隐球菌临床推广课件

隐球菌临床推广第一页，编辑于星期四：二点 五十二分。隐球菌临床推广隐球菌临床推广隐球菌临床推广第一页，编辑于星期一瑞生物一瑞生物 隐球菌病感染诊断现状隐球菌病感染诊断现状一 产品介绍产品介绍二 适用科室及临床意义适用科室及临床意义三 相关标准相关标准四第二页，编辑于星期四：二点 五十二分。隐球菌病感染诊断现状一产品介绍二适用科室及临床意义三一瑞生物一瑞生物q隐球菌为圆形菌体，外周有荚膜，内有反光孢子，但无菌丝。q隐球菌属已知有37个不同的种，但具致病性的多为新型隐球菌，其特点是菌体由一层很厚的多糖荚膜所包被。q新型隐球菌主要包括新生变种、格特变种等简介第三页，编辑于星期四：二点 五十二分。隐球菌为圆形菌体，外周有荚膜，内有反光孢子，但无菌丝。简一瑞生物一瑞生物流行病学p38个ICUsof27个意大利医院p384例真菌感染(318例侵袭性念珠菌感染；63例霉菌感染；3例隐球菌感染)TortoranoAMetal.Mycoses.2011,55:7379.第四页，编辑于星期四：二点 五十二分。流行病学38个ICUsof27个意大利医院Tortor一瑞生物一瑞生物qHIV感染者q器官移植患者q接受大剂量皮质类固醇或单克隆抗体（如阿仑单抗、英夫利昔单抗）和/或其他免疫抑制剂治疗的患者q其他无基础疾病的患者JohnR.Perfect,etc.ClinicalInfectiousDiseases2010;50:291322 美国感染病学会的美国感染病学会的“隐球菌病治疗临床实践指南（隐球菌病治疗临床实践指南（2010 年更新）年更新）”中指出，隐球菌病的易感人群主要包括：中指出，隐球菌病的易感人群主要包括：宿主因素第五页，编辑于星期四：二点 五十二分。HIV感染者JohnR.Perfect,etc.Cl一瑞生物一瑞生物流行病学q随着AIDS患者的增多，各种机会性感染的发病率也随之上升，新型隐球菌成为继白色念珠菌之后最常见的机会性感染真菌，其在HIV中的感染率已达8.5%。q隐球菌性脑膜炎发生率和死亡率在发达国家达到10-30%，在发展中国家可达到50-100%。q早期隐球菌感染临床表现缺乏特异性，脑脊液变化不典型，但是当发展为隐球菌性脑膜炎时，死亡率可达到20%。早期、快速、准确地诊断很有必要第六页，编辑于星期四：二点 五十二分。流行病学随着AIDS患者的增多，各种机会性感染的发病率也随之一瑞生物一瑞生物现有检测手段v墨汁染色（菌体）v真菌培养（活菌）vELISA（荚膜多糖抗原）v乳胶凝集法（荚膜多糖抗原）v胶体金法（荚膜多糖抗原）第七页，编辑于星期四：二点 五十二分。现有检测手段墨汁染色（菌体）第七页，编辑于星期四：二点五十一瑞生物一瑞生物1.印度墨汁染色：印度墨汁染色：敏感性差，阳性检出率很低2.脑脊液或血液培养（金标准）：脑脊液或血液培养（金标准）：阳性检出率低，培养（2-10天）及鉴定时间长，易误诊3.抗原检测试验：抗原检测试验：脑脊液和血清样本抗原检测的敏感性可达到97%和87%*，能实现早期快速诊断*TylerWarkentien,MD.IntJSTDAIDS.2010October;21(10):679684.现有检测手段第八页，编辑于星期四：二点 五十二分。1.印度墨汁染色：*TylerWarkentien,一瑞生物一瑞生物隐球菌荚膜多糖抗原q 由3种不同的单糖聚合而成q 是引起病理变化的主要毒性因子q 在菌体生长和繁殖过程中，GXM不断分泌到胞外q 通过发挥免疫抑制作用和免疫调理作用影响宿主免疫系统OscarZaragoza,etc.AdvApplMicrobiol.2009,68:133216隐球菌荚膜多糖抗原隐球菌荚膜多糖抗原GXM(Glucuronoxylomannan,GXM)：荚膜多糖抗原是隐球菌特有的分泌物，可以作为隐球菌感染的诊断依据第九页，编辑于星期四：二点 五十二分。隐球菌荚膜多糖抗原由3种不同的单糖聚合而成OscarZ一瑞生物一瑞生物 隐球菌病感染诊断现状隐球菌病感染诊断现状一 产品介绍产品介绍二 临床意义及适用科室临床意义及适用科室三 相关标准相关标准四第十页，编辑于星期四：二点 五十二分。隐球菌病感染诊断现状一产品介绍二临床意义及适用科室三一瑞生物一瑞生物隐球菌抗原检测试剂盒（胶体金法）原理第十一页，编辑于星期四：二点 五十二分。隐球菌抗原检测试剂盒（胶体金法）原理第十一页，编辑于星期四：一瑞生物一瑞生物隐球菌抗原检测试剂盒（胶体金免疫层析法）v试剂盒组成试剂盒组成隐球菌抗原检测试纸条50条样本稀释液滴定液阳性对照v稳定性稳定性/储存方法储存方法2年有效期室温储存第十二页，编辑于星期四：二点 五十二分。隐球菌抗原检测试剂盒（胶体金免疫层析法）试剂盒组成第十二页，一瑞生物一瑞生物特点v无需样本预处理无需样本预处理v10分钟得到结果分钟得到结果v定性或半定量测定定性或半定量测定v结果客观结果客观v血清，脑脊液，血浆血清，脑脊液，血浆第十三页，编辑于星期四：二点 五十二分。特点无需样本预处理第十三页，编辑于星期四：二点五十二分一瑞生物一瑞生物样本收集及制备v按照无菌操作收集脑脊液、血浆和血清样本。按照无菌操作收集脑脊液、血浆和血清样本。v样本最多可以在样本最多可以在 2-8放置放置 72 小时。小时。v不反复冻融的情况下，样本可以在不反复冻融的情况下，样本可以在-20以下保存以下保存更长时间。更长时间。v样本在运输过程中应保持在样本在运输过程中应保持在 2-8或者或者-20以下。以下。第十四页，编辑于星期四：二点 五十二分。样本收集及制备按照无菌操作收集脑脊液、血浆和血清样本。第十四一瑞生物一瑞生物定性检测操作步骤v简单简单5步，步，10分钟得到结果分钟得到结果第十五页，编辑于星期四：二点 五十二分。定性检测操作步骤简单5步，10分钟得到结果第十五页，编辑于星一瑞生物一瑞生物注意：若对照条带未出现，则说明该检测无效，应重新检测。定性检测结果第十六页，编辑于星期四：二点 五十二分。注意：若对照条带未出现，则说明该检测无效，应重新检测一瑞生物一瑞生物半定量检测操作步骤v1、以1:5作为初始稀释浓度，依次1:2稀释至1:2560。分别放置于10个微离心管中并编号1-10。v2、向1号试管中加入4滴样本稀释液。v3、分别向标号2-10的试管中加入2滴滴定液。v4、将40L样本加入1号试管并混匀。v5、从1号试管中吸取80L样本混合液转移至2号试管并混匀，依次进行稀释直至10号试管。v6、10号试管中吸取80L样本混合液并丢弃以保证试管内最终体积为80L。v7、将试纸条的白端分别没入试管中。v8、等待10分钟，读取并记录实验结果。第十七页，编辑于星期四：二点 五十二分。半定量检测操作步骤1、以1:5作为初始稀释浓度，依次1一瑞生物一瑞生物半定量检测操作步骤第十八页，编辑于星期四：二点 五十二分。半定量检测操作步骤第十八页，编辑于星期四：二点五十二分。一瑞生物一瑞生物半定量检测操作步骤-2第十九页，编辑于星期四：二点 五十二分。半定量检测操作步骤-2第十九页，编辑于星期四：二点五十二分一瑞生物一瑞生物半定量检测(滴度)结果对于半定量滴定检测，患者的滴度应报告为产生阳性结果的最高稀释度。第二十页，编辑于星期四：二点 五十二分。半定量检测(滴度)结果对于半定量滴定检测，患者的滴度一瑞生物一瑞生物质量控制v阳性对照：将阳性对照：将 1 滴样本稀释液加入试管中，再加入滴样本稀释液加入试管中，再加入 1 滴隐球菌抗原阳性对照。滴隐球菌抗原阳性对照。v阴性对照为：将阴性对照为：将 2 滴样本稀释液加入试管中。滴样本稀释液加入试管中。v分别插入试纸条，分别插入试纸条，10 分钟后读取结果。分钟后读取结果。v依据本地、国家的法规及认证机构的指导方针或要求，可能需要做额外的质控检测。第二十一页，编辑于星期四：二点 五十二分。质量控制阳性对照：将1滴样本稀释液加入试管中，再加入1一瑞生物一瑞生物胶体金法和培养/墨汁染色对比CrAgLFApackageinsert(IMMY)灵敏度特异性胶体金法试剂盒95.83%99.84%墨汁染色86.39%100.00%真菌培养60.72%100.00%第二十二页，编辑于星期四：二点 五十二分。胶体金法和培养/墨汁染色对比CrAgLFApackage一瑞生物一瑞生物胶体金法和ELISA/乳胶凝集法对比血清型灵敏度(ng隐球菌抗原/ml)A(新型隐球菌)B(哥特隐球菌)C(哥特隐球菌)D(新型隐球菌)IMMY胶体金法1198IMMY乳胶凝集法284738062ELISA28232,000770其他厂家乳胶凝集法193794054TRKozel,Clin.VaccineImmunol.(2011)18:1292TRKozel,8thInternationalConferenceonCryptococcusandCryptococcosis(2011)灵敏度远远高于其他方法第二十三页，编辑于星期四：二点 五十二分。胶体金法和ELISA/乳胶凝集法对比血清型灵敏度(ng隐球一瑞生物一瑞生物隐球菌抗原分布时间感染感染血液血液脑脊液脑脊液肺部肺部脑膜炎脑膜炎肺以外肺以外无症状无症状症状症状胶体金法胶体金法隐球菌抗原检测隐球菌抗原检测的其他方法的其他方法AdaptedfromKozelandBauman,ExpertOpin.Med.Diagn.(2012)6:245第二十四页，编辑于星期四：二点 五十二分。隐球菌抗原分布时间感染血液脑脊液肺部脑膜炎肺以外无症状症状胶一瑞生物一瑞生物胶体金法和乳胶凝集法对比胶体金法乳胶凝集法检测时间10分钟长达60分钟样品预处理无需需要(蛋白酶处理血清)样品类型血清,脑脊液,血浆血清和脑脊液储存室温冷藏第二十五页，编辑于星期四：二点 五十二分。胶体金法和乳胶凝集法对比胶体金法乳胶凝集法检测时间10分一瑞生物一瑞生物 隐球菌病感染诊断现状隐球菌病感染诊断现状一 产品介绍产品介绍二 适用科室及临床意义适用科室及临床意义三 相关标准相关标准四第二十六页，编辑于星期四：二点 五十二分。隐球菌病感染诊断现状一产品介绍二适用科室及临床意义三一瑞生物一瑞生物适用科室及临床意义新型隐球菌感染可发生于全身多个部位，最常见的感染主要发生在中枢神经系统、肺部、皮肤等。第二十七页，编辑于星期四：二点 五十二分。适用科室及临床意义新型隐球菌感染可发生于全身多个部位，最常见一瑞生物一瑞生物v中枢神经系统隐球菌病-神经内科 隐球菌侵犯中枢神经系统最常见，包括脑膜炎或亚急性脑膜炎、散播型脑膜炎等。临床症状：临床症状：首发症状间歇性头痛、恶心及呕吐，伴低热、周身首发症状间歇性头痛、恶心及呕吐，伴低热、周身不适、精神不振等非特异性症状。随病情发展，头痛渐加重转不适、精神不振等非特异性症状。随病情发展，头痛渐加重转为持续性、精神异常、躁动不安，严重者出现不同程度意识障为持续性、精神异常、躁动不安，严重者出现不同程度意识障碍。碍。v肺隐球菌病-呼吸科 肺部是隐球菌侵入的门户 适用科室及临床意义第二十八页，编辑于星期四：二点 五十二分。中枢神经系统隐球菌病-神经内科适用科室及临床意义第二十八页，一瑞生物一瑞生物v皮肤黏膜隐球菌病-皮肤科10%15%的隐球菌病患者出现皮肤损害，比如出现丘疹、水疱、脓疱、传染丘疹、水疱、脓疱、传染性软疣样丘疹、痤疮样脓疱性软疣样丘疹、痤疮样脓疱等症状。v儿童脑膜炎-儿科 儿童由于免疫系统不健全，也容易被隐球菌感染，一般儿童的脑脊液样本都会做隐球菌筛查v免疫缺陷人群-感染科、器官移植科、ICU等 新型隐球菌作为一种机会性感染真菌，主要侵犯免疫缺陷人群，如器官移植患者以及AIDS患者及使用免疫抑制剂人群等。适用科室及临床意义第二十九页，编辑于星期四：二点 五十二分。适用科室及临床意义第二十九页，编辑于星期四：二点五十二分。一瑞生物一瑞生物临床意义u在撒哈拉以南的非洲地区，在撒哈拉以南的非洲地区，隐球菌球菌脑膜炎是造成艾滋患膜炎是造成艾滋患者死亡的一种重要疾病，者死亡的一种重要疾病，隐球菌抗原可以在病症球菌抗原可以在病症发生的几生的几周前被周前被检测到。到。u隐球菌抗原的球菌抗原的检测对于于隐球菌球菌脑膜炎的膜炎的预防有非常防有非常积极的作用。极的作用。第三十页，编辑于星期四：二点 五十二分。临床意义在撒哈拉以南的非洲地区，隐球菌脑膜炎是造成艾滋患者死一瑞生物一瑞生物临床意义筛查了了HIVHIV感染病人感染病人进行行隐球菌抗原球菌抗原预防的成本效防的成本效益，使用益，使用隐球菌抗原球菌抗原可以可以显著降低成本著降低成本第三十一页，编辑于星期四：二点 五十二分。临床意义筛查了HIV感染病人进行隐球菌抗原预防的成本效一瑞生物一瑞生物临床意义荚膜多糖抗原是隐球菌特有的分泌物，是隐球菌感染确诊的依据。在感染的初期，荚膜多糖抗原就被检测到，因此是隐球菌病早期诊断的标志物。随着病情的发展，荚膜多糖抗原的含量会随之发生变化，还可作为病情监测的指标。第三十二页，编辑于星期四：二点 五十二分。临床意义荚膜多糖抗原是隐球菌特有的分泌物，是隐球菌感染确诊的一瑞生物一瑞生物G实验：实验：q 检测真菌细胞壁特有成分1,3-D-葡聚糖q 吞噬细胞将菌吞噬消化后释放1,3-D-葡聚糖到血液q 不能检测到的真菌：隐球菌和接合菌（包括毛霉菌、根霉菌等）G实验检测隐球菌为阴性结果的原因：实验检测隐球菌为阴性结果的原因：q 隐球菌含1,3-D-葡聚糖的量少q 荚膜很厚，不易被吞噬细胞消化联合检测的意义第三十三页，编辑于星期四：二点 五十二分。G实验：联合检测的意义第三十三页，编辑于星期四：二点五十二一瑞生物一瑞生物联合检测的意义第三十四页，编辑于星期四：二点 五十二分。联合检测的意义第三十四页，编辑于星期四：二点五十二分。一瑞生物一瑞生物 隐球菌病感染诊断现状隐球菌病感染诊断现状一 产品介绍产品介绍二 适用科室及临床意义适用科室及临床意义三 相关标准相关标准四第三十五页，编辑于星期四：二点 五十二分。隐球菌病感染诊断现状一产品介绍二适用科室及临床意义三一瑞生物一瑞生物收录指南共识中声明，隐球菌荚膜多糖抗原的存在是肺侵袭性隐球菌病的的确诊证据之一第三十六页，编辑于星期四：二点 五十二分。收录指南共识中声明，隐球菌荚膜多糖抗原的存在是肺侵袭性隐球一瑞生物一瑞生物资质认证第三十七页，编辑于星期四：二点 五十二分。资质认证第三十七页，编辑于星期四：二点五十二分。一瑞生物一瑞生物物价标准（2014年版）第三十八页，编辑于星期四：二点 五十二分。物价标准（2014年版）第三十八页，编辑于星期四：二点五十一瑞生物一瑞生物物价标准（2014年版）第三十九页，编辑于星期四：二点 五十二分。物价标准（2014年版）第三十九页，编辑于星期四：二点五十一瑞生物一瑞生物谢谢大家谢谢大家第四十页，编辑于星期四：二点 五十二分。谢谢大家第四十页，编辑于星期四：二点五十二分。谢谢！第四十一页，编辑于星期四：二点 五十二分。谢谢！第四十一页，编辑于星期四：二点 五十二分。