生物学发光检测法(ATP)

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生物学发光检测法生物学发光检测法(ATP)(ATP)ATP检测技术应用(国外)l2020世纪世纪8080年代,英国首先研制出便携式年代,英国首先研制出便携式ATPATP检测仪检测仪l随后在欧洲、美国、日本展开应用随后在欧洲、美国、日本展开应用l应用范围涉及食品加工、超市应用范围涉及食品加工、超市、饮食饮食、医药等、医药等行业行业l检测内容包括微生物和食品残渣检测内容包括微生物和食品残渣检测技术应用(国内)l2020世纪末,世纪末,ATPATP检测技术被引进我国检测技术被引进我国l当时,除个别省级卫生监督单位装备,主要在一些外资、当时,除个别省级卫生监督单位装备,主要在一些外资、合资企业用于自检合资企业用于自检l20022002年我国卫生部颁发了食品加工企业的年我国卫生部颁发了食品加工企业的HACCPHACCP实施指南,实施指南,鼓励食品加工企业引入鼓励食品加工企业引入ATPATP检测技术检测技术l20052005年年3 3月卫生部新出台卫生监督机构建设指导意见,月卫生部新出台卫生监督机构建设指导意见,要求省、市、地配置要求省、市、地配置什么是ATPlATPATP三磷酸腺苷【三磷酸腺苷【adenosine triphosphateadenosine triphosphate,C C1010H H1616N N5 5P P3 3O O1313】存在于所有生物】存在于所有生物体中,在细胞内主要作用是提体中,在细胞内主要作用是提供能量供能量l通过检测通过检测ATP ATP,可以间接地证,可以间接地证明生物体的存在明生物体的存在 生物学发光检测法(ATP)原理:ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理,利用“荧光素酶荧光素体系”快速检测三磷酸腺苷(ATP)。由于所有生物活细胞中含有恒量的ATP,细菌细胞裂解时会释放出ATP,ATP自细菌细胞释放出来后,使用荧光虫素和荧光虫素酶可使之释放出能量,这些能量产生莹光,光的强度就代表ATP的量。ATP含量可以清晰地表明样品中微生物与其他生物残余的多少,用于判断卫生状况使用方法-第一步【SWAB】拭抹表面以获取标本拭抹表面以获取标本,如需如需获得清洗水溶液标本,则将棉获得清洗水溶液标本,则将棉拭子浸入水中拭子浸入水中3 3到到4 4秒钟。秒钟。1球管吸阀棉拭棒棉拭子检测管使用方法-第二步SNAP AND SQUEEZE 将拭子插入检测管,用将拭子插入检测管,用拇拇指和中指捏住球管,轻挤球管指和中指捏住球管,轻挤球管两次,挤出球管内液体。两次,挤出球管内液体。2使用方法-第三步INSERT AND DETECT 将检测管放入将检测管放入ATPATP荧光荧光检测仪中,盖上盖子,倒检测仪中,盖上盖子,倒 计计 时开始并检测。时开始并检测。ATP检测反应原理光(光(RLURLU)荧光素酶荧光素酶O2+Mg2+O2+Mg2+氧化荧光素氧化荧光素PPi+AMPPPi+AMP荧荧光光光光度度计计测测量量细胞细胞数量数量D-D-虫荧光素虫荧光素ATPATP微生物微生物植物植物动物动物现场ATP检测的意义lATPATP检测技术实验结果准确可靠,值得信赖。美国多个专业权检测技术实验结果准确可靠,值得信赖。美国多个专业权威机构研究了威机构研究了10001000个以上的样品,这种只需十几秒就能完成个以上的样品,这种只需十几秒就能完成检测的快速检测法所得实验结果检测的快速检测法所得实验结果90%90%以上与以上与24-4824-48小时标准细小时标准细菌培养法菌培养法/平皿法所得结果一致平皿法所得结果一致l使细菌检查的工作量大幅度减轻,实现卫生监控的简捷化、使细菌检查的工作量大幅度减轻,实现卫生监控的简捷化、效率化效率化,但只能,但只能用于用于细菌的定量分析,定性分析可用常规方细菌的定量分析,定性分析可用常规方法进行培养检测。法进行培养检测。l应用于应用于HACCPHACCP的关键环节监测的关键环节监测,方便有效。,方便有效。
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