实验神经干动作电位课件

资料仅供参考,不当之处，请联系改正。实验一实验一 神经干动作电位的引导及传导速神经干动作电位的引导及传导速度和不应期的测定度和不应期的测定 实验一 神经干1资料仅供参考,不当之处，请联系改正。【实验目的实验目的】v1.1.学习和掌握学习和掌握制备蛙类神经干制备蛙类神经干制作方法。制作方法。2.2.学习使用学习使用BL-420BL-420生物机能实验系统生物机能实验系统引导引导蛙类坐骨神经干蛙类坐骨神经干动作电位动作电位的方法。的方法。分析神经干动作电位的分析神经干动作电位的基本波形、幅值、基本波形、幅值、时程时程，测定神经兴奋的，测定神经兴奋的传导速度传导速度和和不应期不应期。【实验目的】1.学习和掌握制备蛙类神经干制作方法。2.2资料仅供参考,不当之处，请联系改正。【实验原理实验原理】神经干动作电位是神经兴奋神经干动作电位是神经兴奋的客观标志。它是由粗细不等、兴奋性不的客观标志。它是由粗细不等、兴奋性不同的神经纤维所组成的，故在神经干表面同的神经纤维所组成的，故在神经干表面记录的动作电位为复合性动作电位。这种记录的动作电位为复合性动作电位。这种电位的幅度在一定范围内可随刺激强度的电位的幅度在一定范围内可随刺激强度的增加而加大。增加而加大。【实验原理】神经干动作电位是神经兴奋的客观标志。它是由粗细3资料仅供参考,不当之处，请联系改正。处于兴奋部位的膜外电位负于静息部位，处于兴奋部位的膜外电位负于静息部位，当神经冲动通过后，该处的电位又恢复到当神经冲动通过后，该处的电位又恢复到静息水平，这一可扩布的、一过性的电位静息水平，这一可扩布的、一过性的电位变化，即动作电位。如果将两个引导电极变化，即动作电位。如果将两个引导电极分别置于神经干表面，当神经干一端兴奋分别置于神经干表面，当神经干一端兴奋时，兴奋波先后通过两个引导电极处，记时，兴奋波先后通过两个引导电极处，记录到两个方向相反的电位偏转波形，称为录到两个方向相反的电位偏转波形，称为双向动作电位双向动作电位。处于兴奋部位的膜外电位负于静息部位，当神经冲动通过后，该处的4资料仅供参考,不当之处，请联系改正。v【实验对象实验对象】蟾蜍或蛙蟾蜍或蛙v【实验器材实验器材】蛙类手术器械（粗剪刀，眼科蛙类手术器械（粗剪刀，眼科剪，手术剪，镊子，探针，蜡盘，玻璃分针，剪，手术剪，镊子，探针，蜡盘，玻璃分针，大头针，）培养皿，神经屏蔽盒，引导线，大头针，）培养皿，神经屏蔽盒，引导线，刺激电极，任氏液，刺激电极，任氏液，BL-420生物机能实验系生物机能实验系统，废液缸，张力换能器。统，废液缸，张力换能器。【实验对象】蟾蜍或蛙5资料仅供参考,不当之处，请联系改正。【实验步骤实验步骤】1.1.制备坐骨神经腓神经标本制备坐骨神经腓神经标本 （1 1）破坏脑脊髓）破坏脑脊髓 （2 2）剪除躯干上部及内脏）剪除躯干上部及内脏 （3 3）剥皮及分离下肢）剥皮及分离下肢（4 4）制备坐骨神经）制备坐骨神经-腓神经标本。腓神经标本。【实验步骤】1.制备坐骨神经腓神经标本（1）破坏脑脊6资料仅供参考,不当之处，请联系改正。实验神经干动作电位课件7资料仅供参考,不当之处，请联系改正。实验神经干动作电位课件8资料仅供参考,不当之处，请联系改正。实验神经干动作电位课件9资料仅供参考,不当之处，请联系改正。实验神经干动作电位课件10资料仅供参考,不当之处，请联系改正。实验神经干动作电位课件11资料仅供参考,不当之处，请联系改正。2.2.仪器连接仪器连接v（1 1）开机并启动）开机并启动BL-420BL-420生物机能实验系统生物机能实验系统 v（2 2）本实验采用双通道记录，将两对引导）本实验采用双通道记录，将两对引导电极分别与通道电极分别与通道1 1和通道和通道2 2连接，刺激电极连接，刺激电极连接至刺激器输出接口。连接至刺激器输出接口。连接方法如见图：连接方法如见图：2.仪器连接（1）开机并启动BL-420生物机能实验系统12资料仅供参考,不当之处，请联系改正。BL-420生物机能实验系统生物机能实验系统 神经屏蔽盒神经屏蔽盒CH1 CH2 刺激输出刺激输出刺激电极刺激电极地线地线C1 C2 C3 C4 仪器连接示意图仪器连接示意图 BL-420生物机能实验系统 13资料仅供参考,不当之处，请联系改正。实验神经干动作电位课件14资料仅供参考,不当之处，请联系改正。v（3 3）将坐骨神经）将坐骨神经腓神经标本放入神经屏蔽腓神经标本放入神经屏蔽盒（坐骨神经中枢端放在刺激电极上，外周盒（坐骨神经中枢端放在刺激电极上，外周端放在引导电极上）。端放在引导电极上）。（3）将坐骨神经腓神经标本放入神经屏蔽盒（坐骨神经中枢端放15资料仅供参考,不当之处，请联系改正。v【实验项目实验项目】v1 1、观察细胞外引导双相动作电位的波形特点、观察细胞外引导双相动作电位的波形特点、测定幅值及时程。测定幅值及时程。v2 2、测定神经干动作电位传导速度。、测定神经干动作电位传导速度。v3 3、测定不应期：、测定不应期：v记下第二个动作电位刚消失时的两个刺激脉记下第二个动作电位刚消失时的两个刺激脉冲之间的波间隔，此时的波间隔值即为绝对冲之间的波间隔，此时的波间隔值即为绝对不应期。用不应期减去绝对不应期即可得出不应期。用不应期减去绝对不应期即可得出相对不应期相对不应期【实验项目】16资料仅供参考,不当之处，请联系改正。v【结果分析结果分析】v1.1.解释双相动作电位产生的机制，记录动作解释双相动作电位产生的机制，记录动作v 电位的电位的时程、幅值时程、幅值。(3)(3)v2.2.测定神经干动作电位测定神经干动作电位传导速度传导速度:V=:V=S/S/T T (m/s)(m/s)。（。（4 4）v3.3.动作电位动作电位不应期不应期的测量（的测量（5 5）v4.4.刺激强度刺激强度与复合动作电位幅值的关系（与复合动作电位幅值的关系（6 6）【结果分析】17资料仅供参考,不当之处，请联系改正。【注意事项注意事项】1.1.破坏蟾蜍的脑和脊髓时，应防止其耳后腺及破坏蟾蜍的脑和脊髓时，应防止其耳后腺及皮肤分泌的蟾酥毒液射入操作者的眼内或污染皮肤分泌的蟾酥毒液射入操作者的眼内或污染实验标本。实验标本。2.2.制备神经标本过程中，应避免用手捏神经或制备神经标本过程中，应避免用手捏神经或镊子夹伤神经。镊子夹伤神经。3.3.为了防止神经标本干燥，制备过程中需不断为了防止神经标本干燥，制备过程中需不断滴加任氏液，使其保持良好的兴奋性。滴加任氏液，使其保持良好的兴奋性。【注意事项】18资料仅供参考,不当之处，请联系改正。v4.4.将神经干放入屏蔽盒之前，用刀片轻刮引将神经干放入屏蔽盒之前，用刀片轻刮引导电极，以保证电极和神经干密切接触。导电极，以保证电极和神经干密切接触。v5 5制作标本过程中，切勿伤及神经干及其分制作标本过程中，切勿伤及神经干及其分支，避免牵拉和其它不良刺激，支，避免牵拉和其它不良刺激，v6 6实验过程中，应经常在标本上滴加任氏液实验过程中，应经常在标本上滴加任氏液以保持湿润，使其保持良好的兴奋性。以保持湿润，使其保持良好的兴奋性。v7 7每次刺激标本以后，必须让肌肉休息每次刺激标本以后，必须让肌肉休息1-21-2分钟，以防标本疲劳。分钟，以防标本疲劳。4.将神经干放入屏蔽盒之前，用刀片轻刮引导电极，以保证电极和19资料仅供参考,不当之处，请联系改正。双向动作电位双向动作电位双向动作电位20资料仅供参考,不当之处，请联系改正。v传导速度：传导速度：动作电位在神经干的传导速度，动作电位在神经干的传导速度，可用电生理学方法进行测量。测定神经冲动可用电生理学方法进行测量。测定神经冲动在神经干上传导的距离（在神经干上传导的距离（S S）和通过该距离所）和通过该距离所需时间（需时间（t t），即可计算出神经冲动的传导速），即可计算出神经冲动的传导速度度(V)(V)，V VS/S/t t。传导速度：动作电位在神经干的传导速度，可用电生理学方法进行测21资料仅供参考,不当之处，请联系改正。v 不应期：当双脉冲的间隔时间为当双脉冲的间隔时间为20ms 20ms 左左右时，示波器荧光屏上呈现两个同样大小的右时，示波器荧光屏上呈现两个同样大小的动作电位。逐渐缩短双脉冲之间的间隔，第动作电位。逐渐缩短双脉冲之间的间隔，第二个动作电位逐渐向第一个动作电位靠近，二个动作电位逐渐向第一个动作电位靠近，振幅也随之降低，最后可因落在第一个动作振幅也随之降低，最后可因落在第一个动作电位的绝对不应期内而完全消失。电位的绝对不应期内而完全消失。不应期：当双脉冲的间隔时间为20ms 左右时，示波器荧光屏22资料仅供参考,不当之处，请联系改正。刺激强度与复合动作电位幅值的关系刺激强度与复合动作电位幅值的关系v一根神经纤维在受到阈值以上刺激产生动作一根神经纤维在受到阈值以上刺激产生动作电位不随着刺激强度增大而增大电位不随着刺激强度增大而增大,v 但是坐骨神经干是有许多神经纤维组成的但是坐骨神经干是有许多神经纤维组成的,在受到阈值以上刺激时在受到阈值以上刺激时,由于引起不同数目神由于引起不同数目神经纤维产生动作电位经纤维产生动作电位,随着刺激强度增大随着刺激强度增大,神经神经纤维产生动作电位的数目也越多纤维产生动作电位的数目也越多,动作电位的动作电位的幅度也就越大幅度也就越大,当全部神经纤维都产生动作电当全部神经纤维都产生动作电位时位时,动作电位的幅度就不会增大了动作电位的幅度就不会增大了v 故在一定范围内故在一定范围内,坐骨神经干动作电位的幅坐骨神经干动作电位的幅度为何随着刺激强度增大而增大度为何随着刺激强度增大而增大刺激强度与复合动作电位幅值的关系一根神经纤维在受到阈值以上23资料仅供参考,不当之处，请联系改正。实验报告要求实验报告要求神经干动作电位引导及其传导速度和不应期测定一、实验目的二、实验器材三、实验步骤四、实验结果1.动作电位的时程及幅度2.写出阈刺激、最大刺激强度；3.相对不应期、绝对不应期4.传导速度：五、思考题1.双相动作电位产生机制。2.动作电位随刺激增大机制，与全或无是否矛盾？实验报告要求神经干动作电位引导及其传导速度和不应期测定一、实24