医学生物化学-基因工程基本原理课件

生物化学基因工程基本原理基因工程基本原理华东理工大学生物化学精品课程组华东理工大学精品课程系列第十五章 基因工程基本原理一、基因工程的定义及主要内容一、基因工程的定义及主要内容二、重组二、重组DNADNA分子引入宿主细胞和筛选鉴定分子引入宿主细胞和筛选鉴定三、克隆基因的表达三、克隆基因的表达四、基因工程的成就和展望四、基因工程的成就和展望一、基因工程定义及主要内容w基因工程也称基因重组技术、基因克隆或分基因工程也称基因重组技术、基因克隆或分子克隆子克隆w是指利用是指利用DNADNA重组技术生产或改造生物产品、重组技术生产或改造生物产品、创建或改良动植物品种以及开发特殊用途的创建或改良动植物品种以及开发特殊用途的微生物等微生物等w是生物工程的重要内容之一是生物工程的重要内容之一返回w主要步骤主要步骤:1 1、构建、构建DNADNA重组分子重组分子2 2、重组、重组DNADNA分子引入宿主细胞和筛选鉴定分子引入宿主细胞和筛选鉴定3 3、基因的表达、基因的表达一、基因工程定义及主要内容返回返回基基因因工工程程基基本本程程序序真核染色体真核染色体DNA克隆载体克隆载体(质粒质粒)限制酶切割限制酶切割限制酶切割并限制酶切割并分离所需片断分离所需片断重组载体重组载体细菌宿主细细菌宿主细胞的转化胞的转化细胞分离细胞分离培养增值培养增值构建DNA重组分子w工具酶工具酶w目的基因的制备目的基因的制备w克隆载体克隆载体wDNADNA分子的体外重组分子的体外重组返回工具酶w限制性内切酶是基因工程中最主要的工具酶限制性内切酶是基因工程中最主要的工具酶wDNADNA连接酶连接酶(DNA(DNA ligase)ligase)、DNADNA聚合酶聚合酶(DNA(DNA polymerasepolymerase)、末端转移酶、末端转移酶(terminal(terminal transferase)transferase)、逆转录酶、逆转录酶(reverse(reverse transcriptase)transcriptase)、核酸酶、核酸酶S1(nucleaseS1(nuclease S1)S1)和和核酸外切酶核酸外切酶(exonuclease)(exonuclease)返回限制性核酸内切酶w能识别能识别DNADNA特定核苷酸序列的核酸内切酶特定核苷酸序列的核酸内切酶分布分布:主要在微生物中。主要在微生物中。特特点点:特特异异性性,即即识识别别特特定定核核苷苷酸酸序序列列,切割特定切点。切割特定切点。结果结果:产生黏性未端产生黏性未端(碱基互补配对碱基互补配对)。举举例例:大大肠肠杆杆菌菌的的一一种种限限制制酶酶能能识识别别GAATTCGAATTC序序列列,并在并在G G和和A A之间切开。之间切开。限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶w由由SmithSmith在在19701970年从流感噬血菌中发现年从流感噬血菌中发现w细菌体内有特异的限制修饰系统细菌体内有特异的限制修饰系统,这种修饰系这种修饰系统是通过特殊的修饰酶在细菌本身统是通过特殊的修饰酶在细菌本身DNADNA的特异的特异识别序列处进行甲基化修饰识别序列处进行甲基化修饰,从而与外源从而与外源DNADNA相区别。这样相区别。这样,限制性核酸内切酶就能去切割限制性核酸内切酶就能去切割破坏外源破坏外源DNA,DNA,而对本身无影响。而对本身无影响。w目前已从原核生物中分离出目前已从原核生物中分离出400400500500多种限多种限制性核酸内切酶制性核酸内切酶限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶w限制性内切酶可识别限制性内切酶可识别4 4或或6 6个特异核苷酸序列个特异核苷酸序列w粘性末端粘性末端:指限制性内切酶的切割部位不在识指限制性内切酶的切割部位不在识别序列的中心轴别序列的中心轴,在断段产生一个短的单股突在断段产生一个短的单股突伸出来的不齐末端。伸出来的不齐末端。w钝性末端钝性末端:指限制性内切酶的切割部位在识别指限制性内切酶的切割部位在识别序列的中心轴处序列的中心轴处,即产生平齐末端。即产生平齐末端。返回几种限制性内切酶的作用位点几种限制性内切酶的作用位点返回几种限制性内切酶的作用位点几种限制性内切酶的作用位点返回目的基因的制备w目的基因就是所需要克隆的外源基因w制备方法:1、人工合成法2、逆转录法3、用限制性内切酶直接从染色体DNA中分离4、用PCR法扩增目的基因片段返回目的基因的制备:人工合成法w较小分子基因可用人工化学合成的方法获得较小分子基因可用人工化学合成的方法获得wDNADNA化学人工合成的方法已经自动化化学人工合成的方法已经自动化w人工合成目的基因的先决条件是基因的核苷人工合成目的基因的先决条件是基因的核苷酸序列是已知的酸序列是已知的w缺点是缺点是:1:1、不能合成太大的基因、不能合成太大的基因;2;2、合成基、合成基因时遗传密码的兼并现象会为选择密码带来因时遗传密码的兼并现象会为选择密码带来很大困难很大困难;3;3、费用较高、费用较高返回目的基因的制备:逆转录法w若所需基因较大若所需基因较大,人工合成有困难人工合成有困难,从组织中从组织中分离提取也不容易分离提取也不容易,则可利用逆转录法合成。则可利用逆转录法合成。w该法是该法是:以编码某特异多肽的以编码某特异多肽的mRNAmRNA为模板为模板,在在逆转录酶的作用下反转录成该多肽逆转录酶的作用下反转录成该多肽mRNAmRNA的互的互补补DNA(cDNA);DNA(cDNA);再以再以cDNAcDNA为模板为模板,在逆转录酶或在逆转录酶或DNADNA聚合酶聚合酶I(I(或其或其KIenowKIenow片段片段)作用下作用下,最终合最终合成编码该多肽的双链成编码该多肽的双链DNA(dsDNA)DNA(dsDNA)。w可用于真核生物目的基因的获得可用于真核生物目的基因的获得返回目的基因的制备:逆转录法返回返回目的基因的制备:逆转录法w用逆转录法合成用逆转录法合成cDNAcDNA的主要问题是的主要问题是:1 1、mRNAmRNA必需提得很纯必需提得很纯2 2、逆转录中常产生各种不完全的逆转录产物、逆转录中常产生各种不完全的逆转录产物,3 3、以单链、以单链cDNAcDNA为模板往往难以合成与单链为模板往往难以合成与单链cDNAcDNA一样长的一样长的dsdscDNA,cDNA,这与实验技术有关。这与实验技术有关。返回用限制酶切法直接从染色体DNA中分离w此方法主要适用于制备原核基因此方法主要适用于制备原核基因w对于物理图谱已清楚的原核基因对于物理图谱已清楚的原核基因,可用限制酶可用限制酶把目的基因切出来把目的基因切出来w鸟枪法是指把目的基因从已用限制酶降解的鸟枪法是指把目的基因从已用限制酶降解的染色体片段群中分离纯化出的方法染色体片段群中分离纯化出的方法,即把包括即把包括目的基因在内的全部目的基因在内的全部DNADNA片段插入到载体片段插入到载体DNADNA(如如pBR322)pBR322)中中,转化大肠杆菌转化大肠杆菌,做成基因文库。做成基因文库。再用目的基因的转录产物作探针再用目的基因的转录产物作探针,通过分子杂通过分子杂交交,选择出含有所需基因的选择出含有所需基因的DNADNA片段。片段。用限制酶切法直接从染色体DNA中分离w此方法的优点是获得的目的基因的组织结构此方法的优点是获得的目的基因的组织结构与天然基因一样与天然基因一样,也具有间隔顺序。也具有间隔顺序。w此方法的缺点是此方法的缺点是:由于含有插入顺序由于含有插入顺序,原始转原始转录本不能被原核细胞识别录本不能被原核细胞识别,并将插入顺序切除并将插入顺序切除,以形成成熟转录本以形成成熟转录本,因此也得不到目的基因的因此也得不到目的基因的产物多肽或蛋白质。产物多肽或蛋白质。返回用PCR方法扩增目的基因片段wPCRPCR是聚合酶链反应的缩写是聚合酶链反应的缩写w是一种在体外模拟天然是一种在体外模拟天然DNADNA复制过程的核酸扩复制过程的核酸扩增技术增技术w在有少量在有少量DNADNA模板、引物、四种模板、引物、四种dNTPdNTP、TaqDNATaqDNA聚合酶、合适的缓冲系统下聚合酶、合适的缓冲系统下,通过仪器控制通过仪器控制DNADNA变性、退火及延伸的温度与时间变性、退火及延伸的温度与时间,来合成来合成新的新的DNADNA链链,新合成的新合成的DNADNA链又可作为下一轮循链又可作为下一轮循环的模板。理论上经环的模板。理论上经n n次循环后次循环后,DNA,DNA链可达链可达2 2n n返回用PCR方法扩增目的基因片段返回克隆载体w目的基因若无合适的载体协助目的基因若无合适的载体协助,就很难进入受就很难进入受体细胞体细胞;w为了保证目的基因能够繁殖为了保证目的基因能够繁殖,必需将它与载体必需将它与载体连接连接w理想的载体理想的载体1 1、较小的、能进行复制的分子、较小的、能进行复制的分子,具有高拷贝数具有高拷贝数2 2、具有较少的限制酶的切点、具有较少的限制酶的切点,最好是单一切割最好是单一切割点点,以便所要克隆的以便所要克隆的DNADNA片段能被插入载体片段能被插入载体克隆载体w3 3、外源、外源DNADNA片段插入载体后片段插入载体后,不得使载体的复不得使载体的复制功能丧失制功能丧失w4 4、具有某种明显的标志、具有某种明显的标志,例如抗药性标记例如抗药性标记,以以便利用这些标志筛选阳性克隆便利用这些标志筛选阳性克隆w5 5、携带外源、携带外源DNADNA的幅度较宽的幅度较宽w6 6、生物防护是安全的、生物防护是安全的克隆载体克隆载体w常用的克隆载体有常用的克隆载体有:质粒、噬菌体及病毒质粒、噬菌体及病毒w质粒是某些细菌中独立于染色体外的共价闭合环状质粒是某些细菌中独立于染色体外的共价闭合环状双链双链DNADNA。质粒具有复制能力质粒具有复制能力,它的存在与否一般对它的存在与否一般对细菌的生存没有决定性影响。细菌的生存没有决定性影响。w噬菌体是一种能感染大肠杆菌的病毒噬菌体是一种能感染大肠杆菌的病毒,其其DNADNA中的中的1/31/3对噬菌体的生长并非绝对需要对噬菌体的生长并非绝对需要,因此可被外源性因此可被外源性DNADNA所替代所替代,同时它可在体外包装成病毒颗粒同时它可在体外包装成病毒颗粒,高效感高效感染大肠杆菌。克隆容量小于染大肠杆菌。克隆容量小于23kb23kb克隆载体w粘性质粒粘性质粒(Cosmid),(Cosmid),是人工构建的、兼具质粒是人工构建的、兼具质粒与噬菌体双重特性的大容量载体。克隆容量与噬菌体双重特性的大容量载体。克隆容量可达可达45kb45kb。w酵母人工染色体酵母人工染色体:20:20世纪世纪8080年代发展起来的大年代发展起来的大片段外源基因克隆体系片段外源基因克隆体系,其克隆容量可达其克隆容量可达2001000kb2001000kb。返回DNA分子的体外重组w所谓重组所谓重组DNADNA分子就是把外源分子就是把外源DNADNA分子分子(目的基目的基因因)插入到载体中插入到载体中,使两种使两种DNADNA分子连接起来分子连接起来w体外体外DNADNA分子重组有两种方法分子重组有两种方法:1 1、粘性末端连接法粘性末端连接法2 2、平头末端连接法平头末端连接法返回粘性末端连接法w用用同一种或两种限制酶去消化载体和外源同一种或两种限制酶去消化载体和外源DNADNA分子分子,可产生相同的粘性末端可产生相同的粘性末端,这些粘性末端能退火互补这些粘性末端能退火互补,进一步用进一步用DNADNA连接酶将断端封口连接酶将断端封口,即可获得重组即可获得重组DNADNA分分子。子。w用同一种限制酶处理外源用同一种限制酶处理外源DNADNA和载体和载体,重组时可导致重组时可导致外源外源DNADNA特别是质粒的自我环化特别是质粒的自我环化w用碱性磷酸脂酶用碱性磷酸脂酶(不处理外源不处理外源DNADNA分子分子)处理粘性末端处理粘性末端的的55磷酸基磷酸基,能促使载体与外源能促使载体与外源DNADNA分子连接。重组分子连接。重组体每条链仍残留的一个缺口体每条链仍残留的一个缺口,待进入宿主细胞内可被待进入宿主细胞内可被修复修复返回磷磷酸酸脂脂酶酶能能防防止止载载体体的的自自我我环环化化返回用用两两种种限限制制酶酶处处理理载载体体也也可可防防止止环环化化钝性末端连接法w用前述的用前述的化学合成法、逆转录法获得的化学合成法、逆转录法获得的DNADNA或或cDNAcDNA片断片断,以及某些限制酶切生成的以及某些限制酶切生成的DNADNA片断片断,均为钝性末端均为钝性末端,可用可用T4DNAT4DNA连接酶连接连接酶连接,也可将也可将其改造成粘性末端再行连接其改造成粘性末端再行连接:1 1、加接头、加接头:这种人工接头含某种限制酶的单切这种人工接头含某种限制酶的单切点点,用限制酶消化该接头可产生粘性末端。用限制酶消化该接头可产生粘性末端。2 2、加尾巴、加尾巴:应用末端转移酶在载体与外源应用末端转移酶在载体与外源DNADNA分分子上加上互补的同聚核苷酸子上加上互补的同聚核苷酸,经过退火可使两经过退火可使两者形成重组体者形成重组体返回钝性末端连接法返回末端转移酶处理末端转移酶处理退火退火二、重组DNA引入宿主细胞和筛选鉴定w重组重组DNADNA引入宿主细胞引入宿主细胞1 1、转染、转染:将噬菌体将噬菌体DNADNA引入宿主细胞的过程引入宿主细胞的过程2 2、转化、转化:将质粒或染色体将质粒或染色体DNADNA引入宿主细胞的过引入宿主细胞的过程程w重组体克隆的筛选与鉴定重组体克隆的筛选与鉴定1 1、插入灭活法插入灭活法2 2、噬菌斑形成筛选法、噬菌斑形成筛选法3 3、核酸杂交法、核酸杂交法返回插入灭活法w目前使用的质粒载体都有抗药标记。被转化目前使用的质粒载体都有抗药标记。被转化的细菌在含有这种的细菌在含有这种(些些)抗生素的培养基中能抗生素的培养基中能够生长够生长,而未被转化的细菌则不能生长或被杀而未被转化的细菌则不能生长或被杀死。然而死。然而,当限制酶作用于载体当限制酶作用于载体DNADNA的某一抗的某一抗药基因上并在此插入外源药基因上并在此插入外源DNADNA时时,载体上原有载体上原有的抗药基因即被破坏。由此重组体转化的宿的抗药基因即被破坏。由此重组体转化的宿主细胞主细胞,则对这个抗生素敏感则对这个抗生素敏感,这样便可筛选这样便可筛选出转化菌株。出转化菌株。返回返回插插入入灭灭活活法法限制酶切限制酶切转化转化含四环素含四环素TAT三、克隆基因的表达w外源基因在大肠杆菌体系中的表达外源基因在大肠杆菌体系中的表达w外源基因在真核细胞体系中的表达外源基因在真核细胞体系中的表达返回四、基因工程的成就与展望w在农业上的成就与意义在农业上的成就与意义w在工业方面的成就与意义在工业方面的成就与意义w在制药工业中的成就与意义在制药工业中的成就与意义w癌症的研究与治疗癌症的研究与治疗w遗传病的预防与治疗遗传病的预防与治疗插入灭活法w目前使用的质粒载体都有抗药标记。被转化目前使用的质粒载体都有抗药标记。被转化的细菌在含有这种的细菌在含有这种(些些)抗生素的培养基中能抗生素的培养基中能够生长够生长,而未被转化的细菌则不能生长或被杀而未被转化的细菌则不能生长或被杀死。然而死。然而,当限制酶作用于载体当限制酶作用于载体DNADNA的某一抗的某一抗药基因上并在此插入外源药基因上并在此插入外源DNADNA时时,载体上原有载体上原有的抗药基因即被破坏。由此重组体转化的宿的抗药基因即被破坏。由此重组体转化的宿主细胞主细胞,则对这个抗生素敏感则对这个抗生素敏感,这样便可筛选这样便可筛选出转化菌株。出转化菌株。返回现今医学分为传统医学、基于“生物-医学模式”近代发展起来的西医，20世纪西医又发展到“社会-心理-生物医学”或综合医学模式，后基因组时代系统生物学的兴起，形成了系统医学在全球的迅速发展，成为继传统医学、西医学之后中、西医学汇通的未来医学。当代中国医学类专业比较优秀的学校有北京大学、华中科技大学、郑州大学等学校。中医即中国传统医药学，是现今医学分为传统医学、基于“生物-医学模式”近代发展起来的西医，20世纪西医又发展到“社会-心理-生物医学”（高血压心脏病糖尿病）或综合医学模式，后基因组时代系统生物学的兴起，（传染病丙肝乙肝甲肝）形成了系统医学在全球的迅速发展，成为继传统医学、西医学之后中、西医学汇通的未来医学。当代中国医学类专业比较优秀的学校有北京大学、（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）华中科技大学、郑州大学等学校。（肺血液血小板红血球白血球）中医即中国传统医药学，是形成于数千年前的中国，是建立在人们与疾病长期斗争的经验总结及阴阳五行、八纲脏腑辨证基础上，运用朴素辩证法及思辨推理方法，认识机体、自然、疾病三者关系，发展起来的（传染病丙肝乙肝甲肝）一门以“功能人”包括功能脏器为概念的独特的医学哲学理论体系。（肺炎青霉素肝炎）在治疗上，除了药物外，还有针灸、推拿气功、（高血压心脏病糖尿病）耳针等特殊疗法，它是世界传统医学中最完善的一种医学理论体系。它为人类尤其为中国人民（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）健康和民族繁衍做出了巨大贡献。（肺血液血小板红血球白血球）西医学是最近三四百年来建立在解剖学、生物学及现代科学技术基础上、发展起来的一门以“解剖人、肉体人”为概念的、新兴的现代医学科学理论体系。主要采用科学实验方法，从宏观到微观，直至目前的分子基因层次水平，发展极为迅速，超过其它任何一门医学科学，成为世界医学史上的主流。可见中西医学，一个是以“功能人”为概念的独特的哲学医学理论体系，一个是以“解剖人、肉体人”为概念的新兴的现代医学科学理论体系，二者都不是以完整人为研究对象的科学，从理论讲二者都不是科学的，势必影响各自发展。事实也证明这一切，（高血压心脏病糖尿病）中医长期停滞不前、（高血压心脏病糖尿病）疗效也不确实。西医尽管发展到目前的基因分子层次，但疾病发病率居高不下，对绝大部分疾病发病原因认识不清、发病机理弄不明白，治疗受到制约，在小小SARS、禽流感面前竟束手无策，在糖尿病、癌症、心脑血管疾病、尿毒症等相当多疾病面前更是不得不求助或借助中医治疗。一个是疗效不确实，一个是有些甚至相当多疾病无法治疗，这就是中西医学结合的缘由。然而，由于二者是两套理论、两股道上跑的车（肺血液血小板红血球白血球），风马牛不相及，从理论上讲就没有结合的可能，只是形式上的融合罢了。（肺炎青霉素肝炎）故出现西医对治疗不了的疾病只好求助中医，而中医则往往采用西医诊断中医治疗，以及中西治疗法一块用的局面。（高血压心脏病糖尿病）至于（传染病丙肝乙肝甲肝）循证医学、比较医学、后现代医学、行为医学等所谓“医学”，都称不上一门独立的医学科学，关于这一点在灵魂医学有关章节中将有相关点评。总之，目前以中西医学为主的世界各种医学科学都存在不完整性的瑕疵，即都是以不完整的人为研究对象的医学科学，故不能解决目前存在于中西医学甚至人文社会科学史上一切疑难模糊问题，成为阻碍医学科学前进的羁绊。的确，要解决目前存在于中西医学甚至人文社会科学上一切疑难模糊问题，显然已完全超出了中（肺血液血小板红血球白血球）西医学所涉及的范畴，我们必须跳出中西医学的理论框架，建立起一个新的医学理论体系-东方医学和西方医学（即西医）的融合形成现代系统医学。西医学是最近三四百年来建立在解剖学、生物学及现代科学技术基础上、（高血压心脏病糖尿病）发展起来的一门以“解剖人、肉体人”为概念的、新兴的现代医学科学理论体系。主要采用科学实验方法，（传染病丙肝乙肝甲肝）从宏观到微观，直至目前的分子基因层次水平，发展极为迅速，超过其它任何一门医学科学，成为世界医学史上的主流。（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）可见中西医学，一个是以“功能人”为概念的独特（高血压心脏病糖尿病）的哲学医学理论体系，一个是以“解剖人、肉体人”为概念的新兴的现代医学科学理论体系，二者都不是以完整人为研究对象的科学，从理论讲二者都不是科学的，势必影响各自发展。事实也证明这一切，中医长期停滞不前、疗效也不确实。（肺血液血小板红血球白血球）西医尽管发展到目前的基因分子层次，但疾病发病率居高不下，对绝大部分疾病发病原因认识不清、发病机理弄不明白，治疗受到制约，在小小SARS、禽流感面前竟束手无策，（传染病丙肝乙肝甲肝）在糖尿病、癌症、心脑血管疾病、尿毒症等相当多疾病面前更是不得不求助或借助中医治疗。一个是疗效不确实，（肺炎青霉素肝炎）一个是有些甚至相当多疾病无法治疗，这就是中西医学结合的缘由。然而，由于二者是两套理论、两股道上跑的车，（高血压心脏病糖尿病）风马牛不相及，从理论上讲就没有结合的可能，只是形式上的融合罢了。故出现西医对治疗不了的疾病只好求助中医，而中医则往往采用西医诊断中医治疗，以及中西治疗法一块用的局面。（肺血液血小板红血球白血球）至于循证医学、比较医学、后现代医学、行为医学等所谓“医学”，都称不上一门独立的医学科学，关于这一点在灵魂医学有关章节中将有相关点评。（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）中、西医学的起源大致相同。主要包括：救护、求食的本能行为。如动物受伤（传染病丙肝乙肝甲肝）会舐其伤口、遇热会避入水中，人与动物一样有着本能救护。（高血压心脏病糖尿病）人类的求食本能在寻找食物时，逐渐发现了葱、姜、蒜、粳米、（肺炎青霉素肝炎）薏米等虽为食物或调味品，却具有治病作用；生活经验创造了医学。先古人类通过劳动制造出利器，从而产生了砭石、骨针等医疗器具，逐渐掌握了运用工具治疗疾病的经验。与此同时，人们发现活动肢体可以舒筋活络，强身健体，“导引术”、“五禽戏”的形成，也是古代人们积累生活经验后产生的保健养生观；医、巫的合与分。由于原始人受制于智力尚未开化，对自然界的变化（传染病丙肝乙肝甲肝）以及宇宙间的一切反常现象，（肺血液血小板红血球白血球）心存恐惧，难以做科学、合理的解释，因而误以为有超自然的力量主宰其中。（高血压心脏病糖尿病）故巫、医合流曾是中、西医学共有的一段历史。（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）医学教材（肺血液血小板红血球白血球）东、西方文化历史背景是中、西医学形成、发展的土壤。公元2世纪东、西方的两位医学巨匠张仲景和盖伦，传承了不同的学术思想，创建了迥异的医学范式，发展和完善了不同的理论体系，使中、西医学各自走向了两条完全不同的发展道路。（肺炎青霉素肝炎）在汉代医学家张仲景所著述的伤寒杂病论之前，（传染病丙肝乙肝甲肝）就有内经、难经、本草经等古典医药典籍。张仲景总结了汉代以前的医学成就，继承了内经等基本理论和丰富的医药知识，结合自己的临床实践，（肺血液血小板红血球白血球）写成了伤寒杂病论。其贡献在于确立了中医学辨证论治的理论体系，为后世中医临床医学的发展，奠定了坚实的基础。（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）在西方，盖伦的一生生活在罗马帝国时安东尼父子的执政期。彼时，（高血压心脏病糖尿病）罗马帝国的繁荣，为盖伦的医学成就、以及西方医学的昌盛，提供了可靠的政治、经济、科技和文化保证。盖伦继承希波克拉底的学术思想，著述200余部著作，（肺血液血小板红血球白血球）现存的83部著作中，内容涉及解剖、生理、病理、卫生、药物、希波克拉底文集研究、哲学、语言学、逻辑学、数学、历史、法律等。倡导实证医学，他的科学方法论（传染病丙肝乙肝甲肝）具有重视实验、疾病局部定位思想、重视形式逻辑、强调演绎法等特点，对后世西医学的（肺血液血小板红血球白血球）发展影响深远。（肺炎青霉素肝炎）（高血压心脏病糖尿病）编辑本段东西方医学差异中、西医学运用不同的思维模式诊治疾病，其基本理论各成体系并有根本差异。（肺血液血小板红血球白血球）中西医学的差异不仅仅是有否实证的科学理念，最主要的是两种文化体系的差别。从理论上讲，（高血压心脏病糖尿病）中西医学是两种不可能统一的医学体系。“中体西用”曾成为中西医汇通派的指导思想，但由于两种医学的根基不同，硬在中医之体上套上西医之用，近一个世纪的事实证明，（肺血液血小板红血球白血球）“汇通医学的体用判断脱离了中西医学的事实认识，（传染病丙肝乙肝甲肝）以价值认识代替了事实认识，决定最终结果劳而无功”，因此，中、西医学应并存共荣而不必强求统一。（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）古代(经典)中医史中国的中医学起源于三皇五帝时期，（肺血液血小板红血球白血球）相传伏羲发明了针灸并尝试草药。在公元前3000 多年，中国的轩辕黄帝写下了人类第一部医学著作祝由科，后世人在这部医药著作的基础上不断增补删改，（高血压心脏病糖尿病）逐渐形成了后来的黄帝内经和黄帝外经，并由祝由科里将纯粹的医药分离了出来，形成了后来的中医学。（肺血液血小板红血球白血球）而其中的黄帝内经则在世界上第一个提出了“不治已病治未病”这一防病养生保健康的预防医学观点。（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）轩辕黄帝早在周代(公元前1046 年公元前（传染病丙肝乙肝甲肝）771年)就建立了世界上第一个医院和医疗制度，周代的医疗机构设有医师、上士、下士、府（管药库）、史（管记录）、徒若干人。（肺血液血小板红血球白血球）下面又分食医（管饮食卫库）、疾医（内科）、疡医（外科）、兽医四种，这是世界上最早的医学分科。医师总管医药行政，并在年终对医生进行考核；（肺炎青霉素肝炎）周礼记载“岁冬则稽其事，以制其食”，就是说，医生每年都要（传染病丙肝乙肝甲肝）通过年终考核增减俸禄。当时的患者已经分科治疗，而且建立病历。“死终则各书其所以，（高血压心脏病糖尿病）而入于医师”，规定在死者病历上要写明死因，（肺血液血小板红血球白血球）然后送交医师存档，以便总结医疗经验，提高医疗技术。这也是世界上最早的病历制度。（肺炎青霉素肝炎）在春秋战国（公元前770年前221年）时期名医辈出，秦国有名医医缓，齐国有长桑和他的徒弟扁鹊。扁鹊发明了中医独特的辨证论治，并总结为“四诊”方法，即“望、闻、问、切”。扁鹊看病行医有“六不治”原则：（肺血液血小板红血球白血球）一是依仗权势，骄横跋扈的人（传染病丙肝乙肝甲肝）不治；二是贪图钱财，不顾性命者不治；三是暴饮暴食，饮食无常者不治；四是病深不早求医者不治；五是身体虚弱不能服药者不治；六是相信巫术不相信医道者不治。后世则尊称他为神医扁鹊。春秋战国时流行的主要医学著作有黄帝内经、（肺血液血小板红血球白血球）黄帝外经、扁鹊内经、扁鹊外经、白氏内经、白氏外经和旁篇这七本，合成（高血压心脏病糖尿病）“七经”。（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）在秦朝（公元前221年公元前207年）出现了世界上最早的专门法医令史。（肺血液血小板红血球白血球）秦律规定，死因不明的案件原则上都要进行尸体检验，司法官如果违法不进行检验，将受到（传染病丙肝乙肝甲肝）处罚。秦代的封诊式对法医鉴定的方法、程序等有较为详细的记载。在人命案件中，（高血压心脏病糖尿病）鉴定检验的主要内容有尸体的位置、创伤的部位、数量、方向以及大小等。令史检验完成之后，（肺血液血小板红血球白血球）必须提交书面报告，称为“爰书”，是世界上最早的法医鉴定和现场勘察报告。秦代还在世界上第一个建立传染病医院“疠迁所”，并制定了最早的治疗传染病的隔离制度。据1975 年湖北省云梦睡虎地出土秦简中记载：当时规定，凡经医生在给病人检查后发现有鼻梁塌陷、（肺血液血小板红血球白血球）手上无汗毛、声音沙哑、（传染病丙肝乙肝甲肝）刺激鼻腔不打喷嚏等症状者，一律送至疠迁所隔离治疗。这说明中国古代对传染性疾病的治疗措施，很早就已经是得力有效的。（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）到了西汉时期(公元前202年（高血压心脏病糖尿病）公元8年)，（传染病丙肝乙肝甲肝）中医的阴阳五行理论已经非常完备，名医则有太仓公淳于意和公乘阳庆。东汉出现了著名医学家张仲景和华佗。（肺血液血小板红血球白血球）张仲景完善了中医的辨证理论，他还是世界上第一个临床医学大师，被尊称为医圣。（肺炎青霉素肝炎）他著有伤寒论疗妇人方、黄素方、口齿论、平病方等等医书，最终流传下来（肺血液血小板红血球白血球）的医书被并被后人编纂为伤寒杂病论（高血压心脏病糖尿病）和金匮要略（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）近代、现代医学史近代的医学（肺血液血小板红血球白血球）西方近代医学是指文艺复兴以后逐渐兴起的医学，一般包括16世纪、17世纪、18世纪和19世纪的欧洲医学。（肺炎青霉素肝炎）16世纪 封建社会后期，手工业和商业发展，手工工厂出现，生产力的增长也促进对新市场的寻找。1492 年哥伦布发现新大陆,1497 年达伽马发现好望角,1519 1522（传染病丙肝乙肝甲肝）（高血压心脏病糖尿病）年麦哲伦环绕世界一周。许多药物（如鸦片、（肺血液血小板红血球白血球）樟脑、松香），由东方传入欧洲，美洲发现后，欧洲也有了金鸡纳、愈创木、可可果。由于资本主义的兴起，首先在意大利形成了资产阶级的知识分子。他们的特点是敢于向教会（传染病丙肝乙肝甲肝）思想挑战，反对宗教迷信的束缚。他们的口号是：“我是人，人的一切我应该了解”，以此来反对神学的统治。他们一方面传播新文化,一方面竭力钻研和模仿古代希腊的文化,因此此时期（肺血液血小板红血球白血球）称为“文艺复兴”。1543 年哥白尼出版天体运行论，是科学史上文艺复兴的开始。（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）医学革命。文艺复兴运动中，怀疑教条、反对权威之风兴起。于是，医界也产生了一场以帕拉切尔苏斯（高血压心脏病糖尿病）(14931541)为代表的医学革命。中世纪的医学校中,（肺血液血小板红血球白血球）主要讲阿维森纳的医典,以及加伦和希波克拉底的著作。教师照本宣科，一切墨守成规，毫无生气。文艺复兴（传染病丙肝乙肝甲肝）的狂潮，很快就波及医学领域。帕拉切尔苏斯指出人体的生命过程是化学过程。他在巴塞尔大学任教时主张用流行的德语写书和讲演，使医学易为大众所接受，这是一件伟大的改革。他重视实践，反对烦琐的经院哲学，反对中世纪顽固的传统和权威观念，（肺血液血小板红血球白血球）他说：“没有科学和经验，谁也不能成为医生。我的著作不是引证古代权威的著作，（高血压心脏病糖尿病）而是靠最大的教师经验写成的”。他勇敢地向墨守成规和盲目崇拜进行斗争，公开焚毁了加伦和阿维森纳的著作。（肺炎青霉素肝炎）细胞病理学。19世纪初细胞学说提出，到（肺血液血小板红血球白血球）19世纪中叶德国病理学家R.菲尔肖倡导细胞病理学，将疾病研究深入到细胞层次。他学说的（传染病丙肝乙肝甲肝）基本原理包括：细胞来自细胞；机体是细胞的总和；疾病可用细胞病理来说明。（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）细菌学的建立。19世纪中叶，由于发酵工业的需要，由于物理学、化学的进步和显微镜的改进，细菌学诞生了。（肺血液血小板红血球白血球）现代科学技术，不是单单研究一个个事物，一个个现象，而是研究事物、现象的变化发展过程，研究事物相互之间的关系。由“整理材料”的科学，发展成为严密综合起来的体系。近代医学经历了1617世纪的奠基，18世纪的系统分类，（高血压心脏病糖尿病）19世纪的大发展，到20世纪与现代科学技术紧密结合，发展为现代医学。20（肺血液血小板红血球白血球）世纪医学的特点是一方面向微观发展，如分子生物学；一方面又向宏观发展。在向宏观发展方面（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌），又可分为两种：一是人们认识到人本身是一个整体；二是把人作为一个与自然（高血压心脏病糖尿病）环境和社会环境密切相互作用的整体来研究。20世纪以来，基础医学方面成就最突出的是基本理论的发展，它有力地推进了临床医学和预防医学。治疗和预防疾病的有效（肺血液血小板红血球白血球）手段在20世纪才开始出现。20世纪医学发展的主要原因是自然科学的进步。各学科专业间交叉融合，这形成现代医学的特点之一。综合医学宇宙伦理学（张云飞著）中提出了一种“综合医学”，以下是原文摘录：医学（肺血液血小板红血球白血球）的发展，是提高医疗效率的一个重要方面。（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）未来医学的发展方向之一（高血压心脏病糖尿病）（而且是非常重要的一个方向），是朝综合的方向发展。或许，一种在各个方面（预防、诊断、治疗、善后等）都融合各种医术（包括自然疗法、心理疗法、物理疗法、药物疗法等）（肺血液血小板红血球白血球）之长综合医学，即将产生。这种医学已经有了许多基础（例如中西医结合医学），而且实际上也在某种程度上已经（传染病丙肝乙肝甲肝）为许多人所运用，只是还没有形成完善的体系罢了。（肺血液血小板红血球白血球）这种医学在产生之初可能很不完善，但必将得到发展，趋于健全。综合医学并不是要求医生无所不知，无所不能（肺炎青霉素肝炎），而同样是要求大多数医生有专长，有专攻。它只是要求医生在自己所擅长的领域内，全面学习和研究治疗该类疾病的各种方法（综合医学（高血压心脏病糖尿病）即在这样的实践中产生和发展），在医疗实践中，则根据需要，选择最佳治疗方案。（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）综合医学的基础是综合的理论，其理论必须采各种医学之长，并在实践中不断完善。例如，中西医结合的理论，（传染病丙肝乙肝甲肝）就属于某种综合的理论了。（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）综合医学的第一个重要方面是诊断的综合。于是，（肺血液血小板红血球白血球）就要有现代医疗设备，不断发展检测手段。同时，中医的望闻问切也是一种非常重要的诊断手法。最理想的状态是：医生不但懂得高科技检测手段，而且懂得望闻问切，并能够全面运用，整体把握。但综合不是要把问题（传染病丙肝乙肝甲肝）复杂化。目前，许多医院的检测过程本来就太多，而且许多都是没有必要的。如果再“综合”地加上其它检测手段，什么都来一遍，那么，（高血压心脏病糖尿病）即使是没病的人也会被整出病来。“诊断的综合”（肺血液血小板红血球白血球）不是说要把各种手段都对患者用一遍，而是说医生要综合掌握这些方法，至于在具体实践中，则要以自身对所有方法的熟练掌握为基础，从中选择最简单有效的方法。只有在十分必要的情况下，才运用多种方法加以检测。（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌）本文档下载后可以修改编辑，欢迎下载收藏。