护理班常用免疫学检查教学课件

临床常用免疫学检查6/23/2024临床常用免疫学检查7/28/20231临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测二、血清补体检测三、细胞免疫检测四、肿瘤标志物检测五、自身抗体检测六、感染免疫检测免疫系统免疫系统免疫学方法免疫学方法6/23/2024临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测免疫系统免疫学方2教学目的与要求：了解掌握临床免疫学检查的主要内容、检测原理以及临床实际应用的重要意义6/23/2024教学目的与要求：了解掌握临床免疫学检查的主要内容、检测原理3重点与难点1.各种抗体的特点2.补体定义及CH50测定3.肿瘤标志物及其特异性，AFP与CEA的特点，各种类型的特异性4.自身抗体与自身免疫的关系及各类型自身抗体检测的方法及临床意义5.乙肝五项测定以及临床意义6/23/2024重点与难点各种抗体的特点7/28/20234临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测二、血清补体检测三、肿瘤标志物检测四、自身抗体检测五、感染免疫检测6/23/2024临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测7/28/2025免疫球蛋白（Ig）定义：是由浆细胞合成分泌的一组具有抗体活性的球蛋白，存在于机体的血液、体液、外分泌液和部分细胞的膜上。检测：感染性疾病、免疫增值性疾病和免疫缺陷性疾病的诊断、鉴别诊断、疾病进展和预后。6/23/2024免疫球蛋白（Ig）定义：是由浆细胞合成分泌的一组具有抗体活性6血清免疫球蛋白分类根据根据重链稳定区的分子重链稳定区的分子结构和抗原特异性的不结构和抗原特异性的不同同，分为五类：，分为五类：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE6/23/2024血清免疫球蛋白分类根据重链稳定区的分子结构和抗原特异性的不同7血清免疫球蛋白分类血清免疫球蛋白分类6/23/2024血清免疫球蛋白分类7/28/20238检测方法酶联免疫法（ELISA)放射免疫（RIA)荧光标记免疫(IFA)化学发光法（CLIA)免疫透射比浊、免疫散射比浊6/23/2024检测方法酶联免疫法（ELISA)7/28/20239血清免疫球蛋白G检测IgG人体内含量最多，占Ig的70-80再次免疫应答的主要抗体对细菌、病毒和寄生虫都有抗体活性唯一可通过胎盘的Ig6/23/2024血清免疫球蛋白G检测IgG人体内含量最多，占Ig的70-810参考值7.016.6g/L6/23/2024参考值7.016.6g/L7/28/202311临床意义-IgG增高多克隆性增高见于各种慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤、肺结核、链球菌感染以及自身免疫性疾病单克隆性增高仅见一种Ig增高，主要见于免疫增殖性疾病，如IgG分泌型多发性骨髓瘤6/23/2024临床意义-IgG增高多克隆性增高见于各种慢性感染、12临床意义-IgG降低见于各种先天性和获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病、也见于重链病、轻链病、肾病综合症、病毒感染和免疫抑制剂患者6/23/2024临床意义-IgG降低见于各种先天性和获得性免疫缺陷病、联13免疫球蛋白A检测两型：血清型IgA，分泌型IgA（SIgA）。血清型IgA以单体形式存在分泌型IgA（S IgA）由J链连接的二聚体和分泌片组成。6/23/2024免疫球蛋白A检测两型：血清型IgA，分泌型IgA（SIgA）14参考值血清IgA0.73.5g/L，IgA占10-15。SIgA唾液0.3g/L，泪液3080g/L，初乳5.06g/L，粪便1.3g/L6/23/2024参考值血清IgA0.73.5g/L，IgA占1015临床意义IgA增高见于IgA型MM，SLE,类风湿性关节炎，肝硬化，湿疹和肾脏疾病等IgA降低见于反复呼吸道感染，非IgA型MM，重链病，轻链病，原发和继发性免疫缺陷病和自身免疫性疾病6/23/2024临床意义IgA增高见于IgA型MM，SLE,类风湿性关节16免疫球蛋白M检测IgM是五聚体，分子量最大的Ig不能通过血管壁，不能通过胎盘个体发育过程中最早合成的抗体，脐带血IgM增高提示胎儿宫内感染体液免疫应答中IgM是最早产生的抗体6/23/2024免疫球蛋白M检测IgM是五聚体，分子量最大的Ig7/28/2176/23/20247/28/202318参考值参考值0.52.6g/L6/23/2024参考值参考值0.52.6g/L7/28/202319临床意义IgM增高见于初期病毒性肝炎、肝硬化、类风湿关节炎、SLE等，原发性巨球蛋白血症时，IgM呈单克隆性明显增高IgM降低见于IgG型重链病，IgA型MM，先天性免疫缺陷病，使用免疫抑制剂，淋巴系统肿瘤和肾病综合症。6/23/2024临床意义IgM增高见于初期病毒性肝炎、肝硬化、类风湿关节20免疫球蛋白E的检测IgE是血清中最少的一种Ig，占血清总Ig的0.002%。是一种亲细胞抗体，介导型变态反应，与变态反应、寄生虫感染和皮肤过敏等有关。6/23/2024免疫球蛋白E的检测IgE是血清中最少的一种Ig，占血清总Ig21参考值ELISA法为0.10.9mg/L6/23/2024参考值ELISA法为0.10.9mg/L7/28/2022临床意义IgE增高见于IgE型MM、重链病、肝脏病、结节病、类风湿性关节炎，以及各种过敏性疾病和寄生虫感染等。IgE降低见于先天性和获得性丙种球蛋白缺乏症、恶性肿瘤、长期应用免疫抑制剂和共济失调性毛细血管扩展症等。6/23/2024临床意义IgE增高见于IgE型MM、重链病、肝脏病、结节23血清M蛋白M蛋白(Mprotein)或称单克隆免疫球蛋白，是一种单克隆B细胞增殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子及其分子片段。6/23/2024血清M蛋白M蛋白(Mprotein)或称单克隆免疫球蛋白，24【参考值】蛋白电泳法、免疫比浊法或免疫电泳法：正常人为阴性。图图1 14 4号为多发性骨髓瘤病人的血清蛋白电泳图谱号为多发性骨髓瘤病人的血清蛋白电泳图谱13 13 1 12 23 34 45 56 67 78 89 91010 111112126/23/2024【参考值】蛋白电泳法、免疫比浊法或免疫电泳法：正常人为阴性。25【临床意义】检测到M蛋白，提示单克隆免疫球蛋白增殖病。见于：多发性骨髓瘤：以IgG型最常见，其次为IgA型，IgD和IgE罕见，也有IgM型的报道。6/23/2024【临床意义】检测到M蛋白，提示单克隆免疫球蛋白增殖病。见于：26 多发性骨髓瘤（多发性骨髓瘤（multiple myeloma）是浆细胞异常增生的恶性肿瘤，）是浆细胞异常增生的恶性肿瘤，也称浆细胞瘤（也称浆细胞瘤（plasnocytoma），因其），因其引起骨破坏而得名。患者常伴有贫血、肾引起骨破坏而得名。患者常伴有贫血、肾功损害和免疫功能障碍。男性多发，男女功损害和免疫功能障碍。男性多发，男女比约为比约为2:1，平均发病年龄是，平均发病年龄是46.5岁。岁。6/23/20247/28/202327多发性骨多发性骨髓瘤患者髓瘤患者骨破坏所骨破坏所致头颅肿致头颅肿物及眼球物及眼球突出突出6/23/2024多发性骨髓瘤患者骨破坏所致头颅肿物及眼球突出7/28/2028巨球蛋白血症(macroglobulinemia)：该病血液中存在大量单克隆IgM。重链病：出现Ig重链轻链病：出现单克隆游离轻链。半分子病：系由一条重链和一条轻链组成的单克隆Ig片段。恶性淋巴瘤：血液中可出现M蛋白。良性M蛋白血症：6/23/2024巨球蛋白血症(macroglobulinemia)：该病血29临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测二、血清补体检测三、肿瘤标志物检测四、自身抗体检测五、感染免疫检测6/23/2024临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测7/28/20230补体（Complement）补体是一组具有酶源活性的糖蛋白，由传统途径的九种成分C1(C1q/C1r/C1s）-C9，旁路途径的三种成分及其衍生物B/D/P/H/I等因子组成参与机体的抗感染和免疫调节,介导病理反应6/23/2024补体（Complement）补体是一组具有酶源活性的糖蛋白，31补体的三条激活途径6/23/2024补体的三条激活途径7/28/202332总补体溶血活性检测(CH50)原理:抗体致敏的绵羊红细胞(抗原抗体复合物)可激活血清中的补体C1,从而引起补体经典途径的连锁反应,导致绵羊红细胞膜上形成多分子的聚合物，绵羊红细胞溶解。在分光光度计上542nm读取吸光度。溶解程度与样品中补体量正相关。主要反应补体经典途径的综合水平。6/23/2024总补体溶血活性检测(CH50)原理:抗体致敏的绵羊红细胞(抗33Ca+C1rC1sC1q C4C4ab细胞膜细胞膜识识 别别 阶阶 段段6/23/2024Ca+C1rC1sC1qC4C4ab细胞膜识别阶段35C3转化酶的形成C4bMg+C4aCa+C1rC1sC1q C2C2abC2bC4b2b 为为C3转化酶转化酶活活化化阶阶段段6/23/2024C3转化酶的形成C4bMg+C4aCa+C1rC1sC136C5转化酶的形成C4bMg+C4aCa+C1rC1sC1q C2aC2bC3 C3abC4b2b3b 是是C5 转化酶转化酶;它导它导致膜攻击复合体致膜攻击复合体(MAC)的形成的形成活活化化阶阶段段6/23/2024C5转化酶的形成C4bMg+C4aCa+C1rC1sC137C3b C2aC4bC5bC5a 6/23/2024C2aC4bC5bC5a7/28/202338C5b C6C7膜攻击阶段膜攻击阶段6/23/2024C5bC6C7膜攻击阶段7/28/202339MAC形成并插入到细胞内C5b C6C7C8 C9C9C9C9C9C9C9C9C96/23/2024MAC形成并插入到细胞内C5bC6C7C8CCC40CH50在50%溶血附近，“S”形曲线最陡，接近一条直线。在此范围内补体活性稍有变动，溶血程度就有明显变化，即是以50%溶血作为反应的终点比以100%溶血作为终点更为敏感，因而该试验被称为补体50%溶血试验（complement hemolysis 50%），即CH50试验。6/23/2024CH50在50%溶血附近，“S”形曲线最陡，接近一条直线。在41CH50测定的临床意义增高：见于急性炎症，组织损伤和某些恶性肿瘤。减低：免疫复合物性疾病（如肾小球肾炎）、自身免疫性疾病活动期、感染性心内膜炎、病毒性肝炎、慢性肝病、肝硬化、重症营养不良和遗传性补体成分缺乏症等6/23/2024CH50测定的临床意义增高：见于急性炎症，组织损伤和某些恶性42补体C3检测是一种由肝脏合成的2-球蛋白。C3在补体系统各成分中含量最多，是经典途径和旁路途径的关键物质。它也是一种急性时相反应蛋白。【参考值】成人血清C3：O815gL。6/23/2024补体C3检测是一种由肝脏合成的2-球蛋白。C3在补体系统各43【临床意义】(1)增高：常见于一些急性时相反应，如急性炎症、传染病早期、肿瘤、排异反应、急性组织损伤。(2)减低：见于系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎活动期、大多数肾小球肾炎(如链球菌感染后肾小球炎、狼疮性肾炎、基底膜增殖性肾小球肾炎)、慢性活动性肝炎、慢性肝病、肝硬化、肝坏死、先天性补体缺乏(如遗传性C3缺乏症)等。它们或是由于消耗或丢失过多或是由于合成能力降低造成。6/23/2024【临床意义】(1)增高：常见于一些急性时相反应，如44临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测二、血清补体检测三、肿瘤标志物检测四、自身抗体检测五、感染免疫检测6/23/2024临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测7/28/20245 肿瘤标志物 肿瘤标志物（tumor marker、TM）：在肿瘤发生和发展过程中，由肿瘤细胞所产生或机体在肿瘤细胞刺激下产生的，与肿瘤存在相关的物质，存在于血液、细胞、组织液、体液中。6/23/2024肿瘤标志物肿瘤标志物（tumormarker、TM4620082008年城乡居民前十位疾病死亡专率及死亡原因构成年城乡居民前十位疾病死亡专率及死亡原因构成顺位城市农村死亡原因(ICD-10)死亡专率(1/10万)构成(%)死亡原因(ICD-10)死亡专率(1/10万)构成(%)1恶性肿瘤166.97166.9727.1227.12恶性肿瘤156.73156.7325.3925.392心脏病121.0019.65脑血管病134.1621.733脑血管病120.7919.62呼吸系病104.2016.884呼吸系病73.0211.86心脏病87.1014.115损伤及中毒31.265.08损伤及中毒53.028.596内分泌营养和代谢疾病21.093.43消化系病16.332.657消化系病17.602.86内分泌营养和代谢疾病11.051.798泌尿生殖系病6.971.13泌尿生殖系病5.700.929神经系病6.341.03神经系病4.350.7010精神障碍3.690.60精神障碍4.270.69十种死因合计92.3692.36十种死因合计93.4693.4620082008年我国卫生事业发展统计公报年我国卫生事业发展统计公报 卫生部统计信息中心 6/23/20242008年城乡居民前十位疾病死亡专率及死亡原因构成顺位城市农47肿瘤的发展与诊断10-100 g榛子大小针头大小免疫学方法生物物理学方法早期亚临床阶段晚期1 mg1 g1kg1 g高灵敏度的肿瘤标志物的测定对肿瘤的早期诊断和治疗方案设计是十分重要的手段 世界卫生组织（WHO）指出：若能早期诊断并若能早期诊断并及时治疗，及时治疗，90%90%95%95%的的肿瘤是可以治愈的肿瘤是可以治愈的。临床可检测的肿瘤临床可检测的肿瘤肿瘤标记物肿瘤标记物(无形的肿瘤无形的肿瘤)6/23/2024肿瘤的发展与诊断10-100g榛子大小针头大小免疫学方法生48一般肿瘤细胞在癌前病变时，会产生表达肿瘤异常蛋白质，多数肿瘤从癌前病变发展到0.5 cm 以上的占位性病变需要 5 y10 y的时间。如果能够在这段时间内运用肿瘤标志物检测技术，早期检测到患者血液中肿瘤所表达的异常蛋白质，就可以早期发现、早期诊断，并获得早期治疗的良好效果。6/23/2024一般肿瘤细胞在癌前病变时，会产生表达肿瘤异常蛋白质，多数肿49肿瘤标志物免疫分析现实的肿瘤标志物灵敏度有限；特异性有限；存在正常异常交错；存在不稳定性与临床表现存在差异理想的肿瘤标志物肿瘤患者血液中含量明显增高；与肿瘤组织的定位有关；肿瘤标志物的含量与肿瘤的大小分期有关；肿瘤标志物的含量与肿瘤的生长、消退或转移、复发有关；假阴性率与假阳性率低。6/23/2024肿瘤标志物免疫分析现实的肿瘤标志物理想的肿瘤标志物7/28/51TM分类蛋白质类，如AFPAFP、CEACEA和PSAPSA等。糖脂类，如CA19-9和CA-50等酶类，如PAPPAP、NSENSE和AFUAFU等。激素，如HCGHCG、雌激素受体等其它 肿瘤标志物，如核酸、多胺等。6/23/2024TM分类蛋白质类，如AFP、CEA和PSA等。7/28/2052肿瘤标志物检测方法肿瘤标志物检测方法6/23/2024肿瘤标志物检测方法7/28/202353化学发光免疫分析系统6/23/2024化学发光免疫分析系统7/28/202354临床常用肿瘤标志物临床常用肿瘤标志物6/23/2024临床常用肿瘤标志物7/28/2023551.蛋白质类肿瘤标志物检测6/23/20241.蛋白质类肿瘤标志物检测7/28/202356甲胎蛋白（-fetoprotein-fetoprotein，AFPAFP）在胎儿发育早期,由肝脏和卵黄囊合成，出生后一年内降至正常水平。细胞恶变后又重新具有分泌AFP的能力。对诊断肝细胞癌及滋养细胞恶性肿瘤有重要的临床价值。6/23/2024甲胎蛋白（-fetoprotein，AFP）在胎儿发育早期57参考值血清 25g/L6/23/2024参考值血清300g/L300g/L。病毒性肝炎与肝硬化患者血清中AFPAFP可增高，但常 300g/L300g/L。生殖器胚胎性肿瘤、胃癌、胰腺癌患者血清中AFPAFP可升高。妊娠时AFPAFP可升高，峰值低于400g/L400g/L，若异常升高应考虑胎儿神经管缺损畸形。6/23/2024临床意义原发性肝癌患者血清中AFP的含量明显升高，常3059癌胚抗原（carcinoembryonic antigen、CEA）早期胎儿的胃肠道及某些组织均有合成CEA的能力胎儿出生后血清 CEA的含量极低6/23/2024癌胚抗原（carcinoembryonicantigen、60参考值血清 5g/L6/23/2024参考值血清5g/L7/28/202361临床意义升高主要见于胰腺癌、结肠癌、直肠癌、乳腺癌、胃癌等消化系统肿瘤。血清CEA连续随访检测，可用于恶性肿瘤治疗后的疗效观察及预后判断。病情好转时，CEA浓度下降，病情加重时可升高。肠道憩室炎，直肠息肉，结肠炎，肝硬化，肝炎和肺部疾病也有不同程度的升高。抽烟6/23/2024临床意义升高主要见于胰腺癌、结肠癌、直肠癌、乳腺癌、胃癌等消62前列腺特异性抗原（PSA)前列腺分泌的单链糖蛋白存在于前列腺管道的上皮细胞，前列腺癌时血清水平明显升高总PSA(t-PSA）中，80结合形式，20游离（f-PSA)参考值：t-PSA4.0g/L、f-PSA0.256/23/2024前列腺特异性抗原（PSA)前列腺分泌的单链糖蛋白7/28/263临床意义前列腺癌是60-90患者血清t-PSA明显升高前列腺炎、增生，轻度升高，t-PSA4.0-10.0g/L t-PSA4.0-10.0g/L，f-PSA/t-PSA 的比值对诊断更有价值，f-PSA/t-PSA0.1时提示前列腺癌6/23/2024临床意义前列腺癌是60-90患者血清t-PSA明显升高7/642.糖脂类肿瘤标志物检测肿瘤细胞内糖基化过程发生变异，从而导致细胞分泌性或细胞膜上的糖蛋白或糖脂中的糖基序列发生改变，形成了一种和正常糖蛋白不同的特殊抗原，可利用单克隆抗体技术检测这些抗原，结果诞生了糖蛋白类抗原。作为新一代的肿瘤标记物，远较酶和激素类标记物敏感、特异。6/23/20242.糖脂类肿瘤标志物检测肿瘤细胞内糖基化过程发生变异，从而导65CA125糖蛋白性肿瘤相关抗原，存在于上皮性卵巢组织及患者血清中6/23/2024CA125糖蛋白性肿瘤相关抗原，存在于上皮性卵巢组织及患者血66CA-125在卵巢诊断中的应用8090的卵巢上皮癌中CA-125可明显升高子宫内膜癌、透明细胞癌、输卵管癌及未分化卵巢癌患者中CA-125含量也可明显升高粘液性卵巢癌患者的阳性率则较低CA-125在卵巢包块良恶性的鉴别上特别有价值，敏感度为78、特异性95、阳性预测价值82、阴性预测价值91。CA-125和CEA联合测定，计算两者比值，可提高卵巢癌检出的敏感性和特异性。6/23/2024CA-125在卵巢诊断中的应用8090的卵巢上皮癌中CA67CA15-3分子量约为40000的糖蛋白是抗原决定簇、糖和多肽组成的糖蛋白6/23/2024CA15-3分子量约为40000的糖蛋白7/28/20272临床意义:CA15-3作为乳腺癌的主要标记物23的原发性乳腺癌和69转移性乳腺癌可有CA15-3的升高乳腺癌的期和期，仅有1020的病人有升高，所以不能用于乳腺癌的早期诊断主要用于乳腺癌病人的治疗监测和预后判断。乳腺癌患者血清CA15-3浓度比原来水平升高预示病情进展、肿瘤复发、转移，其浓度升高比临床症状出现或影像学检查的发现时间早。对晚期病人，当CA15-3100kU/L时，肯定有转移，敏感性高于CEA、TPA。6/23/2024临床意义:CA15-3作为乳腺癌的主要标记物7/28/273肿瘤标志物的合理选用 同一种肿瘤可含多种标志物，而一种标志物可出现在多种肿瘤。选择特异标志物或最佳组合有利于提高肿瘤诊断的阳性率。动态检测有利于良性和恶性肿瘤的鉴别，也有利于复发、转移和预后判断。胃癌：CEA+CA199乳腺癌：CA153+CEA+CA199卵巢癌：CA125+CA724+TPS+AFP6/23/2024肿瘤标志物的合理选用同一种肿瘤可含多种标志物，而一种标76临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测二、血清补体检测三、肿瘤标志物检测四、自身抗体检测五、感染免疫检测6/23/2024临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测7/28/20277自身免疫病检测正常情况下，机体免疫系统对自身抗原物质不产生免疫应答或只产生极微弱的免疫应答自身免疫性疾病是指机体免疫功能紊乱时,针对自身组织抗原产生自身抗体或致敏淋巴细胞,并导致组织损伤而引起的疾病.如SLE、RA、MCTD等。自身免疫性疾病主要免疫学特征为血清或其它体液中出现高滴度的自身抗体和致敏淋巴细胞,因此通过对自身抗体的检测辅助自身免疫性疾病的诊断.6/23/2024自身免疫病检测正常情况下，机体免疫系统对自身抗原物质不产生免78类风湿因子(rehumatoidfactor,RF)RF是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体，是一种以变性IgG的作为靶抗原的自身抗体。RF主要为IgM型抗体,但也有 IgG,IgA IgD、IgE型抗体。存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液内。6/23/2024类风湿因子(rehumatoidfactor,RF)R79检测方法与参考值乳胶致敏凝集实验：1:10为阴性。酶连免疫吸附实验（ELISA）：阴性。速率散射比浊法：30KIU/L30KIU/L6/23/2024检测方法与参考值乳胶致敏凝集实验：1:10为阴性。7/2880临床意义类风湿性关节炎患者RF的阳性率为52%-92%，平均为70%。RF的量或滴度与疾病的严重程度不平行，但与疾病的活动性有关。IgG型与患者的滑膜炎、血管炎和关节外症状有关，IgM型与IgA型的效价与骨质破坏有关。RF的特异性不强，在其他结缔组织病也有一定的阳性率，如SLE、硬皮病和皮肌炎、干燥综合征、慢性活动性肝炎等患者等。不过RF的含量相对较低，且持续时间较短。6/23/2024临床意义类风湿性关节炎患者RF的阳性率为52%-92%，平均81抗核抗体(antinuclearantibody,ANA)经典ANA：是一类以细胞核成分为靶抗原的自身抗体的总称。广义ANA：整个细胞成分，包括细胞核和细胞浆。无器官与种属的特异性。主要是IgG.检测方法：间接免疫荧光法（IIF)6/23/2024抗核抗体(antinuclearantibody,ANA82核仁型核仁型：抗核小体抗体，多见于硬皮病、皮肌炎及类分关等核仁型：抗核小体抗体，多见于硬皮病、皮肌炎及类分关等6/23/2024核仁型核仁型：抗核小体抗体，多见于硬皮病、皮肌炎及类分关等783均质型均质型：抗均质型：抗DNP或抗组蛋白抗体，或抗组蛋白抗体，也可是多种自身也可是多种自身抗体高度密集的抗体高度密集的形态表现。形态表现。多见于活动期多见于活动期SLE、药物性狼、药物性狼疮等。疮等。6/23/2024均质型均质型：抗DNP或抗组蛋白抗体，也可是多种自身抗体高度84边缘型是抗是抗dsDNA或抗脱氧或抗脱氧核糖核蛋白的形态学核糖核蛋白的形态学反应。高滴度周边型核反应。高滴度周边型核荧光多见于荧光多见于SLE。6/23/2024边缘型是抗dsDNA或抗脱氧7/28/202385颗粒型：抗ENA抗体。抗抗ENA抗体抗体6/23/2024颗粒型：抗ENA抗体。抗ENA抗体7/28/202386可提取核抗原(Extractable nuclear antigen,ENA)多肽抗体谱ENA又称盐水可溶性抗原或磷酸盐可浸出抗原，是指在盐水中或磷酸盐可溶解的核抗原。ENA多肽抗体谱是针对核内ENA的一类自身抗体，约有10余种，主要为抗核糖核蛋白(RNP)抗体和抗Sm抗体，其它还有抗SS-A抗体、抗SS-B抗体、抗Scl-70抗体、抗JO-1抗体等。不同的自身免疫病可产生不同的抗ENA抗体。通过检测抗ENA抗体的类型及其组合，可综合诊断自身免疫病的类型。6/23/2024可提取核抗原(Extractablenuclearan88检测方法免疫印迹技术（最常用）6/23/2024检测方法7/28/202389免疫印迹技术（最常用）先将ENAENA混合抗原作凝胶电泳，分离开不同的区带，然后把这些区带转印到硝酸纤维膜上，加入待检血清，最后用酶标抗体使相应的抗原带显色，在硝酸纤维膜上呈现特异性显色条带。参照各种已知阳性血清在膜上留下的显色区带的位置特征及显色区带对应的蛋白多肽抗原的分子特征，即可检测和识别多种自身抗体。6/23/2024免疫印迹技术（最常用）先将ENA混合抗原作凝胶电泳，分离开不90动物胸腺提取ENASDS-PAGE电转移至硝酸纤微膜加标本加酶标抗体判断结果6/23/2024动物胸腺提取ENA7/28/20916/23/20247/28/2023926/23/20247/28/202393临床意义抗RNP抗体阳性见于多种风湿性疾病，如MCTD、SLE、系统性硬化病、皮肌炎等，以MCTD的阳性率最高，约为95-100%，且抗体的滴度亦高，故此抗体对MCTD有较高的诊断价值。抗JO-1抗体阳性对多发性肌炎与皮肌炎的诊断有一定的价值。6/23/2024临床意义抗RNP抗体阳性见于多种风湿性疾病，如MCTD、SL94临床意义抗Sm抗体主要见于SLE及其重叠综合征，在SLE的非活动期亦可检出，是SLE的特异性标志抗体之一，阳性率约为30-40%，而其它疾病鲜见阳性。若联合检测抗ds-DNA和抗Sm抗体可提高SLE诊断的准确性。抗Rib抗体阳性主要见于SLE，为SLE的又一标志抗体，6/23/2024临床意义抗Sm抗体主要见于SLE及其重叠综合征，在SLE的非95临床意义抗SS-A、抗SS-B抗体阳性多见于干燥综合征及合并SLE的干燥综合征，偶见MCTD，因此抗SS-A、抗SS-B抗体为干燥综合征的标志抗体。抗Scl-70抗体为进行性全身硬化的标志抗体。特异地出现于该病患者的血清中，阳性多伴有肺纤维化，局限性硬皮病该抗体常阴性。6/23/2024临床意义抗SS-A、抗SS-B抗体阳性多见于干燥综合征及合并96抗脱氧核糖核酸抗体（anti-DNAantibody）抗DNA抗体分为：（1）抗双链 DNA（double stranded DNA,ds-DNA）抗体；（2）抗单链DNA（single stranded DNA,ss-DNA）抗体；（3）抗Z-DNA抗体6/23/2024抗脱氧核糖核酸抗体（anti-DNAantibody）抗97检测方法与参考值 检测抗dsDNA抗体最特异和最敏感的方法是用马疫锥虫或绿蝇短膜虫作为抗原基质进行间接免疫荧光测定。6/23/2024检测方法与参考值检测抗dsDNA抗体最特异和最敏感的98临床意义 1抗dsDNA抗体阳性 见于活动期SLE，阳性率7090。本试验特异性较高，但敏感性较低。2抗ssDNA抗体阳性 见于SLE(阳性率7095)，尤其是合并有狼疮性肾炎。还可见于一些重叠结缔组织病、药物诱导的狼疮和慢性活动行肝炎等，但不具特异性。6/23/2024临床意义1抗dsDNA抗体阳性见于活动期S99临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测二、血清补体检测三、细胞免疫检测四、肿瘤标志物检测五、自身抗体检测六、感染免疫检测六、感染免疫检测6/23/2024临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测7/28/202101病毒感染免疫检测6/23/2024病毒感染免疫检测7/28/2023102TORCHT=Toxopasma，弓形虫O=other(syphilis),其它病毒R=RubellaVirus，风疹病毒C=Cytomegalovirus，巨细胞病毒H=Herpessimplex，单纯疱疹病毒，因此命名为TORCH检查为妇产科产前的常规检查项目6/23/2024TORCHT=Toxopasma，弓形虫7/28/202103TORCH检测的意义由于成人TORCH感染的临床症状不明显，无法自我感觉到是否受到感染，因此孕前及孕早期诊断对优生优育十分重要。目前，国际上公认的最方便、最先进的早期诊断方法是检测人体血清中的特异性IgM、IgG抗体，以判断受到感染的情况。世界上许多发达国家已经将TORCH列为孕期常规检查项目，在优生优育方面发挥着重要作用。在国内，随着科学技术的发展和人民生活水平的提高，人们对优生优育的认识逐步提高，TORCH检测越来越受到重视。6/23/2024TORCH检测的意义由于成人TORCH感染的临床症状不明显104造成孕妇流产、死胎，出生后有严重的智力障碍，生活不能自理，造成极大的精神及经济负担。6/23/2024造成孕妇流产、死胎，出生后有严重的智力障碍，生活不能自理，造105临床意义 TORCH感染后，患者特异性抗体IgM、IgG可迅速升高，IgM出现早，可持续6-12周，而IgG出现晚，但可维持终生。因此，我们常把IgG阳性看作是既往感染，而IgM阳性则做为初次感染的诊断指标。1、IgG阳性IgM阴性 曾经感染过这种病毒，或接种过疫苗，并且已产生免疫力，胎宝宝感染的可能性很小。2、IgG阴性IgM阴性 表明孕妇为易感人群。妊娠期最好重复IgG检查，观察是否阳转。3、IgG阳性IgM阳性 表明孕妇可能为原发性感染或再感染。可借IgG亲和试验加以鉴别。4、IgG阴性IgM阳性 近期感染过，或为急性感染；也可能是其它干扰因素造成的IgM假阳性。需2周后复查，如IgG阳转，为急性感染，否则判断为假阳性。6/23/2024临床意义TORCH感染后，患者特异性抗体IgM106(五)轮状病毒抗体和RNA测定普通轮状病毒主要侵犯婴幼儿，成人腹泻轮状病毒则可引起青壮年胃肠炎的暴发【参考值】RNA阴性(PCR法)；抗原阴性(胶乳凝集试验或ELISA法)IgM和IgG阴性(金标免疫斑点法或ELISA法)。【I临床意义】婴幼儿腹泻约有50是由轮状病毒所致，常呈IgM阳性，提示现症感染；。IgG阳性提示既往感染；PCR检测轮状病毒RNA具特异性。6/23/2024(五)轮状病毒抗体和RNA测定普通轮状病毒主要侵犯婴幼儿107城市牛皮藓3.性传播性疾病的免疫学检验6/23/2024城市牛皮藓3.性传播性疾病的免疫学检验7/28/20231333.性传播性疾病的免疫学检验性传播性疾病（sexually transmitted disease,STD）：是指通过各种性接触而传播的疾病，简称性病（venereal disease）6/23/20243.性传播性疾病的免疫学检验性传播性疾病（sexually134正规医疗机构是性病患者的正确选择6/23/2024正规医疗机构是性病患者的正确选择7/28/2023135衣原体衣原体6/23/2024衣原体7/28/2023136淋球菌淋球菌6/23/2024淋球菌7/28/20231376/23/20247/28/2023138梅毒螺旋体抗体的检测梅 毒（syphilis）是 由 梅 毒 螺 旋 体(treponema pallidum，TP)引起的一种危害性严重的性传播性疾病,早期主要侵犯皮肤与黏膜，晚期可侵犯全身各组织器官，特别易侵犯心脏与神经系统。机体感染梅毒螺旋体，可产生梅毒螺旋体的特异性抗体与非特异性抗体（抗类脂质抗原的抗体）6/23/2024梅毒螺旋体抗体的检测梅毒（syphilis）是由梅毒螺旋139过筛实验非特异性抗体的检测不加热血清反应素（unheated serum reagin,USR）试验快速血浆反应素（rapid plasma reagin,RPR）试验6/23/2024过筛实验非特异性抗体的检测不加热血清反应素（unheate1406/23/20247/28/2023141确诊实验特异性抗体的检测梅 毒 螺 旋 体 抗 体 血 凝 试 验（treponema pallidum hemagglutination assay,TPHA）荧 光 密 螺 旋 体 抗 体 吸 附（fluorescent treponemal antibody absorption,FTA-ABS）试验梅毒螺旋体制动（treponema pallidum immobilizing,TPI）试验6/23/2024确诊实验特异性抗体的检测梅毒螺旋体抗体血凝试验（trep1426/23/20247/28/2023143过筛实验的临床意义梅毒的筛选及流行病学调查。梅毒患者的阳性率约为70-95%，特别是二期梅毒，阳性率可高达100%。其它疾病，如麻风，SLE，硬皮病，结核，雅司病等也有一定的阳性率。梅毒疗效的检测：患者经过有效治疗后，抗体血清滴度下降。6/23/2024过筛实验的临床意义梅毒的筛选及流行病学调查。梅毒患者的阳性144确诊实验的临床意义对梅毒进行确诊。6/23/2024确诊实验的临床意义对梅毒进行确诊。7/28/2023145人免疫缺陷病毒（HIV）抗体检测人免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）是艾滋病（acquired immunodeficiency syndrome,AIDS）的病原体，可分为HIV-1和HIV-2型HIV为单链RNA病毒6/23/2024人免疫缺陷病毒（HIV）抗体检测人免疫缺陷病毒7/28/201466/23/20247/28/20231476/23/20247/28/2023148中国爱滋病村里的病人中国爱滋病村里的病人6/23/2024中国爱滋病村里的病人7/28/2023149爱滋病家庭遗孤爱滋病家庭遗孤6/23/2024爱滋病家庭遗孤7/28/2023150患者常表现CD4+淋巴细胞减少、细胞免疫功能严重缺损、继发感染等。血清中常可产生抗HIV的抗体。6/23/2024患者常表现CD4+淋巴细胞减少、细胞免疫功能严重缺损、继发151金标法检测HIV6/23/2024金标法检测HIV7/28/2023152HIV的检测筛选试验可选择：1酶联免疫吸附试验（ELISA）2荧光免疫试验（FIA）放射免疫试验（radio immunoassay,RIA）确认试验可选择：蛋白印迹（western blot,WB）法，RT-PCR检测HIV-RNA。6/23/2024HIV的检测筛选试验可选择：7/28/2023154临床意义筛选试验阳性的患者，加以确认试验阳性，若伴有临床症状，可诊断为艾滋病筛选试验阳性的患者，加以确认试验阳性，若无临床症状，则为HIV感染者6/23/2024临床意义筛选试验阳性的患者，加以确认试验阳性，若伴有临床症状155性传播性疾病的高危人群性滥交者，性病患者的配偶或性伴侣吸毒人员经常接受输血或血液制品者其它感染6/23/2024性传播性疾病的高危人群性滥交者，性病患者的配偶或性伴侣7156 中国也在行中国也在行动动6/23/2024中国也在行动7/28/2023157人人关爱爱滋病人人人关爱爱滋病人6/23/2024人人关爱爱滋病人7/28/2023158总结1.各种抗体的特点2.补体定义及CH50测定3.肿瘤标志物及其特异性，AFP与CEA的特点，各种类型的特异性4.自身抗体与自身免疫的关系及各类型自身抗体检测的方法及临床意义5.TORCH检查的临床意义6.乙肝五项测定的临床意义。6/23/2024总结各种抗体的特点7/28/2023160Thanks！6/23/2024Thanks！7/28/2023161