司一级参考品司一级参考品”。2.2.公司公司“一级参考血清一级参考血清”的参考值定的参考值定值值n由公司选择国际上知名的参考实验由公司选择国际上知名的参考实验室委托定值。这些参考实验室在国室委托定值。这些参考实验室在国际上的数量很少，每个实验室只是际上的数量很少，每个实验室只是对某一个或几个项目接受定值委托，对某一个或几个项目接受定值委托，费用昂贵。但是，这是公司校准品费用昂贵。但是，这是公司校准品定值的依据。定值的依据。由于参考系统或参考材料的使用常由于参考系统或参考材料的使用常常是很有限的，因此，必须设立内常是很有限的，因此，必须设立内部使用的参考系统（或材料）复制部使用的参考系统（或材料）复制品即设立公司一级校准品品即设立公司一级校准品（Master CalibratorMaster Calibrator）。）。3.3.设立公司内部使用的设立公司内部使用的“一级校准品一级校准品”n n除了有公司一级校准品外，还需要除了有公司一级校准品外，还需要建立公司生产用的建立公司生产用的Working Working CalibratorCalibrator、日常供应的日常供应的Business Business CalibratorCalibrator。n n所有各种校准品的原料要求和加工所有各种校准品的原料要求和加工制备工艺一样。只是在制备工艺一样。只是在定值方案上定值方案上有区别有区别。4.4.建立应用校准品和商品校准品建立应用校准品和商品校准品n自始至终以方法学比较实验为确定、自始至终以方法学比较实验为确定、验证或传递定值的手段验证或传递定值的手段n除了上述混和血清组外，随时需要除了上述混和血清组外，随时需要实际的新鲜病人标本，供方法学比实际的新鲜病人标本，供方法学比较用较用商业校准品实现溯源性的商业校准品实现溯源性的手段手段(1).(1).确定公司产品对病人标本检测结确定公司产品对病人标本检测结果可溯源的参考方法或参考品。果可溯源的参考方法或参考品。（和什么参考系列比较？）（和什么参考系列比较？）(2).(2).确定定值的实验室：选择合适的确定定值的实验室：选择合适的实验室是定值质量的先决条件。实验室是定值质量的先决条件。实现溯源性的必备条件实现溯源性的必备条件校准品的溯源性依据（示例）校准品的溯源性依据（示例）项目（分析物）项目（分析物）参考方法或参考品参考方法或参考品Alb白蛋白白蛋白（BCP）CRM 470ALP碱性磷酸酶碱性磷酸酶 IFCC 1983 手工方法手工方法 TBIL总胆红素总胆红素 Doumas方法方法Cl氯氯（ISE）电量滴定法电量滴定法CHOL胆固醇胆固醇 ID-MS Abell Kendall Apo-A1载脂蛋白载脂蛋白A1 WHO，SP1-01 Lactate乳酸乳酸 一级标准（称量法）一级标准（称量法）Total Protein 总蛋白总蛋白 SRM 927 K钾钾（ISE）火焰光度法火焰光度法 溯源的过程溯源的过程 选参考实验室以参考方法对公司选参考实验室以参考方法对公司一级参一级参考品定值考品定值以以一级校准品一级校准品对检测系统校对检测系统校准准测定测定一级参考品一级参考品比较分析参考品比较分析参考品结果和初步检测值结果的差异结果和初步检测值结果的差异用方法用方法学比较的回归线调整样品在该公司检测学比较的回归线调整样品在该公司检测系统上的初步结果数值，向参考系统系统上的初步结果数值，向参考系统（或方法）的参考结果数值靠拢。（或方法）的参考结果数值靠拢。实现溯源性的实质实现溯源性的实质n实质是调整校准品在公司组合的检测系统上的实质是调整校准品在公司组合的检测系统上的定值，将它调整到：公司组合的检测系统再次定值，将它调整到：公司组合的检测系统再次被该校准品校准后，对参考样品的检测结果尽被该校准品校准后，对参考样品的检测结果尽可能和原有的相应参考方法的结果一致。可能和原有的相应参考方法的结果一致。n新鲜病人标本核实：如果确实实现了参考样品新鲜病人标本核实：如果确实实现了参考样品的检测结果和原有的相应参考结果一致。说明：的检测结果和原有的相应参考结果一致。说明：校准品定值可以使病人标本在检测系统上检测校准品定值可以使病人标本在检测系统上检测的结果，溯源至参考系统。的结果，溯源至参考系统。通过方法学比较确定定值通过方法学比较确定定值公公司司组组合合的的检检测测系系统统和和初步校准品定值（初步校准品定值（）方法学比较方法学比较标标准准化化过过程程信信号号Ctar为为参参考考值值血血清清在在公公司司组组合的检测系统上的检测结果。合的检测系统上的检测结果。Cref为参考血清的参考值。为参考血清的参考值。通过方法学比较确定定值通过方法学比较确定定值检测系统和最终校准品检测系统和最终校准品定值（定值（）方法学比较方法学比较信信号号Ctar为为具具有有参参考考值值血血清清在在公公司司组组合合的的检检测测系系统统上上的的检检测测结果。结果。Cref为参考血清的参考值。为参考血清的参考值。n在参考标准化中为了避免未处理过的人在参考标准化中为了避免未处理过的人样品稳定性问题，单个供体样品只使用样品稳定性问题，单个供体样品只使用一次。混合人血清的参考方法值最多被一次。混合人血清的参考方法值最多被认可认可6 6个月（个月（-70-70 保存）保存）；需要重新；需要重新用于参考标准化时，应重确定。用于参考标准化时，应重确定。校准品定值过程校准品定值过程 n对公司对公司一级参考血清一级参考血清定值的最高计量水定值的最高计量水平是国际认可的参考方法（如：平是国际认可的参考方法（如：ID-MSID-MS）。）。若没有参考方法可用，则选择合适的正若没有参考方法可用，则选择合适的正式官方参考品（如：式官方参考品（如：CRM 470CRM 470）。）。若这个若这个也没有，则可使用一级标准的水标准液也没有，则可使用一级标准的水标准液（如：乳酸锂）为参考，或者某个确定（如：乳酸锂）为参考，或者某个确定的检测方法。的检测方法。校准品定值过程校准品定值过程n公司公司一级校准品一级校准品的基体大致和各批市售的基体大致和各批市售校准品（常规校准品）相当；另外，这校准品（常规校准品）相当；另外，这些一级校准品储存于些一级校准品储存于-70-70，并定期检查，并定期检查稳定性。稳定性。校准品定值过程校准品定值过程n用参考方法、或以参考品为校准品，对用参考方法、或以参考品为校准品，对人血清（人血清（一级参考品一级参考品）的检测）的检测公司公司一一级校准品级校准品以这些参考方法值标准化以这些参考方法值标准化市市售校准品和控制品售校准品和控制品则以公司一级批号校则以公司一级批号校准品（真实性控制）在相应分析系统上准品（真实性控制）在相应分析系统上作校准作校准保证该系统的患者结果值的溯保证该系统的患者结果值的溯源性源性每个分析仪平台对每个方法各自每个分析仪平台对每个方法各自都以相同方式，按照该参考系统程序标都以相同方式，按照该参考系统程序标准化。准化。溯源的过程溯源的过程 溯源性途径溯源性途径 人血清组人血清组 “参考组参考组”以参考品（一级或二级）以参考品（一级或二级）对（参考）方法校准对（参考）方法校准 .f.a.s.f.a.s.公司一级，公司一级，初步校准品定值初步校准品定值 .f.a.s.f.a.s.公司一级，公司一级，调整过的校准品定值调整过的校准品定值市售市售C.f.a.s.C.f.a.s.和真实性控制品和真实性控制品 n相对于参考方法的标准化（有公认相对于参考方法的标准化（有公认的参考方法和的参考方法和/或参考品）或参考品）n相对于参考品的标准化（没有公认相对于参考品的标准化（没有公认的参考方法，但是有公认的参考品）的参考方法，但是有公认的参考品）校准品定值的两种方式校准品定值的两种方式总胆固醇测定总胆固醇测定参考方法示例参考方法示例n确认方法为同位素稀释质谱（确认方法为同位素稀释质谱（ID-MSID-MS）法法n参考方法为改良参考方法为改良AbellAbell-Kendall-Kendall方法（皂化方法（皂化-抽提抽提-浓硫酸、磷酸显色）浓硫酸、磷酸显色）n常规方法为酶法（胆固醇酯酶、胆固醇氧常规方法为酶法（胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶、化酶、过氧化物酶、TrinderTrinder显色终点法）显色终点法）n美国美国NISTNIST建立的标准参考品有：建立的标准参考品有：纯胆固醇纯胆固醇SRM911SRM911；冻干人血清冻干人血清SRM909SRM909。相对于参考品标准化示例相对于参考品标准化示例 14 14种特定蛋白测定种特定蛋白测定n公认参考品为公认参考品为CRM470CRM470。n可以适用的检测方法为：放射免疫扩散、可以适用的检测方法为：放射免疫扩散、免疫透射比浊、和免疫散射比浊。免疫透射比浊、和免疫散射比浊。n没有指定这些项目的参考方法。没有指定这些项目的参考方法。校准品定值过程校准品定值过程 SI SI制单位定义制单位定义 一级校准品一级校准品 二级校准品二级校准品 生产应用校准品生产应用校准品 产品校准品产品校准品 常规样品常规样品 二级参考检测方法二级参考检测方法 一级参考检测方法一级参考检测方法 厂商选择的检测方法厂商选择的检测方法 厂商常备的检测方法厂商常备的检测方法 用户常规的检测方法用户常规的检测方法结果结果 不确定度不确定度溯源性要求对实际工作的几点启示溯源性要求对实际工作的几点启示n n校准品必须专用于某一检测系统校准品必须专用于某一检测系统校准品必须专用于某一检测系统校准品必须专用于某一检测系统n n同一校准品用于不同检测体系时，应该有不同同一校准品用于不同检测体系时，应该有不同同一校准品用于不同检测体系时，应该有不同同一校准品用于不同检测体系时，应该有不同的校准值的校准值的校准值的校准值n n不应再用单一标准液校准或标化结果不应再用单一标准液校准或标化结果不应再用单一标准液校准或标化结果不应再用单一标准液校准或标化结果n n不能用定值质控品校准仪器不能用定值质控品校准仪器不能用定值质控品校准仪器不能用定值质控品校准仪器n n不可将定值血清靶值或均值作为自己的均值不可将定值血清靶值或均值作为自己的均值不可将定值血清靶值或均值作为自己的均值不可将定值血清靶值或均值作为自己的均值n n质控品测定值相似或等于定值，不足以说明方质控品测定值相似或等于定值，不足以说明方质控品测定值相似或等于定值，不足以说明方质控品测定值相似或等于定值，不足以说明方法的准确度和结果绝对可靠性法的准确度和结果绝对可靠性法的准确度和结果绝对可靠性法的准确度和结果绝对可靠性