食品安全快速检测技术及其进展课件

食品安全快速检测技术及其进展食品安全快速检测技术及其进展食品安全快速检测技术及其进展1n检测技术是保障食品质量安全的重要技术支撑。检测技术是保障食品质量安全的重要技术支撑。n快速检测技术在鲜活农产品现场监测、市场准入、快速检测技术在鲜活农产品现场监测、市场准入、进出口岸贸易、快速筛查等工作中发挥着越来越进出口岸贸易、快速筛查等工作中发挥着越来越 重要的作用。重要的作用。食品安全快速检测技术及其进展课件2检测速度快，灵敏度高；检测速度快，灵敏度高；特异性、高通量；特异性、高通量；前处理简单，成本低；前处理简单，成本低；快速检测技术特点快速检测技术特点设备小型化，便携。设备小型化，便携。检测速度快，灵敏度高；特异性、高通量；前处理简单，成本低；快3 样品前处理样品前处理残留分析的两大基本主题残留分析的两大基本主题 检测检测食品安全快速检测技术食品安全快速检测技术 样品前处理4快速样品前处理技术快速样品前处理技术 传统样品前处理技术：传统样品前处理技术：索氏提取、液液分配、柱层析等。索氏提取、液液分配、柱层析等。现代样品前处理技术：现代样品前处理技术：固相萃取技术固相萃取技术(SPE)(SPE)固相微萃取技术固相微萃取技术SPMESPME）基体分散固相萃取（基体分散固相萃取（MSPDMSPD）分子印迹技术（分子印迹技术（MIPMIP）免疫亲和色谱免疫亲和色谱(IAC)(IAC)凝胶层析凝胶层析(GPC)(GPC)加速溶剂提取（加速溶剂提取（ASEASE）超临界流体萃取技术超临界流体萃取技术(SFE)(SFE)微波辅助萃取微波辅助萃取 MAE MAE）快速样品前处理技术 传统样品前处理技术：固相萃取技术(SP5快速检测技术快速检测技术化学分析技术化学分析技术v 化学检测试剂盒（试纸、卡）化学检测试剂盒（试纸、卡）v 电化学传感器电化学传感器生物分析技术生物分析技术v免疫学方法免疫学方法v分子生物学技术分子生物学技术v生物传感器技术生物传感器技术v生物芯片生物芯片快速检测技术化学分析技术生物分析技术6遵从的标准和方法遵从的标准和方法放射免疫测定法放射免疫测定法/酶免疫法酶免疫法色谱联用分析色谱联用分析放射受体分析放射受体分析气相色谱（气相色谱（ECD/NPDECD/NPD）气相色谱（气相色谱（FIDFID）1 pg/g1 ng/g1 ug/g1 mg/g高效液相色谱高效液相色谱 (FLD/UVD)(FLD/UVD)极谱法极谱法荧光分光光度法荧光分光光度法微生物测定法微生物测定法紫外紫外/可见分光光度可见分光光度比色法比色法各种方法检测范围比较各种方法检测范围比较遵从的标准和方法放射免疫测定法/酶免疫法色谱联用分析放射受体7 快速测定的生物分析方法快速测定的生物分析方法v 免疫学方法免疫学方法v 分子生物技术分子生物技术v 生物传感器技术生物传感器技术v 生物芯片生物芯片 快速测定的生物分析方法 免疫学方法8方法方法检测对象检测对象国内外对比国内外对比化学检测技术化学检测技术 有机磷有机磷灵敏度低灵敏度低酶抑制检测技术酶抑制检测技术 有机磷和氨基甲酸酯有机磷和氨基甲酸酯 国国内内假阳性、假阴性率高，二十余家生产厂商，多种速测假阳性、假阴性率高，二十余家生产厂商，多种速测卡、速测仪，卡、速测仪，GB/T 5009.199-2003GB/T 5009.199-2003；NY/T 448-2001 NY/T 448-2001 国国外外测测定定样样品品和和农农药药种种类类有有限限，欧欧美美作作为为普普查查农农药药残残留留和和田间实地检测的基本手段田间实地检测的基本手段 ；AOAC AOAC 官方方法官方方法 964.17 964.17免疫分析法免疫分析法 有机磷类、氨基甲酸有机磷类、氨基甲酸酯类、硫代氨基甲酸酯类、硫代氨基甲酸酯类、有机氯类、三酯类、有机氯类、三嗪类、拟除虫菊酯类嗪类、拟除虫菊酯类和酰胺类等几十种农和酰胺类等几十种农药药 国国内内研究活跃，但未有真正推广使用的商品化产品研究活跃，但未有真正推广使用的商品化产品 国国外外技技术术成成熟熟，灵灵敏敏度度高高，FAOFAO推推荐荐方方法法，美美国国USDA USDA、EPAEPA、AOACAOAC制制定定了了评评定定标标准准，但但经经认认证证的的有有限限，经经EPAEPA认认证证的的免免疫疫试试剂剂盒盒约约有有4 4个个厂厂家家的的2626种种试试剂剂盒盒：EPAEPA方方法法40104010、EPAEPA方法方法4015 EPA4015 EPA方法方法4040 4040 等等生物传感器生物传感器有机磷、氨基甲酸酯有机磷、氨基甲酸酯国国内内处于研究阶段处于研究阶段国国外外电电导导型型生生物物传传感感器器 、光光寻寻址址电电位位型型传传感感器器 、安安培培型型传感器传感器 ，处于研究和应用阶段，并未广泛推广使用，处于研究和应用阶段，并未广泛推广使用农药快速检测技术农药快速检测技术方法检测对象国内外对比化学检测技术 有机磷灵敏度低酶抑制检测9方法方法检测对象检测对象国内外对比国内外对比免免疫疫分分析析法法 ELISAELISA方法方法兽药的单残兽药的单残留检测留检测国内国内盐酸克仑特罗、磺胺二甲嘧啶试剂盒、试纸等盐酸克仑特罗、磺胺二甲嘧啶试剂盒、试纸等2020余种产品，假阳余种产品，假阳性率高，市场占有率大约性率高，市场占有率大约50%50%左右左右 兽药的单残兽药的单残留检测、多留检测、多残留检测残留检测 国外国外广广泛泛应应用用，意意大大利利TecnaTecna公公司司、美美国国IdexxIdexx公公司司、英英国国RandoxRandox公公司司、LaboratoriesLaboratories公公司司和和德德国国R-BiophanmR-Biophanm公公司司等等均均有有产产品品，20012001年年国国家家质质检检总总局局推推荐荐RandoxRandox公公司司的的ELISAELISA试试剂剂盒盒作作为为动动物物激激素素和和抗抗生生素素残残留留的的首首选选筛筛查查方方法法，AOACAOAC的的官官方方网网站站上上登登记记有有1515个个厂厂家家的的100100多多种商品试剂盒，经种商品试剂盒，经FDAFDA认证或认证或AOACAOAC确证的试剂盒占确证的试剂盒占5050多种多种 放射免放射免疫方法疫方法检测同一类检测同一类抗生素抗生素国内国内DB33/T 473-2004DB33/T 473-2004：放射免疫快速检测：放射免疫快速检测-内酰胺类、磺胺类和氨内酰胺类、磺胺类和氨基糖苷类链霉素型药物残留量基糖苷类链霉素型药物残留量检测同一类检测同一类抗生素抗生素国外国外美国美国CHARM ScienceCHARM Science公司公司Charm6600/7600Charm6600/7600抗生素快速检测系统，抗生素快速检测系统，可测可测-内酰胺类、氯霉素类、四环素类、磺氨类、邻氯青霉素等，内酰胺类、氯霉素类、四环素类、磺氨类、邻氯青霉素等，FDAFDA认可认可胶体金胶体金试纸条试纸条少数兽药少数兽药国内国内研究活跃，但未有真正推广使用的商品化产品研究活跃，但未有真正推广使用的商品化产品 国外国外灵敏度比灵敏度比ELISAELISA试剂盒低试剂盒低5 51010倍，特异性差，仅适合残留限量要倍，特异性差，仅适合残留限量要求不高的少数兽药的粗筛求不高的少数兽药的粗筛 蛋白蛋白芯片芯片多残留兽药多残留兽药的检测的检测国内国内有微阵列芯片产品，但因价格相对较高，未推广使用有微阵列芯片产品，但因价格相对较高，未推广使用国外国外有多种商品化芯片，但灵敏度需进一步提高有多种商品化芯片，但灵敏度需进一步提高兽药快速检测技术兽药快速检测技术方法检测对象国内外对比ELISA方法兽药的单残留检测国内盐酸10方法方法检测对象检测对象国内外对比国内外对比生物化学生物化学快速检测快速检测大肠菌群大肠菌群国国内内鲜鲜乳乳中中菌菌落落总总数数快快速速测测定定 （SN/T SN/T 1749-20061749-2006）；畜畜禽禽产产品品大大肠肠菌菌群群快快速速测测定定技技术术规规范范（NY/T NY/T 824-2004824-2004）；大大肠肠菌菌群群的的快快速速检检测测（GB/T GB/T 4789.32-20024789.32-2002）肠杆菌科肠杆菌科,李斯特菌李斯特菌,葡萄状球菌葡萄状球菌国国外外基基于于生生物物化化学学原原理理开开发发的的商商品品化化的的试试剂剂盒盒和和自自动动化化系系统统，FDAFDA细细菌菌分分析析手手册册列列出出了了1717个个厂厂家家的的分分析析系系统统，基基于于生生物物化化学学、脂脂肪肪酸酸、核核酸等进行检测酸等进行检测 免疫免疫分析法（分析法（ELISAELISA、侧流式侧流式技术）技术）单一微生物、单一微生物、多种微生物多种微生物国国内内大肠菌群大肠菌群ELTSEELTSE快速检验方法（快速检验方法（WS/T 116-1999WS/T 116-1999）。）。国国外外自自动动ELISAELISA系系统统官官方方认认可可，但但交交叉叉反反应应导导致致的的假假阳阳性性率率高高 ，美美国国BiocontrolBiocontrol系系统统、瑞瑞士士DiffchambDiffchamb系系统统和和美美国国DetexDetex系系统统是是ELISAELISA主主流流产产品品，美美国国的的RealReal系系统统、VIPVIP系系统统是是侧侧流流式式技技术术的的典典型型代代表表，在在官官方方网网站站上上查查到到7070多多个个厂厂家家生生产产的的8 8种种微微生生物物的的8484个个检检测测产产品品，其其中中包包括括1212个个AOACAOAC方法方法DNADNA分析法分析法 单一微生物单一微生物国国内内大大多多是是模模仿仿国国外外先先进进技技术术，且且在在试试制制阶阶段段，各各质质检检监监督督部部门门所所用用快快速速检检测测方方法法大大多多为为国国外外技技术术和和设设备备，已已开开发发出出食食源源性性致致病病菌菌实实时时荧荧光光PCRPCR检测试剂、猪链球菌检测试剂、猪链球菌2 2型多重型多重PCRPCR检测试剂等检测试剂等国国外外FDAFDA细细菌菌分分析析手手册册列列出出的的基基于于DNADNA技技术术（PCRPCR、探探针针）的的商商品品化化检检测测法法有有4 4个个厂厂家家建建立立的的7 7种种微微生生物物的的1616种种方方法法，8 848h48h可可得得准准确确结结果果、比比培培养养方方法法快快速速，比比免免疫疫分分析析方方法法灵灵敏敏；但但操操作作较较繁繁锁锁，检检测测费费用用较较高，且未经验证认可高，且未经验证认可微生物快速检测技术微生物快速检测技术方法检测对象国内外对比生物化学快速检测大肠菌群国内鲜乳中菌落11方法方法检测对象检测对象国内外对比国内外对比免疫分析法：免疫分析法：侧侧流流式式免免疫疫吸吸附附法（胶体金法）、法（胶体金法）、ELISAELISA黄黄曲曲霉霉毒毒素素、脱脱氧氧雪雪腐腐镰镰刀刀 菌菌 烯烯 醇醇（呕呕吐吐毒毒素素）、伏伏马马菌菌素素、玉玉米米赤赤霉霉烯烯酮酮、T-2T-2毒毒素等素等国国内内一一步步式式黄黄曲曲霉霉毒毒素素快快速速检检测测试试纸纸、检检测测试试剂剂盒盒，玉玉米米赤赤酶酶烯烯酮酮检检测测试试剂剂盒盒、赭赭曲曲酶酶素素A A检检测测试试剂剂盒盒、伏伏马马菌菌素素B1B1检检测测试试剂剂盒盒、河河豚豚毒毒素素检检测测试试剂剂盒盒、T2T2毒毒素素检检测测试试剂剂盒盒等等，我我国国部部分分质质检检部部门门检检测测黄黄曲曲霉霉毒毒素素使使用用美美国国CHARMCHARM公公司司生生产产的的Charm Charm II II 76007600系系统统及及ROSAROSA抗抗生生素素快快速速检测仪检测仪国国外外ELISAELISA是是主主流流技技术术，美美国国USDAUSDA要要求求在在官官方方检检查查中中使使用用经经认认证证的的快快速速检检测测方方法法，测测定定谷谷物物中中的的黄黄曲曲霉霉毒毒素素、脱脱氧氧雪雪腐腐镰镰刀刀菌菌烯烯醇醇（呕呕吐吐毒毒素素）、伏伏马马菌菌素素、玉玉米米赤赤霉霉烯烯酮酮等等，目目前前USDAUSDA已已认认可可1010种种黄黄曲曲霉霉毒毒素素ELISAELISA试试剂剂盒盒，检检测测下下限限5ppb5ppb；1212种种呕呕吐吐毒毒素素试试剂剂盒盒，灵灵敏敏度度在在0.25-0.25-5ppm5ppm范范围围内内，其其他他经经AOACAOAC认认证证或或确确证证的的毒毒素素检检测测试试剂剂盒盒有玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素和有玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素和T-2T-2毒素毒素 毒素快速检测技术毒素快速检测技术方法检测对象国内外对比免疫分析法：黄曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌12重金属快速检测技术 方法方法检测对象检测对象国内外对比国内外对比酶抑制检测技术酶抑制检测技术 砷、铅、汞、砷、铅、汞、镉等镉等国内国内研究阶段，还没有经过认证的快速检测方法研究阶段，还没有经过认证的快速检测方法 国外国外脲酶抑制法，限于饮用水中汞的测定脲酶抑制法，限于饮用水中汞的测定 免疫分析法免疫分析法 国内国内研究阶段，未有真正推广使用的商品化产品研究阶段，未有真正推广使用的商品化产品 国外国外成成功功用用于于液液体体样样品品中中的的铟铟()()、汞汞()()、镉镉()()、铅铅()()和和铀铀()()等等的的检检测测，固固体体样样品品重重金金属属提提取取方方法法需进一步研究需进一步研究 化学或传感器检测化学或传感器检测国内国内重金属快速测定仪，检汞管速测盒和检砷管速测盒重金属快速测定仪，检汞管速测盒和检砷管速测盒 国外国外电电化化学学传传感感器器：阳阳极极溶溶出出伏伏安安仪仪，检检测测时时间间5min5min，电电极极为为一一次次性性使使用用，检检出出限限达达ngng级级；生生物物传传感感器器：基基于于脲酶抑制法测汞脲酶抑制法测汞重金属快速检测技术重金属快速检测技术重金属快速检测技术 方法检测对象国内外对比酶抑制检测技术 砷13显色前显色前 显色后显色后快速检测技术和试剂快速检测技术和试剂 我国的成就我国的成就显色前显色后快速检测技术和试剂 我国的成就14快速检测仪器和设备快速检测仪器和设备 我国的成就我国的成就快速检测仪器和设备 我国的成就15 农药残留快速检测技术农药残留快速检测技术u问问题题：酶酶抑抑制制技技术术虽虽然然价价廉廉（分分析析一一个个样样品品平平均均需需1.51.5元元左左右右 ），但但假假阳阳性性率率高高，且且检检测测对对象受限等。象受限等。u建建议议：除除解解决决“关关键键酶酶”问问题题，重重点点发发展展具具有有“类类特特异异性性”的的免免疫疫分分析析技技术术，这这也也是是国国外外目目前发展的主流技术。前发展的主流技术。存在的问题及建存在的问题及建议议 农药残留快速检测技术问题：酶抑制技术虽然价廉（分析一个样16n问问题题：兽兽药药残残留留快快速速检检测测50%50%以以上上依依赖赖进进口口仪仪器器和和试试剂剂盒盒（卡卡），价价格格较较高高，如如莱莱克克多多巴巴胺胺检检测测试试剂剂盒盒32003200元元/96/96次次，而而国国产产试试剂剂盒盒因因价价格格与与国国外外进进口口产产品品差差距距不不大大（是是进进口口产产品品价价格格的的80%80%左左右右），推推广广受受到到限制。限制。n建建议议：重重点点发发展展“类类”兽兽药药残残留留免免疫疫检检测测试试剂剂盒盒和和生生物物芯芯片片，扩扩大大检检测测靶靶标标物物的的范范围围。如如国国产产快快速速检检测测试试剂盒市场占有率增加，价格将会有所下降剂盒市场占有率增加，价格将会有所下降。存在的问题及建存在的问题及建议议 兽药残留快速检测技术兽药残留快速检测技术问题：兽药残留快速检测50%以上依赖进口仪器和试剂盒（卡），17 存在的问题及建存在的问题及建议议微生物快速检测技术微生物快速检测技术 我我国国致致病病微微生生物物快快速速检检测测的的主主流流技技术术为为国国外外技技术术和和产品。产品。建建议议：重重点点发发展展免免疫疫分分析析技技术术、PCRPCR技技术术、DNADNA探探针针检测技术。检测技术。毒素快速检测技术毒素快速检测技术 关关于于毒毒素素的的快快速速检检测测技技术术在在国国内内应应用用较较少少，由由无无锡锡微微生生物物研研究究所所生生产产的的黄黄曲曲霉霉毒毒素素M1M1检检测测试试剂剂盒盒（800800元元/24/24孔孔）和和黄黄曲曲霉霉毒毒素素B1B1检检测测试试剂剂盒盒（400400元元/24/24孔孔）有有一一定定应应用用；而而玉玉米米赤赤酶酶烯烯酮酮检检测测试试剂剂盒盒、呕呕吐吐毒毒素素检检测测试试剂盒等（剂盒等（40004000元元/96/96孔左右）均为进口产品。孔左右）均为进口产品。建议：发展重要毒素的免疫分析技术。建议：发展重要毒素的免疫分析技术。存在的问题及建议微生物快速检测技术18快速检测技术发展趋势检测速度要求越来越快检测速度要求越来越快检测方法的灵敏度要求越来越高检测方法的灵敏度要求越来越高检测方法的类特异性要求越来越高检测方法的类特异性要求越来越高多种污染物同时分析多种污染物同时分析检测方法的操作更简便、易操作检测方法的操作更简便、易操作检测方法的检测方法的“无试剂化无试剂化”、仪器的微型化和便携化、仪器的微型化和便携化快速检测技术发展趋势检测速度要求越来越快检测方法的灵敏度要求19 结语结语 针针对对我我国国农农产产品品质质量量安安全全快快速速检检测测技技术术现现状状，根根据据我我国国国国情情和和已已有有研研究究基基础础，整整和和各各方方研研究究力力量量，重重点点突突破破农农药药、兽兽药药、致致病病微微生生物物、毒毒素素等等的的快快速速检检测测，实实现现稳稳定定、特特异异、灵灵敏敏、快快速速、低低成成本本检检测测目目标标，方方便便市市场场流流通通领领域域的的各种检测和鉴定需求。各种检测和鉴定需求。结语20请批评指正！谢谢21