林木病理学林木病原细菌培训ppt课件

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文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。林木病原细菌林木病原细菌林木病原细菌的一般性状林木病原细菌的一般性状细菌形态和结构细菌形态和结构形态大多杆状形态大多杆状,个别丝状个别丝状细菌大多单生大小一般为细菌大多单生大小一般为1-3x0.5-0.8微米,要在苯酚品红染色后在微米,要在苯酚品红染色后在x的油镜下才能观察到的油镜下才能观察到林木病原细菌林木病原细菌的一般性状1 1文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。大多有鞭毛大多有鞭毛极鞭着生在菌体的一端或两端极鞭着生在菌体的一端或两端周鞭着生在菌体的四周周鞭着生在菌体的四周鞭毛着生的位置是分类的依据鞭毛着生的位置是分类的依据一般要对鞭毛染色后再镜检一般要对鞭毛染色后再镜检大多有鞭毛2 2文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。菌体结构菌体结构黏质层黏质层(较厚而固定的称作荚膜较厚而固定的称作荚膜)-细胞壁细胞壁(多糖,拟脂类和甲壳质组成多糖,拟脂类和甲壳质组成)-质膜(质膜下的小粒状鞭毛穿过质膜(质膜下的小粒状鞭毛穿过细胞壁和黏质层延伸到体外)细胞壁和黏质层延伸到体外)-胞胞质(异染粒中性体气泡液泡质(异染粒中性体气泡液泡核糖体)核糖体)-核区(核区(DNA,无核膜),无核膜)无芽孢无芽孢菌体结构黏质层(较厚而固定的称作荚膜)-细胞壁(多糖,3 3文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。用革兰氏染色法可反映细胞壁的差异革兰氏阴性菌壁厚,肽聚糖为主革兰氏阴性菌壁厚,肽聚糖为主革兰氏阳性菌壁薄,有脂多糖和脂蛋白革兰氏阳性菌壁薄,有脂多糖和脂蛋白革兰氏染色是用结晶紫草酸铵对细菌染色,革兰氏染色是用结晶紫草酸铵对细菌染色,经酒精脱色后再用番红复染以便观察未经酒精脱色后再用番红复染以便观察未能脱色的为阳性(紫色),脱色的为阴性能脱色的为阳性(紫色),脱色的为阴性(红色)(红色)用革兰氏染色法可反映细胞壁的差异革兰氏阴性菌壁厚,肽聚糖为4 4文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。革兰氏染色阳性革兰氏染色阳性大肠杆菌大肠杆菌革兰氏染色阴性革兰氏染色阴性枯草杆菌枯草杆菌革兰氏染色阳性大肠杆菌革兰氏染色阴性枯草杆菌5 5文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。植物病原细菌对链霉素敏感,可用于植物病原细菌对链霉素敏感,可用于防治细菌病害防治细菌病害植物病原细菌对链霉素敏感,可用于防治细菌病害6 6文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。培养性状,繁殖,遗传和变异培养性状,繁殖,遗传和变异培养性状:固定培养基上菌落培养性状:固定培养基上菌落液体培养基上混浊,絮状物,菌液体培养基上混浊,絮状物,菌膜,菌环等膜,菌环等繁殖繁殖方式为裂殖,繁殖速度繁殖繁殖方式为裂殖,繁殖速度为次分钟,为次分钟,S形生长曲线形生长曲线培养性状,繁殖,遗传和变异培养性状:固定培养基上菌落7 7文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。遗传遗传遗传裂殖时细胞内物质均等分遗传裂殖时细胞内物质均等分配到子细胞配到子细胞质粒染色体质粒染色体DNA之外的可自我之外的可自我复制的环状双链复制的环状双链DNA,常带有与抗药,常带有与抗药性,致病性,性结合有关的基因性,致病性,性结合有关的基因遗传遗传裂殖时细胞内物质均等分配到子细胞质粒染8 8文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。变异变异类有性作用类有性作用接合:一个细胞的遗传物质可以部分进接合:一个细胞的遗传物质可以部分进入另一个细胞,接受遗传物质的细菌在入另一个细胞,接受遗传物质的细菌在分裂繁殖时体内的两种遗传物质重新组分裂繁殖时体内的两种遗传物质重新组合合突变频率低但次数多突变频率低但次数多转化:由于菌体破裂,一个细胞的遗传转化:由于菌体破裂,一个细胞的遗传物质释放出来,进入另一个有亲和力的物质释放出来,进入另一个有亲和力的同种或近似种的菌体内,并作为后者遗同种或近似种的菌体内,并作为后者遗传物质的一部分传物质的一部分变异类有性作用9 9文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。转导:噬菌体侵染和在消解一种转导:噬菌体侵染和在消解一种细菌时,细菌时,其其DNA可以携带寄主细可以携带寄主细胞的部分遗传物质,在侵染另一胞的部分遗传物质,在侵染另一个细菌时,就可以将遗传物质带个细菌时,就可以将遗传物质带到第二个细菌体内作为它的遗传到第二个细菌体内作为它的遗传物质的一部分物质的一部分转导:噬菌体侵染和在消解一种细菌时,其DNA可以携带寄主细1010文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。噬菌体:细菌的病毒,专性寄生,噬菌体:细菌的病毒,专性寄生,一般蝌蚪状,在细菌液体培养时一般蝌蚪状,在细菌液体培养时使培养液变清,在细菌培养平板使培养液变清,在细菌培养平板上形成透明斑(噬菌斑)上形成透明斑(噬菌斑)噬菌体:细菌的病毒,专性寄生,一般蝌蚪状,在细菌液体培养时使1111文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。寄生性:绝大多数非专性寄生寄生性:绝大多数非专性寄生,极少数极少数专性寄生专性寄生鉴定方法鉴定方法:症状观察症状观察:染色镜检鉴定法染色镜检鉴定法(革兰氏染色法和鞭毛革兰氏染色法和鞭毛染色法染色法)培养性状鉴定法培养性状鉴定法(菌落性状观察菌落性状观察,生理生生理生化性状观察化性状观察)致病性测定致病性测定:血清学鉴定法血清学鉴定法:核酸技术核酸技术:寄生性:绝大多数非专性寄生,极少数专性寄生鉴定方法:症状1212文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。植物病原细菌的主要类群植物病原细菌的主要类群薄壁菌门薄壁菌门重要属重要属:野杆菌属野杆菌属Agrobacterium,也叫脓杆菌杆也叫脓杆菌杆菌属菌属,革兰氏阴性菌,鞭毛周生,引起植革兰氏阴性菌,鞭毛周生,引起植物组织肿瘤或畸形物组织肿瘤或畸形假单胞杆菌属假单胞杆菌属Pseudomonas革兰氏阴性革兰氏阴性菌,鞭毛数根,菌落白色,能产生荧光菌,鞭毛数根,菌落白色,能产生荧光性色素,引起叶斑,溃疡,果斑性色素,引起叶斑,溃疡,果斑植物病原细菌的主要类群薄壁菌门1313文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。黄单胞杆菌属黄单胞杆菌属Xanthomonas革兰氏阴革兰氏阴性菌,鞭毛根,菌落黄色,能产生性菌,鞭毛根,菌落黄色,能产生非水溶性黄色色素,柑橘溃疡病非水溶性黄色色素,柑橘溃疡病,核桃核桃黑斑病黑斑病欧氏杆菌属欧氏杆菌属Erwina革兰氏阴性菌,鞭革兰氏阴性菌,鞭毛周生,引起植物组织腐烂或萎焉毛周生,引起植物组织腐烂或萎焉黄单胞杆菌属Xanthomonas革兰氏阴性菌,鞭毛根,菌1414文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。厚壁菌门厚壁菌门棒杆菌属棒杆菌属Gorynebacterium(Clavibacter)革兰氏阳性菌,多数无鞭毛革兰氏阳性菌,多数无鞭毛厚壁菌门1515文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。软壁菌门软壁菌门植原体属(植原体属(Phytomonas)引起的病状很象病毒病的症状,主要是黄引起的病状很象病毒病的症状,主要是黄化丛枝症状以前放在病毒病中,后来发化丛枝症状以前放在病毒病中,后来发现有些病可用四环素治疗,在电镜下可看现有些病可用四环素治疗,在电镜下可看到哑铃状类似于菌原体的生物体,改成类到哑铃状类似于菌原体的生物体,改成类菌原体,近年来将其归到植原体属中,引菌原体,近年来将其归到植原体属中,引起桑的萎缩病,造成节尖缩短,丛枝,缩起桑的萎缩病,造成节尖缩短,丛枝,缩叶,黄化;泡桐丛枝病:丛枝,花果变枝叶,黄化;泡桐丛枝病:丛枝,花果变枝叶,黄化,有传染性叶,黄化,有传染性软壁菌门植原体属(Phytomonas)1616文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。螺原体属(螺原体属(Spiroplasma)菌体的基本形态为螺旋形菌体的基本形态为螺旋形繁殖时可产生分支,分支也螺旋形繁殖时可产生分支,分支也螺旋形引起柑橘僵化病(引起柑橘僵化病(S.citri)节间变短,)节间变短,缩小,丛生枝或丛芽树皮增厚,植株缩小,丛生枝或丛芽树皮增厚,植株矮化,并且全年可开花,但结果小而矮化,并且全年可开花,但结果小而少,多畸形,易脱落少,多畸形,易脱落可以人工培养,在培养基上形成可以人工培养,在培养基上形成“荷荷包蛋包蛋”状菌落状菌落螺原体属(Spiroplasma)1717文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。油橄榄肿瘤病油橄榄肿瘤病Pseudomonas假单胞杆菌属假单胞杆菌属假单胞杆菌属假单胞杆菌属油橄榄肿瘤病Pseudomonas假单胞杆菌属1818文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。杨属柳属山楂属果树冠瘿病杨属柳属山楂属果树冠瘿病Agrobacterium(野杆菌属)根瘤野杆菌属)根瘤杨属柳属山楂属果树冠瘿病Agrobacterium(野杆菌1919文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。根部小木瘤根部小木瘤根部小木瘤2020文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。病原细菌病原细菌病原细菌2121文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。柑橘溃疡病柑橘溃疡病Xanthomonas campestri pv.citri(Hasse)黄单胞杆菌属黄单胞杆菌属黄单胞杆菌属黄单胞杆菌属X.citriX.citri同物异名同物异名同物异名同物异名柑橘溃疡病Xanthomonas campestri pv.2222文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。症状症状2323文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。病原病原病原2424文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。细菌病害的症状细菌病害的症状 侵染循环和防治侵染循环和防治细菌病害的症状 侵染循环和防治2525文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。症状症状斑点斑点溃疡溃疡萎焉萎焉症状斑点2626文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。侵染循环侵染循环植物病原细菌从伤口侵入植物病原细菌从伤口侵入,有的从自然孔有的从自然孔口侵入口侵入寄生性弱的细菌一般都是从伤口侵入寄生性弱的细菌一般都是从伤口侵入寄寄生生性性强强的的细细菌菌从从伤伤口口和和自自然然孔孔口口都都能能侵侵入入假假单单胞胞杆杆菌菌属属和和黄黄单单胞胞杆杆菌菌属属的的细细菌菌引引致致叶斑病叶斑病,一般是从自然孔口侵入一般是从自然孔口侵入侵染循环植物病原细菌从伤口侵入,有的从自然孔口侵入2727文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。棒棒形形杆杆菌菌属属、欧欧氏氏杆杆菌菌属属和和土土壤壤杆杆菌菌属属的的细细菌菌引引致致萎萎蔫蔫、腐腐烂烂和和瘤瘤肿肿,多多半半是是从伤口侵入从伤口侵入有多次再侵染的机会有多次再侵染的机会在自然条件在自然条件,传播靠雨水溅洒作用传播靠雨水溅洒作用,故传故传播距离不会很远播距离不会很远带菌的种苗是细菌病害传染的重要来源带菌的种苗是细菌病害传染的重要来源昆虫介体也可传播细菌昆虫介体也可传播细菌工具传播工具传播棒形杆菌属、欧氏杆菌属和土壤杆菌属的细菌引致萎蔫、腐烂和瘤肿2828文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。侵染来源侵染来源细菌在受害苗木内越冬细菌在受害苗木内越冬,成为初侵染来源成为初侵染来源种种子子和和无无性性繁繁殖殖器器官官:带带菌菌种种苗苗是是最最重重要要的的初初侵入来源,带菌种苗调运可远距离传播侵入来源,带菌种苗调运可远距离传播病病残残体体:植植物物病病原原细细菌菌可可以以在在病病株株残残余余组组织织中中长期存活,也是重要的初侵染来源长期存活,也是重要的初侵染来源侵染来源细菌在受害苗木内越冬,成为初侵染来源2929文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。土壤:主要存活于土壤中的作物残余组织土壤:主要存活于土壤中的作物残余组织杂草和其他作物:相同寄主范围的作物杂草和其他作物:相同寄主范围的作物昆昆虫虫介介体体:玉玉米米细细菌菌性性萎萎蔫蔫病病菌菌可可以以在在玉玉米叶甲体内越冬,成为初侵染来源米叶甲体内越冬,成为初侵染来源土壤:主要存活于土壤中的作物残余组织3030文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。防治方法防治方法作好种苗消毒和清除植物病死残体作好种苗消毒和清除植物病死残体用抗生素效果较好用抗生素效果较好防止造成伤口和及时保护伤口防止造成伤口和及时保护伤口,在在防治上特别重要防治上特别重要防治方法作好种苗消毒和清除植物病死残体3131文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。寄生性种子植物寄生性种子植物寄生性种子植物的种类寄生性种子植物的种类主要有桑寄生科主要有桑寄生科(Loranthaceae)菟丝子科菟丝子科(Cuscutaceae)列当科列当科(Orobanchaceae)野菰野菰蛇菰科(蛇菰科(Balanophoraceae)其中菟丝子和列当是对外检疫对象其中菟丝子和列当是对外检疫对象寄生性种子植物寄生性种子植物的种类3232文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。寄生性种子植物的寄生特点寄生性种子植物的寄生特点寄生部位寄生部位:茎寄生茎寄生(地上部分的茎地上部分的茎):桑寄生和菟丝子桑寄生和菟丝子根寄生根寄生(地下部分的根地下部分的根):列当和野菰列当和野菰寄生性种子植物的寄生特点寄生部位:3333文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。对寄主的依赖程度对寄主的依赖程度半寄生半寄生:含叶绿素含叶绿素,其吸盘的导管与寄主其吸盘的导管与寄主导管相连导管相连,如桑寄生如桑寄生全寄生全寄生:不含叶绿素不含叶绿素,其吸盘的导管和筛其吸盘的导管和筛管分别与寄主的导管和筛管相连管分别与寄主的导管和筛管相连,如菟如菟丝子丝子,列当和野菰列当和野菰对寄主的依赖程度半寄生:含叶绿素,其吸盘的导管与寄主导管相连3434文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。林木病理学林木病原细菌培训ppt课件3535文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。林木病理学林木病原细菌培训ppt课件3636文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。菟丝子害菟丝子害种子萌发到缠绕寄种子萌发到缠绕寄主的过程主的过程菟丝子的茎和果实菟丝子的茎和果实枝条被害状枝条被害状寄主和菟丝子茎切寄主和菟丝子茎切面面,示菟丝子吸器伸示菟丝子吸器伸入寄主皮层入寄主皮层菟丝子害种子萌发到缠绕寄主的过程3737文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。槲寄生槲寄生槲寄生3838文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。油杉寄生害 列当危害番茄油杉寄生害 列当危害番茄3939文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。蛇菰科Balanophoraceae 双子叶植物,19属,约120种,分布于热带和亚热带地区,中国只有 蛇菰属Balanophora 锁阳属Cynomorium 双柱蛇菰属 Rhopalocemis 3属17种,产中南部至西南 一年生或多年生、肉质草本,寄生于根上 无叶绿素和气孔,花单性,很少两性,密集成一个单性或两性的花序蛇菰科Balanophoraceae 双子叶植物,19属,4040文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。野菰野菰,野菰,又名蔗寄生一年生寄生草本植物,整个列当科都是营寄生的植物,南方最常见的是这种茎基部分枝,地上不分枝。叶退化成鳞片状,全株肉色枝顶开花,萼佛焰苞状,冠二唇形,紫红色,黄白色地下根常附于禾本科寄生植物全株药用,具清热解毒,消肿功效野菰野菰,又名蔗寄生4141文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。油杉矮槲寄生发育循环图油杉矮槲寄生发育循环图油杉矮槲寄生发育循环图4242文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。越冬场所越冬场所菟丝子种子比寄主植物的种子成熟早、菟丝子种子比寄主植物的种子成熟早、萌发晚萌发晚种子在土内或与寄主种子一起越冬种子在土内或与寄主种子一起越冬列当靠寄主根部分泌物刺激而萌发列当靠寄主根部分泌物刺激而萌发桑寄生直接在寄主上越冬桑寄生直接在寄主上越冬越冬场所菟丝子种子比寄主植物的种子成熟早、萌发晚4343文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。传播传播小的种子靠风传播小的种子靠风传播(菟丝子菟丝子,列当列当)大的种子靠鸟类传播大的种子靠鸟类传播(桑寄生桑寄生)传播小的种子靠风传播(菟丝子,列当)4444文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。防治方法防治方法:检疫检疫轮作轮作手工拔除手工拔除(砍除砍除)喷洒除草剂喷洒除草剂防治方法:检疫4545文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。植物病原线虫植物病原线虫线虫的形态和结构线虫的形态和结构低等动物,属线虫动物门,数量多,低等动物,属线虫动物门,数量多,分布广,受线虫危害的症状与一般分布广,受线虫危害的症状与一般的病害症状相似,称为线虫病的病害症状相似,称为线虫病350-1000 x15-35微米,虫体细长,微米,虫体细长,蠕虫形,虫体半透明蠕虫形,虫体半透明植物病原线虫线虫的形态和结构4646文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。生活史寄生性生活史寄生性卵幼虫(龄)成虫受精卵卵幼虫(龄)成虫受精卵专性寄生,去食时排出唾液,起到致病专性寄生,去食时排出唾液,起到致病作用,刺激细胞分裂,肿瘤,枯萎作用,刺激细胞分裂,肿瘤,枯萎症状:根结,丛根,根腐,地上部分似症状:根结,丛根,根腐,地上部分似缺素症缺素症松材线虫是松褐天牛传播松材线虫是松褐天牛传播生活史寄生性卵幼虫(龄)成虫受精卵4747文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。线虫症状线虫症状线虫症状4848文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。林木病理学林木病原细菌培训ppt课件4949文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。林木病理学林木病原细菌培训ppt课件5050文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。林木病理学林木病原细菌培训ppt课件5151文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。林木病理学林木病原细菌培训ppt课件5252文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。林木病理学林木病原细菌培训ppt课件5353文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。林木病理学林木病原细菌培训ppt课件5454文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。雄虫雄虫雄虫5555文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。雌虫雌虫雌虫5656文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。林木病理学林木病原细菌培训ppt课件5757文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。检验及鉴定检验及鉴定检验方法检验方法对应施检疫物首先直接观察是否存对应施检疫物首先直接观察是否存在本质干枯、木质部蓝变和媒介昆在本质干枯、木质部蓝变和媒介昆虫或它的栖居痕迹等症状,然后进虫或它的栖居痕迹等症状,然后进行室内检验行室内检验检验及鉴定检验方法5858文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。(1)抽样和取样抽样和取样抽取有上述症状的部分检疫物,数量为每抽取有上述症状的部分检疫物,数量为每批次总件数的批次总件数的0.5%-5.0%,但最低不得少于,但最低不得少于5件。若无明显症状时可随机抽样件。若无明显症状时可随机抽样在所抽取的样木在所抽取的样木(或样品或样品)上取部分样品,或上取部分样品,或钻取少量木屑钻取少量木屑(不得少于不得少于20g),每样,每样3个重复个重复标号后带回实验室检验。必要时可将整件标号后带回实验室检验。必要时可将整件样木样木(或样品或样品)带回备检带回备检取样时注意选取靠近蛀道、蛹室的部位,取样时注意选取靠近蛀道、蛹室的部位,所取样品不得带有树皮所取样品不得带有树皮(1)抽样和取样抽取有上述症状的部分检疫物,数量为每批次总件5959文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。(2)分离线虫分离线虫将各标号样品分别进行线虫分离将各标号样品分别进行线虫分离分离线虫可采用贝尔曼漏斗法或浅盘法分离线虫可采用贝尔曼漏斗法或浅盘法对媒介昆虫进行线虫分离时,可将其用剪刀对媒介昆虫进行线虫分离时,可将其用剪刀或尖头镊子、解剖针等剪碎或撕碎后同样采或尖头镊子、解剖针等剪碎或撕碎后同样采用上述方法进行用上述方法进行分离时若室温较低分离时若室温较低(不得低于不得低于7 oC)可根据室可根据室温将分离用水调至温将分离用水调至20-40 oC(不得超过不得超过40 oC)浸泡分离材料浸泡分离材料3-4h线虫游离出一定数量后即线虫游离出一定数量后即可镜检可镜检(一般需经一般需经24小时后镜检小时后镜检)(2)分离线虫将各标号样品分别进行线虫分离6060文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。贝尔曼贝尔曼(Baermann)漏斗法漏斗法将漏斗末端接一段长约将漏斗末端接一段长约10cm乳胶管乳胶管在乳胶管上装一止水夹在乳胶管上装一止水夹剪大小适当纱布两层铺在漏斗上剪大小适当纱布两层铺在漏斗上将样段去皮劈成长约将样段去皮劈成长约3-4cm细条细条,约取约取10 g(或木或木屑屑)置于漏斗上的纱布中,纱布四角向中间盖上置于漏斗上的纱布中,纱布四角向中间盖上分离材料,然后注入清水浸没分离材料,然后注入清水浸没注入清水后要注意使水充满漏斗和下面的乳胶注入清水后要注意使水充满漏斗和下面的乳胶管,不要产生空隙管,不要产生空隙 用培养皿在漏斗末端接取线虫分离液用培养皿在漏斗末端接取线虫分离液10ml镜检镜检贝尔曼(Baermann)漏斗法将漏斗末端接一段长约10c6161文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。贝尔曼漏斗法线虫分离装置图贝尔曼漏斗法线虫分离装置图6262文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。浅盘法浅盘法浅盘分离装置由两只不锈钢浅盘组成浅盘分离装置由两只不锈钢浅盘组成口径略小的一只底部为粗网筛,放在另一口径略小的一只底部为粗网筛,放在另一只浅盘上面只浅盘上面将两层纱布打湿铺于筛盘上,把样品劈碎将两层纱布打湿铺于筛盘上,把样品劈碎(或钻取的木屑或钻取的木屑)置于筛盘的纱布上置于筛盘的纱布上慢馒注人清水,使水浸没样品慢馒注人清水,使水浸没样品浅盘法浅盘分离装置由两只不锈钢浅盘组成6363文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。分离结束后分离结束后,移去筛盘,把大盘内的移去筛盘,把大盘内的分离液集中于小烧杯内分离液集中于小烧杯内小烧杯内的线虫分离液可通过自然小烧杯内的线虫分离液可通过自然沉降或离心机沉降或离心机(1500转转/min,离心,离心2-3min)浓缩至适宜的量,以便镜检浓缩至适宜的量,以便镜检分离结束后,移去筛盘,把大盘内的分离液集中于小烧杯内6464文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。林木病理学林木病原细菌培训ppt课件6565文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。(3)镜检镜检将各标号盛有线虫分离液的培养皿置于解将各标号盛有线虫分离液的培养皿置于解剖镜下观察,先确认有无线虫剖镜下观察,先确认有无线虫对有线虫的样品进行活体镜检,观察它的对有线虫的样品进行活体镜检,观察它的一般形态结构一般形态结构选择几条成熟、特征易观察的线虫,用针选择几条成熟、特征易观察的线虫,用针或吸管移至载玻片上的水滴中或吸管移至载玻片上的水滴中使之沉底使之沉底(3)镜检将各标号盛有线虫分离液的培养皿置于解剖镜下观察,先6666文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。将此载玻片在酒精灯火焰上方往返几次将此载玻片在酒精灯火焰上方往返几次约约5-6秒至虫体突然伸直时停止秒至虫体突然伸直时停止加盖玻片后在显微镜下观察加盖玻片后在显微镜下观察根据形态特征予以初步鉴别,以确定是根据形态特征予以初步鉴别,以确定是否需作进一步的鉴定否需作进一步的鉴定 将此载玻片在酒精灯火焰上方往返几次6767文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。1.病原鉴定线虫培养线虫培养:鉴定需要相当数量的雌、雄成虫,但在检鉴定需要相当数量的雌、雄成虫,但在检验时分离到的线虫多是处于休眠阶段的分验时分离到的线虫多是处于休眠阶段的分散型散型3龄虫(龄虫(L);有时虽可见雌雄成虫,有时虽可见雌雄成虫,但数量较少但数量较少从媒介昆虫分离到的线虫则只能是被称为从媒介昆虫分离到的线虫则只能是被称为休眠幼虫休眠幼虫(DL)的分散型的分散型4龄虫,因此,需龄虫,因此,需将上述情况的线虫进行培养,以获得大量将上述情况的线虫进行培养,以获得大量雌雄成虫供鉴定雌雄成虫供鉴定1.病原鉴定线虫培养:6868文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。真菌上的单异活体培养真菌上的单异活体培养通常用于培养松材线虫的真菌为通常用于培养松材线虫的真菌为灰葡萄孢灰葡萄孢(Botrytis cinerea)多毛孢多毛孢(Pestalotia sp.)镰刀菌镰刀菌(Fusarium sp.)培养松材线虫培养松材线虫真菌上的单异活体培养通常用于培养松材线虫的真菌为6969文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。将真菌菌种接至马铃薯琼脂培养基将真菌菌种接至马铃薯琼脂培养基(PDA)平板或试管斜面上平板或试管斜面上在在25 oC条件下经过条件下经过4-5d待菌丝铺满平板或斜面后待菌丝铺满平板或斜面后将经过表面消毒的线虫用吸管接到菌将经过表面消毒的线虫用吸管接到菌丝上丝上28 oC条件下培养条件下培养10-15d即可繁殖出即可繁殖出大量线虫大量线虫用少量清水将线虫充分洗至小烧杯内用少量清水将线虫充分洗至小烧杯内备用备用 将真菌菌种接至马铃薯琼脂培养基(PDA)平板或试管斜面上7070文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。样木保温、保湿培养样木保温、保湿培养将样木劈开、锯成小段,置于烧杯中将样木劈开、锯成小段,置于烧杯中加少量清水,使木段下端浸在水中,加少量清水,使木段下端浸在水中,木段上端用湿纱布覆盖木段上端用湿纱布覆盖在在26 oC培养箱中培养培养箱中培养3-4d倒取杯底水液,亦可获得较多的雌、倒取杯底水液,亦可获得较多的雌、雄成虫雄成虫 样木保温、保湿培养将样木劈开、锯成小段,置于烧杯中7171文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。接种线虫的表面消毒接种线虫的表面消毒经分离后获得的线虫悬浮液用经分离后获得的线虫悬浮液用1500转转/min离心离心2-3min浓缩至离心管底部浓缩至离心管底部吸去上清液,用无菌滴管将底部线虫液吸去上清液,用无菌滴管将底部线虫液约约2ml移至另一无菌离心管内移至另一无菌离心管内加加 入入2ml双倍浓度的消毒液,轻轻振荡双倍浓度的消毒液,轻轻振荡混匀混匀一定时间后再离心浓缩,重复消毒一定时间后再离心浓缩,重复消毒1次次再用无菌水换洗再用无菌水换洗2次次接种线虫的表面消毒经分离后获得的线虫悬浮液用1500转/mi7272文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。消毒剂消毒剂松材线虫表面消毒常用的消毒剂有松材线虫表面消毒常用的消毒剂有3%双双氧水,处理氧水,处理10min1%升汞,处理升汞,处理5min0.002%放线菌酮放线菌酮0.1%硫酸链霉素混合液,处理硫酸链霉素混合液,处理5min硫酸链酶素硫酸链酶素(1000g/g)、金霉素、金霉素(30g/g)和匹玛霉素和匹玛霉素(pimafucin,0.63g/g)混合液混合液处理处理5min消毒剂松材线虫表面消毒常用的消毒剂有3%双氧水,处理10mi7373文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。2.临时玻片制作杀死和固定杀死和固定:将盛有线虫悬浮液的小烧杯置于将盛有线虫悬浮液的小烧杯置于65oC水浴中水浴中2min杀死线虫杀死线虫经离心浓缩后即用三烃基乙胺福尔马经离心浓缩后即用三烃基乙胺福尔马林固定液林固定液(TAF)固定固定2.临时玻片制作杀死和固定:7474
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