临床细菌学检验的质量控制培训ppt课件

本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。概念概念l质量控制（质量控制（Quality control）是临床微生物学实验室为了保证检验结是临床微生物学实验室为了保证检验结果实事求是地反映客观存在而建立的操果实事求是地反映客观存在而建立的操作程序体系作程序体系概念质量控制（Qualitycontrol）1本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。目的目的l临床微生物学的质量控制临床微生物学的质量控制是保证细菌的是保证细菌的直接涂片、培养、鉴定、药敏试验及血直接涂片、培养、鉴定、药敏试验及血清学试验等的准确性，避免因操作变化清学试验等的准确性，避免因操作变化导致检验结果错误，造成误诊导致检验结果错误，造成误诊目的临床微生物学的质量控制是保证细菌的直接涂片、培养、鉴定、2本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。内容内容l室内质量控制室内质量控制 实验室内部实验室内部 质量保证的核心和基础质量保证的核心和基础l室间质量控制评价室间质量控制评价 外部组织或机构外部组织或机构 质量评价质量评价内容室内质量控制3室内质量控制室内质量控制对细菌检验人员的要求对细菌检验人员的要求操作手册操作手册仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测培养基的质量控制培养基的质量控制试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控临床标本检验过程的质量控制临床标本检验过程的质量控制标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存室内质量控制对细菌检验人员的要求4本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。一、对细菌检验人员的要求一、对细菌检验人员的要求高度的主观判断力高度的主观判断力 个人的技能、经验个人的技能、经验 细菌学的专业水平细菌学的专业水平培训班培训班实验室进修实验室进修学术交流学术交流专业期刊专业期刊一、对细菌检验人员的要求高度的主观判断力培训班实验室进修专5室内质量控制室内质量控制对细菌检验人员的要求对细菌检验人员的要求 操作手册操作手册仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测培养基的质量控制培养基的质量控制试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控临床标本检验过程的质量控制临床标本检验过程的质量控制标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存室内质量控制对细菌检验人员的要求6本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。二、操作手册二、操作手册l各级人员的职责和权限各级人员的职责和权限l实验室安全措施实验室安全措施l标本采集和处理指南标本采集和处理指南l细菌检验项目细菌检验项目l培养基和试剂的配制方法培养基和试剂的配制方法l室内和室间质量控制室内和室间质量控制l参考数据参考数据 二、操作手册各级人员的职责和权限7本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。二、操作手册二、操作手册参考书：参考书：l诊断细菌学诊断细菌学l实用临床微生物诊断学实用临床微生物诊断学l临床微生物学诊断与图解临床微生物学诊断与图解l全国临床检验操作规程全国临床检验操作规程l临床微生物学和微生物学检验临床微生物学和微生物学检验lManual of Clinical Microbiology二、操作手册参考书：8室内质量控制室内质量控制对细菌检验人员的要求对细菌检验人员的要求操作手册操作手册仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测培养基的质量控制培养基的质量控制试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控临床标本检验过程的质量控制临床标本检验过程的质量控制标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存室内质量控制对细菌检验人员的要求9本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。三、仪器设备的功能监测三、仪器设备的功能监测l高压灭菌器：定期监测（每月一次）高压灭菌器：定期监测（每月一次）生物指示剂：嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂：嗜热脂肪芽孢杆菌 化学指示剂：变色的指示带化学指示剂：变色的指示带l培养箱、冰箱、水浴箱：培养箱、冰箱、水浴箱：每日早、晚两次温度观测，绘制温度曲线图每日早、晚两次温度观测，绘制温度曲线图三、仪器设备的功能监测高压灭菌器：定期监测（每月一次）10本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。三、仪器设备的功能监测三、仪器设备的功能监测l厌氧培养装置：厌氧培养装置：化学标记：化学标记：美蓝美蓝 生物学指标：铜绿假单胞菌生物学指标：铜绿假单胞菌lCO2培养箱培养箱：每天检查箱内的每天检查箱内的CO2含量含量三、仪器设备的功能监测厌氧培养装置：11本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。三、仪器设备的功能监测三、仪器设备的功能监测l生物安全柜：生物安全柜：定期更换滤网，紫外线每定期更换滤网，紫外线每3月检查月检查1次次l细菌培养仪细菌培养仪：每批培养瓶进行少量生长试验每批培养瓶进行少量生长试验 有效期内使用有效期内使用l微生物鉴定仪微生物鉴定仪 及时更新软件及时更新软件 每批号鉴定卡用标准菌株测定每批号鉴定卡用标准菌株测定三、仪器设备的功能监测生物安全柜：12本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。三、仪器设备的功能监测三、仪器设备的功能监测 表表1仪器设备的质量控制标准仪器设备的质量控制标准设备设备控制标准控制标准允许范围允许范围高压灭菌器高压灭菌器121121培养箱培养箱351水浴箱水浴箱370.5冰箱冰箱42低温冰箱低温冰箱-205CO2培养箱培养箱5%10%10%三、仪器设备的功能监测表1仪器设备的质13室内质量控制室内质量控制对细菌检验人员的要求对细菌检验人员的要求操作手册操作手册仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测 培养基的质量控制培养基的质量控制试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控临床标本检验过程的质量控制临床标本检验过程的质量控制标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存室内质量控制对细菌检验人员的要求14本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制(1)配制记录：配制记录：l培养基的制作过程必须统一培养基的制作过程必须统一l无无论论是是培培养养基基或或添添加加剂剂的的剂剂量量、pH值值、高高温灭菌的时间或温度，都需遵照规定温灭菌的时间或温度，都需遵照规定l培培养养基基名名称称、本本批批配配制制量量、配配方方、配配制制日日期期和配制人员姓名都必须详细记录和配制人员姓名都必须详细记录 四、培养基的质量控制(1)配制记录：15本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制(2)培养基外观的检查：培养基外观的检查：l新新配配或或新新购购入入的的培培养养基基必必须须先先以以肉肉眼眼检检查查其其颜色与透明度，培养基应澄清，无浑浊颜色与透明度，培养基应澄清，无浑浊l培培养养基基的的色色泽泽不不正正常常应应测测其其pH值值，不不得得超超过过所预期值的所预期值的0.2l平平板板培培养养基基最最易易脱脱水水，应应放放在在严严密密的的有有盖盖容容器器内内或或塑塑料料袋袋内内。这这样样平平板板内内培培养养基基可可保保存存两周左右，试管内培养基可保存两周左右，试管内培养基可保存1-2个月个月四、培养基的质量控制(2)培养基外观的检查：16本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制(3)无菌试验：无菌试验：l 每批配好的培养基须进行无菌试验每批配好的培养基须进行无菌试验l随随机机选选取取5%10%的的量量，如如果果配配制制大大量量的的培培养养基基，则则任任意意选选取取10个个平平板板或或管管装装培培养养基基，35温度下隔夜培养，证明无菌生长为合格温度下隔夜培养，证明无菌生长为合格四、培养基的质量控制(3)无菌试验：17本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制(4)培养基的量：培养基的量：l平板培养基的厚度一般为平板培养基的厚度一般为3mm (90mm平皿平皿+1520ml培养基）培养基）l药敏试验用为药敏试验用为4mm (90mm平皿平皿+25ml培养基）培养基）l斜面不超过试管的斜面不超过试管的2/3四、培养基的质量控制(4)培养基的量：18本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制(5)培养基的有效性试验：培养基的有效性试验：l 每每一一批批新新制制或或新新购购的的培培养养基基，使使用用前前均均须须取取已已知知性性质质的的标标准准菌菌株株试试验验是是否否能能支支持持，区区分分或或选选择择某某类类细细菌的生长菌的生长l培培养养基基的的试试验验结结果果需需要要加加以以记记录录，项项目目包包括括试试验验日日期期、试试验验结结果果以以及及实实验验者者的的签签名名等等。且且此此记记录录本本需需便便于于检检验验室室人人员员的的查查看看，以以便便能能随随时时解解决决任任何何发发生生的难题的难题 四、培养基的质量控制(5)培养基的有效性试验：19本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制表表2常用培养基的质量控制常用培养基的质量控制培养基培养基质控菌种质控菌种生长情况生长情况结果结果血琼脂血琼脂巧克力琼脂巧克力琼脂营养琼脂营养琼脂麦康凯琼脂麦康凯琼脂中国蓝琼脂中国蓝琼脂SS琼脂琼脂沙保罗琼脂沙保罗琼脂化脓链球菌化脓链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌大肠埃希菌大肠埃希菌福氏志贺菌福氏志贺菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌大肠埃希菌大肠埃希菌福氏志贺菌福氏志贺菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌产气肠杆菌产气肠杆菌鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌大肠埃希菌大肠埃希菌白色假丝酵母菌白色假丝酵母菌+-+-+-+明显乙型溶血环明显乙型溶血环甲型溶血环甲型溶血环24h生长生长生长生长分解乳糖，菌落红色分解乳糖，菌落红色不分解乳糖，菌落无色透明不分解乳糖，菌落无色透明不生长不生长分解乳糖，菌落蓝色分解乳糖，菌落蓝色不分解乳糖，菌落无色不分解乳糖，菌落无色不生长不生长粉红色菌落粉红色菌落无色菌落，中心黑色无色菌落，中心黑色四、培养基的质量控制表2常用培养基的质量控制血琼脂化脓链20本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制表表2常用培养基的质量控制常用培养基的质量控制生长生长生长，生长，溶血溶血生长生长部分抑制部分抑制生长，黄色菌落生长，黄色菌落生长，蓝绿色菌落生长，蓝绿色菌落大量生长大量生长抑制生长抑制生长+-脆弱拟杆菌脆弱拟杆菌产气荚膜梭菌菌产气荚膜梭菌菌空肠弯曲菌空肠弯曲菌大肠埃希菌大肠埃希菌霍乱弧菌霍乱弧菌副溶血弧菌副溶血弧菌霍乱弧菌霍乱弧菌大肠埃希菌大肠埃希菌厌氧血平板厌氧血平板弯曲菌琼脂弯曲菌琼脂TCBS琼脂琼脂碱性蛋白胨水碱性蛋白胨水结果结果生长情况生长情况质控菌种质控菌种培养基培养基四、培养基的质量控制表2常用培养基的质量控制生长+脆弱拟21本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制(6)培养基的有效期：培养基的有效期：l 培养基有效期的长短应参考诊断细菌学书籍培养基有效期的长短应参考诊断细菌学书籍l若若购购买买现现用用的的培培养养基基，均均应应注注意意有有效效期期的的标标示示是是否否正正确确，如如血血平平板板的的有有效效期期为为3星星期期，厌厌氧氧菌菌分分离离培培养养基基为为1-2星期等星期等 四、培养基的质量控制(6)培养基的有效期：22室内质量控制室内质量控制对细菌检验人员的要求对细菌检验人员的要求操作手册操作手册仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测培养基的质量控制培养基的质量控制 试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控临床标本检验过程的质量控制临床标本检验过程的质量控制标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存室内质量控制对细菌检验人员的要求23本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。五、试剂、染色液及抗血清的质控五、试剂、染色液及抗血清的质控染色液的质量控制染色液的质量控制l 染色液要标明配制或购入日期，必须选用适当染色液要标明配制或购入日期，必须选用适当的标准菌株作阳性及阴性对照，来鉴定染色液的的标准菌株作阳性及阴性对照，来鉴定染色液的性能性能l革兰染色用金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌制备浓革兰染色用金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌制备浓菌悬液，经高压灭菌后冰箱保存，作为革兰染色菌悬液，经高压灭菌后冰箱保存，作为革兰染色的质量控制，每次质控与标本同步进行的质量控制，每次质控与标本同步进行五、试剂、染色液及抗血清的质控染色液的质量控制24本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。五、试剂、染色液及抗血清的质控五、试剂、染色液及抗血清的质控各种染色液的监控菌株各种染色液的监控菌株染色液染色液 阳性对照菌阳性对照菌 阴性对照菌阴性对照菌 监控频度监控频度革兰染色液革兰染色液 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌大肠埃希菌 每天每天抗酸染色液抗酸染色液 结核分枝杆菌结核分枝杆菌 每次每次 异染颗粒染色液异染颗粒染色液 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌 每次每次荚膜染色液荚膜染色液 肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌 每批每批鞭毛染色液鞭毛染色液 普通变形杆菌普通变形杆菌 福氏志贺菌福氏志贺菌 每次每次五、试剂、染色液及抗血清的质控各种染色液的监控菌株25本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。五、试剂、染色液及抗血清的质控五、试剂、染色液及抗血清的质控试剂的质量控制试剂的质量控制l各类试剂，在配制或购入后均应进行各类试剂，在配制或购入后均应进行“有效有效”试试验，用已知阳性及阴性菌株进行试验验，用已知阳性及阴性菌株进行试验l试剂须根据标示的配制要领或制造者的指示作适试剂须根据标示的配制要领或制造者的指示作适当的储存当的储存l对较稳定的试剂如靛基质试剂应在配制时及每周对较稳定的试剂如靛基质试剂应在配制时及每周予以检测核对，凡不稳定的试剂每天使用时均应予以检测核对，凡不稳定的试剂每天使用时均应检测，合格后才能使用检测，合格后才能使用 五、试剂、染色液及抗血清的质控试剂的质量控制26本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。五、试剂、染色液及抗血清的质控五、试剂、染色液及抗血清的质控表表3常用试剂的阳性、阴性对照菌株常用试剂的阳性、阴性对照菌株常用试剂常用试剂 阳性对照菌株阳性对照菌株阴性对照菌株阴性对照菌株凝固酶试剂凝固酶试剂金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌触酶试验用试剂触酶试验用试剂化脓链球菌化脓链球菌V-P试验用试剂试验用试剂阴沟肠杆菌阴沟肠杆菌大肠埃希菌大肠埃希菌大肠埃希菌大肠埃希菌阴沟肠杆菌阴沟肠杆菌氧化酶试剂氧化酶试剂铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌大肠埃希菌大肠埃希菌靛基质试剂靛基质试剂金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌五、试剂、染色液及抗血清的质控表3常用试剂的阳性、阴性对照27本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。五、试剂、染色液及抗血清的质控五、试剂、染色液及抗血清的质控诊断血清的质量控制诊断血清的质量控制l购入的沙门菌属、志贺菌属、致病性大肠杆菌购入的沙门菌属、志贺菌属、致病性大肠杆菌的诊断血清必须立即记录其购入日期、观察其的诊断血清必须立即记录其购入日期、观察其透明度、色彩有无变化和是否有沉淀物，然后透明度、色彩有无变化和是否有沉淀物，然后置置4冰箱保存冰箱保存l使用前应注意检查诊断血清的批号、有效期，使用前应注意检查诊断血清的批号、有效期，如发现浑浊或有絮状沉淀物时，很可能系污染如发现浑浊或有絮状沉淀物时，很可能系污染所致，不能再继续使用所致，不能再继续使用五、试剂、染色液及抗血清的质控诊断血清的质量控制28本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。五、试剂、染色液及抗血清的质控五、试剂、染色液及抗血清的质控诊断血清的质量控制诊断血清的质量控制l使用前还应以阳性及阴性菌株进行检测，使用前还应以阳性及阴性菌株进行检测，观察其效价及特异性观察其效价及特异性l不得将诊断血清置室温保存不得将诊断血清置室温保存,各种诊断血清各种诊断血清均应置冰箱中均应置冰箱中4保存保存l每月用标准菌株进行一次测定每月用标准菌株进行一次测定 五、试剂、染色液及抗血清的质控诊断血清的质量控制29本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。五、试剂、染色液及抗血清的质控五、试剂、染色液及抗血清的质控 临床微生物实验室诊断血清质控记录表临床微生物实验室诊断血清质控记录表名称名称检测频率检测频率质控物质控物质控鉴定记录质控鉴定记录日期日期操作者操作者沙门菌属诊断血沙门菌属诊断血清清每月每月伤寒沙门菌伤寒沙门菌大肠埃希菌大肠埃希菌（ATCC25922）鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌无菌盐水无菌盐水伤寒沙门菌伤寒沙门菌鼠伤寒沙门鼠伤寒沙门菌菌ATCC25922无菌盐水无菌盐水A-F多多价价（）（）（）（）Vi（）（）（）（）Hd（）（）（）（）Hi（）（）（）（）O4（）（）（）（）O9（）（）（）（）志贺菌属诊断血志贺菌属诊断血清清每月每月福氏志贺菌福氏志贺菌宋内志贺菌宋内志贺菌大肠埃希菌大肠埃希菌（ATCC25922）无菌盐水无菌盐水福氏志贺菌福氏志贺菌宋内志贺菌宋内志贺菌ATCC25922无菌盐水无菌盐水多价血清多价血清（）（）（）（）福氏志贺菌血福氏志贺菌血清清（）（）（）（）宋内志贺菌血宋内志贺菌血清清（）（）（）（）致病性大肠埃希致病性大肠埃希菌诊断血菌诊断血清清每月每月EPECO126B16大肠埃希菌大肠埃希菌（ATCC25922）EPECO126B16ATCC25922OK1（）（）OK2（）（）OK3（）（）五、试剂、染色液及抗血清的质控检测频率质控物质控鉴定记录日30室内质量控制室内质量控制对细菌检验人员的要求对细菌检验人员的要求操作手册操作手册仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测培养基的质量控制培养基的质量控制试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控 临床标本检验过程的质量控制临床标本检验过程的质量控制标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存室内质量控制对细菌检验人员的要求31本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。六、临床标本检验过程的质量控制六、临床标本检验过程的质量控制培养前培养前l选择合理的检验项目选择合理的检验项目l标本采集、运送（早期采集、无菌采集、即时送标本采集、运送（早期采集、无菌采集、即时送检）检）l标本的合理保存标本的合理保存l送检标本的登记：三查、三对送检标本的登记：三查、三对l不合格标本登记：不合格原因，注明理由退回不合格标本登记：不合格原因，注明理由退回六、临床标本检验过程的质量控制培养前32本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。培养中：培养中：l直接诊断直接诊断:直接涂片非常必要和重要直接涂片非常必要和重要l分离培养：使用多种适合于可疑病原菌生长分离培养：使用多种适合于可疑病原菌生长 的培养基和培养条件的培养基和培养条件l鉴定：按鉴定程序执行，正确引导下一步鉴鉴定：按鉴定程序执行，正确引导下一步鉴 定定六、临床标本检验过程的质量控制六、临床标本检验过程的质量控制培养中：六、临床标本检验过程的质量控制33本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。培养后：培养后：l结果复核：是否为病原菌结果复核：是否为病原菌l报告单复核报告单复核l临床联系临床联系l 阳性结果及时通知临床阳性结果及时通知临床l 特别结果提示（特别结果提示（ESBL；MRS）六、临床标本检验过程的质量控制六、临床标本检验过程的质量控制培养后：六、临床标本检验过程的质量控制34本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。粪便标本细菌培养的处理原则粪便标本细菌培养的处理原则（1）标本采集：标本采集：自然排便取脓血、粘液部分粪便自然排便取脓血、粘液部分粪便23g，液体粪便取絮状物，液体粪便取絮状物23ml，盛，盛于灭菌容器内，立即送检，如排不出于灭菌容器内，立即送检，如排不出粪便也可用肛拭送检粪便也可用肛拭送检六、临床标本检验过程的质量控制六、临床标本检验过程的质量控制粪便标本细菌培养的处理原则六、临床标本检验过程的质量控制35本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。粪便标本细菌培养的处理原则粪便标本细菌培养的处理原则（2）直接涂片：直接涂片：革兰染色镜检，用于霍乱弧菌形态学检查革兰染色镜检，用于霍乱弧菌形态学检查悬滴法：米泔水样便检查流星样运动或制悬滴法：米泔水样便检查流星样运动或制 动试验动试验直接涂片检查真菌孢子和假菌丝直接涂片检查真菌孢子和假菌丝 六、临床标本检验过程的质量控制六、临床标本检验过程的质量控制粪便标本细菌培养的处理原则六、临床标本检验过程的质量控制36本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。粪便标本细菌培养的处理原则粪便标本细菌培养的处理原则（3）粪便培养接种培养基：）粪便培养接种培养基：沙门沙门志贺菌培养：接种于志贺菌培养：接种于SS和麦康凯平板和麦康凯平板霍乱弧菌培养：接种于碱性蛋白胨水，转种庆大平霍乱弧菌培养：接种于碱性蛋白胨水，转种庆大平 板或板或TCBS琼脂平板琼脂平板 致病性大肠埃希菌培养：接种于伊红美蓝或麦康凯致病性大肠埃希菌培养：接种于伊红美蓝或麦康凯 平板平板其他病原菌培养：视需要接种不同培养基其他病原菌培养：视需要接种不同培养基 六、临床标本检验过程的质量控制六、临床标本检验过程的质量控制粪便标本细菌培养的处理原则六、临床标本检验过程的质量控制37本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。粪便标本细菌培养的处理原则粪便标本细菌培养的处理原则（3）报告方式：）报告方式：检出检出菌（腹泻病原菌及药敏结果）菌（腹泻病原菌及药敏结果）菌群失调（肠道正常菌群消失）：提示抗菌群失调（肠道正常菌群消失）：提示抗 生素使用过量生素使用过量未检出沙门志贺菌未检出沙门志贺菌 六、临床标本检验过程的质量控制六、临床标本检验过程的质量控制粪便标本细菌培养的处理原则六、临床标本检验过程的质量控制38本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。湖北医科大学附属第一医院检验科湖北医科大学附属第一医院检验科室内质控失控报告单室内质控失控报告单l 编号：编号：l日期：日期：年年 月月 日日l项目：项目：l药敏纸片生产单位：药敏纸片生产单位：仪器型号：仪器型号：l质控菌株：质控菌株：ATCC25923 ATCC25922 lATCC27853l失控原因：失控原因：1）试剂）试剂l 2）鉴定卡）鉴定卡l 3）药敏纸片）药敏纸片l 4）药敏卡）药敏卡l 5）其它（请述）：）其它（请述）：l失控处理：失控处理：l失控前测定数据处理后测定数据失控前测定数据处理后测定数据12345失控判断失控判断l操作者签名：操作者签名：l质量控制负责人签名：质量控制负责人签名：l 六、临床标本检验过程的质量控制六、临床标本检验过程的质量控制湖北医科大学附属第一医院检验科六、临床标本检验过程的质量控制39室内质量控制室内质量控制对细菌检验人员的要求对细菌检验人员的要求操作手册操作手册仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测培养基的质量控制培养基的质量控制试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控临床标本检验过程的质量控制临床标本检验过程的质量控制 标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存室内质量控制对细菌检验人员的要求40本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。七、标准菌株的来源和保存七、标准菌株的来源和保存标准菌株要求标准菌株要求l 必须是形态、染色反应、生理生化及血必须是形态、染色反应、生理生化及血清学特性典型而稳定的菌株清学特性典型而稳定的菌株l实验结果重复性好，极少发生变异实验结果重复性好，极少发生变异l国际社会认可国际社会认可l来源于专门机构来源于专门机构七、标准菌株的来源和保存标准菌株要求41本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。七、标准菌株的来源和保存七、标准菌株的来源和保存标准菌株来源标准菌株来源l美国典型菌种保藏中心美国典型菌种保藏中心ATCC（American Type Culture Collection）l卫生部药品生物制品检定所菌种保藏中心卫生部药品生物制品检定所菌种保藏中心 l各级临床检验中心各级临床检验中心七、标准菌株的来源和保存标准菌株来源42本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。七、标准菌株的来源和保存七、标准菌株的来源和保存标准菌株的保存方法标准菌株的保存方法 冷冻干燥法：冷冻干燥法：l最理想的保存方法，不改变菌种性状，保最理想的保存方法，不改变菌种性状，保存时间长存时间长l手续繁琐，需专门的冷冻干燥设备手续繁琐，需专门的冷冻干燥设备l菌种保存中心均采用此法菌种保存中心均采用此法七、标准菌株的来源和保存标准菌株的保存方法43本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。七、标准菌株的来源和保存七、标准菌株的来源和保存标准菌株的保存方法标准菌株的保存方法 冰冻保存法：冰冻保存法：l此法较简单，将细菌混悬于脱纤维羊血或脱此法较简单，将细菌混悬于脱纤维羊血或脱脂牛奶中，置液氮或脂牛奶中，置液氮或-20冰箱保存冰箱保存l但细菌经多次转种，性状可能发生变异但细菌经多次转种，性状可能发生变异七、标准菌株的来源和保存标准菌株的保存方法44本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。七、标准菌株的来源和保存七、标准菌株的来源和保存标准菌株的保存方法标准菌株的保存方法培养基保存法：培养基保存法：l最简易方便的方法，适用于大多数实验室最简易方便的方法，适用于大多数实验室（1）普通琼脂斜面保存法：适于一般细菌的保存，置）普通琼脂斜面保存法：适于一般细菌的保存，置4冰箱冰箱可保存可保存1个月个月七、标准菌株的来源和保存标准菌株的保存方法45本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。七、标准菌株的来源和保存七、标准菌株的来源和保存标准菌株的保存方法标准菌株的保存方法培养基保存法：培养基保存法：l最简易方便的方法，适用于大多数实验室最简易方便的方法，适用于大多数实验室（2）血琼脂斜面保存法：适于链球菌，可半月转种一次。脑）血琼脂斜面保存法：适于链球菌，可半月转种一次。脑膜炎奈瑟氏菌应用巧克力斜面，若加液体石蜡，可延长保存膜炎奈瑟氏菌应用巧克力斜面，若加液体石蜡，可延长保存期。期。七、标准菌株的来源和保存标准菌株的保存方法46本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。七、标准菌株的来源和保存七、标准菌株的来源和保存标准菌株的保存方法标准菌株的保存方法培养基保存法：培养基保存法：（3）半固体穿刺法：穿刺培养基并加液体石蜡，置）半固体穿刺法：穿刺培养基并加液体石蜡，置4冰箱可冰箱可保存保存3-6个月，适用于肠杆菌科细菌个月，适用于肠杆菌科细菌 七、标准菌株的来源和保存标准菌株的保存方法47本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。七、标准菌株的来源和保存七、标准菌株的来源和保存实验室必备质控菌株：实验室必备质控菌株：l大肠埃希菌大肠埃希菌 ATCC25922l大肠埃希菌大肠埃希菌 ATCC35218l铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌 ATCC27853l金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 ATCC25923l粪肠球菌粪肠球菌 ATCC29212七、标准菌株的来源和保存实验室必备质控菌株：48本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。室间质量评价室间质量评价l室间质量评价室间质量评价是质量保证体系的重要组成部是质量保证体系的重要组成部分。国外通常设专门执行机构，称参考实验室，分。国外通常设专门执行机构，称参考实验室，如美国病理学院、疾病控制中心。国内主要由卫如美国病理学院、疾病控制中心。国内主要由卫生部临检中心、省市临检中心担负此项任务生部临检中心、省市临检中心担负此项任务 室间质量评价室间质量评价是质量保证体系的重要组成部分。国外通49本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。室间质量评价室间质量评价l室间质量控制的一般性检查项目室间质量控制的一般性检查项目1、仪器设备的操作卡，人员水平，设备的使用、保养、维修、仪器设备的操作卡，人员水平，设备的使用、保养、维修 记录记录2、培养基和试剂的配制记录、培养基的保存方法、灭菌质、培养基和试剂的配制记录、培养基的保存方法、灭菌质 量、有效期量、有效期3、室内全面质量控制的建立，室内工作人员的熟练程度的考、室内全面质量控制的建立，室内工作人员的熟练程度的考核和盲点试验核和盲点试验 的进行情况，细菌检验的操作手册及操作的的进行情况，细菌检验的操作手册及操作的规范性规范性室间质量评价室间质量控制的一般性检查项目50本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。室间质量评价室间质量评价熟练程度的考核熟练程度的考核l用模拟临床标本做质量评价用模拟临床标本做质量评价是目前国内外广泛采是目前国内外广泛采用的方法，主要评价实验室在病原菌的分离、鉴用的方法，主要评价实验室在病原菌的分离、鉴定和药敏试验等方面的工作情况定和药敏试验等方面的工作情况室间质量评价熟练程度的考核51本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。室间质量评价室间质量评价熟练程度的考核熟练程度的考核l由质控管理机构发放模拟标本或菌种，实验室根据由质控管理机构发放模拟标本或菌种，实验室根据该标本的性质及有关模拟的临床指征，按照日常的该标本的性质及有关模拟的临床指征，按照日常的操作方法进行相应的分离鉴定及药敏试验。实验室操作方法进行相应的分离鉴定及药敏试验。实验室完成鉴定后在规定时间内将结果反馈至检验中心或完成鉴定后在规定时间内将结果反馈至检验中心或参考实验室，进行评价参考实验室，进行评价室间质量评价熟练程度的考核52本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。室间质量评价室间质量评价质控结果的分析与评价质控结果的分析与评价 质控管理机构对每次质控结果进行统计分析，质控管理机构对每次质控结果进行统计分析，将每一实验室的结果与标准进行比较。根据参加的将每一实验室的结果与标准进行比较。根据参加的规模和鉴定的正确数，计算鉴定正确率及所有参加规模和鉴定的正确数，计算鉴定正确率及所有参加实验室的平均分，以及每个实验室的得分实验室的平均分，以及每个实验室的得分室间质量评价质控结果的分析与评价53本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。再见54