第六章 兽用基因工程生物制品的安全性

第六章第六章 兽用基因工程生物制品兽用基因工程生物制品 的安全性的安全性第一节第一节 兽用基因工程生物制品概况兽用基因工程生物制品概况第二节第二节 兽用基因工程生物制品的安全性兽用基因工程生物制品的安全性第三节第三节 兽用基因工程生物制品安全性兽用基因工程生物制品安全性 评价概况评价概况第四节第四节 兽用基因工程生物制品安全管理兽用基因工程生物制品安全管理兽用基因工程生物制品是用微生物、微生物代谢产兽用基因工程生物制品是用微生物、微生物代谢产物物、原虫原虫、血液或组织等加工制成，作为预防血液或组织等加工制成，作为预防、治治疗疗、诊断特定传染病或其他疾病的制剂。诊断特定传染病或其他疾病的制剂。作为畜禽疾病预防控制的利器，兽用生物制品在畜作为畜禽疾病预防控制的利器，兽用生物制品在畜牧业的发展中发挥着越来越重要的作用，其研发和牧业的发展中发挥着越来越重要的作用，其研发和生产应用促进了畜牧业的繁荣。生产应用促进了畜牧业的繁荣。由于其本身的特性和安全管理方面的漏洞，在研发由于其本身的特性和安全管理方面的漏洞，在研发和应用中也可能出现某些生物灾害。概括起来主要和应用中也可能出现某些生物灾害。概括起来主要有：实验研究人员的感染、病原微生物对环境的污有：实验研究人员的感染、病原微生物对环境的污染、以及遗传性状不稳定。染、以及遗传性状不稳定。兽用生物制品的生物安全问题直接或间接影响人类兽用生物制品的生物安全问题直接或间接影响人类和动物的身体健康和生命安全。和动物的身体健康和生命安全。第一节第一节 兽用基因工程生物制品概况兽用基因工程生物制品概况 目前的兽用基因工程生物制品，可分为基因工程目前的兽用基因工程生物制品，可分为基因工程亚单位疫苗、重组活载体疫苗、基因缺失疫苗、亚单位疫苗、重组活载体疫苗、基因缺失疫苗、核酸疫苗、多肽疫苗和转基因植物疫苗等几类。核酸疫苗、多肽疫苗和转基因植物疫苗等几类。1.基因工程亚单位疫苗或基因工程蛋白质疫苗基因工程亚单位疫苗或基因工程蛋白质疫苗通过基因工程将病原微生物的主要免疫原基因在通过基因工程将病原微生物的主要免疫原基因在宿主细胞表达，再从表达产物制备而成。其产品宿主细胞表达，再从表达产物制备而成。其产品或是病原蛋白质或是病原蛋白质(或亚单位或亚单位)，或是其抗原决定簇。，或是其抗原决定簇。这类疫苗可能产生的问题这类疫苗可能产生的问题：与原始蛋白质的结构与原始蛋白质的结构差异、异源蛋白质对宿主的毒性、细菌表达系统差异、异源蛋白质对宿主的毒性、细菌表达系统对外源基因的识别、对外源基因的识别、T细胞对蛋白成分非敏感。细胞对蛋白成分非敏感。对上述问题的解决途径包括对上述问题的解决途径包括：采用真核生物细胞采用真核生物细胞为宿主、采用能分泌重组蛋白质的细菌为宿主、为宿主、采用能分泌重组蛋白质的细菌为宿主、突变外源基因的糖基化位点。突变外源基因的糖基化位点。目的基因的获取目的基因的获取工程菌的构建工程菌的构建目的基因表达目的基因表达蛋白质分蛋白质分离与纯化离与纯化产品产品2.核酸疫苗核酸疫苗核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因(DNA 或或RNA)直接导入动物体细胞内直接导入动物体细胞内,并通过宿主细胞并通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白的表达系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的。以达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗的优点是：免疫保护力增强、制备简单、核酸疫苗的优点是：免疫保护力增强、制备简单、同种异株交叉保护、持久免疫应答。同种异株交叉保护、持久免疫应答。核酸疫苗的缺点是：免疫原性较低、用量大、真核核酸疫苗的缺点是：免疫原性较低、用量大、真核细胞不存在质粒细胞不存在质粒DNA的主动的主动 核质核质 间传输途径。间传输途径。提高核酸疫苗免疫原性的尝试主要有：抗原基因上提高核酸疫苗免疫原性的尝试主要有：抗原基因上游插入游插入RNARNA复制酶基因、在抗原基因下游插入细胞复制酶基因、在抗原基因下游插入细胞因子编码基因、提高细胞转染效率、改变重组质粒因子编码基因、提高细胞转染效率、改变重组质粒非编码区。非编码区。核酸疫苗通常不能在动物细胞中长期复制或不复制。核酸疫苗通常不能在动物细胞中长期复制或不复制。3.重重组活活载体疫苗体疫苗重重组活活载体疫苗包括：重体疫苗包括：重组DNA病毒病毒疫苗和重疫苗和重组RNA病毒疫苗。病毒疫苗。重重组DNA病毒病毒疫苗是将抗原基因疫苗是将抗原基因转移至病毒移至病毒DNA载体上而制体上而制备的重的重组DNA疫苗。疫苗。重重组RNA病毒疫苗是将抗原基因病毒疫苗是将抗原基因转移至病毒移至病毒RNA载体上而制体上而制备的重的重组RNA疫苗。疫苗。重重组活活载体疫苗的体疫苗的优点主要在于：宿主体内有点主要在于：宿主体内有识别病毒的免疫系病毒的免疫系统、病毒能主、病毒能主动将其将其DNA或或RNA A传输至至细胞内、表达量大。胞内、表达量大。重重组活活载体疫苗的主要不足在于：体疫苗的主要不足在于：对免疫力弱者免疫力弱者可能致病、容易出可能致病、容易出现非相关免疫反非相关免疫反应、需要避开、需要避开先天或后天的抗病毒免疫，等等。先天或后天的抗病毒免疫，等等。第二节第二节 兽用基因工程生物制品的安全性兽用基因工程生物制品的安全性兽用基因工程生物制品的应用越来越广泛，其安兽用基因工程生物制品的应用越来越广泛，其安全性一直受到人们的密切关注。全性一直受到人们的密切关注。对兽用基因工程生物制品安全性的考虑，主要在对兽用基因工程生物制品安全性的考虑，主要在以下几方面以下几方面：对使用动物的毒性、致癌的可能性、对使用动物的毒性、致癌的可能性、外源外源DNA与宿主染色体整合的可能性、诱导产生与宿主染色体整合的可能性、诱导产生抗抗DNA 抗体的可能性抗体的可能性。对基因工程生物制品使用后的担忧主要是持续表对基因工程生物制品使用后的担忧主要是持续表达外源抗原可能出现的后果达外源抗原可能出现的后果：产生耐受性、自动产生耐受性、自动免疫、过敏反应和超敏反应等，或最终导致机体免疫、过敏反应和超敏反应等，或最终导致机体免疫机制受抑制而易感染其他病原体。免疫机制受抑制而易感染其他病原体。基因工程生物制品安全性评价应包括基因工程生物制品安全性评价应包括：受体细胞受体细胞的安全性、基因操作的安全性、基因重组活疫苗的安全性、基因操作的安全性、基因重组活疫苗的安全性及工业化生产的潜在安全性。的安全性及工业化生产的潜在安全性。一、受体细胞的一、受体细胞的安全性安全性受体细胞是用于制备基因工程生物制品的表达系受体细胞是用于制备基因工程生物制品的表达系统。可分为原核表达系统和真核表达系统两大类。统。可分为原核表达系统和真核表达系统两大类。选择受体细胞时应重点考虑选择受体细胞时应重点考虑：安全性高且不造成生物污染；安全性高且不造成生物污染；便于重组便于重组DNA导入；导入；便于筛选克隆子；便于筛选克隆子；能使重组能使重组DNA分子在细胞内分子在细胞内稳定维持；稳定维持；适合外源基因高效表达和表达产物分泌或累积；适合外源基因高效表达和表达产物分泌或累积；对遗传密码无偏倚（没有选择性表达）；对遗传密码无偏倚（没有选择性表达）；遗传性稳定、易于扩大培养或发酵；遗传性稳定、易于扩大培养或发酵；对真核表达系统还要求有较好的翻译后加工机制。对真核表达系统还要求有较好的翻译后加工机制。1.原核生物表达系统原核生物表达系统原核生物表达系原核生物表达系统是研究最透是研究最透彻的表达系的表达系统，常，常用用细菌作菌作为受体，具有操作受体，具有操作简单、价格低廉、外、价格低廉、外源基因表达水平高的特点。最源基因表达水平高的特点。最为常常 用的是大用的是大杨杆杆菌和枯草芽菌和枯草芽孢杆菌。杆菌。大大肠杆菌是杆菌是肠道菌群的道菌群的组成部分，大部分成部分，大部分为非致非致病病 菌，但某些血清型可引起腹泻和菌，但某些血清型可引起腹泻和败血症。作血症。作为外源基因受体的大外源基因受体的大肠杆菌菌株杆菌菌株遗传背景清楚、目背景清楚、目的基因表达水平高、培养周期短、抗的基因表达水平高、培养周期短、抗污染能力染能力强强。枯草芽枯草芽孢杆菌是需氧的革杆菌是需氧的革兰氏阳性菌，氏阳性菌，细胞内存胞内存在着分泌系在着分泌系统，常常能将重，常常能将重组蛋白蛋白质分泌到培养分泌到培养基中。枯草杆菌本身没有致病性，但其可用的基中。枯草杆菌本身没有致病性，但其可用的载体株有限，外源基因的表达量也低于大体株有限，外源基因的表达量也低于大肠杆菌。杆菌。大大肠肠杆杆菌菌枯草枯草芽孢芽孢杆菌杆菌2.真核表达系统真核表达系统原核表达系统表达量高，但目的蛋白质常以包涵原核表达系统表达量高，但目的蛋白质常以包涵体出现而致纯化难，缺翻译后加工而使表达产物体出现而致纯化难，缺翻译后加工而使表达产物活性较低，促使人们寻找合适的真核表达系统。活性较低，促使人们寻找合适的真核表达系统。目前常用的真核表达系统有：酵母表达系统、昆目前常用的真核表达系统有：酵母表达系统、昆虫细胞表达系统和哺乳动物细胞表达系统。虫细胞表达系统和哺乳动物细胞表达系统。酵母菌的遗传背景清楚、遗传操作容易，可微生酵母菌的遗传背景清楚、遗传操作容易，可微生物化操作，外源基因在酵母细胞中能分泌表达，物化操作，外源基因在酵母细胞中能分泌表达，但只能进行有限的翻译后加工修饰。但只能进行有限的翻译后加工修饰。昆虫细胞表达系统多利用杆状病毒为外源基因载昆虫细胞表达系统多利用杆状病毒为外源基因载体，利用昆虫细胞表达目的蛋白，但分泌性较差体，利用昆虫细胞表达目的蛋白，但分泌性较差哺乳细胞表达系统培养细胞如哺乳细胞表达系统培养细胞如CHOCHO、COHCOH、BHKBHK、NIH3T3NIH3T3为受体，以病毒或质粒为外源基因载体。为受体，以病毒或质粒为外源基因载体。主要缺点是培养和操作难度大，且不能持久表达主要缺点是培养和操作难度大，且不能持久表达 啤酒酵母啤酒酵母NIH3T3CHO BHK 二、基因操作的安全性二、基因操作的安全性基因操作主要包括：目的基因基因操作主要包括：目的基因获取、取、载体制体制备、基、基因重因重组、重、重组子子转化与外源基因表达等步化与外源基因表达等步骤。1.目的基因的分子特征目的基因的分子特征表达载体相关资料：目的基因与载体图谱，目的表达载体相关资料：目的基因与载体图谱，目的基因供体、结构功能及安全，其他元件安全记录。基因供体、结构功能及安全，其他元件安全记录。目的基因在表达系统中的整合情况：插入片段的目的基因在表达系统中的整合情况：插入片段的位点、边界、拷贝数、全长位点、边界、拷贝数、全长DNADNA序列，宿主序列，宿主DNADNA序序列被删除或基因失活情况。列被删除或基因失活情况。外源插入片段的表达情况：转录水平外源插入片段的表达情况：转录水平(RTPCR,Northern)、翻译水平、翻译水平(ELISA,Western)。蓝舌病毒蓝舌病毒BL3基因基因-pFB1表达载体表达载体2 基因的基因的遗传稳定性定性基因操作的遗传稳定性主要涉及质粒的稳定性，基因操作的遗传稳定性主要涉及质粒的稳定性，包括分离稳定性和结构稳定性。进行遗传稳定性包括分离稳定性和结构稳定性。进行遗传稳定性鉴定时，应从几个方面入手：鉴定时，应从几个方面入手：目的基因整合的稳定性目的基因整合的稳定性 转化体中目的基因拷贝转化体中目的基因拷贝数、连续三代以上的分离情况数、连续三代以上的分离情况(Southern,PCR)。目的基因表达的稳定性目的基因表达的稳定性 转化体在不同世代中目转化体在不同世代中目的基因的表达情况，即转录、翻译水平的稳定性，的基因的表达情况，即转录、翻译水平的稳定性，需提供不少于三代的试验数据需提供不少于三代的试验数据(Northern,Western,RT-PCR)。目标性状表达的稳定性目标性状表达的稳定性 目标性状在转化体不同目标性状在转化体不同世代中的表现，需提供不少于三代的试验数据。世代中的表现，需提供不少于三代的试验数据。重组载体的安全性：能否向自然界中不含该目的重组载体的安全性：能否向自然界中不含该目的基因的生物转移。基因的生物转移。三、兽用基因重组活疫苗的安全性三、兽用基因重组活疫苗的安全性基因工程重组活疫苗是利用基因工程技术将保护性基因工程重组活疫苗是利用基因工程技术将保护性抗原基因转移到载体（病毒、细菌）中使之表达的抗原基因转移到载体（病毒、细菌）中使之表达的活疫苗。根据其载体的致病性有两个制备途径。活疫苗。根据其载体的致病性有两个制备途径。非致病性载体携带异源抗原基因非致病性载体携带异源抗原基因，产生新的免疫产生新的免疫。致病性载体通过基因修饰或突变使致病性大为减弱致病性载体通过基因修饰或突变使致病性大为减弱或消失，但仍保持免疫原性。或消失，但仍保持免疫原性。基因重组活疫苗可分为：基因缺失疫苗与基因突变基因重组活疫苗可分为：基因缺失疫苗与基因突变疫苗、复制性活载体疫苗、非复制性活载体疫苗三疫苗、复制性活载体疫苗、非复制性活载体疫苗三类。它们之间分别具有各自的特点，在安全性方面类。它们之间分别具有各自的特点，在安全性方面的表现也不尽相同。的表现也不尽相同。1 不同不同类型的基因重型的基因重组活疫苗活疫苗基因缺失疫苗与基因突变活疫苗：属减毒或弱毒基因缺失疫苗与基因突变活疫苗：属减毒或弱毒疫苗，正常使用不引起临床疾病，但可诱发产生疫苗，正常使用不引起临床疾病，但可诱发产生保护性免疫力，对免疫力弱的人可能致病。保护性免疫力，对免疫力弱的人可能致病。复制性活载体疫苗：在接种的动物体内特定免疫复制性活载体疫苗：在接种的动物体内特定免疫基因可随载体生物复制和适量表达，产生抗体。基因可随载体生物复制和适量表达，产生抗体。非复制性活载体疫苗：不能在动物体内复制，但非复制性活载体疫苗：不能在动物体内复制，但特定免疫基因可少量表达而引起免疫反应。特定免疫基因可少量表达而引起免疫反应。活载体疫苗的优点：可同时启动细胞免疫和体液活载体疫苗的优点：可同时启动细胞免疫和体液免疫、可构建多价疫苗、用量少且持续时间长、免疫、可构建多价疫苗、用量少且持续时间长、不影响相关疾病监测和流行病学调查。不影响相关疾病监测和流行病学调查。活载体疫苗的缺点：与野生载体生物发生基因重活载体疫苗的缺点：与野生载体生物发生基因重组的可能性、进化成新毒株的可能性、二次免疫组的可能性、进化成新毒株的可能性、二次免疫的排斥反应、残存毒力问题。的排斥反应、残存毒力问题。2 兽用基因工程活疫苗的安全性问题兽用基因工程活疫苗的安全性问题对人和动物健康的危害：致病性（包括毒性、致癌、对人和动物健康的危害：致病性（包括毒性、致癌、致畸、致突变、致过敏等），抗药性即转基因微生物致畸、致突变、致过敏等），抗药性即转基因微生物的抗药性，食品安全性即接种疫苗后动物性食品是否的抗药性，食品安全性即接种疫苗后动物性食品是否食用安全的问题。食用安全的问题。对生态环境的潜在危害对生态环境的潜在危害 致病性和毒性：与供体微生物和受体微生物相比致病性和毒性：与供体微生物和受体微生物相比 其致病性和毒性是否增加。其致病性和毒性是否增加。生存竞争力：与非转基因微生物相比是否增强。生存竞争力：与非转基因微生物相比是否增强。传播扩散能力：通过水、土、气、动植物等远距离传播扩散能力：通过水、土、气、动植物等远距离 转移的能力转移的能力 遗传变异能力：遗传稳定性与适应性变异、突变率遗传变异能力：遗传稳定性与适应性变异、突变率 遗传转移能力：向非转基因微生物发生遗传物质转移遗传转移能力：向非转基因微生物发生遗传物质转移四、兽用的四、兽用的DNA疫苗的安全性疫苗的安全性 DNA疫苗是将免疫应答目的基因插入质粒载体而疫苗是将免疫应答目的基因插入质粒载体而制备的生物制剂。将其导入动物体后通过宿主细胞制备的生物制剂。将其导入动物体后通过宿主细胞表达系统表达抗原，进而诱生保护性免疫应答。表达系统表达抗原，进而诱生保护性免疫应答。1.DNA疫苗简介疫苗简介DNA 疫苗的给药途径包括：注射、液喷、基因枪、疫苗的给药途径包括：注射、液喷、基因枪、口服和皮内接种等。口服和皮内接种等。DNA 疫苗的主要优点如下：疫苗的主要优点如下：载体结构简单，分子克隆较易；载体结构简单，分子克隆较易；重组重组DNA分子稳定，可制成冻干疫苗，便于贮运分子稳定，可制成冻干疫苗，便于贮运 比传统疫苗更安全，使用过程中不需用佐剂。比传统疫苗更安全，使用过程中不需用佐剂。将几种重组质粒简单组合便可制备成多价疫苗。将几种重组质粒简单组合便可制备成多价疫苗。2 DNA疫苗的安全性疫苗的安全性问题对DNA疫苗的主要担疫苗的主要担忧：重：重组DNA片段可能整合片段可能整合至宿主至宿主DNA而造成插入突而造成插入突变，进而可能致癌或致病；而可能致癌或致病；虽然目前然目前发现整合危整合危险性相当低，但缺乏灵敏有效性相当低，但缺乏灵敏有效的的监测手段，手段，难得得获得准确和全面的数据。得准确和全面的数据。对DNA疫苗使用的安全性疫苗使用的安全性还有一系列有一系列问题需需阐明：明：动物体内究竟是哪些物体内究竟是哪些细胞胞摄取取DNA、在、在哪些哪些细胞中胞中表达、表达的持表达、表达的持续期有多久？期有多久？DNA是否进入细胞核、能否复制、是否能整合？是否进入细胞核、能否复制、是否能整合？外源抗源长期表达能否导致有害的免疫病理反应？外源抗源长期表达能否导致有害的免疫病理反应？对对DNA注射是否会导致产生对注射是否会导致产生对DNA的抗体？或引的抗体？或引起自身免疫反应？起自身免疫反应？减毒菌的转基因产品：减毒菌的转基因产品：主要是活疫苗产品，通过转基因减毒菌的培主要是活疫苗产品，通过转基因减毒菌的培养、收集培养物或离心收集菌体、加入保护养、收集培养物或离心收集菌体、加入保护剂后转入西林瓶、制备液体疫苗或冻干疫苗剂后转入西林瓶、制备液体疫苗或冻干疫苗 要求生产过程严格要求生产过程严格GMP要求组织生产；要求组织生产；要求产品稳定性好、加入的保护剂安全有效，要求产品稳定性好、加入的保护剂安全有效，且没有引入有害物质；且没有引入有害物质；要求生产和加工活动对转基因生物的影响类要求生产和加工活动对转基因生物的影响类型为类型型为类型2；因此，转基因活菌产品的安全性等同于转基因此，转基因活菌产品的安全性等同于转基因的减毒菌株。因的减毒菌株。第三节第三节 兽用基因工程生物制品安全性评价兽用基因工程生物制品安全性评价一、危害性分类标准和安全性评价标准一、危害性分类标准和安全性评价标准1.危害性分类标准危害性分类标准第一类危害性：个体和群体危害性低，不可能引第一类危害性：个体和群体危害性低，不可能引 起健康动物疾病；起健康动物疾病；第二类危害性：中度个体危害、有限群体危害，第二类危害性：中度个体危害、有限群体危害，可能引起动物疾病，正常情况下不会对人可能引起动物疾病，正常情况下不会对人 造成严重危害，具备有效治疗和预防措施造成严重危害，具备有效治疗和预防措施第三类危害性：高度个体危害、低度群体危害，第三类危害性：高度个体危害、低度群体危害，能引起严重的人或动物疾病，但不会引起能引起严重的人或动物疾病，但不会引起 个体间传播，有预防和治疗手段；个体间传播，有预防和治疗手段；第四类危害性：高度个体和群体危害，能致病且第四类危害性：高度个体和群体危害，能致病且 不可预防或治疗，可个体间及人畜间传播。不可预防或治疗，可个体间及人畜间传播。2.安全性安全性评价价标准准第一第一类制品的安全性制品的安全性评价：价：评价的重点是生物体的价的重点是生物体的分子特性及受体生物基因和缺失或增加基因的特性。分子特性及受体生物基因和缺失或增加基因的特性。分子特性分子特性：受体的特性、缺失的特性、供体基因的：受体的特性、缺失的特性、供体基因的 特性特性、重重组体的特性体的特性、基基础种子的特性种子的特性 生物学特性生物学特性：包括：包括 受体、供体和基受体、供体和基础种子的生物种子的生物 学特性、安全等学特性、安全等级及其及其检测方法方法 第二第二类制品的安全性制品的安全性评价：价：评价的重点是缺失基因、价的重点是缺失基因、疫苗生物和受体生物的分子特性和生物学特性。疫苗生物和受体生物的分子特性和生物学特性。分子特性分子特性：受体的特性、缺失的特性、基因缺失体：受体的特性、缺失的特性、基因缺失体 的特性、基的特性、基础种子的分子特性；种子的分子特性；生物学特性生物学特性：包括受体和基：包括受体和基础种子的生物学特性、种子的生物学特性、安全安全记录、遗传稳定性及潜在危害性。定性及潜在危害性。3.第三第三类制品的安全性制品的安全性评价价评价的重点是基因修饰的载体活疫苗的特性鉴定评价的重点是基因修饰的载体活疫苗的特性鉴定和对供体、受体及重组基础种子的分子和生物学和对供体、受体及重组基础种子的分子和生物学特性的鉴定。特性的鉴定。分子特性：包括分子特性：包括 受体、供体、重组生物体和基础受体、供体、重组生物体和基础种子的分子特性和制备过程中的改变。种子的分子特性和制备过程中的改变。生物学特性：包括生物学特性：包括 受体、供体和基础种子的生物受体、供体和基础种子的生物学特性学特性，毒力毒力、宿主特异性宿主特异性、遗传稳定性等资料遗传稳定性等资料。4.其他制品的安全性评价其他制品的安全性评价其他动物用生物制品包括其他动物用生物制品包括DNA疫苗、干扰素、生疫苗、干扰素、生化制品等，可参照动物用或植物用转基因微生物化制品等，可参照动物用或植物用转基因微生物的要求进行评价。的要求进行评价。进口兽用基因工程生物制品评价重点，是以控制进口兽用基因工程生物制品评价重点，是以控制污染制品进口，防止外来动物疫病进入。评价对污染制品进口，防止外来动物疫病进入。评价对象既包括制品本身，也包括其研制和生产过程。象既包括制品本身，也包括其研制和生产过程。第四节第四节 兽用基因工程生物制品安全管理兽用基因工程生物制品安全管理兽用基因工程生物制品的安全性问题可能出现在兽用基因工程生物制品的安全性问题可能出现在研发、生产、使用、转运和废弃物处理等各个环研发、生产、使用、转运和废弃物处理等各个环节中，其安全管理也应复盖上述的各个环节。节中，其安全管理也应复盖上述的各个环节。兽用基因工程活疫苗在环境释放后的分子特性、兽用基因工程活疫苗在环境释放后的分子特性、生物学特性及潜在危险性的表现可能更为明显。生物学特性及潜在危险性的表现可能更为明显。兽用基因工程生物制品的安全性问题主要集中于兽用基因工程生物制品的安全性问题主要集中于对人类和动物健康和对环境潜在危害两个方面。对人类和动物健康和对环境潜在危害两个方面。安全管理的目的是将其研发、生产、使用、转运安全管理的目的是将其研发、生产、使用、转运和废弃物处理等各个环节中可能发生的危害降到和废弃物处理等各个环节中可能发生的危害降到最低程度，保障人类、动物和环境的安全。最低程度，保障人类、动物和环境的安全。一、国外的安全管理一、国外的安全管理 随着兽医生物技术的发展，兽用基因工程生物制随着兽医生物技术的发展，兽用基因工程生物制品安全性问题日益引起人们的重视，各国政府均品安全性问题日益引起人们的重视，各国政府均制定和采取一系列生物安全控制的对策和措施。制定和采取一系列生物安全控制的对策和措施。1 1 法律法规体系法律法规体系采取立法和条例的形式予以引导和管理。采取立法和条例的形式予以引导和管理。美国：原则上是在现有法律、法规基础上由有关美国：原则上是在现有法律、法规基础上由有关行政部门实施相关产品和过程的安全性管理，主行政部门实施相关产品和过程的安全性管理，主要管理部门有农业部、卫生部和环保署。要管理部门有农业部、卫生部和环保署。欧盟：主要是法规、条例指导，各成员国再建立欧盟：主要是法规、条例指导，各成员国再建立自己的法规体系，并由各国政府有关部门行使。自己的法规体系，并由各国政府有关部门行使。其他国家大多参照采用美国或欧盟的管理模式。其他国家大多参照采用美国或欧盟的管理模式。2 安全管理安全管理兽用基因工程生物制品的分类及其管理：兽用基因工程生物制品的分类及其管理：第一类制品第一类制品 主要是核酸疫苗和亚单位疫苗，且对主要是核酸疫苗和亚单位疫苗，且对环境不造成危害和不形成新的安全性问题，按常规环境不造成危害和不形成新的安全性问题，按常规产品的要求进行管理。产品的要求进行管理。第二类制品第二类制品 主要是基因缺失和基因突变活疫苗，主要是基因缺失和基因突变活疫苗，需要对缺失片段或修饰基因的特性及表型变化进行需要对缺失片段或修饰基因的特性及表型变化进行安全性评价。安全性评价。第三类制品第三类制品 主是重组主是重组DNADNA疫苗，应保证其使用与野疫苗，应保证其使用与野生株比较，不增强毒力、致病性和存活力。生株比较，不增强毒力、致病性和存活力。活基因工程生物制品的安全管理：严格管理，一般活基因工程生物制品的安全管理：严格管理，一般不审批环境释放和商业化生产。管理分四阶段，即不审批环境释放和商业化生产。管理分四阶段，即实验室安全管理、试验方案及实验室试验管理、环实验室安全管理、试验方案及实验室试验管理、环境释放审查及野外试验管理、产品注册审查。境释放审查及野外试验管理、产品注册审查。二、国内安全管理二、国内安全管理现有相关管理法规主要有：现有相关管理法规主要有：基因工程安全管理办基因工程安全管理办法法和和农业生物基因工程安全管理实施办法农业生物基因工程安全管理实施办法。我国对基因工程工作的安全管理实行安全等级控制。我国对基因工程工作的安全管理实行安全等级控制。由农业部对兽用基因工程生物制品实施管理，实行由农业部对兽用基因工程生物制品实施管理，实行分安全等级、分段审批制度，但缺乏环境释放和商分安全等级、分段审批制度，但缺乏环境释放和商业化后的安全监控措施。业化后的安全监控措施。现阶段急需尽快制定的法规主要有：现阶段急需尽快制定的法规主要有：国家生物安国家生物安全法全法、国家生物安全条例国家生物安全条例和和实验室生物安实验室生物安全准则全准则，等等。，等等。需加强监督管理，实行全过程各个环节的监督，特需加强监督管理，实行全过程各个环节的监督，特别是对环境释放后的监督管理。别是对环境释放后的监督管理。