资源描述
实验室检测常用方法及特点一 、 称 量 法二 、 色 谱 法三 、 光 谱 法四 、 样 品 预 处 理五 、 校 准 曲 线 的 要 求 称量法 实 验 室 一 般 的 分 析 称 量 方 法 有 以 下 几 种 ： 1、 直 接 称 量 法 2、 增 量 法 3、 减 量 法 4、 指 定 法 1、直接称量法 称 量 物 体 ， 如 烧 杯 、 表 面 皿 、 坩 埚 等 ，一 般 采 用 直 接 称 量 法 。 即 用 砝 码 直 接 与 被称 物 平 衡 ， 此 时 砝 码 的 重 量 就 是 被 称 物 的重 量 。 所 称 固 体 试 样 如 果 没 有 吸 湿 性 并 在空 气 中 是 稳 定 的 ， 可 用 直 接 称 量 法 。 方 法 如 下 ： 用 一 条 干 净 的 纸 条 拿 取 被称 物 放 入 天 平 的 称 量 盘 ， 然 后 去 掉 纸 条 ，在 砝 码 盘 上 加 砝 码 。 此 时 ， 砝 码 所 标 示 的重 量 就 等 于 被 称 物 的 重 量 。 2、增量法 此 法 一 般 用 来 称 量 规 定 重 量 的 试 样 。 方 法如 下 ： 将 盛 物 容 器 放 于 天 平 的 称 量 盘 ， 在 砝码 盘 上 加 适 当 的 砝 码 使 之 平 衡 ， 得 到 盛 物容 器 重 0， 然 后 在 砝 码 盘 上 添 加 与 所 称 试样 同 重 的 砝 码 ， 用 牛 角 勺 取 试 样 加 于 盛 物容 器 中 ， 直 至 达 到 平 衡 。 此 时 ， 砝 码 总 重 ， 则 称 取 的 样 品 重 为 。 3、减量法 此 法 一 般 用 来 连 续 称 取 几 个 试 样 ， 其 量 允 许 在 一 定 范围 内 波 动 ， 也 用 于 称 取 易 吸 湿 、 易 氧 化 或 易 与 二 氧 化 碳 反应 的 试 样 。 此 法 称 取 固 体 试 样 的 方 法 为 ： 将 适 量 试 样 装入 称 量 瓶 中 ， 称 得 称 量 瓶 及 试 样 重 量 为 1， 然 后 将 称 量瓶 ， 从 天 平 盘 上 取 出 ， 举 放 于 容 器 上 方 ， 瓶 口 向 下 稍 倾 ，捏 住 称 量 瓶 盖 ， 轻 敲 瓶 口 上 部 ， 使 试 样 慢 慢 落 入 容 器 中 ，当 倾 出 的 试 样 已 接 近 所 需 要 的 重 量 时 ， 慢 慢 地 将 称 量 瓶 竖起 ， 再 用 称 量 瓶 盖 轻 敲 瓶 口 下 部 ， 使 瓶 口 的 试 样 集 中 到 一起 ， 盖 好 瓶 盖 ， 放 回 到 天 平 盘 上 称 量 ， 得 2 ， 两 次 称量 之 差 就 是 试 样 的 重 量 。 如 此 继 续 进 行 ， 可 称 取 多 份 试 样 。如 果 一 次 倒 入 容 器 的 药 品 太 多 ， 必 须 弃 去 重 称 ， 切 勿 放 回称 量 瓶 。 如 果 倒 入 的 试 样 不 够 可 再 加 一 次 ， 但 次 数 宜 少 。 第 一 份 ： 试 样 重 1 2（ ） 第 二 份 ： 试 样 重 2 3（ ） 4、指定法对 于 性 质 比 较 稳 定 的 试 样 ， 有 时 为 了 便 于 计算 ， 则 可 称 取 指 定 质 量 的 样 品 。 用 指 定 法 称量 时 ， 在 天 平 盘 的 两 边 各 放 一 块 表 面 皿 (它 们的 质 量 尽 量 接 近 )， 调 节 天 平 的 平 衡 点 在 中 间刻 度 左 右 ， 然 后 在 左 边 天 平 盘 内 加 上 固 定 质量 的 砝 码 ， 在 右 边 天 平 盘 内 加 上 试 样 (这 样 取放 试 样 比 较 方 便 )， 直 至 天 平 的 平 衡 点 达 到 原来 的 数 值 ， 这 时 ， 试 样 的 质 量 即 为 指 定 的 质量 。 电子天平使用方法1 检 查 并 调 整 天 平 至 水 平 位 置 。2 事 先 检 查 电 源 电 压 是 否 匹 配 (必 要 时 配 置 稳 压 器 )， 按仪 器 要 求 通 电 预 热 至 所 需 时 间 。3 预 热 足 够 时 间 后 打 开 天 平 开 关 ， 天 平 则 自 动 进 行 灵 敏度 及 零 点 调 节 。 待 稳 定 标 志 显 示 后 ， 可 进 行 正 式 称 量 。4 称 量 时 将 洁 净 称 量 瓶 或 称 量 纸 置 于 称 盘 上 ， 关 上 侧 门 ，轻 按 一 下 去 皮 键 ， 天 平 将 自 动 校 对 零 点 ， 然 后 逐 渐 加 入 待称 物 质 ， 直 到 所 需 重 量 为 止 。5 被 称 物 质 的 重 量 是 显 示 屏 左 下 角 出 现 “ ” 标 志 时 ，显 示 屏 所 显 示 的 实 际 数 值 。6 称 量 结 束 应 及 时 除 去 称 量 瓶 (纸 )， 关 上 侧 门 ， 切 断 电源 ， 并 做 好 使 用 情 况 登 记 。 色谱法（GC1690气相色谱仪） 一 、 气 相 色 谱 法 的 特 点 二 、 气 相 色 谱 法 的 原 理 三 、 相 关 操 作 的 注 意 事 项 二、气相色谱法的原理 色 谱 定 量 分 析 的 依 据 是 被 测 物 的 量 与 它 在 色谱 图 上 的 峰 面 积 （ 或 峰 高 ） 成 正 比 。职 业 病 危 害 因 素 检 测 检 验 定 量 分 析 一 般 采 用 标 准曲 线 法 。 标 准 曲 线 法 ， 亦 称 外 标 法 。 首 先 用 纯 物质 配 置 一 系 列 不 同 浓 度 的 标 准 试 样 ， 在 一 定 的 色谱 条 件 下 准 确 定 量 进 样 ， 测 量 峰 面 积 （ 或 峰 高 ） ，绘 制 标 准 曲 线 。 外 标 法 不 使 用 校 正 因 子 ， 准 确 性较 高 ， 操 作 条 件 变 化 对 结 果 准 确 性 影 响 较 大 ， 对进 样 量 的 准 确 性 控 制 要 求 较 高 ， 适 用 于 大 批 量 试样 的 快 速 分 析 。 三、相关操作的注意事项 、 开 机 到 检 测 （ 约 45分 钟 ） 先 打 氮 氢 空 一 体 机 发 生 器 电 源 ， 大 约 15分钟 后 ， 待 各 压 力 表 压 力 稳 定 在 0.4MP左 右 ，同 时 查 看 毛 细 气 路 控 制 器 “ 柱 前 压 ” ， 如果 压 力 表 有 0.1MP压 力 ， 可 打 开 仪 器 开 关 电源 。 并 且 按 “ 起 始 ” 键 。 、 设 置 温 度 柱 箱 温 度 COL： 按 柱 箱 键 +初 温 键 +数 字（ 50） +置 入 键 ；进 样 器 INJ： 按 进 样 键 +数 字 （ 250） +置 入 键 ；氢 火 焰 检 测 器 DET： 按 换 挡 键 +热 导 键 +数 字(250)+置 入 键 热 解 吸 仪 温 度 AOLII： 按 换 挡 键 +进 样 键 +数 字(300)+置 入 键 初 温 50度 -初 时 间 5分 钟 -升 速 5度 /分 钟 终 温250度 终 时 15分 钟 、 查 看 设 置 温 度 柱 箱 温 度 ； 按 柱 温 键 +初 温 键 +置 入 键进 样 器 温 度 ： 按 进 样 键 +置 入 键FID检 测 器 温 度 ； 按 换 挡 键 +热 导 键 +置 入 键 热 解 吸 仪 温 度 AOLII： 按 换 挡 键 +进 样 键 +置 入 键 。 、 查 看 实 际 温 度 柱 箱 温 度 ： 按 显 示 键 和 柱 箱 键 ； 进 样 器 温 度 ： 按 显 示 键 +进 样 键 ； FID（ 氢 火 焰 检 测 器 ） 温 度 ： 按 显 示 键 +换挡 键 +热 导 键 （ 检 测 DET） 热 解 吸 仪 温 度 AOLII： 按 显 示 键 +按 换 挡 键 +进 样 键 。 、 点 火 当 氢 火 焰 检 测 器 （ DET） 温 度 达 到 150度以 上 时 点 火 。 点 火 ： 把 空 气 压 力 从 0.1MP调 到 0.04MP，用 火 枪 点 火 ， 如 点 着 火 后 （ 看 是 否 有 水 蒸 汽有 的 话 说 明 点 着 了 ） 再 把 空 气 调 到 0.1MP。 、 色 谱 数 据 工 作 站 打 开 电 脑 及 数 据 工 作 站 （ 在 线 工 作 站 , 通道 1） 。点 击 “ 查 看 基 线 ” 确 保 能 顺 利 采 集 基 线 并 保持 平 稳编 辑 实 验 数 据 参 数 和 实 验 图 谱 存 放 置 等 信 息 。 、 进 样 待 基 线 走 平 稳 后 将 HD-D热 解 吸 仪 气 流 控制 开 关 关 闭 ， 用 微 量 注 射 器 吸 取 样 品 ， 进 样 。吸 取 样 品 时 应 确 保 注 射 器 内 无 多 余 的 气 泡 ；待 样 品 热 解 吸 1060S， 将 切 换 阀 切 换 至 “ 解吸 ” 处 。 按 GC-1690主 机 “ 起 始 ” 按 钮 。 同 时按 键 盘 “ F5” 或 鼠 标 点 击 “ 采 集 数 据 ” 。 观察 GC-1690主 机 显 示 屏 上 的 信 息 ， 待 解 吸 完 毕后 将 切 换 阀 切 换 至 “ 反 吹 ” 状 态 ， 并 将 热 解吸 仪 气 流 控 制 开 关 打 开 。 进 样 完 毕 ， 等 待 出峰 。 、 保 存 图 谱 保 存 图 谱 ： 待 所 有 峰 都 检 测 出 来 后 ， 按GC-1690气 相 色 谱 仪 “ 停 止 ” 按 钮 ； N2000工 作 站 继 续 采 集 数 据 110min， 在 电 脑 上 用鼠 标 点 击 “ 停 止 采 集 ” 。 实 验 图 谱 会 自 动 保存 于 设 定 的 文 件 夹 内 。 到 此 ， 一 个 进 样 实 验完 成 。若 再 次 进 样 ， 等 待 柱 箱 温 度 下 降 至 柱 箱 初 温510min后 ， 再 次 按 上 述 流 程 进 样 。 、 关 机 关 机 前 先 关 闭 N2000色 谱 数 据 工 作 站 和 电脑 ； 将 GC-1690气 相 色 谱 仪 的 柱 箱 、 检 测 器 、热 解 吸 仪 、 辅 助 2的 温 度 参 数 设 定 为 99 ，等 待 温 度 全 部 降 低 至 99 以 下 。 关 闭 燃 气 控制 器 的 空 气 流 量 ， 使 氢 气 火 焰 检 测 器 火 焰 熄灭 ， 火 焰 熄 灭 后 讲 空 气 流 量 调 回 正 常 ， 最 后关 闭 气 相 色 谱 仪 ；继 续 通 气 15分 钟 ， 最 后 关 闭 氮 氢 空 一 体 机 。 10、 气 相 色 谱 柱 温 的 选 择 考 虑 到 每 种 固 定 液 都 有 一 定 的 温 度 范 围 。柱 温 不 能 高 于 固 定 液 的 最 高 使 用 温 度 ， 否 则固 定 液 因 挥 发 而 流 失 。 应 从 分 离 的 角 度 出 发 ，权 衡 利 弊 ， 柱 温 的 选 择 原 则 为 ： 在 对 最 难 分离 的 物 质 对 保 持 较 好 分 离 度 的 前 提 下 ， 尽 可能 采 用 较 高 柱 温 ， 但 以 保 留 时 间 适 宜 、 峰 形不 拖 尾 为 度 。 11、 维 护 保 养 第 一 次 使 用 的 气 相 色 谱 柱 需 经 过 “ 老 化 ” 方 可 投 入 样 品检 测 。 “ 老 化 ” 参 数 按 以 下 设 置 (柱 箱 初 温 ： 50 ； 柱 箱 升 速 ：0.5 /min； 柱 箱 终 温 ： 270 ； 保 持 时 间 ： 300min。 “ 老 化 ”完 后 查 看 基 线 情 况 ， 基 线 走 稳 即 可 ， 基 线 若 不 稳 ， 继 续 “ 老化 ” 。 气 相 色 谱 柱 使 用 一 段 时 间 会 出 现 基 线 不 稳 情 况 ， 直 接影 响 实 验 准 确 度 。 此 时 只 需 重 复 “ 老 化 ” 程 序 即 可 。 BRT-300G氮 氢 一 体 机 使 用 一 段 时 间 后 ， 需 更 换 氢 氧 化 钾溶 液 。 更 换 方 法 ： 称 取 130g氢 氧 化 钾 ， 溶 于 500mL冷 却 蒸 馏 水 。注 入 液 罐 并 补 充 蒸 馏 水 至 液 位 刻 度 。定 期 检 查 BRT-300G氮 氢 一 体 机 内 部 空 气 过 滤 系 统 ， 检 查 硅 胶状 况 。 若 硅 胶 变 色 ， 则 取 出 置 于 烘 箱 120 恒 温 干 燥 3小 时 ，可 重 新 使 用 。 定 期 维 护 电 脑 硬 盘 数 据 ， 将 实 验 所 得 数 据 图 谱分 类 保 存 。 长 期 保 存 。 光谱法 根 据 我 们 实 验 室 常 用 的 光 谱 法 有 以 下 三 种 ： 紫 外 -可 见 分 光 光 度 法 原 子 吸 收 分 光 光 度 法 原 子 荧 光 分 光 光 度 法 紫外-可见分光光度法 一 、 基 本 原 理 二 、 分 析 条 件 的 选 择 三 、 分 析 方 法 及 注 意 事 项 一、基本原理 紫 外 -可 见 分 光 光 度 法 根 据 被 测 物 质在 紫 外 -可 见 光 的 特 定 波 长 处 或 一 定 波 长 范 围内 对 光 的 吸 收 特 性 而 对 该 物 质 进 行 定 性 、 定 量分 析 的 方 法 称 紫 外 -可 见 分 光 光 度 法 。 将 不 同 波 长 的 单 色 光 依 次 通 过 一 定 浓 度 的 同 一溶 液 ， 分 别 测 定 吸 收 度 ， 然 后 以 吸 收 度 为 纵 坐标 ， 波 长 为 横 坐 标 画 图 可 得 到 一 条 吸 收 曲 线 即吸 收 光 谱 。 曲 线 显 示 了 物 质 对 不 同 波 长 光 的 吸收 情 况 ， 曲 线 上 吸 收 值 最 大 处 所 对 应 的 波 长 称最 在 吸 收 波 长 ， 用 表 示 ， 最 大 吸 收 波 长 在 定量 分 析 中 常 用 来 作 测 定 波 长 。 紫 外 -可 见 分 光 光 度 法 是 工 作 场 所 职 业 病 化 学 危 害 因 素 检测 中 的 常 用 方 法 。 具 有 灵 敏 度 高 ， 测 量 精 度 好 ， 操 作 简 便 等 优点 。 通 常 ， 待 测 物 质 含 量 为 1%0.00001%时 ， 能 够 用 分 光 光度 法 准 确 测 定 ， 所 以 它 主 要 用 于 测 定 微 量 组 分 ， 几 乎 所 有 的 无机 离 子 和 许 多 有 机 化 合 物 均 可 以 用 分 光 光 度 法 进 行 测 定 。 若 采用 灵 敏 度 高 、 选 择 性 好 的 有 机 显 色 剂 ， 并 加 入 适 当 掩 蔽 剂 ， 一般 不 经 过 分 离 即 可 直 接 进 行 分 光 光 度 法 测 定 ， 其 方 法 的 相 对 误差 为 5%10%。 紫 外 -可 见 分 光 光 度 法 的 定 量 依 据 是 朗 伯 -比 尔 定 律 ， 即 在 一 定条 件 下 溶 液 对 单 色 吸 收 的 强 弱 与 吸 光 物 质 的 浓 度 和 厚 度 成 正 比关 系 。 其 数 学 表 达 式 为 ： A=KCL 式 中 A溶 液 吸 光 度 ； K吸 光 常 数 （ 摩 尔 吸 光 常 数 ） ， L/(molcm)； C溶 液 浓 度 ， mol/L； L液 层 厚 度 （ 比 色 皿 厚 度 ） ， cm。 吸 光 系 数 K在 给 定 条 件 下 （ 单 色 光 波 长 、 溶 剂 、 温 度 等 ） 是 物质 的 特 征 常 数 ， 可 作 为 定 性 依 据 。 在 吸 收 度 与 浓 度 之 间 的 直 线关 系 中 ， 吸 光 系 数 K是 斜 率 ， 是 定 量 的 依 据 ， 其 数 值 越 大 则 测定 的 灵 敏 度 越 高 。 二、分析条件的选择 我 们 实 验 室 的 722 S 可 见 分 光 光 度 计 其工 作 波 长 范 围 为 3251020nm。 该 仪 器 的主 要 由 光 源 、 单 色 器 、 吸 收 池 、 检 测 器 和信 号 显 示 系 统 五 个 部 分 构 成 。 1、 仪 器 测 量 条 件 的 选 择 适 宜 的 吸 光 度 范 围 入 射 光 波 长 的 选 择 狭 缝 宽 度 的 选 择 2、 显 色 反 应 条 件 的 选 择 对 多 种 物 质 进 行 测 定 ， 常 利 用 显 色 反 应 将被 测 组 分 转 变 为 在 一 定 波 长 范 围 有 吸 收 的 物 质 。常 见 的 显 色 反 应 有 配 位 反 应 、 氧 化 还 原 反 应 等 。显 色 反 应 必 须 满 足 的 反 应 条 件 有 ： (1)反 应 生 成 物 须 在 紫 外 -可 见 光 区 有 较 强 吸 光能 力 ， 即 摩 尔 吸 光 系 数 较 大 。 (2)反 应 有 较 高 的 选 择 性 ， 即 被 测 组 分 生 成 化合 特 吸 收 曲 线 应 与 共 存 物 质 的 吸 收 光 谱 有 明 显的 差 别 。 (3)反 应 产 物 应 足 够 稳 定 ， 以 保 证 测 量 过 程 中溶 液 的 吸 光 度 不 变 。 (4)反 应 产 物 组 成 恒 定 。 3、 参 比 溶 液 的 选 择 测 定 样 品 溶 液 的 吸 光 度 ， 需 先 用 参 比溶 液 调 节 透 光 度 （ 吸 光 度 为 0） 为 100%， 消 除 其 他 成 分 及 吸 光 池 和 溶 剂 等 对 光 的 反射 和 吸 收 带 来 测 定 误 差 。 三、分析方法及注意事项 目 视 比 色 法 用 眼 睛 观 察 、 比 较 溶 液 颜 色 深 度 以 确 定 物质 含 量 的 方 法 称 为 目 视 比 色 法 。 标 准 曲 线 法 根 据 朗 伯 -比 尔 定 律 ， 保 持 液 层 厚 度 ， 入 射光 波 长 和 其 他 测 量 条 件 也 不 变 ， 则 在 一 定浓 度 范 围 内 ， 所 测 得 吸 光 度 与 溶 液 中 待 测物 质 浓 度 成 正 比 。 样 品 检 测 注 意 事 项 在 进 行 样 品 检 测 与 分 析 过 程 中 ， 不 能 不 考 虑 试剂 和 显 色 条 件 对 检 测 的 影 响 ， 需 要 注 意 以 下 几 点 ： （ 1） 显 色 剂 质 量 ， 注 意 其 使 用 期 限 、 保 存 方 式（ 低 温 、 避 光 、 干 燥 ） 、 显 色 剂 纯 度 的 区 别 和 要 求 ，尽 量 使 用 有 效 期 限 和 方 法 要 求 的 试 剂 纯 度 。 （ 2） 遵 照 实 验 要 求 ， 注 意 反 应 温 度 和 时 间 等 控 制条 件 。 （ 3） 注 意 显 色 的 稳 定 时 间 ， 并 在 其 稳 定 时 间 内 进行 检 测 。 （ 4） 使 用 试 剂 分 级 和 质 量 ， 按 检 测 要 求 使 用 。 （ 5） 对 被 检 样 品 的 干 扰 物 质 和 干 扰 因 素 进 行 排 除 ，必 要 时 进 行 复 检 。 原子吸收分光光度法 一 、 基 本 原 理 二 、 原 子 吸 收 光 谱 法 的 特 点 三 、 仪 器 的 组 成 四 、 仪 器 条 件 的 选 择 一、基本原理 1、 原 子 吸 收 光 谱 法 利 用 原 子 对 固 有 波 长 光 的 吸 收 进 行测 定 。 （ 被 测 元 素 基 态 原 子 在 蒸 气 状 态 对 其 原 子 共 振 辐射 的 吸 收 进 行 元 素 定 量 分 析 ） 基 态 原 子 吸 收 其 共 振 辐 射 ， 外 层 电 子 由 基 态 跃 迁 至 激 发态 而 产 生 原 子 吸 收 光 谱 。 2、 在 实 际 工 作 中 ， 对 于 原 子 吸 收 值 的 测 量 ， 是 以 一 定光 强 的 单 色 光 I0通 过 原 子 蒸 气 ， 然 后 测 出 被 吸 收 后 的 光强 I， 此 一 吸 收 过 程 符 合 朗 伯 -比 耳 定 律 ， 即 I = I0e-K N L 式 中 K为 吸 收 系 数 ， N为 自 由 原 子 总 数 （ 基 态 原 子 数 ） ，L为 吸 收 层 厚 度 。 吸 光 度 A可 用 下 式 表 示 A = lgI0 / I = 2.303 K N L 在 实 际 分 析 过 程 中 ， 当 实 验 条 件 一 定 时 ， N正 比 于 待测 元 素 的 浓 度 。 二、原子吸收光谱法的特点 1、 检 出 限 低 ， 灵 敏 度 高 。 2、 分 析 精 度 好 。 3、 选 择 性 好 。 4、 应 用 范 围 广 ， 可 测 定 70多 个 元 素 。 5、 分 析 速 度 快 ， 操 作 方 便 。 6、 仪 器 比 较 简 单 ， 一 般 实 验 室 可 配 备 。 三、仪器的组成 原 子 吸 收 光 谱 仪 由 光 源 、 原 子 化 器 、 分 光 器 、检 测 系 统 等 部 分 组 成 。 而 原 子 化 器 又 细 分 为 火 焰 原子 化 器 与 非 火 焰 原 子 化 器 。 根 据 我 们 实 验 室 的 WFX-310原 子 吸 收 光 谱 仪 其采 用 原 子 化 器 是 火 焰 原 子 化 器 ， 火 焰 原 子 化 器 由 喷雾 器 、 雾 化 器 和 燃 烧 器 三 个 部 分 组 成 。 1、 喷 雾 器 ， 它 的 作 用 是 将 样 品 溶 液 雾 化 ， 使 之 成为 微 米 级 的 细 雾 。 雾 滴 愈 小 生 成 的 基 太 原 子 就 愈 多 。 2、 雾 化 室 ， 它 的 作 用 是 使 燃 气 、 助 燃 气 与 试 液 的细 雾 在 雾 化 室 内 充 分 混 合 均 匀 ， 以 保 证 得 到 稳 定 的火 焰 ； 同 时 也 使 未 被 细 化 的 较 大 雾 滴 在 雾 化 室 内 凝结 为 液 珠 ， 沿 室 壁 流 入 泄 漏 管 内 排 走 。 3、 燃 烧 器 ， 它 的 作 用 是 形 成 火 焰 ， 使 进 入 火 焰 的待 测 元 素 的 化 合 物 经 过 干 燥 、 熔 化 、 蒸 发 、 解 离 及原 子 化 过 程 转 变 成 基 态 原 子 蒸 气 ， 要 求 燃 烧 器 的 原子 化 程 度 高 ， 火 焰 稳 定 ， 吸 收 光 程 长 及 噪 声 小 。 四、仪器条件的选择 1、 分 析 线 2、 空 心 阴 极 灯 的 工 作 电 流 3、 火 焰 类 型 和 特 性 4、 燃 烧 器 的 高 度 选 择 5、 程 序 升 温 的 条 件 选 择 6、 狭 缝 宽 度 选 择 7、 进 样 量 的 选 择 原子荧光分光光度法 一 、 基 本 原 理 与 特 点 二 、 仪 器 的 组 成 三 、 分 析 方 法 及 干 扰 消 除 一、基本原理与特点 基 本 原 理 气 态 自 由 原 子 吸 收 光 源 的 特 征 辐 射 后 ，原 子 的 外 层 电 子 跃 迁 到 较 高 能 级 ， 然 后 又跃 迁 返 回 基 态 或 较 低 能 级 ， 同 时 发 射 出 与原 激 发 辐 射 波 长 相 同 或 不 同 的 辐 射 即 为 原子 荧 光 。 原 子 荧 光 属 光 致 发 光 ， 也 是 二 次发 光 。 原 子 荧 光 光 谱 法 是 以 原 子 在 辐 射 能激 发 下 发 射 的 荧 光 强 度 进 行 定 量 分 析 的 发射 光 谱 分 析 法 。 原 子 荧 光 光 谱 法 的 优 点 1、 检 出 限 低 ， 灵 敏 度 高 ； 2、 干 扰 较 少 ， 谱 线 比 较 简 单 ； 3、 分 析 校 准 曲 线 线 性 范 围 宽 ， 可 达 35个数 量 级 ； 4、 由 于 原 子 荧 光 是 向 空 间 各 个 方 向 发 射 的 ，较 易 制 作 多 道 仪 器 而 实 现 多 元 素 同 时 测 定 。 二、仪器的组成 原 子 荧 光 光 谱 仪 与 原 子 吸 收 分 光 光 度计 的 构 造 大 致 相 同 ， 其 主 要 区 别 于 原 子 吸收 分 光 光 度 计 的 锐 线 光 源 、 原 子 化 器 、 单色 器 和 检 测 系 统 位 于 同 一 条 直 线 上 ， 而 原子 荧 光 光 谱 仪 的 锐 线 光 源 、 原 子 化 器 、 单色 器 和 检 测 系 统 处 于 直 角 状 态 。 因 为 只 有这 样 ， 才 能 避 免 光 源 的 辐 射 进 入 单 色 器 和检 测 系 统 ， 影 响 荧 光 信 号 的 检 测 。 原 子 荧光 光 谱 仪 分 为 色 散 型 和 非 色 散 型 两 类 。 光 源 透 镜 原 子 化 器 单 色 器 检 测 器 三、分析方法及干扰消除 定 量 分 析 方 法 为 标 准 曲 线 法 原 子 荧 光 光 谱 仪 的 主 要 干 扰 是 猝 灭 效 应 。 这 种干 扰 可 采 用 减 少 溶 液 中 其 他 干 扰 离 子 的 浓 度 避 免 。其 他 干 扰 因 素 如 光 谱 干 扰 、 化 学 干 扰 、 物 理 干 扰 等与 原 子 吸 收 光 谱 法 相 似 。 在 原 子 荧 光 法 中 由 于 光 源 的 强 度 比 荧 光 强 度 高几 个 数 量 级 ， 因 此 散 射 光 可 产 生 较 大 的 正 干 扰 。 减少 散 射 干 扰 ， 主 要 是 减 少 散 射 微 粒 ， 采 用 预 混 火 焰 、增 高 火 焰 观 测 高 度 和 火 焰 温 度 ， 或 使 用 高 挥 发 性 的溶 剂 等 ， 均 可 以 减 少 散 射 微 粒 ， 也 可 采 用 扣 除 散 射光 背 景 的 方 法 消 除 其 干 扰 。 样品预处理方法一、概述：1、样品处理的目的 色谱分析技术 气相色谱 高效液相色谱 高效毛细管电泳 平面色谱 气相色谱质谱 联用技术 液相色谱质谱 液相色谱核磁 气相色谱红外 石 化 过 程 分 析 工 业 卫 生 调 查 和 评 价 药 物 动 力 学 和 毒 理 学 研 究 食 品 分 析 职 业 病 危 害 因 素 分 析色 谱 法 应 用 医 疗 诊 断 核 能 和 燃 料 分 析 制 药 过 程 监 测 化 妆 品 和 香 料 组 成 分 析 商 品 质 量 检 验 样品预处理的目的 除 去 微 粒 减 少 干 扰 杂 质 浓 缩 微 量 的 组 份 提 高 检 测 的 灵 敏 度 及 选 择 性 改 善 分 离 的 效 果 有 利 于 色 谱 柱 及 仪 器 的 保 护 2、样品处理的必要性和重要性 色 谱 分 析 的 全 过 程 包 括 ：样品采集、样品制备、色谱分析、数据处理与结果表述 样 品 种 类 繁 多 ， 其 组 成 、 浓 度 、 物 理形 态 等 均 是 色 谱 分 析 测 定 的 影 响 因 素 。样 品 处 理 技 术 就 成 为 提 高 分 析 测 定 效率 、 改 善 和 优 化 色 谱 分 析 的 重 要 环 节 。 占 样 品 分 析 时 间 的 比 例 （ 60%） 样 品 预 处 理 所 用 时 间 远 大 于 色 谱 分 离 的 时 间 占 分 析 的 消 耗 总 成 本 最 大 消 耗 大 量 的 溶 剂 及 其 他 化 学 品 实 验 的 重 复 性 及 准 确 性 最 差 的 环 节 影 响 实 验 结 果 好 坏 的 最 重 要 因 素 是 决 定 性 的 步 骤 3、样品处理的原则（ 1） 样 品 中 可 能 存 在 的 物 质 组 成 ？ 浓 度 水 平 ？（ 2） 样 品 中 的 主 要 组 分 ？（ 3） 采 样 方 法 是 非 破 坏 性 的 还 是 破 坏 性 的 ？（ 4） 收 集 的 样 品 必 须 有 代 表 性 。（ 5） 采 用 方 法 必 须 和 分 析 目 的 保 持 一 致 。（ 6） 样 品 制 备 过 程 中 尽 可 能 防 止 和 避 免 待 测 定组 分 发 生 化 学 变 化 或 丢 失 3、样品处理的原则（续）（ 7） 样 品 处 理 中 ， 若 进 行 待 测 定 组 分 的 化 学 反应 ， 则 反 应 应 是 已 知 的 和 定 量 完 成 的 。（ 8） 样 品 制 备 过 程 中 ， 要 防 止 和 避 免 待 测 定 组分 受 到 污 染 ， 减 少 无 关 化 合 物 引 入 制 备 过 程 。（ 9） 处 理 过 程 应 简 单 易 行 ， 所 用 样 品 处 理 装 置的 尺 寸 应 与 处 理 样 品 的 量 相 适 应 。（ 10） 采 用 后 应 尽 可 能 快 的 进 行 分 析 样 品 的 制 备和 分 析 ， 或 使 用 适 当 的 方 法 消 除 可 能 产 生 的 干扰 ， 做 好 样 品 的 保 存 。 二、样品的采集 气 体 （ 包 括 蒸 汽 ）涉 及 的 样 品 形 式 气 溶 胶 （ 雾 、 烟 、 粉 尘 ） 直接采样法主 要 采 集 方 法 有泵型采样法 无泵型采样法 直接采样法：只 需 将 样 品 直 接 引 进 容 器 中 ，所 用 容 器 最 好 是 新 的 或 洗 净 后 干 燥 的 ， 以防 止 其 他 样 品 的 残 留 影 响 。有泵型采样法：又 称 动 力 采 样 法 ， 是 用 空气 采 样 器 （ 有 电 动 抽 气 泵 和 流 量 计 组 成 ）作 为 抽 气 动 力 ， 将 样 品 空 气 抽 过 样 品 收 集器 ， 空 气 中 的 待 测 物 被 样 品 收 集 器 采 集 下来 ， 供 测 定 用 。 无泵型采样法：无 泵 型 采 样 法 也 叫 扩 散 采样 法 ， 采 集 空 气 中 化 学 物 质 时 ， 不 需 要 抽气 动 力 和 流 量 装 置 ， 而 是 根 据 费 克 (Fick)扩散 定 律 ， 利 用 化 学 物 质 分 子 在 空 气 中 的 扩散 作 用 完 成 采 样 的 。 使用采集方法的注意事项（ 1） 采 集 的 样 品 应 具 有 代 表 性 ， 要 注 意 采样 的 时 间 、 地 点 及 采 样 位 置 的 选 择 。（ 2） 所 有 样 品 都 要 采 集 双 份 ， 一 份 分 析 样品 ， 一 份 保 存 样 品 ， 备 复 查 时 使 用 。（ 3） 样 品 的 采 集 和 储 存 过 程 要 作 记 录 ， 详列 采 样 时 间 、 地 点 、 准 确 位 置 等 。 （ 4） 采 集 储 存 中 待 测 组 分 不 应 有损失或 发 生化学变化。 损失包 括 挥 发 、 在 储 存 容 器 上 的 吸 附 等 物 理 原因 化学变化包 括 被 氧 化 、 微 生 物 引 起 的 分 解 、各 组 分 间 的 化 学 反 应 等（ 5） 避 免 样 品 受 到 外 界 污 染 。（ 6） 采 集 后 要 尽 快 进 行 分 析 样 品 的 制 备 和 分 析 。 三、样品预处理常用的方法 高 速 离 心 过 滤 、 超 滤 选 择 性 沉 淀 萃 取 索 氏 抽 提 衍 生 反 应 新 样 品 处 理 技 术 加 速 溶 剂 萃 取 （ ASE） 浓 缩 样 品 液 -固 萃 取 / 液 -液 萃 取 固 相 萃 取 样 品 小 柱 样品预处理的过程 去除微粒 过 滤 过 滤 膜 /过 滤 装 置 有 机 (0.5m)/无 机 (0.45m) 膜 片 可 更 换 一 次 性 使 用 的 膜 使 用 方 便 简 单 ， 交 叉 污 染 小 有 更 小 内 径 ， 可 用 于 微 量 样 品 的 处 理 高 速 离 心 大 于 ： 10,000g 超 滤 机 理 超 滤 是 一 种 基 于 分 子 量 分 离 的 技 术 目 的 根 据 分 子 量 的 不 同 把 分 子 、 细 胞 及 病 毒 等 分 为不 同 的 馏 份 除 去 小 分 子 样 品 中 的 大 分 子 蛋 白 脱 盐 选择性沉淀 常 用 于 生 化 样 品 中 除 蛋 白 有 机 溶 剂 乙 腈 ， 甲 醇 强 酸 三 氯 乙 酸 ， 过 氯 酸 盐 50% 硫 酸 铵 10% TCA 样品衍生 提 高 检 测 的 灵 敏 度 增 加 紫 外 基 团 以 增 强 紫 外 检 测 的 灵 敏 度 增 加 荧 光 基 团 使 样 品 用 高 灵 敏 度 荧 光 检 测 器 改 变 分 离 的 选 择 性 改 变 组 份 的 基 团 ， 如 ： 变 离 子 型 化 合 物 为 非 离 子 型 ， 用 反 相 方 法 分离 典 型 的 例 子 氨 基 酸 分 析 加速溶剂萃取（ASE）t ASE 是 用 溶 剂 对 固 体 、 半 固 体 的 样 品 进 行 萃 取 的技 术 .t ASE 的 原 理 是 选 择 合 适 的 溶 剂 、 通 过 增 加 温 度 和压 力 来 提 高 萃 取 过 程 的 效 率 . t ASE 可 用 来 替 代 索 氏 提 取 、 超 声 萃 取 、 手 工 振 摇 、煮 沸 法 和 其 他 萃 取 方 法 三种不同型号的ASE ASE100 ASE200 ASE300 ASE的突出优点 快 速 ， 15分 钟 溶 剂 用 量 少 萃 取 效 率 高 样 品 基 体 影 响 小 可 同 时 选 用 四 种 溶 剂 萃 取 安 全 ， 全 自 动 ASE建 立 了 环 境 , 药 物 , 聚 合 物 , 食 品 , 和 化 妆 品工 业 的 大 量 应 用 ASE工作流程加 溶 剂 时 间 (mi n) 0. 51加 样 品静 态 萃 取 5 氮 气 吹 扫 12 溶 剂 泵 吹 扫 阀 炉 体氮 气 瓶 静 态 阀收 集 瓶萃 取 池循 环加 热 5加 压萃 取 结 束 Total (mi n)准 备 分 析 1218新 溶 剂 冲 洗 0. 5 ASE的应用领域环 境 农 业 、 食 品聚 合 物 制 药 浓缩样品 浓 缩 样 品 的 方 法 萃 取 /吹 干 沉 淀 /再 溶 解 色 谱 法 液 固 抽 提 /固 相 萃 取 小 柱 四、导致待测物损失的因素 吸 附 ： 原 因 ： 玻 璃 表 面 或 橡 胶 塞 会 吸 附 待 测 物 ， 特 别是 脂 肪 胺 类 及 含 硫 化 合 物 。 解 决 方 法 ： 可 采 用 硅 烷 化 减 少 玻 璃 表 面 的 吸 附 性 非 极 性 提 取 溶 剂 中 加 入 少 量 极 性 溶 剂 可 减 少器 皿 对 药 物 的 吸 附 。 化 学 降 解 ：原 因 ： 样 品 的 化 学 和 生 物 学 不 稳 定 性 常 引 起 化 学 分 解 光 化 学 及 热 稳 定 性 （ 尤 其 在 净 化 步 骤 中 强 酸 、 强碱 的 中 和 所 产 生 的 热 ） 引 起 的 损 失 ， 也 应 加 注 意 。解 决 方 法 ： 尽 量 采 用 温 和 条 件 制 备 样 品 ， 经 免 引 起待 测 物 的 部 分 分 解 、 开 环 等 情 况 发 生 ， 有 的 样 品 尚需 避 光 操 作 衍 生 化 反 应 ： 由 于 不 完 全 反 应 ， 待 测 样 品 仅 部 分 转 化 为 所需 的 产 物 或 形 成 副 产 物 有 时 在 蒸 发 除 去 过 量 衍 生 化 试 剂 时 ， 使 得 衍生 物 与 溶 剂 形 成 共 沸 混 合 物 而 导 致 损 失 络 合 ： 某 些 样 品 会 与 重 金 属 离 子 络 合 ， 这 种 情况 虽 较 少 遇 到 ， 但 往 往 是 某 些 样 品 制 备 中损 失 的 一 个 因 素 。 蒸 发 ： 有 的 是 待 测 物 本 身 的 挥 发 性 （ 如 苯 丙 胺 ） 因 蒸 发 所 得 残 渣 未 能 完 全 溶 于 所 加 的 小 体 积溶 剂 中 因 减 压 浓 缩 引 起 溶 液 暴 沸 而 导 致 损 失 在 吹 氮 过 程 中 使 样 品 以 气 溶 胶 形 式 逸 出 。 溶 剂 中 杂 质原 因 ： 由 于 溶 剂 体 积 较 其 它 试 剂 为 大 ， 即 使 原 来 杂 质 浓 度 较 低 ，浓 集 时 或 通 过 色 谱 柱 时 ， 浓 度 显 著 增 大 而 干 扰 测 定 。 更 严 重 的 是 干 扰 物 在 每 批 溶 剂 或 试 剂 中 有 所 不 同 ， 而 影响 不 同 实 验 室 间 、 各 分 析 人 员 间 的 实 验 结 果 。解 决 方 法 ： 采 用 高 纯 度 溶 剂 （ 价 贵 ） 溶 剂 在 使 用 前 重 新 应 用 全 玻 璃 仪 器 重 蒸 馏 采 用 专 属 的 检 测 方 法 。 化 学 衍 生 化 带 来 的 杂 质 由 于 试 剂 未 经 纯 化 致 使 色 谱 分 析 中 往 往 呈 现 额 外的 杂 质 峰 。 实 验 环 境 和 器 皿 、 材 料 的 污 染 实 验 室 的 去 污 剂 、 润 滑 油 、 滤 纸 、 玻 璃 器 皿 不 够洁 净 ， 蒸 馏 水 纯 度 不 够 等 。 校准曲线的要求 一 、 配 制 一 系 列 标 准 溶 液 ， 在 同 样 的 测 量 条 件 下 ， 测 定标 准 溶 液 和 样 品 溶 液 的 吸 光 度 ， 绘 制 吸 光 度 与 标 准 溶 液浓 度 间 的 校 准 曲 线 ， 然 后 从 校 准 曲 线 上 依 据 样 品 的 吸 光度 查 得 待 测 元 素 的 浓 度 或 含 量 。 为 确 保 分 析 准 确 ， 应 注意 以 下 几 点 ： 1、 待 测 元 素 浓 度 高 时 ， 会 出 现 校 准 曲 线 弯 曲 的 现 象 ，因 此 ， 所 配 制 标 准 溶 液 的 浓 度 范 围 应 服 从 比 尔 定 律 。 最佳 分 析 范 围 的 吸 光 度 应 在 0.10.5之 间 。 绘 制 校 准 曲 线的 点 应 不 少 于 4个 。 2、 标 准 溶 液 与 样 品 溶 液 应 用 相 同 的 试 剂 处 理 ， 且 应 具有 相 似 的 组 成 。 因 此 ， 在 配 制 标 准 溶 液 时 ， 应 加 入 与 样品 组 成 相 同 的 基 体 。 使 用 与 样 品 具 有 相 同 基 体 而 不 含 待测 元 素 的 空 白 溶 液 将 仪 器 调 零 ， 或 从 样 品 的 吸 光 度 中 扣除 空 白 值 。 3、 应 使 操 作 条 件 在 整 个 分 析 过 程 中 保 持 不 变 。 二 、 校 准 曲 线 是 描 述 待 测 物 质 浓 度 或 量 与 相 应测 量 仪 器 响 应 值 或 其 他 指 示 量 之 间 的 定 量 关 系曲 线 。 校 准 曲 线 包 括 工 作 曲 线 （ 绘 制 标 准 曲 线的 溶 液 需 与 样 品 分 析 步 骤 完 全 相 同 ） 和 标 准 曲线 （ 标 液 的 分 析 步 骤 有 所 省 略 ， 如 不 经 过 前 处理 等 ） 。 每 次 分 析 样 品 时 必 须 配 制 校 准 曲 线 ，应 由 空 白 及 35个 已 知 浓 度 的 标 准 溶 液 ， 按 照与 样 品 相 同 的 测 定 步 骤 ， 包 括 样 品 的 前 处 理 操作 制 成 。 如 校 准 曲 线 与 浓 度 具 有 极 好 的 直 线 关系 ， 并 且 有 高 度 的 重 现 性 ， 可 在 每 次 分 析 样 品时 只 选 择 两 个 适 当 浓 度 的 标 准 物 和 空 白 ， 同 时进 行 测 定 ， 以 核 校 原 有 校 准 曲 线 。 利 用 校 准 曲线 （ 工 作 曲 线 ） 推 测 样 品 浓 度 时 ， 样 品 浓 度 应在 所 作 校 准 曲 线 的 浓 度 范 围 以 内 ， 不 得 将 校 准曲 线 任 意 外 延 。
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