医学实验室生物安全防护详细

BIOHAZARDBIOHAZARD生物危害标识生物危害标识第1页/共69页第2页/共69页实验室生物安全法规实验室生物安全法规实验室生物安全法规实验室生物安全法规 20032003年年1212月月实验室生物安全通用要求实验室生物安全通用要求通过了专家审定，并很快申报通过了专家审定，并很快申报国家标准国家标准 20032003年年SARSSARS期间，有关部门制订了期间，有关部门制订了传染性非典型肺炎病毒研究实验室传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理办法暂行管理办法 20042004年年1111月月1212日我国发布了日我国发布了病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例第3页/共69页严重生物安全事故案例严重生物安全事故案例严重生物安全事故案例严重生物安全事故案例 20032003年年9 9月新加坡实验室人员感染月新加坡实验室人员感染SARSSARS病毒病毒 20032003年年9 9月台湾实验室人员感染月台湾实验室人员感染SARSSARS病毒病毒 20042004年年4 4月我国国家月我国国家CDCCDC的的SARSSARS实验室研究生感染实验室研究生感染SARSSARS病毒并传染给病毒并传染给别人别人第4页/共69页动物实验中的生物安全事故动物实验中的生物安全事故动物约有动物约有200200种传染病、种传染病、8080种寄生虫病，其中半数可以感染给人种寄生虫病，其中半数可以感染给人动物感染实验，有病原体随尿粪、唾液排出，有感染性气溶胶扩散的危险动物感染实验，有病原体随尿粪、唾液排出，有感染性气溶胶扩散的危险剖检动物时，有接触病原体的危险，还可能被动物咬伤或注射器、手术刀剖检动物时，有接触病原体的危险，还可能被动物咬伤或注射器、手术刀的创伤等的创伤等肿瘤病毒引起的潜在致癌性等生物危害肿瘤病毒引起的潜在致癌性等生物危害第5页/共69页国内外曾多次发生因饲养野鼠或大白鼠而国内外曾多次发生因饲养野鼠或大白鼠而发生肾综合征出血热流行发生肾综合征出血热流行19991999年广州中医药大学博士后张某从事年广州中医药大学博士后张某从事“九五九五”国家攻关课题国家攻关课题“补肾法治疗老年性补肾法治疗老年性痴呆痴呆”的实验时接触大鼠，的实验时接触大鼠，3 3个月后感染个月后感染流行性出血热，流行性出血热，20032003年被诊断为肾功能衰年被诊断为肾功能衰竭，竭，20062006年进行肾移植手术年进行肾移植手术20022002年年,湖北省药检学校的一名毕业生在湖北省药检学校的一名毕业生在某药厂从事动物实验工作，由于接触了带某药厂从事动物实验工作，由于接触了带出血热病毒的实验动物而感染流行性出血出血热病毒的实验动物而感染流行性出血热不治死亡热不治死亡第6页/共69页20012001年年6 6月月，北北京京发发生生了了因因使使用用质质量量不不合合格格实实验验动动物物和和动动物物实实验验不不规规范范致致使使鼠鼠源源性性人人兽兽共共患患病病流流行行性性出出血血热热感感染染：一一名名院院士士死死亡亡和和700700多多师生紧急预防接种师生紧急预防接种20062006年年，东东北北三三省省由由于于个个体体户户养养殖殖、贩贩运运不不合合格格实实验验动动物物，导导致致几几十十名名教教学学科科研研人人员员感感染染流流行性出血热行性出血热广广东东省省，19901990年年和和19971997年年分分别别出出现现因因使使用用不不合合格格实实验验动动物物而而感感染染人人畜畜共共患患病病的的严严重重生生物物安安全全事故事故第7页/共69页SARSSARS病毒蛋白模型病毒蛋白模型HIVHIV病毒病毒第8页/共69页生物安全生物安全生物安全生物安全防范处理微生物及其毒素对人体危害的综合性措施危害的来源：生物实验室生物实验室生物实验室生物实验室 生物恐怖活动生物恐怖活动生物恐怖活动生物恐怖活动第9页/共69页实验室生物安全防护实验室生物安全防护 实实实实验验验验室室室室工工工工作作作作人人人人员员员员所所所所处处处处理理理理的的的的实实实实验验验验对对对对象象象象含含含含有有有有致致致致病病病病的的的的微微微微生生生生物物物物及及及及其其其其毒毒毒毒素素素素时时时时，通通通通过过过过在在在在实实实实验验验验室室室室设设设设计计计计建建建建造造造造、使使使使用用用用个个个个体体体体防防防防护护护护装装装装置置置置、严严严严格格格格遵遵遵遵从从从从标标标标准准准准化化化化的的的的工工工工作作作作及及及及操操操操作作作作程程程程序序序序和和和和规规规规程程程程等等等等方方方方面面面面采采采采取取取取综综综综合合合合措措措措施施施施，确确确确保保保保实实实实验验验验室室室室工工工工作作作作人人人人员员员员不不不不受受受受实实实实验验验验对对对对象象象象侵侵侵侵染染染染，确确确确保保保保周周周周围围围围环境不受其污染环境不受其污染环境不受其污染环境不受其污染第10页/共69页生物安全的重要性生物安全的重要性 应对公共卫生突发事件的需要应对公共卫生突发事件的需要 防止外来生物危险因子侵入的需要防止外来生物危险因子侵入的需要 实验室工作的需要实验室工作的需要 防止医院感染的需要防止医院感染的需要 防止人畜共患病的需要防止人畜共患病的需要 反生物恐怖的需要反生物恐怖的需要第11页/共69页生物安全的内容生物安全的内容生物危险度的分级生物危险度的分级生物危险度的分级生物危险度的分级生物安全分级生物安全分级生物安全分级生物安全分级生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室实验室设备实验室设备实验室设备实验室设备生物安全管理和操作技术生物安全管理和操作技术生物安全管理和操作技术生物安全管理和操作技术个人生物安全防护装备个人生物安全防护装备个人生物安全防护装备个人生物安全防护装备卫生保健和医学监测卫生保健和医学监测卫生保健和医学监测卫生保健和医学监测第12页/共69页生物危险（生物危险（riskrisk）的分级）的分级 I I级：个体和群体低危险级：个体和群体低危险 IIII级：中等个体危险，有限群体危险级：中等个体危险，有限群体危险 IIIIII级：高个体危险，低群体危险级：高个体危险，低群体危险 IVIV级：高度的个体和群体危险级：高度的个体和群体危险第13页/共69页当实验室使用传染性或有潜在传染性材料前，必须进当实验室使用传染性或有潜在传染性材料前，必须进当实验室使用传染性或有潜在传染性材料前，必须进当实验室使用传染性或有潜在传染性材料前，必须进行微生物危害评估。行微生物危害评估。行微生物危害评估。行微生物危害评估。应依据传染性微生物致病能力的程度、应依据传染性微生物致病能力的程度、应依据传染性微生物致病能力的程度、应依据传染性微生物致病能力的程度、传播途径、稳定性、感染剂量、操作时的浓度和规模、实传播途径、稳定性、感染剂量、操作时的浓度和规模、实传播途径、稳定性、感染剂量、操作时的浓度和规模、实传播途径、稳定性、感染剂量、操作时的浓度和规模、实验对象的来源、是否有动物实验数据、是否有有效的预防验对象的来源、是否有动物实验数据、是否有有效的预防验对象的来源、是否有动物实验数据、是否有有效的预防验对象的来源、是否有动物实验数据、是否有有效的预防和治疗方法等诸因素进行微生物危害评估和治疗方法等诸因素进行微生物危害评估和治疗方法等诸因素进行微生物危害评估和治疗方法等诸因素进行微生物危害评估 通过微生物危害评估确定对象微生物应在哪一级的生通过微生物危害评估确定对象微生物应在哪一级的生通过微生物危害评估确定对象微生物应在哪一级的生通过微生物危害评估确定对象微生物应在哪一级的生物安全防护实验室中进行操作物安全防护实验室中进行操作物安全防护实验室中进行操作物安全防护实验室中进行操作 根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管理制度和紧急事故处理办法，形成书面文件并严格遵守执理制度和紧急事故处理办法，形成书面文件并严格遵守执理制度和紧急事故处理办法，形成书面文件并严格遵守执理制度和紧急事故处理办法，形成书面文件并严格遵守执行行行行微生物危害评估微生物危害评估第14页/共69页 第一级第一级：不引起健康成年人疾病：不引起健康成年人疾病 第二级第二级：可通过：可通过破损皮肤、消化道及粘膜暴露破损皮肤、消化道及粘膜暴露等方等方式引起人类疾病式引起人类疾病 第三级第三级：本土或外来的微生物，通过：本土或外来的微生物，通过吸入途径吸入途径暴露暴露时可以造成严重或潜在致死性疾病时可以造成严重或潜在致死性疾病 第四级第四级：可以引起：可以引起严重且威胁生命严重且威胁生命的人类疾病，可的人类疾病，可通过通过气溶胶气溶胶传播，或相关的传播危险性不明的微生传播，或相关的传播危险性不明的微生物物 生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分为分为四四个生物安全防护级别个生物安全防护级别美国美国美国美国CDC/NIHCDC/NIHCDC/NIHCDC/NIH对对对对微生物微生物微生物微生物指导性指导性指导性指导性分分分分级级级级第15页/共69页我国对我国对病原微生物病原微生物的分类的分类 第一类第一类第一类第一类：能够引起人类或者动物能够引起人类或者动物非常严重疾病非常严重疾病非常严重疾病非常严重疾病的微的微生物，以及我国生物，以及我国尚未发现尚未发现或者或者已经宣布消灭已经宣布消灭的微生的微生物物 第二类第二类第二类第二类：能够引起人类或者动物能够引起人类或者动物严重疾病严重疾病严重疾病严重疾病，比较容，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物间传播的微生物 第三类第三类第三类第三类：能够引起人类或者动物能够引起人类或者动物疾病疾病疾病疾病；不构成严重；不构成严重危害，传播风险有限；具备有效治疗和预防措施危害，传播风险有限；具备有效治疗和预防措施 第四类第四类第四类第四类：通常情况下通常情况下不会引起人类或者动物疾病不会引起人类或者动物疾病不会引起人类或者动物疾病不会引起人类或者动物疾病的的微生物微生物第一类和第二类病原微生物统称为第一类和第二类病原微生物统称为第一类和第二类病原微生物统称为第一类和第二类病原微生物统称为高致病性高致病性高致病性高致病性病原微生物病原微生物病原微生物病原微生物第16页/共69页实验室生物安全防护的基本原实验室生物安全防护的基本原则则实验室生物安全防护的内容包括安全设备、个体防护装置和措施（一级屏障一级屏障一级屏障一级屏障）；实验室的特殊设计和建设（分区、单向气流）（分区、单向气流）要求（二级屏障二级屏障二级屏障二级屏障）；严格的管理制度和标准化的操作程序及规程（三级屏障三级屏障三级屏障三级屏障）应将每一特定实验室从立项、建设到使用维护的全过程中有关生物安全防护综合措施的内容编入各实验室的生物安全手册中。必须设有专职的生物安全负责人 生物安全防护实验室生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分为四四四四个生物安全防护级别第17页/共69页管理制度管理制度实验室内设置和准入实验室内设置和准入 在主实验室内应合理设置清洁区、半污染区和污染在主实验室内应合理设置清洁区、半污染区和污染在主实验室内应合理设置清洁区、半污染区和污染在主实验室内应合理设置清洁区、半污染区和污染区区区区 非实验有关人员和物品不得进入实验室非实验有关人员和物品不得进入实验室非实验有关人员和物品不得进入实验室非实验有关人员和物品不得进入实验室 实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验室及其岗位之前必须经过实验室的批准进入实验室及其岗位之前必须经过实验室的批准进入实验室及其岗位之前必须经过实验室的批准进入实验室及其岗位之前必须经过实验室的批准第18页/共69页实验室工作人员资格和培训实验室工作人员资格和培训实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人员。在独立工作前须在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训，达到合格标准，方可开始工作实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室安全教育，自愿从事实验室工作实验室的工作人员必须遵守遵守实验室的所有制度、规定和操作规程第19页/共69页实验室特殊管理实验室特殊管理对可能的危险因素，制订保证安全的对可能的危险因素，制订保证安全的SOPSOP事前进行有效的培训和模拟训练事前进行有效的培训和模拟训练对于意外事故要能够提供包括对于意外事故要能够提供包括紧急救助紧急救助或专或专业性业性保健治疗保健治疗的措施，足以应付紧急情况的措施，足以应付紧急情况实验室事故处理及上报实验室事故处理及上报第20页/共69页 安全设备安全设备安全设备安全设备和和和和个体防护个体防护个体防护个体防护是确保实验室工作人员不与致病是确保实验室工作人员不与致病是确保实验室工作人员不与致病是确保实验室工作人员不与致病微生物及其毒素直接接触的微生物及其毒素直接接触的微生物及其毒素直接接触的微生物及其毒素直接接触的一级屏障一级屏障一级屏障一级屏障。生物安全柜生物安全柜生物安全柜生物安全柜是最重要的安全设备，形成最主要的防护是最重要的安全设备，形成最主要的防护是最重要的安全设备，形成最主要的防护是最重要的安全设备，形成最主要的防护屏障。实验室应按要求分别配备屏障。实验室应按要求分别配备屏障。实验室应按要求分别配备屏障。实验室应按要求分别配备、级生物安级生物安级生物安级生物安全柜。所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气全柜。所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气全柜。所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气全柜。所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操作，除实际上不可实施外，都必须在生物安溶胶的操作，除实际上不可实施外，都必须在生物安溶胶的操作，除实际上不可实施外，都必须在生物安溶胶的操作，除实际上不可实施外，都必须在生物安全柜内进行全柜内进行全柜内进行全柜内进行 不得用不得用不得用不得用超净工作台超净工作台超净工作台超净工作台代替代替代替代替生物安全柜生物安全柜生物安全柜生物安全柜安全设备和个体防护（一级屏障一级屏障）第21页/共69页 必要时实验室应配备其它安全设备，如设置配有排风必要时实验室应配备其它安全设备，如设置配有排风净化装置净化装置的排气罩等，或采用其它不使致病微生物逸的排气罩等，或采用其它不使致病微生物逸出确保安全的设备出确保安全的设备 实验室所配备的实验室所配备的离心机离心机应在生物安全柜或其它安全设应在生物安全柜或其它安全设备中使用，否则必须使用安全备中使用，否则必须使用安全密封的专用离心头（杯）密封的专用离心头（杯）必须给实验室工作人员配备必要的必须给实验室工作人员配备必要的个体防护用品个体防护用品，如，如个人防护服、防毒面具、安全眼镜或眼罩个人防护服、防毒面具、安全眼镜或眼罩第22页/共69页生生物物安安全全柜柜（biosafety cabinet）是是处处理理危危险险性性微微生生物物时时所所用用的的箱箱型型空空气气净净化安全装置化安全装置 生物安全柜生物安全柜第23页/共69页I级生物安全柜（class I biosafety cabinet）至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，外部空气由操作窗至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，外部空气由操作窗吸进吸进，而，而不可能由操作窗口不可能由操作窗口逸出；逸出；100%由密接排气导管排到室外由密接排气导管排到室外（类似于通风厨）工作状态时保证工作状态时保证工作人员工作人员不受侵害，但不保证不受侵害，但不保证实验对象实验对象不受污染不受污染。现已很少使用现已很少使用第24页/共69页 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气。工作时柜正面玻璃推拉窗打开一半，上部为观察窗，下部为操作窗口。外部空气由操作窗吸进，而不可能由操作窗口逸出 工作状态下遵守操作规程时既保证工作人员工作人员不受侵害，又保证实验对象实验对象及环境环境不受污染级生物安全柜（class biosafety cabinet）第25页/共69页 II II 级级生生物物安安全全柜柜根根据据结结构构以以及及气气流流分分配配不不同同主要是外排气流不同分为：主要是外排气流不同分为：A1A1型型:（0.38m/s0.38m/s，30%30%排在室内排在室内 ）A2A2型型:（0.5m/s0.5m/s，30%30%外排，原外排，原B3 B3 型型）B1B1型型:（0.5m/s0.5m/s，70%70%接管道外排）接管道外排）B2B2型型:（0.5m/s0.5m/s，100%100%接管道外排）接管道外排）第26页/共69页级生物安全柜（class biosafety cabinet）至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气。正面上部为观察窗，下部流空气。正面上部为观察窗，下部流空气。正面上部为观察窗，下部流空气。正面上部为观察窗，下部手套箱式操手套箱式操手套箱式操手套箱式操作口作口作口作口 箱内对外界保持负压箱内对外界保持负压箱内对外界保持负压箱内对外界保持负压可确保人体与柜内物品可确保人体与柜内物品可确保人体与柜内物品可确保人体与柜内物品完全隔绝完全隔绝完全隔绝完全隔绝第27页/共69页 全封闭的、气密结构的通风柜全封闭的、气密结构的通风柜 通过与柜体联结的通过与柜体联结的橡胶手套橡胶手套进行操作；进行操作；柜内保持至少柜内保持至少120Pa120Pa的负压的负压(0.50wg)(0.50wg)；供气通过供气通过HEPAHEPA抽入内；抽入内；外外排排的的气气流流经经过过双双层层HEPAHEPA过过滤滤或或经经HEPAHEPA后再经燃烧处理。后再经燃烧处理。第28页/共69页隔离器隔离器第29页/共69页IIIIII第30页/共69页高效空气高效空气高效空气高效空气过滤过滤过滤过滤工作人员工作人员工作人员工作人员安全安全安全安全无涡流单无涡流单无涡流单无涡流单向流空气向流空气向流空气向流空气实验对象实验对象实验对象实验对象不受污染不受污染不受污染不受污染手套箱式手套箱式手套箱式手套箱式操作口操作口操作口操作口I级级有有是是否否否否否否II级级有有是是是是是是否否III级级有有是是是是是是是是第31页/共69页个人生物安全防护装备个人生物安全防护装备个人生物安全防护装备个人生物安全防护装备实验室防护服面部防护手套呼吸防护第32页/共69页微生物和生物安全实验室生物安全实验室不同于其它普通实验室，是从事对人可能产生危害的生物实验场所 尤其是三级和四级生物安全实验室主要用于对人、畜有高度传染性的烈性传染病的研究（如反恐）和检测（如SARSSARS）的工作第33页/共69页 实验室设施结构和通风设计实验室设施结构和通风设计 实验室分区实验室分区:清洁区清洁区 半污染区半污染区 污染区污染区 单向气流单向气流(负压负压):):外界外界 HEPA HEPA 清洁区清洁区 半污染区半污染区 污染区污染区 HEPA HEPA 外界外界第34页/共69页生物安全实验室的分类分级生物安全实验室的分类分级实验室分类实验室分类 一般生物安全防护实验室一般生物安全防护实验室(不使用实验脊椎动物和昆虫)实验脊椎动物生物安全防护实验室（A）实验室生物安全防护分级实验室生物安全防护分级 一级生物安全防护实验室，一级生物安全防护实验室，一级生物安全防护实验室，一级生物安全防护实验室，简称简称简称简称BSL1BSL1或或或或P1P1二级生物安全防护实验室，二级生物安全防护实验室，二级生物安全防护实验室，二级生物安全防护实验室，简称简称简称简称BSL2BSL2或或或或P2P2三级生物安全防护实验室，三级生物安全防护实验室，三级生物安全防护实验室，三级生物安全防护实验室，简称简称简称简称BSL3BSL3或或或或P3P3四级生物安全防护实验室，四级生物安全防护实验室，四级生物安全防护实验室，四级生物安全防护实验室，简称简称简称简称BSL4BSL4或或或或P4P4 一级最低，四级最高一级最低，四级最高第35页/共69页 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对用于对健康成年人已知无致病作用的微生物健康成年人已知无致病作用的微生物，如，如用于教学的普通微生物实验室等。用于教学的普通微生物实验室等。包含微生物举例包含微生物举例 大肠杆菌 格鲁伯耐格里原虫 感染性犬肝炎病毒 枯草杆菌一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室第36页/共69页实验室应设洗手池（靠近出口处）实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙，不得铺设地毯实验室中的家具应牢固。应有专门放置生物废弃物容器的台（架）实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室实验室设计及建造实验室设计及建造第37页/共69页 工作过程中禁止非工作人员进入实验室。接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及存储食物一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室标准微生物操作规程第38页/共69页 使用机械移液器吸取液体，禁止口吸使用机械移液器吸取液体，禁止口吸 制定尖锐器具的安全操作规程制定尖锐器具的安全操作规程 按实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产按实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产生生 每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出要随每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出要随时消毒时消毒 所有培养物、废弃物在运出实验室前须进行灭活所有培养物、废弃物在运出实验室前须进行灭活（如高压）；需运出实验室灭活的物品须放在专（如高压）；需运出实验室灭活的物品须放在专用密闭容器内用密闭容器内第39页/共69页一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室 安全设施和个体防护安全设施和个体防护一般无须使用生物安全柜等专用安全设备一般无须使用生物安全柜等专用安全设备工作人员在实验室应穿工作服，带防护眼镜工作人员在实验室应穿工作服，带防护眼镜工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套第40页/共69页n实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物对人或环境具有中等潜在危害的微生物n n包含微生物举例包含微生物举例 麻疹病毒 沙门氏菌 乙型肝炎病毒 HIV 血清学检测 衣原体 志贺氏菌二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室第41页/共69页二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室 设计和建造的特殊要求设计和建造的特殊要求 消毒设施（高压灭菌锅、化学消毒装置等）洗眼装置 可自动关闭的门锁 门口有发光指示装置 换气装置（3-4次/小时）第42页/共69页满足一级实验室满足一级实验室 (标准微生物操作规程标准微生物操作规程)各款要求，在此基础上特别注意：各款要求，在此基础上特别注意：制定出入制度制定出入制度实验室人口贴上实验室人口贴上生物危险标志生物危险标志制定实验室特定的生物安全操作规则制定实验室特定的生物安全操作规则每年一次最新培训制度每年一次最新培训制度二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室特殊微生物操作规程特殊微生物操作规程第43页/共69页使用使用使用使用塑料器材塑料器材塑料器材塑料器材代替代替代替代替玻璃器材玻璃器材玻璃器材玻璃器材禁止禁止禁止禁止用手处理破碎的玻璃器具用手处理破碎的玻璃器具用手处理破碎的玻璃器具用手处理破碎的玻璃器具培养基、组织、体液及其它具有培养基、组织、体液及其它具有培养基、组织、体液及其它具有培养基、组织、体液及其它具有 潜在危险性的废弃物须放在防漏的容潜在危险性的废弃物须放在防漏的容潜在危险性的废弃物须放在防漏的容潜在危险性的废弃物须放在防漏的容器中储存、运输及消毒、灭菌器中储存、运输及消毒、灭菌器中储存、运输及消毒、灭菌器中储存、运输及消毒、灭菌第44页/共69页v用过的针头用过的针头禁止禁止折弯、剪断、折断、重新盖折弯、剪断、折断、重新盖帽，帽，禁止禁止用手直接从注射器取下。用手直接从注射器取下。v用过的针头用过的针头必须必须直接放入防穿透的容器中。直接放入防穿透的容器中。v非一次性利器非一次性利器必须必须放入厚壁容器中并运送到放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压消毒特定区域消毒，最好进行高压消毒第45页/共69页工作人员应接受必要的免疫接种免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗，卡介苗等)必要时收集从事危险性工作人员的本底血清严格执行实验室工作人员年度采血检测 HIV 抗体和备案制度。每半年进行一次 HIV 抗体检测，并保留样品对从事艾滋病实验室工作的人员，因工作中意外事故造成HIV 职业暴露者，所在单位应负责解决抗病毒及其它相应治疗的医疗费用第46页/共69页实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案禁止将无关动物带入实验室第47页/共69页处理以下致病微生物时应在生物安全柜(级)中进行，包括:高浓度高浓度 大容量大容量 有喷溅可能性有喷溅可能性上述材料的离心操作如使用密封的离心机转子或安全离心杯，且只在生物安全柜中开闭，可在实验室中进行级生物安全柜必须每年进行一次年度现场检测二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室安全设施和个体防护安全设施和个体防护第48页/共69页当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行时，须使用面部保护装置应有相应的SOP在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服，不得穿着外出。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃当手可能接触感染材料、污染的设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室，工作完全结束后方不得戴着手套离开实验室，工作完全结束后方不得戴着手套离开实验室，工作完全结束后方不得戴着手套离开实验室，工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用第49页/共69页下列操作必须在下列操作必须在P2实验室或全排式实验室或全排式生物安全柜中进行生物安全柜中进行l l、含漱液、血清和血液等样品的诊断检测、含漱液、血清和血液等样品的诊断检测2 2、溶解、固定或用其他方法处理灭活的病毒和、溶解、固定或用其他方法处理灭活的病毒和(或或)无传染性无传染性 的病毒基因片的病毒基因片段段 3 3、常规的细菌和毒素检查、常规的细菌和毒素检查4 4、可能产生气溶胶的样品处理、可能产生气溶胶的样品处理5 5、临床样品的包装、分装、临床样品的包装、分装6 6、离心管和离心机转头的封闭和开启、离心管和离心机转头的封闭和开启第50页/共69页n n实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素的致病微生物及其毒素。通常已有预防的疫苗。通常已有预防的疫苗n包含微生物举例包含微生物举例 结核分枝杆菌结核分枝杆菌 牛分枝杆菌牛分枝杆菌 鼠疫杆菌鼠疫杆菌 炭疽杆菌炭疽杆菌 Q Q热病原体热病原体 HIV(HIV(血清学检测除外血清学检测除外)澳大利亚立克次氏体澳大利亚立克次氏体 加拿大立克次氏体加拿大立克次氏体 三级生物安全防护实验室三级生物安全防护实验室第51页/共69页下列操作必须在下列操作必须在P3实验室中进行实验室中进行l l、用细胞培养的方法分离病毒用细胞培养的方法分离病毒2 2、收集或浓缩病毒或其培养产物、收集或浓缩病毒或其培养产物 3 3、用活病毒或病毒的全基因接种动物、用活病毒或病毒的全基因接种动物4 4、咽拭子样品的诊断检测、咽拭子样品的诊断检测第52页/共69页P3实验室示意图第53页/共69页n实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性高度的危险性高度的危险性高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素n与上述情况类似的不明微生物不明微生物不明微生物不明微生物，也必须在四级四级四级四级生物安全防护实验室中进行，带有充分数据后再决定此种微生物或毒素应在四级还是在较低级别的实验室中处理n n包含微生物举例包含微生物举例包含微生物举例包含微生物举例 黄病毒黄病毒 埃博拉病毒埃博拉病毒 中欧蜱传脑炎病毒中欧蜱传脑炎病毒 四级生物安全防护实验室四级生物安全防护实验室第54页/共69页美国国立卫生研美国国立卫生研究所究所美国疾病控制美国疾病控制中心中心病病 源源操操 作作一级屏障一级屏障二级屏障二级屏障P1BSL1不会经常引发健康成人疾病标准的微生物操作不要求开放实验台、洗手池P2BSL2人类病源菌，因皮肤伤口、吸入、黏膜曝露而发生危险BSL1操作外加：1、限制进入2、有生物危险警告标志3、“锐器”安全措施4、生物安全手册，其中规定废物消毒和医疗观察1级、2级生物安全柜实验服、手套、若需要则采取面部保护措施 BSL-1外加：高压灭菌锅P3BSL3内源性和外源性病源，可通过气溶胶传播，能导致严重后果或生命危险 BSL-3 BSL-2操作外加：1、控制进入2、所有废物消毒3、洗涤前，实验服消毒4、有基础血清1级、2级生物安全柜保护性实验服、手套、若需要则采取呼吸保护措施BSL-2外加：1、和进入走廊隔开2、双门进入，门自动关闭3、排出的空气不循环4、实验室内负压P4BSL4对生命有高度危险的危险性病源或外源性病源：致命、通过气溶胶而致实验室感染：或未知传播风险的有关病源BSL3操作外加：1、进入前换衣服2、出实验室前淋浴3、带出设施的所有材料消毒3级生物安全柜或1级、2级生物安全柜加全身的、供应空气的正压防护服BSL3外加：1、单独建筑或隔离区域2、有供气系统、排气系统、真空系统、消毒系统3、其他有关要第55页/共69页 样品从一个实验室转送到另外一个实验室，必须是血清或血样品从一个实验室转送到另外一个实验室，必须是血清或血浆，除特殊需要外，一般不能用全血浆，除特殊需要外，一般不能用全血且需置于带有盖帽的试管内，防止样品流出，试管上应有明且需置于带有盖帽的试管内，防止样品流出，试管上应有明显的标记。清楚地标记为显的标记。清楚地标记为感染性材料感染性材料感染性材料必须放在感染性材料必须放在密闭的管子密闭的管子中，再放入含有足够吸水材中，再放入含有足够吸水材料的生物危险管中，以防泄漏。将试管放入专门带盖的容器料的生物危险管中，以防泄漏。将试管放入专门带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理，在所放试剂管周围上下均内，容器的材料要易于消毒处理，在所放试剂管周围上下均垫有软性物质，以免破碎，容器外表有垫有软性物质，以免破碎，容器外表有HIVHIV检测专用字样。检测专用字样。如果路程较远或者气候炎热时，盛有样本的容器应至于如果路程较远或者气候炎热时，盛有样本的容器应至于44以下转运以下转运样本的转送和发放样本的转送和发放样本的转送和发放样本的转送和发放生物危险生物危险级级第56页/共69页实验室的生物安全防实验室的生物安全防护护第57页/共69页职业暴露职业暴露是指实验室、医护、预防保健人员以及有关的监管工作人员，在从事艾滋病防治工作及相关工作的过程中意外被艾滋病毒感染者或艾滋病患者的血液、体液污染了破损的皮肤或非胃肠道粘膜，或被含有艾滋病病毒的血液、体液污染了的针头及其它锐器刺破皮肤，而具有被艾滋病病毒感染的可能性的情况实验室生物安全事故处理（以（以HIVHIV为例）为例）第58页/共69页美国美国美国美国CDCCDCCDCCDC的研究显示：的研究显示：的研究显示：的研究显示：影响针头刺伤后的危险性因素包括 伤口的深度伤口的深度有可见的血液从伤口溢出有可见的血液从伤口溢出针头刺破了静脉或动脉针头刺破了静脉或动脉污染源来自于晚期艾滋病病毒感染者污染源来自于晚期艾滋病病毒感染者(病毒载量高病毒载量高)第59页/共69页皮肤针刺伤或切割伤：立即用肥皂和大量流水冲洗，尽可能挤出损伤出的血液，用70%70%乙醇或其它消毒剂消毒伤口皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染部位，并用适当的消毒剂浸泡，如70%70%乙醇或其它皮肤消毒剂紧急处理措施紧急处理措施第60页/共69页粘膜污染：用大量流水或生理盐水彻底冲洗污染部位衣物污染：尽快脱掉污染的衣物，进行消毒处理污染物泼溅：发生小范围污染物泼溅事故时，应立即进行消毒处理；发生大范围污染物泼溅事故时，应立即通知实验室主管领导和安全负责人到达事故现场查清情况，确定消毒的程序第61页/共69页 由于预防性治疗药物的效力和毒性以及不同由于预防性治疗药物的效力和毒性以及不同暴露方式导致暴露方式导致HIVHIV感染的危险性不同，所以感染的危险性不同，所以预防性治疗药物应在预防性治疗药物应在HIVHIV职业暴露预防性治职业暴露预防性治疗药品储备库（点）和疗药品储备库（点）和HIV/AIDSHIV/AIDS防治方面防治方面的专家的指导下使用的专家的指导下使用 根据使用药物反应情况，可改变处方根据使用药物反应情况，可改变处方HIVHIV职业暴露后的预防职业暴露后的预防第62页/共69页对感染可能性很大的医护、检验人员可使用对感染可能性很大的医护、检验人员可使用预防性治疗药物，治疗方案须根据暴露情况预防性治疗药物，治疗方案须根据暴露情况由专家决定。对于感染危险性很小的，建议由专家决定。对于感染危险性很小的，建议不使用药物预防不使用药物预防对可能有危险的人，是否用药治疗，应权衡对可能有危险的人，是否用药治疗，应权衡较低的感染危险性与使用药物的效力和药物较低的感染危险性与使用药物的效力和药物毒、副反应以及坚持用药的依从性等利弊毒、副反应以及坚持用药的依从性等利弊第63页/共69页基基本本用用药药程程序序：两种逆转录酶抑制剂，使用常规治疗剂量，连续服用2828天。如双汰芝（AZTAZT与3TC3TC联合制剂）300 300 mg/mg/次，每日2 2次，用药时间为连续服用2828天。或参考抗病毒治疗指导方案。本程序适用于轻度低危暴露强强化化用用药药程程序序：基本用药程序加一种蛋白酶抑制剂，如佳息患或利托那韦。均使用常规治疗剂量，连续服用2828天。本程序适用于严重暴露第64页/共69页职业暴露后，存在感染艾滋病毒的危险性，但实际感染艾滋病毒的机率机率是很低很低的。研究资料表明，医务工作者被艾滋病病毒污染的针具刺伤针具刺伤后，发生艾滋病病毒感染的机率为 0.33（20/613520/6135），粘膜表面暴露粘膜表面暴露的感染艾滋病病毒的机率为 0.09（1/11431/1143）第65页/共69页最主要的职业是护士护士护士护士和实验室技术员实验室技术员实验室技术员实验室技术员除三名实验室人员是暴露于艾滋病病毒培养以外，其余全部是由于污染血液或体液到19971997年为止，外科医生和被缝合针刺伤的暴露者中没有发生肯定的艾滋病病毒感染分析美国发生的分析美国发生的5252名职业暴露后艾滋病病毒感染者，发现：名职业暴露后艾滋病病毒感染者，发现：第66页/共69页 医护和预防保健等人员对艾滋病病毒感染者和艾滋病患者从事医疗和实验检医护和预防保健等人员对艾滋病病毒感染者和艾滋病患者从事医疗和实验检测活动是比较安全的测活动是比较安全的 执行严格的安全操作及防护措施，医护及检验等人员的暴露事件是可以避免执行严格的安全操作及防护措施，医护及检验等人员的暴露事件是可以避免的的 第67页/共69页第68页/共69页感谢您的观看！第69页/共69页