葡聚糖的检验和临床培训ppt课件

本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。AIDS插管等侵袭性插管等侵袭性治疗治疗肿瘤和免疫肿瘤和免疫抑制治疗抑制治疗骨髓和实体骨髓和实体器官移植器官移植广谱抗生素广谱抗生素治疗治疗 侵袭性真菌感染率上升侵袭性真菌感染率上升1AIDS插管等侵袭性治疗肿瘤和免疫抑制治疗骨髓和实体器官移植本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。严严重重真真菌菌感感染染迅迅速速上上升升势势头头 危重病人的存活期危重病人的存活期延长延长延长了真菌感染延长了真菌感染延长了真菌感染延长了真菌感染的的的的 高高高高 危危危危 期期期期使此类患者业已增加使此类患者业已增加使此类患者业已增加使此类患者业已增加的人数进一步扩大的人数进一步扩大的人数进一步扩大的人数进一步扩大医医学学和和相相关关科科学学的的进进步步是是日日益益严严重重的的威威胁胁！2严重真菌感染迅速上升势头 危重病人的存活期延长延长了真菌感染本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。真菌感染的危险因素真菌感染的危险因素：n中心静脉插管中心静脉插管n尿道插管尿道插管n广谱抗生素广谱抗生素n气管插管气管插管n腹部外科腹部外科n肠胃外营养肠胃外营养n营养不良营养不良n住院时间住院时间感染之前定殖感染之前定殖3真菌感染的危险因素：中心静脉插管感染之前定殖3本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。侵袭性真菌感染侵袭性真菌感染n条件致病性真菌条件致病性真菌n念珠菌病念珠菌病n曲霉病曲霉病n隐球菌病隐球菌病n其他其他4侵袭性真菌感染条件致病性真菌4本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。诊断方法n影像学影像学n组织病理学组织病理学/细胞学细胞学n培养培养n血清学血清学n分子生物学方法：分子生物学方法：PlateliaAspergillusELISAFungitellassayPCR（unavailable）传统的方法传统的方法5诊断方法影像学传统的方法5本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。真菌病实验室诊断主要内容真菌病实验室诊断主要内容准确、快速检出真菌病原体准确、快速检出真菌病原体n真菌镜检真菌镜检n真菌培养真菌培养n组织病理组织病理n生理生化生理生化n血清学方法血清学方法n分子生物学分子生物学6真菌病实验室诊断主要内容准确、快速检出真菌病原体6本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。镜检和培养方法镜检和培养方法n敏感性低敏感性低血培养：在肿瘤和血液病病人中，血培养：在肿瘤和血液病病人中，50%尸检尸检证实深部念珠菌感染的病例血培养阴性。证实深部念珠菌感染的病例血培养阴性。n培养结果阳性仅表示存在某种真菌，区培养结果阳性仅表示存在某种真菌，区分定植和感染困难分定植和感染困难n培养时间长培养时间长n有些标本采集困难有些标本采集困难7镜检和培养方法敏感性低 7本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。非培养方法优点非培养方法优点n快速报告结果快速报告结果n敏感性提高敏感性提高n取材简便取材简便n多以真菌在致病状态产生的物质为检测多以真菌在致病状态产生的物质为检测标志物，结果阳性提示有致病性标志物，结果阳性提示有致病性n定量检测可判断感染严重程度及疗效评定量检测可判断感染严重程度及疗效评估估8非培养方法优点快速报告结果8本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。非培养诊断的方法简介非培养诊断的方法简介n真菌细胞壁成分真菌细胞壁成分n（1-3）-D-葡聚糖检测（葡聚糖检测（G试验）试验）n真菌抗原检查真菌抗原检查n半乳甘露聚糖（半乳甘露聚糖（galactomannan)抗原抗原（GM)n甘露聚糖甘露聚糖(mannan)抗原抗原n真菌特异的代谢产物真菌特异的代谢产物nD-阿拉伯糖醇阿拉伯糖醇n真菌真菌 DNA 的检测的检测9非培养诊断的方法简介真菌细胞壁成分9本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。临床诊断、拟诊的微生物学1 1 合格痰标本直接镜检发现菌丝，且连续培养合格痰标本直接镜检发现菌丝，且连续培养22次分离到同种真菌次分离到同种真菌2 BALF2 BALF经直接镜检发现菌丝真菌培养阳性经直接镜检发现菌丝真菌培养阳性3 3 痰液或痰液或BALFBALF直接镜检发现新生隐球菌直接镜检发现新生隐球菌4 4 乳胶凝集法检测隐球菌荚膜多糖抗原阳性乳胶凝集法检测隐球菌荚膜多糖抗原阳性5 G5 G实验连续两次阳性实验连续两次阳性6 GM6 GM实验连续两次阳性实验连续两次阳性10临床诊断、拟诊的微生物学1 合格痰标本直接镜检发现菌丝，且连本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。侵袭性真菌感染的诊断标准侵袭性真菌感染的诊断标准EORTC/MSG2008修订版修订版n宿主因素宿主因素n临床特征临床特征n病原学病原学n真菌镜检真菌镜检n真菌培养真菌培养n组织病理学检查组织病理学检查n血清学检查方法（间接证据）血清学检查方法（间接证据）nCSF隐球菌抗原阳性隐球菌抗原阳性确诊确诊nGM-test,G-test临床诊断临床诊断Clinical Infectious Diseases 2008;4611侵袭性真菌感染的诊断标准EORTC/MSG2008修订版宿本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。（1,3）-D-葡聚糖检测葡聚糖检测12（1,3）-D-葡聚糖检测12本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。b1,6葡聚糖 磷脂双分子层几丁质麦角固醇b1,3葡聚糖合成酶mannoproteins1,3真菌细胞膜、壁结构真菌细胞膜、壁结构羊毛固醇羊毛固醇C C1414去甲基化酶去甲基化酶1414位还原和位还原和7 78 8位异构酶位异构酶角鲨烯环氧化酶角鲨烯环氧化酶13 磷脂双分子层几丁质麦角固醇b1,3葡聚本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。1,3-D-葡聚糖结构葡聚糖结构n葡聚糖广泛存在于真菌细胞壁中葡聚糖广泛存在于真菌细胞壁中n1,3-D-1,3-D-葡聚糖占真菌壁成分葡聚糖占真菌壁成分50%50%以上，是真菌细胞壁上的特有以上，是真菌细胞壁上的特有成分成分n以以1,3-1,3-糖苷键连接的葡萄糖残糖苷键连接的葡萄糖残基骨架作为主链基骨架作为主链n以分支状以分支状1-6-D1-6-D葡萄糖残基作葡萄糖残基作为侧链为侧链141,3-D-葡聚糖结构葡聚糖广泛存在于真菌细胞壁中14本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。1,3-D-葡聚糖特性葡聚糖特性n对热极为稳定，高压对热极为稳定，高压121121并不能使其灭活。在念珠菌并不能使其灭活。在念珠菌和曲霉菌细胞壁中含量较多，对和曲霉菌细胞壁中含量较多，对G G实验灵敏。实验灵敏。n当真菌进入人体血液或深部组织后，经吞噬细胞的吞当真菌进入人体血液或深部组织后，经吞噬细胞的吞噬、消化等处理后，噬、消化等处理后，(1-3)-D-(1-3)-D-葡聚糖可从胞壁中释葡聚糖可从胞壁中释放出来，从而使血液及其它体液中含量增高。当真菌放出来，从而使血液及其它体液中含量增高。当真菌在体内含量减少时，机体免疫系统可将其清除。在体内含量减少时，机体免疫系统可将其清除。n在浅部真菌感染中，在浅部真菌感染中，(1-3)-D-(1-3)-D-葡聚糖未被释放出来，葡聚糖未被释放出来，故其在体液中的量不增高。故其在体液中的量不增高。n可用于检测念珠菌、毛孢子菌、曲霉菌、镰刀菌、卡可用于检测念珠菌、毛孢子菌、曲霉菌、镰刀菌、卡氏肺孢子菌氏肺孢子菌n不可检测隐球菌、接合菌（根霉不可检测隐球菌、接合菌（根霉/毛霉等）毛霉等）151,3-D-葡聚糖特性对热极为稳定，高压121并不能使本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。n“G”试验缘何而来？试验缘何而来？1616比浊法反应机理比浊法反应机理细菌内毒素细菌内毒素（1-3）-D-GlucanLAL-RM(反应物反应物)因子因子C活化因子活化因子C因子因子B活化因子活化因子B活化因子活化因子G因子因子G凝固酶原凝固酶原凝固酶凝固酶凝固蛋白原凝固蛋白原凝固蛋白（凝胶）凝固蛋白（凝胶）定量浊度仪定量浊度仪TurbidimetrictechniqueGEL17比浊法反应机理17本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。分析前注意事项分析前注意事项n采用无菌无热原真空采血管采用无菌无热原真空采血管n抽血后抽血后4h内送检内送检n血标本血标本4-8最多存放最多存放48h48hn检测环境应保持清洁检测环境应保持清洁18分析前注意事项采用无菌无热原真空采血管18本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。1,3-D-葡聚糖相关影响因素葡聚糖相关影响因素以下情况可出现假阳性：以下情况可出现假阳性：n使用纤维素膜进行血透，标本或患者暴露于纱布或其使用纤维素膜进行血透，标本或患者暴露于纱布或其他含有葡聚糖的材料；他含有葡聚糖的材料；n静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；n链球菌血症；链球菌血症；n操作者处理标本时存在污染；操作者处理标本时存在污染；n使用多糖类抗癌药物、放化疗造成的粘膜损伤导致食使用多糖类抗癌药物、放化疗造成的粘膜损伤导致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进入血液等也物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进入血液等也可能造成假阳性。可能造成假阳性。191,3-D-葡聚糖相关影响因素以下情况可出现假阳性：19本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。1,3-D-葡聚糖检测临床价值葡聚糖检测临床价值n早期诊断：侵袭性早期诊断：侵袭性真菌感染增多且复杂，早期症状无真菌感染增多且复杂，早期症状无特异性，往往被原发病掩盖，病程长，发现较晚，死特异性，往往被原发病掩盖，病程长，发现较晚，死亡率高。因此对深部真菌感染治疗成败的关键在于早亡率高。因此对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断。期诊断。n指导用药：指导用药：快速确定真菌感染后，选择好治疗方案快速确定真菌感染后，选择好治疗方案,有有针对性使用抗真菌类药物。为临床选用副作用小，疗针对性使用抗真菌类药物。为临床选用副作用小，疗效高，价格适宜的药物提供准确的依据。效高，价格适宜的药物提供准确的依据。n评价效果：评价效果：应用抗真菌药物后，定期检测血浆中葡聚应用抗真菌药物后，定期检测血浆中葡聚糖浓度变化，评价选用药物的有效性。糖浓度变化，评价选用药物的有效性。n监护病程：监护病程：监护深部真菌感染易感人群的病发状态。监护深部真菌感染易感人群的病发状态。n动态观察：动态观察：易感人群，监测临床疗效。易感人群，监测临床疗效。201,3-D-葡聚糖检测临床价值早期诊断：侵袭性真菌感染增本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。曲霉菌半乳甘露聚糖（曲霉菌半乳甘露聚糖（GM）Figure 1-10 Noncompetitive sandwich method of immunoassay21曲霉菌半乳甘露聚糖（GM）Figure 1-10 Nonco本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。n中性粒细胞减少症患者中性粒细胞减少症患者40例例（发展为曲霉菌病的高危人群）（发展为曲霉菌病的高危人群）n该研究选择该研究选择1,3-D-葡聚糖（葡聚糖（BG）和半乳甘露聚糖（）和半乳甘露聚糖（GM）两个指标）两个指标 用于监测中性粒细胞减少性成人曲霉菌病患者用于监测中性粒细胞减少性成人曲霉菌病患者nBG和和GM两项指标均可用于指导临床诊断和治疗真菌性疾病两项指标均可用于指导临床诊断和治疗真菌性疾病,但但BG可早于可早于GM升高升高.BG和和GM联合检测用于曲霉菌病的诊疗联合检测用于曲霉菌病的诊疗,其特异性和阳性率均为其特异性和阳性率均为100%.例例 1Carmen Pazos,Jose Ponton,etc.JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY,Jan.2005n结论：结论：BG和和GM联合检测有助于临床鉴定血液病患者是否合并真菌感染联合检测有助于临床鉴定血液病患者是否合并真菌感染,并将并将单一试验假阳性给诊疗带来的影响降低到最小单一试验假阳性给诊疗带来的影响降低到最小.1,3-D-葡聚糖与循环半乳甘露聚糖的检测比较：葡聚糖与循环半乳甘露聚糖的检测比较：用于治疗和监测中性粒细胞减少性成人曲霉菌病用于治疗和监测中性粒细胞减少性成人曲霉菌病 22中性粒细胞减少症患者40例（发展为曲霉菌病的高危人群）例 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。不同患者不同患者BG()andGM()体液变化情况体液变化情况(a)侵袭性曲霉菌病合并急性髓样白血病患者侵袭性曲霉菌病合并急性髓样白血病患者(b)给予两性霉素给予两性霉素B和卡泊芬净用药和卡泊芬净用药 治疗过程中治疗过程中BG和和GM变化情况变化情况23不同患者BG()and GM()体液变化情况侵袭性曲霉本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。(b)侵袭性曲霉病合并慢性淋巴细胞白血病患者侵袭性曲霉病合并慢性淋巴细胞白血病患者 未使用两性霉素未使用两性霉素B治疗治疗 BG()和和GM()变化情况变化情况24(b)侵袭性曲霉病合并慢性淋巴细胞白血病患者24本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。(c)多发性骨髓瘤患者多发性骨髓瘤患者(非侵袭性曲霉病非侵袭性曲霉病)BG结果假阳性结果假阳性BG()和和GM()25(c)多发性骨髓瘤患者(非侵袭性曲霉病)BG结果假阳性2本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。(d)Hodgkins 淋巴瘤淋巴瘤(非侵袭性曲霉病非侵袭性曲霉病)患者患者 GM结果假阳性结果假阳性 BG()和和GM()26(d)Hodgkins 淋巴瘤(非侵袭性曲霉病)患者 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。(e)急性髓样白血病患者急性髓样白血病患者(非侵袭性曲霉病非侵袭性曲霉病)白色念珠菌和光滑念珠菌白色念珠菌和光滑念珠菌 培养阳性培养阳性 BG和和GM结果假阴性结果假阴性 BG()和和GM()27(e)急性髓样白血病患者(非侵袭性曲霉病)27本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。(f)慢性淋巴细胞白血病患者慢性淋巴细胞白血病患者(非侵袭性曲霉病非侵袭性曲霉病)白色念珠菌白色念珠菌 培养阳性培养阳性 BG和和GM结果阴性结果阴性 BG()和和GM()28(f)慢性淋巴细胞白血病患者(非侵袭性曲霉病)28本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。n120名儿童名儿童7月月8岁岁n1,3-D-葡聚糖定量检测结果：葡聚糖定量检测结果：中位数中位数32pg/ml平均值平均值68128pg/ml 高高值5例例 12岁348pg/ml2岁374pg/ml14岁491pg/ml13岁754pg/ml14岁947pg/ml 94例例(78%)180pg/ml例例 2P.Brian Smith,Daniel K.Benjamin,Jr,etc.CLINICALAND VACCINE IMMUNOLOGY,July2007n结论结论研究数据显示研究数据显示,健康儿童的健康儿童的1,3-D-葡聚糖水平高于健康成人葡聚糖水平高于健康成人.该指标用于儿童感染性疾病的诊断应慎重该指标用于儿童感染性疾病的诊断应慎重,1,3-D-葡聚糖在儿童葡聚糖在儿童群体的正常值区间有待进一步研究群体的正常值区间有待进一步研究.儿童儿童1,3-D-葡聚糖水平研究葡聚糖水平研究29120名儿童 7月8岁例 2P.Brian Smith,本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。非免疫功能低下儿童非免疫功能低下儿童1,3-D-葡聚糖水平葡聚糖水平30非免疫功能低下儿童1,3-D-葡聚糖水平30本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。收集患者收集患者82例例 侵袭性真菌感染组侵袭性真菌感染组 22例例 其他真菌感染组其他真菌感染组 镰刀菌镰刀菌/接合菌接合菌/丝孢菌感染丝孢菌感染 17 例例 念珠菌感染念珠菌感染 23例例 对照组对照组(血液肿瘤患者非真菌感染血液肿瘤患者非真菌感染)20例例414份血清标本检测份血清标本检测GM 409份血清标本检测份血清标本检测BG侵袭性曲霉菌病患者在留取血清标本前已接受抗真菌药物治侵袭性曲霉菌病患者在留取血清标本前已接受抗真菌药物治疗疗 (包括聚烯类、氮杂茂类、棘球白素类等包括聚烯类、氮杂茂类、棘球白素类等)半乳甘露聚糖和半乳甘露聚糖和1,3-D-葡聚糖用于诊断血液肿瘤患者烟曲霉菌葡聚糖用于诊断血液肿瘤患者烟曲霉菌感染敏感性较低感染敏感性较低R.Y.Hachem,D.P.Kontoyiannis,etc.JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY,Jan.2009n结论结论 对于血液肿瘤患者合并侵袭性真菌感染的诊断对于血液肿瘤患者合并侵袭性真菌感染的诊断,BG的的敏感度优于敏感度优于GM.例例 331收集患者82例半乳甘露聚糖和1,3-D-葡聚糖用于诊断血本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。侵袭性真菌感染或者侵袭性真菌感染或者GM和和BG检测结果比较检测结果比较32侵袭性真菌感染或者GM和BG检测结果比较32本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。例例 41,3-D-葡聚糖和抗白色念珠菌细胞壁抗原的葡聚糖和抗白色念珠菌细胞壁抗原的IgG亚型亚型抗体用于系统性念珠菌感染诊疗抗体用于系统性念珠菌感染诊疗系统性念珠菌病患者 IgG亚型体液水平升高 抗细胞壁碎片抗细胞壁碎片IgG1抗体抗体(IgG1-CW)抗磷酸肽甘露聚糖片段抗磷酸肽甘露聚糖片段IgG2抗体抗体(IgG2-PPM)系统性念珠菌病患者 IgG1-CW/IgG2-PPM比值升高n结论结论1,3-D-1,3-D-葡聚糖以及葡聚糖以及IgG1-CWIgG1-CW、IgG2-PPMIgG2-PPM可用于早期诊断系统性可用于早期诊断系统性 念珠菌病念珠菌病.1,3-D-1,3-D-葡聚糖与葡聚糖与IgGIgG亚型相结合检测可提高阳性预测值，有效指导亚型相结合检测可提高阳性预测值，有效指导 早期抗真菌药物治疗早期抗真菌药物治疗.N.Kondori,L.Edebo,etc.CLINICAL AND DIAGNOSTIC LABORATORY IMMUNOLOGY,Mar.200433例 41,3-D-葡聚糖和抗白色念珠菌细胞壁抗原的IgG本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。念珠菌感染患者念珠菌感染患者14例例 1,3-D-葡聚糖结果阳性葡聚糖结果阳性系统性念珠菌病患者系统性念珠菌病患者14例例1,3-D-葡聚糖检测结果均大葡聚糖检测结果均大于于20 pg/ml34念珠菌感染患者14例 1,3-D-葡聚糖结果阳性系统本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。血浆血浆1,3-D1,3-D葡聚糖检测对血液病患者侵袭性真菌感染的诊断价值葡聚糖检测对血液病患者侵袭性真菌感染的诊断价值本研究收集疑为IFI的血液病患者血浆标本162例,其中化疗后患者85例,造血干细胞移植后患者77例。按照欧洲癌症研究治疗组织及真菌研究组(EORTC/MSG)诊断标准,所有病例中有确定诊断2例,临床诊断18例,拟诊75例,排除诊断67例。结果表明:以20 ng/m l为诊断界值,G试验的敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)分别为75%、91%、72.4%和92.4%。在75例拟诊病例中,其中有51例G试验阳性,且对广谱抗生素无效而经过抗真菌治疗有效,经过临床回顾性分析符合IFI,表明G试验使IFI诊断率提高31.4%。例例 5刘芳刘芳,吴彤吴彤,等等.中国实验血液学杂志中国实验血液学杂志Journal of Experimental Hematology 200935血浆1,3-D葡聚糖检测对血液病患者侵袭性真菌感染的诊断本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。G试验对试验对IF I诊断率的影响诊断率的影响在所有162例患者中,若无G试验作为诊断标准,仅20例患者达到确诊+临床诊断真菌感染标准,占总病例数12.3%。若将G试验阳性作为微生物学标准,则有71例达确诊+临床诊断标准,占总病例数的43.8%。在75例拟诊病例中,其中51例真菌培养阴性而G试验阳性的患者,均对广谱抗生素无效而经过抗真菌治疗病情好转,经过临床回顾性分析符合IFI,故G试验使IFI诊断率提高了31.4%。36G试验对IF I诊断率的影响36本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。血浆血浆1,3-D1,3-D葡聚糖对深部真菌感染诊断的研究葡聚糖对深部真菌感染诊断的研究例例 6赵勇赵勇,王红王红,等等.中国真菌学杂志中国真菌学杂志2007年年8月第月第2卷第卷第4期期该研究共留取用于检测血浆葡聚糖的标本182份,其中来自确诊病例和高度疑似病例(真阳性)共18份,其余为可能感染病例(18份)和无深部真菌感染病例(146份,真阴性)。统计学结果提示血浆葡聚糖水平对深部真菌统计学结果提示血浆葡聚糖水平对深部真菌感染诊断的准确性优于单纯依靠各种标本真感染诊断的准确性优于单纯依靠各种标本真菌培养或真菌涂片是否阳性对深部真菌感染菌培养或真菌涂片是否阳性对深部真菌感染的判断。的判断。AUC95%置信区间置信区间葡聚糖葡聚糖0.8870.795-0.979真菌培养真菌培养0.8400.744-0.936真菌涂片真菌涂片0.8330.738-0.927用于诊断深部真菌感染各指标用于诊断深部真菌感染各指标ROC曲线下面积曲线下面积37血浆1,3-D葡聚糖对深部真菌感染诊断的研究例 6赵勇,本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。血清血清1,3-D-葡聚糖检测在念珠菌菌血症诊断中的价值葡聚糖检测在念珠菌菌血症诊断中的价值例例 7对2007年1月至2009年4月的25例念珠菌菌血症患者、60例细菌菌血症患者、25例念珠菌口咽定植者、20例健康体检者的血清1,3-D-葡聚糖含量进行比较分析。念珠菌菌血症组的血清1,3-D-葡聚糖含量为115.242.3 ng/L,明显高于其他各组,其他各组间的血清1,3-D-葡聚糖含量无显著差异。结论结论:血清血清1,3-D-葡聚糖的检测是诊断念珠菌菌血症的有效指标。葡聚糖的检测是诊断念珠菌菌血症的有效指标。四组间比较四组间比较:F=119.493,P0.105;念珠菌菌血症组与细菌菌血症组、念珠菌口咽定植组、健康体检组的两两比较念珠菌菌血症组与细菌菌血症组、念珠菌口咽定植组、健康体检组的两两比较:P值均值均0.05.刘英其刘英其.中国卫生检验杂志中国卫生检验杂志2009年年9月第月第19卷第卷第9期期38血清1,3-D-葡聚糖检测在念珠菌菌血症诊断中的价值例 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。血浆血浆1,3-D-葡聚糖与抗深部白色念珠菌感染药物疗效关系的实验研究葡聚糖与抗深部白色念珠菌感染药物疗效关系的实验研究例例 8李世荣李世荣,王红王红,等等.临床和实验医学杂志临床和实验医学杂志2007年第年第6卷第卷第6期期本文采用110只小鼠随机分成3组,空白对照组、模型组、氟康唑组,建立深部白色念珠菌感染的动物模型。定量检测血浆中1,3-D-葡聚糖的含量,双肾组织匀浆液培养计数菌落数。用于探讨深部真菌感染小鼠血浆1,3-D-葡聚糖水平与抗真菌药物疗效的关系。各处理组不同时间点血浆各处理组不同时间点血浆1,3-D-葡聚糖的比较葡聚糖的比较组别组别治疗前治疗前治疗第治疗第1天天治疗第治疗第3天天治疗第治疗第5天天模型组模型组4791.474415.995397.004640.993537.984259.212355.313663.52氟康唑组氟康唑组3978.093500.152976.153953.12662.601665.5417.8715.03对照组对照组8.956.06治疗前模型组血浆治疗前模型组血浆(13)-D-葡聚糖水平明显高于空白对照组葡聚糖水平明显高于空白对照组,说明血浆说明血浆1,3-D-葡聚糖水平异常升高可以反映深部真菌感染的存在。葡聚糖水平异常升高可以反映深部真菌感染的存在。氟康唑组血浆氟康唑组血浆1,3-D-葡聚糖水平随着治疗逐渐减低葡聚糖水平随着治疗逐渐减低,从治疗第从治疗第5天开始与模型组天开始与模型组相比相比,血浆血浆1,3-D-葡聚糖水平差异具有统计学意义葡聚糖水平差异具有统计学意义(P0.05),说明血浆说明血浆(13)-D-葡聚糖水平与氟康唑的治疗呈量效关系。葡聚糖水平与氟康唑的治疗呈量效关系。39血浆1,3-D-葡聚糖与抗深部白色念珠菌感染药物疗效关系本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。大鼠感染大鼠感染曲霉菌后曲霉菌后1,3-D-葡聚糖水平变化葡聚糖水平变化该研究目的在于建立患侵袭性肺曲霉菌病动物模型,监测其血清1,3-D-葡聚糖浓度变化,评价抗真菌感染疗效.n结论结论1,3-D-葡聚糖可用于早期检测侵袭性肺曲霉菌病和评价抗真菌药物疗效葡聚糖可用于早期检测侵袭性肺曲霉菌病和评价抗真菌药物疗效Nathan P.Wiederhold,Laura K.Najvar,etc.ANTIMICROBIAL AGENTS AND CHEMOTHERAPY,Mar.2008例例 9大鼠感染曲霉菌后第三天大鼠感染曲霉菌后第三天1,3-D-葡聚糖水平明显升高葡聚糖水平明显升高,49.2pg/ml 609pg/ml40大鼠感染曲霉菌后1,3-D-葡聚糖水平变化该研究目的在于本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。卡氏肺孢子虫肺炎血清学标志物卡氏肺孢子虫肺炎血清学标志物卡氏肺孢子虫肺炎(Pneumocystis pneumonia,PCP)当宿主防御机能受损时易引起疾病,最常见的是血液系统恶性疾病,淋巴增生性疾病,肿瘤化疗和艾滋病等引起的细胞免疫缺乏.PCP因没有特异性诊断指标和明显临床症状较难治疗,通常多药物联合治疗,常引发多器官感染.该研究收集患者57例 标本支气管肺泡灌洗液BAL 检测项目：乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶 LDH (LDH (肺部感染炎症指标肺部感染炎症指标)1,3-D-1,3-D-葡聚糖葡聚糖 BG (BG (真菌感染标志物真菌感染标志物)KL-6 (KL-6 (间质性肺炎标志物间质性肺炎标志物)n结论结论1,3-D-葡聚糖为诊断葡聚糖为诊断PCP的最佳指标的最佳指标.LDH与氧分压相结合适用于反映肺部组织损害程度与氧分压相结合适用于反映肺部组织损害程度.对于严重呼吸衰竭患者对于严重呼吸衰竭患者,BAL的的 1,3-D-葡聚糖水平能准确反映患者病情葡聚糖水平能准确反映患者病情.Sadatomo Tasaka,Naoki Hasegawa,etc.Chest2007例例 1041卡氏肺孢子虫肺炎血清学标志物卡氏肺孢子虫肺炎(Pneumoc本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。PCP组与非组与非PCP组组 LDH/BG/KL-6 水平比较水平比较42PCP组与非PCP组 LDH/BG/KL-6 水平比本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。4343本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。4444本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。各项目各项目ROC曲线下面积为：曲线下面积为：BG 0.935 KL-6 0.730 LDH 0.7041,3-D-葡聚糖的葡聚糖的ROC曲线下曲线下面积明显高于其他两个指标面积明显高于其他两个指标(p 0.01)提示提示1,3-D-葡聚糖为诊断卡氏肺葡聚糖为诊断卡氏肺孢子虫肺炎孢子虫肺炎(PCP)的最佳指标的最佳指标BG、LDH和和 KL-6 ROC曲线曲线45各项目ROC曲线下面积为：BG、LDH和 KL-6 ROC曲本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。1,3-D-葡聚糖和白色念珠菌芽管抗体葡聚糖和白色念珠菌芽管抗体用于诊断和治疗成人中性粒细胞减少性念珠菌病用于诊断和治疗成人中性粒细胞减少性念珠菌病检测白念珠菌芽管抗体(CAGT)在系统性白念珠菌感染诊断中具有一定的诊断意义n结论结论BG和和CAGT联合检测利于血液病患者合并真菌感染的检测联合检测利于血液病患者合并真菌感染的检测两试验相结合可降低单一试验的假阳性率两试验相结合可降低单一试验的假阳性率Carmen Pazos,Mara-Dolores Moragues,etc.Rev Iberoam Micol 2006例例 11461,3-D-葡聚糖和白色念珠菌芽管抗体检测白念珠菌芽管抗本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。不同患者不同患者BG()and 抗抗CAGT()抗体动态变化情况抗体动态变化情况(a)侵袭性念珠菌病患者合并急性髓样白血病侵袭性念珠菌病患者合并急性髓样白血病(b)使用两性霉素使用两性霉素B 治疗后治疗后BG和和CAGT变化情况变化情况47不同患者BG()and 抗CAGT()抗体动态变化情况侵本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。(b)疑似侵袭性念珠菌病患者合并慢性淋巴细胞白血病疑似侵袭性念珠菌病患者合并慢性淋巴细胞白血病未使用两性霉素未使用两性霉素B治疗治疗 BG和和CAGT滴度变化情况滴度变化情况BG()and抗抗CAGT()48(b)疑似侵袭性念珠菌病患者合并慢性淋巴细胞白血病48本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。(c)多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤(非念珠菌感染非念珠菌感染)患者患者BG结果假阳性结果假阳性BG()and抗抗CAGT()49(c)多发性骨髓瘤(非念珠菌感染)患者BG结果假阳性49本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。(d)非非Hodgkins 淋巴瘤淋巴瘤(非念珠菌感染非念珠菌感染)患者患者 CAGT结果假阳性结果假阳性BG()and抗抗CAGT()50(d)非Hodgkins 淋巴瘤(非念珠菌感染)患者 C本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。天津医科大学总医院天津医科大学总医院 病例病例1患者患者A，女性，女性，82岁。岁。病史：病史：2009年年8月月31日外伤后，面部、左上肢疼痛、伴大小便失禁日外伤后，面部、左上肢疼痛、伴大小便失禁5天入院，于干部天入院，于干部保健科接受治疗。保健科接受治疗。入院第一周入院第一周21222324252627入院第二周入院第二周2829301234入院第三周入院第三周567891011NovDec送检血培养送检血培养(需氧需氧+厌氧厌氧)需氧瓶报阳需氧瓶报阳 为季也蒙假丝酵母菌为季也蒙假丝酵母菌无厌氧菌生长无厌氧菌生长再次送检血培养再次送检血培养 结果同结果同21日日G试验检测试验检测:682.6 pg/ml请感染科会诊请感染科会诊:诊断为真菌血症诊断为真菌血症且不除外真菌败血症且不除外真菌败血症给予科塞斯给予科塞斯50mg静滴静滴因患者体弱因患者体弱给予输入乳糜营养液数天给予输入乳糜营养液数天科塞斯已用科塞斯已用11天天给予输血浆给予输血浆200ml 改变胶体渗透压改变胶体渗透压G试验检测试验检测:876.7pg/ml51天津医科大学总医院 病例1患者A，女性，82岁。入院第一周 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。病例病例1治疗过程治疗过程11月月21日日送检血培养送检血培养(需氧需氧+厌氧厌氧)需氧瓶报阳需氧瓶报阳为季也蒙假丝酵母菌为季也蒙假丝酵母菌无厌氧菌生长无厌氧菌生长11月月23日日再次送检血培养再次送检血培养(需氧需氧+厌氧厌氧)结果同上结果同上11月月24日日送检送检G试验试验报告结果为报告结果为682.6pg/ml11月月26日日请感染科会诊：患者为真菌血症请感染科会诊：患者为真菌血症目前不除外真菌败血症目前不除外真菌败血症给予科塞斯给予科塞斯50mg静滴以抗真菌血症静滴以抗真菌血症11月月29日日患者病情平稳患者病情平稳无发热寒战无发热寒战11月月30日日因患者体弱因患者体弱给予输入乳糜营养液数天给予输入乳糜营养液数天12月月2日日患者病情稳定患者病情稳定未诉不适未诉不适神情神情两肺呼吸音粗两肺呼吸音粗12月月5日日患者稍有憋气患者稍有憋气有黄疸有黄疸不易喀出不易喀出12月月6日日患者憋气患者憋气不能平卧不能平卧12月月7日日患者病情如前患者病情如前仍有间断憋气不适仍有间断憋气不适体温尚可体温尚可送检送检G试验试验报告结果为报告结果为867.7pg/ml*与临床医生沟通：主治医生考虑与临床医生沟通：主治医生考虑G试验结果升高与输入血浆和营养脂肪试验结果升高与输入血浆和营养脂肪乳有关乳有关52病例1 治疗过程11月21日 送检血培养(需氧+厌氧)52本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。天津医科大学总医院天津医科大学总医院 病例病例2入院第一周入院第一周23242526272829入院第二周入院第二周303112345入院第三周入院第三周6789101112入院第四周入院第四周13141516171819OctDecG试验检测：试验检测：179.6pg/ml痰培养痰培养:铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌无真菌生长无真菌生长痰培养痰培养:粘质沙雷菌粘质沙雷菌 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌无真菌生长无真菌生长G试验检测：试验检测：3280pg/ml患者患者B，男性，男性，85岁。岁。因肺炎、肺感染入院，于干部保健科接受治疗。因肺炎、肺感染入院，于干部保健科接受治疗。该颜色区域表示当天给予输入该颜色区域表示当天给予输入200ml血浆血浆53天津医科大学总医院 病例2入院第一周 23242本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。病例病例2治疗过程治疗过程10月月23日日给予输入血浆给予输入血浆200ml10月月26日日给予输入血浆给予输入血浆200ml10月月28日日给予输入血浆给予输入血浆200ml11月月5日日送检送检G试验试验报告结果报告结果:179.6pg/ml*与临床医生联系，临床暂不考虑真菌感染，怀疑与输血浆有关。与临床医生联系，临床暂不考虑真菌感染，怀疑与输血浆有关。11月月6日日给予输入血浆给予输入血浆200ml11月月9日日痰培养痰培养结果结果:铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌无真菌生长无真菌生长11月月11日日给予输入血浆给予输入血浆200ml11月月12日日送检送检G试验试验报告结果报告结果:3280pg/ml*再次与临床联系，询问患者临床症状与治疗情况，主管医生考虑该结再次与临床联系，询问患者临床症状与治疗情况，主管医生考虑该结果果仍与输入血浆有关。仍与输入血浆有关。11月月17日日痰涂片找真菌菌丝及孢子痰涂片找真菌菌丝及孢子结果结果:未见真菌菌丝与酵母样孢子未见真菌菌丝与酵母样孢子痰培养痰培养结果结果:粘质沙雷菌粘质沙雷菌铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌无无真菌生长真菌生长54病例2 治疗过程10月23日 给予输入血浆200ml54本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。小结小结n1,3-D-葡聚糖是侵袭性真菌感染早期葡聚糖是侵袭性真菌感染早期诊断、疗效观察、预后评估有价值的实诊断、疗效观察、预后评估有价值的实验诊断。验诊断。n1,3-D-葡聚糖检验其敏感性优于葡聚糖检验其敏感性优于GMn侵袭性真菌感染的诊断与治疗是一个复侵袭性真菌感染的诊断与治疗是一个复杂过程，实验室与临床应密切联系，为杂过程，实验室与临床应密切联系，为临床医生提供诸如显微镜检查、真菌培临床医生提供诸如显微镜检查、真菌培养、血清学标志物等多方面信息。养、血清学标志物等多方面信息。55小结1,3-D-葡聚糖是侵袭性真菌感染早期诊断、疗效观察56谢谢！56