实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验-课件

实验四地中海贫血与实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验红细胞渗透脆性试验 实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验ThalassemiaThalassemia地中海贫血是全球最大的单基因遗传病之一地中海贫血是全球最大的单基因遗传病之一全球有全球有3.5亿人为地中海贫血基因携带者（占总人口的亿人为地中海贫血基因携带者（占总人口的2%）中国南方不同高发地中国南方不同高发地区人群携带率区人群携带率 3 24%Thalassemia地中海贫血是全球最大的单基因遗传病之一实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验地中海沿岸国家、东南亚及中国南方多见；地中海沿岸国家、东南亚及中国南方多见；广西发病率为广西发病率为20%20%；重重型型地地贫贫给给家家庭庭社社会会带带来来沉沉重重的的经经济济负负担担和难以估量的精神负担；和难以估量的精神负担；实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验地中海沿岸国家、东南亚及实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验中国南方人群地贫基因携带率 地区地区携带率携带率(%)地贫地贫地贫地贫合计合计广西广西17.66.424.0广东广东8.52.511.0海南海南12.72.715.4云南云南9.8 7.317.1贵州贵州4.25.19.3重庆重庆5.22.07.2中国南方人群地贫基因携带率 地区携带率(%)地贫地贫实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验地中海贫血（海洋性贫血、珠蛋白生成障地中海贫血（海洋性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血）：碍性贫血）：由于由于遗传性珠蛋白基因缺陷遗传性珠蛋白基因缺陷（突变、缺失（突变、缺失等）引起的等）引起的一种或多种珠蛋白肽链生物合一种或多种珠蛋白肽链生物合成减少或完全不能合成成减少或完全不能合成，导致，导致珠蛋白肽链珠蛋白肽链间的正常平衡不能维持间的正常平衡不能维持，同时，同时成人型成人型Hb（HbA：22）合成降低）合成降低的一种的一种遗传性遗传性血红蛋白病血红蛋白病。实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验地中海贫血（海洋性贫血、实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验其特点是其特点是由于珠蛋白基因的缺陷使血红蛋由于珠蛋白基因的缺陷使血红蛋白中的珠蛋白肽链有一种或几种合成减少白中的珠蛋白肽链有一种或几种合成减少或不能合成，导致或不能合成，导致血红蛋白血红蛋白的的组成成分组成成分改改变。本组疾病的临床症状轻重不一，大多变。本组疾病的临床症状轻重不一，大多表现为表现为慢性进行性慢性进行性溶血性贫血溶血性贫血。实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验其特点是由于珠蛋白基因的实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验 重型重型地贫地贫（HbBarts胎儿水肿综合征胎儿水肿综合征）4个个基因都缺失了基因都缺失了(-/-)，在孕后期或出生后即死亡。在孕后期或出生后即死亡。实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验 重型地贫实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验骨髓腔扩大，骨质变薄，头大、眼间距增宽、鼻梁塌陷、颧骨突起等骨髓腔扩大，骨质变薄，头大、眼间距增宽、鼻梁塌陷、颧骨突起等实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验骨髓腔扩大，骨质变薄，头实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验胞渗透脆性试验1.广西人群地贫基因携带率很高。一方为基一方为基因携带者，推荐配偶行基因检测因携带者，推荐配偶行基因检测。2.父母双方同类型地贫者需行遗传咨询和产父母双方同类型地贫者需行遗传咨询和产前诊断前诊断。3.产前诊断可预防重症和中间型地贫患儿出生，结合地贫筛查几乎可以阻断其出生。4.绒毛活检和羊膜腔穿刺均可行地贫产前诊绒毛活检和羊膜腔穿刺均可行地贫产前诊断断，但推荐羊膜腔穿刺推荐羊膜腔穿刺。5.无创性产前诊断无创性产前诊断是未来发展的方向。实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验1.广西人群地贫基因携带实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验-靶型靶型RBC-靶型RBC 红细胞脆性实验红细胞脆性实验Erythrocyte fragility testErythrocyte fragility test地贫患者地贫患者正常人正常人 红细胞脆性实验地贫患者正常人血红蛋白电泳血红蛋白电泳Hemoglobin electrophoresisHemoglobin electrophoresis血红蛋白电泳Hemoglobin electrophores实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验-课件 chain disappear (0-thal major)chain disappear (HbBarts hydrop fetalis)12341234 肽链分析肽链分析Peptide chain analyses 实验四地中海贫血与红细实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验临临床床特特点点实实验验室室检检查查父父母母调调查查阳阳性性（基因分析）（基因分析）实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验临床特点实验室检查父实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验MCV 80fl 和和/或或MCH 27pg,则高度怀疑则高度怀疑为地贫为地贫;红细胞渗透脆性试验阳性红细胞渗透脆性试验阳性(Red cell os motic fragility test,ROFT;0.60):即可即可怀疑为地贫怀疑为地贫;HbA2 3.5%,则为则为地贫基因携带者地贫基因携带者实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验MCV 80fl 和实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验地贫地贫诊断基因芯片诊断基因芯片(Thalachip);地贫地贫基因诊断条膜基因诊断条膜(反向点杂交反向点杂交)/一管法多重一管法多重PCRASO寡核苷酸探针点杂交寡核苷酸探针点杂交DNA测序测序实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验地贫诊断基因芯片(Tha实验四地中海贫血与红细胞渗透实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验脆性试验缺铁性贫血缺铁性贫血遗传性球形红细胞增多症遗传性球形红细胞增多症传染性肝炎或肝硬化传染性肝炎或肝硬化实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验缺铁性贫血实验：红细胞渗透脆性检验实验：红细胞渗透脆性检验(试剂盒一管法试剂盒一管法)实验：红细胞渗透脆性检验【检验原理】【检验原理】贫血症者常伴有红细胞渗透脆性的改变。贫血症者常伴有红细胞渗透脆性的改变。测定红细胞在一定渗透浓度下的溶血率，测定红细胞在一定渗透浓度下的溶血率，可筛查是否贫血，特别是可筛查是否贫血，特别是溶血率降低引起溶血率降低引起的贫血的贫血（如地贫症、严重缺铁性贫血症）（如地贫症、严重缺铁性贫血症）【检验原理】【主要组成成分】【主要组成成分】组成：由SG-A母液（红细胞渗透脆性检测液）；SG-B母液（终止红细胞溶血液）母液（终止红细胞溶血液）；SG-C母液（红细胞溶血液）组成；成分：SG-A母液采用氯化钠（NaCl）、磷酸氢二钠（Na2HPO4）、磷酸二氢钠（NaH2PO4）制成；SG-B母液采用氯化钠制成；母液采用氯化钠制成；SG-C母液采用皂素（saponin）制成。【主要组成成分】【样品要求】【样品要求】新鲜抗凝全血新鲜抗凝全血（肝素肝素、EDTA-Na、ACD），置28保存。已发生溶血或有血凝块的标本为不合格样品。标本采集后，测试应在三日内完成。【样品要求】【实验操作】【实验操作】【实验操作】【实验操作】1、取试管一只，加入A A试验液试验液试验液试验液1ml1ml，放3737，预热，预热，预热，预热1-21-2分钟分钟分钟分钟。2、加入待测抗凝全血待测抗凝全血待测抗凝全血待测抗凝全血1010 l l，立刻混匀，继续放在3737保温保温保温保温5 5分分分分钟钟钟钟。3、5 5分钟后分钟后分钟后分钟后，加入B B试验液试验液试验液试验液1ml1ml。混匀，30003000转转转转/分钟，离心分钟，离心分钟，离心分钟，离心5 5分钟分钟分钟分钟。4、将上清液轻轻倒入上清液轻轻倒入上清液轻轻倒入上清液轻轻倒入1.0cm 1.0cm 1.0cm 1.0cm的比色杯中的比色杯中的比色杯中的比色杯中（切勿搅动试切勿搅动试切勿搅动试切勿搅动试管底的红细胞管底的红细胞管底的红细胞管底的红细胞），于530nm530nm波长读取光密度波长读取光密度波长读取光密度波长读取光密度D1D1（以纯化水作空白对照）。（勿倒掉比色杯中的溶液）（勿倒掉比色杯中的溶液）（勿倒掉比色杯中的溶液）（勿倒掉比色杯中的溶液）5、向试管中加入向试管中加入向试管中加入向试管中加入C C试验液试验液试验液试验液0.5ml0.5ml，混匀，待血液全部溶血待血液全部溶血待血液全部溶血待血液全部溶血（透明红色）后，将比色杯中已比色的溶液倒入试管中混匀将比色杯中已比色的溶液倒入试管中混匀将比色杯中已比色的溶液倒入试管中混匀将比色杯中已比色的溶液倒入试管中混匀。6、将混匀后的溶液，倒入比色杯中，再于将混匀后的溶液，倒入比色杯中，再于将混匀后的溶液，倒入比色杯中，再于将混匀后的溶液，倒入比色杯中，再于530nm530nm波长比色，波长比色，波长比色，波长比色，读取光密度读取光密度读取光密度读取光密度D2D2。7、按下列公式计算出溶血率百分比。溶血溶血溶血溶血 =D1 D1 100 100 D2 X 1.25 D2 X 1.25【实验操作】溶血 =D1