哈医大药分第07章胺类药物的分析11

第七章第七章 芳香胺类药物的分析芳香胺类药物的分析本章主要内容本章主要内容n n芳胺类药物的分析芳胺类药物的分析n n苯乙胺类药物的分析苯乙胺类药物的分析n n苯丙胺类药物的分析苯丙胺类药物的分析第一章第一章 芳胺类药物的分析芳胺类药物的分析一、基本结构与化学性质一、基本结构与化学性质 Structure and properties Structure and properties 常见的芳胺类药物常见的芳胺类药物 对氨基苯甲酸酯类药物对氨基苯甲酸酯类药物重氮化偶合重氮化偶合与芳醛缩合与芳醛缩合-Schiff碱碱易氧化变色易氧化变色易发生水解易发生水解侧链烃胺侧链烃胺-碱性碱性苯佐卡因（苯佐卡因（benzocaine）盐酸普鲁卡因（盐酸普鲁卡因（procaine hydrochloride）局部麻醉药。局部麻醉药。浸润麻醉、浸润麻醉、阻滞麻醉、阻滞麻醉、蛛网膜下腔麻醉、蛛网膜下腔麻醉、硬膜外麻醉和封闭疗法硬膜外麻醉和封闭疗法局部麻醉药。局部麻醉药。盐酸丁卡因盐酸丁卡因(tetracaine hydrochloride)盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因胺(procainamide hydrochloride)其局麻作用比普鲁卡因强，其局麻作用比普鲁卡因强，毒性亦较大，能透过粘膜毒性亦较大，能透过粘膜主要用于粘膜麻醉主要用于粘膜麻醉眼科手术眼科手术前表面麻醉前表面麻醉用于各种心律失常用于各种心律失常但因其促心律失常作用和其他不良反应，但因其促心律失常作用和其他不良反应，现仅推荐用于危及生命的室性心律失常。现仅推荐用于危及生命的室性心律失常。酰胺类酰胺类药物的基本结构药物的基本结构酰胺结构酰胺结构水解后具有芳伯胺基水解后具有芳伯胺基酚羟基酚羟基与与FeCl3显色显色侧链烃胺侧链烃胺弱碱性，与生物碱沉淀剂弱碱性，与生物碱沉淀剂与重金属离子反应与重金属离子反应有色配位化合物有色配位化合物对乙酰氨基酚（扑热息痛）对乙酰氨基酚（扑热息痛）(paracetamol）用于感冒发烧、关节痛、神经痛用于感冒发烧、关节痛、神经痛偏头痛、癌性痛及术后止痛。偏头痛、癌性痛及术后止痛。醋氨醋氨苯砜苯砜(acedapsone)抗麻风药物。抗麻风药物。盐酸利多卡因盐酸利多卡因（lidocaine hydrochloride）本品为局麻药。本品为局麻药。主要用于表面麻醉主要用于表面麻醉（胸腔镜检查和腹腔手术时（胸腔镜检查和腹腔手术时作粘膜麻醉用）作粘膜麻醉用）盐酸布比卡因盐酸布比卡因（bupivacaine hydrochloride）用于局部浸润麻醉用于局部浸润麻醉外周神经阻滞外周神经阻滞椎管内阻滞。椎管内阻滞。（一）具有芳伯氨基（二）酯键或酰胺键（三）具脂烃胺侧链（四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。（六）UV（七）IR（五）某些特征取代基（如酚羟基）的反应二、鉴别试验二、鉴别试验（identification test)（一）重氮化偶合反应芳香第一胺类鉴别反应直接：盐酸普鲁卡因苯佐卡因盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 ChP（2005）鉴别鉴别 （1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录（附录）供试品供试品50mg稀盐酸稀盐酸1ml溶解溶解放冷放冷NaNO20.1mol/L数滴数滴碱性碱性-萘酚萘酚数滴数滴橙黄橙黄-猩红色猩红色间接：对乙酰氨基酚醋氨苯砜对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 ChP（2005）鉴别鉴别 （2）NaNO2试液试液碱性碱性-萘酚萘酚2ml红红色色水水3ml稀释稀释供试品供试品约约0.1g稀盐酸稀盐酸5ml加热加热40min放冷放冷5滴滴取取0.5ml+HNO3N-亚硝基化合物亚硝基化合物（二）三氯化铁反应对乙酰氨基酚（三）与重金属离子反应（三）与重金属离子反应 1.与铜和钴离子反应与铜和钴离子反应 黄色黄色2羟肟酸铁盐反应羟肟酸铁盐反应 3与汞离子的反应与汞离子的反应 对氨基苯甲酸酯类药物显对氨基苯甲酸酯类药物显红色或橙黄色红色或橙黄色区别区别（四）水解产物的反应1.盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 ChP（2005）鉴别鉴别供试品供试品约约0.1g水水2ml溶解溶解10%NaOH1ml白色白色沉淀沉淀 油状油状对氨基苯甲酸钠对氨基苯甲酸钠 蒸汽蒸汽盐酸盐酸白色白色沉淀沉淀过量过量盐酸盐酸普鲁卡因普鲁卡因不溶于水不溶于水二乙胺基乙醇二乙胺基乙醇OHCH2CH2N(C2H5)2溶于水溶于水普鲁卡因普鲁卡因不溶于水不溶于水2.苯佐卡因苯佐卡因 ChP（2005）鉴别鉴别 （2）取本品约）取本品约0.1g，加氢氧化钠试液加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。生碘仿的臭气。（五）制备衍生物测熔点（五）制备衍生物测熔点1三硝基苯酚衍生物三硝基苯酚衍生物 盐酸利多卡因盐酸利多卡因 ChP（2005）鉴鉴别别 取取本本品品0.2g，加加水水20ml溶解。溶解。（1）取取溶溶液液10ml，加加三三硝硝基基苯苯酚酚试试液液10ml，即即生生成成沉沉淀淀；滤滤 过过，沉沉 淀淀 熔熔 点点 为为 228232，熔融时同时分解。，熔融时同时分解。2.硫氰酸盐衍生物硫氰酸盐衍生物 盐酸丁卡因盐酸丁卡因ChP（2005）鉴鉴别别 （1）取取本本品品约约0.1g，加加5%醋醋酸酸钠钠溶溶液液10ml溶溶解解后后，加加25%硫硫氰氰酸酸铵铵溶溶液液1ml，即即析析出出白白色色结结晶晶；滤滤过过，结结晶晶用用水水洗洗涤涤，在在80干干燥燥，熔熔点点约为约为131。盐酸布比卡因盐酸布比卡因 ChP（2005）鉴鉴别别（2）取取本本品品，精精密密称称定定，按按干干燥燥品品计计算算，加加0.01mol/L盐盐酸酸溶溶液液制制成成每每1ml中中含含0.40mg的的溶溶液液，照照分分光光光光度度法法（附附录录A）测测定定，在在263nm与与271nm的的波波长长处处有有最最大大吸吸收收；其其吸吸收收度度分分别别为为0.530.58与与0.430.48。（六）（六）UV （七）（七）IR 盐酸布比卡因盐酸布比卡因 ChP（2005）鉴鉴别别（3）本本品品的的红红外外光光吸吸收收图图谱谱与对照的图谱（光谱集与对照的图谱（光谱集324图）一致。图）一致。三、杂质检查三、杂质检查(impurities test)（一）对乙酰氨基酚的杂质检查一般杂质：一般杂质：酸度、氯化物、硫酸盐、酸度、氯化物、硫酸盐、重金属、水分、炽灼残渣重金属、水分、炽灼残渣特殊杂质：特殊杂质：乙醇溶液的澄清度和颜色乙醇溶液的澄清度和颜色有关物质（对氯乙酰苯胺）有关物质（对氯乙酰苯胺）对氨基酚对氨基酚水解水解还原还原Fe粉粉乙酰化乙酰化n生产中的还原剂带入生产中的还原剂带入 则产生浑浊。则产生浑浊。1、乙醇溶液的澄清度和颜色乙醇溶液的澄清度和颜色n对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 性状：性状：白色结晶或结晶性粉末白色结晶或结晶性粉末 易溶于热水、乙醇易溶于热水、乙醇 略溶于水略溶于水Fe粉粉 对氨基酚氧化后形成对氨基酚氧化后形成 有色氧化物，在乙醇有色氧化物，在乙醇 中显橙红色或棕色中显橙红色或棕色2.有关物质杂质来源中间体、副产物及分解产物对氯乙酰苯胺对氯乙酰苯胺 杂质对照品法杂质对照品法水解水解还原还原Fe粉粉乙酰化乙酰化副反应副反应还原还原乙酰化乙酰化n n样品液和对照液样品液和对照液样品液和对照液样品液和对照液：检查方法TLC对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚1g乙醚乙醚5ml离心离心上清液上清液对氯乙酰苯胺对氯乙酰苯胺50g/ml200l40l限量？2.对氨基酚杂质来源中间体、水解产物反应原理配位化合物配位化合物检查方法对照法 取本品取本品1.0g，加甲醇溶液加甲醇溶液（12）20ml溶解后，加碱性溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液亚硝基铁氰化钠试液1m1，摇匀，摇匀，放置放置30min；如显色，与对乙酰如显色，与对乙酰氨基酚对照品氨基酚对照品1.0g加对氨基酚加对氨基酚50 g用同一方法制成的对照液用同一方法制成的对照液比较，不得更深（比较，不得更深（0.005）。）。(二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查检查方法TLC杂质对照品法杂质来源水解产生（一）亚硝酸钠滴定法（一）亚硝酸钠滴定法 1.原理原理 具芳伯氨基的药物具芳伯氨基的药物四、含量测定四、含量测定具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。2.主要测定条件主要测定条件（1）加入适量）加入适量KBr加速反应加速反应 KBr为催化剂为催化剂NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2O 在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：NOCl（氯化亚酰胺）（氯化亚酰胺）（1）K1（2）K2 K1 300 K2 加加入入KBr，可可增增大大被被测测溶溶液液中中NO+的的浓度，所以能加快重氮化反应速度浓度，所以能加快重氮化反应速度HCl+KBrHBr+KCl（2）酸的种类及其浓度）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：在不同酸中重氮化反应的速度为：HBrHCl H2SO4 HNO3盐酸盐酸 1:2.56；加入盐酸：加入盐酸：重氮化反应速度加快；重氮化反应速度加快；重氮盐在酸性溶液中稳定；重氮盐在酸性溶液中稳定；防防止止生生成成偶偶氮氮氨氨基基化化合合物物，而而影影响响测定结果测定结果酸度过大，游离酸度过大，游离Ar-NH2量减小，反应减慢量减小，反应减慢（3）室温条件下滴定）室温条件下滴定 1030（4）滴定速度：先快后慢）滴定速度：先快后慢 滴定管尖端插入液面下滴定管尖端插入液面下2/3处，滴处，滴定液一次大部分放下，近终点时方定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定改为慢速滴定 3.指示终点的方法指示终点的方法（1）永停滴定法）永停滴定法 ChP（2005）、BP（1998）永停滴定法（附录永停滴定法（附录A）调节调节R1使加于电极上的电压约为使加于电极上的电压约为50mV。取供试品适量，精密称定。取供试品适量，精密称定置烧杯中，除另有规定外，可加置烧杯中，除另有规定外，可加水水40ml与盐酸溶液（与盐酸溶液（12）15ml。置电磁搅拌器上，搅拌使置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾溶解，再加溴化钾2g，插，插入入铂铂铂电极铂电极后，将滴定后，将滴定管的尖端插入管的尖端插入液面下约液面下约2/3处处用亚硝酸钠滴定液（用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或或0.05mol/L）迅速）迅速滴定，搅拌。滴定，搅拌。至近终点时，将滴定管的至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电中，继续缓缓滴定，至电流计指针流计指针突然偏转，并不突然偏转，并不再回复再回复，即为滴定终点。，即为滴定终点。（2）电位法电位法 USP（24）（3）外指示剂法）外指示剂法 （4）内指示剂法内指示剂法 4.测定方法测定方法 盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 ChP（2005）取本品约取本品约0.6g，精密称定，照永停滴精密称定，照永停滴定法（附录定法（附录A），），在在1525，用亚，用亚硝酸钠滴定液（硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当相当于于27.28mg的的C13H20N2O2HCl（三）紫外分光光度法（三）紫外分光光度法对乙酰氨基酚在对乙酰氨基酚在0.4氢氧化钠溶氢氧化钠溶液中，于液中，于257nm波长处有最大吸收，波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。及其制剂的含量测定。（二）非水溶液滴定法（二）非水溶液滴定法 脂烃胺侧链，具弱碱性脂烃胺侧链，具弱碱性 对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 ChP（2005）取取本本品品约约40mg，精精密密称称定定，置置25ml量量瓶瓶中中，加加0.4氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液50ml溶溶解解后后，加加水水至至刻刻度度，摇摇匀匀，精精密密量量取取5m1，置置100ml量量瓶瓶中中，加加0.4氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液10m1，加加水水至至刻刻度度，摇摇匀匀，在在257nm的的波波长长处处测测定定吸吸收收度度，按按C8H9NO2的的吸吸收系数收系数 为为715 计算，即得计算，即得。原料药原料药吸收系数法吸收系数法USP（24）对照法对照法 （四）（四）HPLC法法 盐酸普鲁卡因注射液盐酸普鲁卡因注射液 ChP（2005）可可同同时时测测定定盐盐酸酸普普鲁鲁卡卡因因及及其其降降解解产产物对氨基苯甲酸物对氨基苯甲酸 离子抑制色谱法离子抑制色谱法 内标法定量内标法定量盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有（）A.重氮化偶合反应B.羟肟酸铁盐反应C.氧化反应D.磺化反应E.碘化反应采用亚硝酸钠法测定含量的药物有（）A.苯巴比妥B.盐酸丁卡因C.苯佐卡因D.醋氨苯砜E.盐酸去氧肾上腺素下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（）A.乙酰水杨酸B.对氨基水杨酸钠C.对乙酰氨基酚D.普鲁卡因E.苯佐卡因亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（）A.添加BrB.生成NO+BrC生成HBrD.生成Br2E.抑制反应进行中国药典（1990年版）所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为（）A.电位法B.永停法C.外指示剂法D.内指示剂法E.自身指示剂法亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（）A.自身指示剂法B.内指示剂法C.永停法D.外指示剂法E.电位法ChP（2005）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为（）A.自身指示终点法B.电位法指示终点C.永停滴定法D.氧化还原指示剂法E.酸碱指示剂法盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（）A.强酸B.加入适量溴化钾C.室温（1030）下滴定D.滴定管尖端深入液面E.永停法指示终点第二节苯乙胺类药物的分析 苯苯乙胺类药物的基本结构乙胺类药物的基本结构*侧链烃胺侧链烃胺常见的苯乙胺类药物常见的苯乙胺类药物Adrenaline 用于心脏骤停的抢救用于心脏骤停的抢救和过敏性休克的抢救，和过敏性休克的抢救，也可用于其他过敏性也可用于其他过敏性疾病疾病(如支气管哮喘、如支气管哮喘、荨麻疹荨麻疹)的治疗。与局的治疗。与局麻药合用有利局部止麻药合用有利局部止血和延长药效。血和延长药效。Noradrenaline bitartrate盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇一、结构与性质 1.脂烃胺基侧链，显弱碱性脂烃胺基侧链，显弱碱性 2.酚酚羟羟基基，易易氧氧化化变变色色，可可发发生生三氯化铁反应三氯化铁反应 3.具手性碳原子，具旋光性具手性碳原子，具旋光性4.溶溶解解性性 游游离离碱碱难难溶溶于于水水，易易溶溶于有机溶剂，其盐可溶于水于有机溶剂，其盐可溶于水 5.UV 6.IR 7.取取代代基基：具具芳芳伯伯氨氨基基的的盐盐酸酸克克仑仑特特罗罗可可用用重重氮氮化化偶偶合合反反应应鉴鉴别别、亚硝酸钠滴定法测定含量。亚硝酸钠滴定法测定含量。二、鉴别试验1.三氯化铁反应三氯化铁反应2.氧化反应氧化反应3.与甲醛与甲醛硫酸反应硫酸反应4.UV与与IR 5.与与亚亚硝硝基基铁铁氰氰化化钠钠反反应应（Rimini反反应）应）脂肪族伯胺的专属反应脂肪族伯胺的专属反应6、双缩脲反应、双缩脲反应原理：芳环侧链具有原理：芳环侧链具有氨基醇氨基醇结构结构盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱10mg盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素10mg水水1ml水水1ml硫酸铜试液硫酸铜试液NaOH溶液溶液硫酸铜试液硫酸铜试液NaOH溶液溶液蓝蓝紫紫色色紫紫色色乙醚乙醚乙醚乙醚乙乙醚醚层层水水层层乙乙醚醚层层紫紫红红色色三、杂质检查三、杂质检查杂质来源杂质来源 原料残存原料残存 检查方法检查方法 比较法（含量测定法）比较法（含量测定法）（一）酮体的检查 检检查查原原理理 利利用用酮酮体体在在310nm波波长长处处有有最最大大吸吸收收，而而药药物物本本身身在在此此波波长长处处几几乎乎没没有有吸吸收收，规规定定一一定定浓浓度度溶溶液液在在310nm波波长长处处的的吸吸收收度度限限制制酮酮体体的的量。量。（二）有关物质检查二）有关物质检查 盐盐酸酸去去氧氧肾肾上上腺腺素素、硫硫酸酸沙沙丁丁胺胺醇等药物醇等药物 检查方法：检查方法：TLC中高低浓度对比法中高低浓度对比法 配制两种浓度对照溶液配制两种浓度对照溶液（三三）盐盐酸酸苯苯乙乙双双胍胍中中有有关关双双胍胍的的检检查查 检检查查方方法法：纸纸色色谱谱法法（PC）分分离离后后，洗洗脱脱，照照分分光光光光度度法法于于232nm波波长长处处测测定定吸吸收收度度，控控制制吸吸收收度度以以控控制制有关双胍的量有关双胍的量 四、含量测定（一）非水溶液滴定法（一）非水溶液滴定法 原料药原料药脂烃胺基侧链，显弱碱性脂烃胺基侧链，显弱碱性（二二）溴溴量量法法 盐盐酸酸去去氧氧肾肾上上腺腺素素及及其注射液、重酒石酸间羟胺其注射液、重酒石酸间羟胺 反应摩尔比为反应摩尔比为1 6（三）（三）UV 比色法比色法对照法定量对照法定量（四）提取酸碱滴定法（四）提取酸碱滴定法 硫酸苯丙胺及其制剂硫酸苯丙胺及其制剂盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂游离碱不溶于水，易溶于有机溶剂依据性质碱化碱化有机溶剂提取有机溶剂提取（五）（五）HPLC法法 重酒石酸去甲肾上腺素注射液重酒石酸去甲肾上腺素注射液 离子对反相高效液相色谱法离子对反相高效液相色谱法 内标法定量内标法定量 调调节节溶溶液液pH为为3.8，加加入入离离子子对对试试剂十二烷基磺酸钠剂十二烷基磺酸钠例1.能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜色反应的试液为（D）A.浓硫酸B.甲醛试液C.氨试液D.甲醛硫酸试液E.茚三酮试液例2.盐酸异丙肾上腺素的检查项目是（E）A.有关物质B.二苯酮C.盐酸D.醛E.酮体n n对乙酰氨基酚中对氨基酚的检查：取对乙对乙酰氨基酚中对氨基酚的检查：取对乙酰氨基酚酰氨基酚4.0g，加甲醇，加甲醇100ml溶解后，取此溶解后，取此溶液溶液25ml，加碱性亚硝基铁氰化钠试液，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1ml，摇匀，放置，摇匀，放置30分钟，如显色与对氨基分钟，如显色与对氨基50g，用同一方法制成的对照液比较，不，用同一方法制成的对照液比较，不得更深，计算对氨基酚的限量？得更深，计算对氨基酚的限量？n n对乙酰氨基酚的含量测定：精密称取本品对乙酰氨基酚的含量测定：精密称取本品40mg，置，置250ml量瓶中，加量瓶中，加0.4%氢氧化钠氢氧化钠溶液溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取密量取5ml，置，置100ml量瓶中，加量瓶中，加0.4%氢氧氢氧化钠溶液化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，照分，加水至刻度，摇匀，照分光光度法，在光光度法，在257nm的波长处测定吸光度为的波长处测定吸光度为0.572，按，按C8H9NO2的吸收系数为的吸收系数为715计算，计算，即得，求其百分含量？即得，求其百分含量？