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12021-6-7 22021-6-7 nRBC表 面 有 丰 富 唾 液 酸 ， 在 中 性 环 境 中 带 负 电 荷 ， 互相 分 离 。 可 通 过 缩 短 细 胞 间 距 ， 以 及 在 致 敏 细 胞 上 的抗 体 之 间 搭 桥 使 RBC凝 集 。F凝 集 一 般 为 二 个 步 骤 抗 体 吸 附 于 RBC抗 原 上 成 为 致 敏 状 态 致 敏 RBC凝 集 形 成 块 状 32021-6-7 标 本 的 采 集 及 要 求一 血 型二 不 规 则 抗 体 的 筛 选 三 交 叉 配 血四一二三四 42021-6-7 标 本 的 采 集 与 要 求 52021-6-7 1.标 本 要 新 鲜 : F 前 三 个 月 内 输 血 或 妊 娠 :配 血 试 验 标 本 抽 取 48h,避 免 因 回 忆 反 应 产 生 的 抗 体 漏 检 。F 新 近 的 输 血 或 妊 娠 ： 可 引 起 意 外 抗 体 迅 速 出 现 ,如 果 对 病 人 的 输 血 史 或 人 身 史 不 明 ,使 用 的 标 本 必 须是 输 血 前 48h内 抽 取 的 。F 血 量 约 为 5ml 。2.使 用 右 旋 糖 酐 、 pvp等 ：F 治 疗 前 抽 取 标 本 备 用 ,防 止 RBC缗 钱 状 凝 集 的 干 扰标 本 要 具 有 代 表 性 ，能 代 表 患 者 目 前 状 况 62021-6-7 3.24小 时 内 输 了 12u血 后 ：F 可 输 注 未 经 交 叉 配 血 的 ABO、 RH同 型 的 血 液 ,因 为 原始 交 叉 配 血 用 的 血 清 已 不 能 代 表 患 者 血 清 的 情 况 。 4.防 止 血 样 的 稀 释 和 溶 血 的 产 生 ：F 溶 血 标 本 一 般 不 使 用 ,因 为 血 清 中 游 离 血 红 蛋 白 可掩 盖 在 输 血 前 实 验 中 抗 体 反 映 引 起 的 溶 血5.标 本 标 识 ： 唯 一 性 标 识 无 误 、 与 输 血 申 请 单 一 致6.使 用 血 浆 标 本 ： 应 排 除 纤 维 蛋 白 原 的 干 扰7.输 血 后 标 本 保 存 ： 2-8 ,至 少 一 周 。 72021-6-7 血 型1. 红 细 胞 悬 液 的 配 制2. 离 心 力 的 标 准3. 离 心 后 结 果 观 察4. 盐 水 试 验5. 正 反 定 型 结 果 不 一 致 原 因 及 处 理 82021-6-7 1.红 细 胞 悬 液 的 配 制F 洗 涤 洗 涤 目 的 : 去 除 RBC表 面 物 质 少 量 的 血 浆 蛋 白 已 溶 解 红 细 胞 的 基 质 （ 有 竞 争 抗 体 的 作 用 ） 抗 凝 剂 （ 有 抗 补 体 的 作 用 ） 至 少 要 用 大 量 生 理 盐 水 洗 一 次F 浓 度2%： 一 般 用 于 抗 体 效 价 的 测 定5%： 一 般 用 于 血 型 鉴 定 、 配 血 试 验 、 抗 球 蛋 白 试 验等 大 多 数 血 型 血 清 学 试 验 10%： 一 般 用 于 测 定 抗 体 的 亲 和 力 试 验 92021-6-7 2. 离 心 力 的 标 准 F 不 同 规 格 离 心 机 ， 力 矩 不 同 ， 统 一 离 心 转 速 ， 但没 有 统 一 离 心 力 。 离 心 转 速 换 算 公 式 ： RCF = 1.118 10-5 (rpm) 2 R (cm)3. 离 心 后 结 果 观 察 注 意 事 项F 将 试 管 成 30-45 角 拿 在 手 上 ， 细 胞 扣 朝 上 ， 手 腕轻 轻 用 力 ， 用 液 体 去 冲 细 胞 扣 。F 切 不 可 用 力 使 劲 摇 试 管 ， 那 样 凝 集 颗 粒 会 被 摇 散 ，弱 凝 集 则 会 误 判 为 阴 性 。 - 细 胞 成 细 沙 状 沿 试 管 壁 流 下+ 细 胞 成 块 状 或 成 齿 状 沿 试 管 壁 流 下 102021-6-7 常 用 的 记 录 符 号 及 所 示 的 凝 集 强 度4+ 一 个 大 的 凝 集 块 ,背 景 透 明 ,无 游 离 细 胞3+ 数 个 大 凝 集 块 ,背 景 透 明 ,无 游 离 细 胞2+ 许 多 小 凝 集 块 ,肉 眼 可 见 ,大 小 均 匀 ,背 景 基 本 透 明 ,有 游离 细 胞1+ 很 小 的 凝 集 块 ,肉 眼 可 见 ,背 景 不 透 明 ,游 离 细 胞 较 多 ,需要 用 显 微 镜 观 察W+ 微 小 凝 集 块 ,肉 眼 很 难 看 清 ,背 景 混 浊 ,要 用 显 微 镜 观 察O 无 凝 集 ,无 溶 血 ,全 部 是 游 离 细 胞 ,要 用 显 微 镜 观 察PH 部 分 溶 血H 完 全 溶 血WF 混 合 外 观 112021-6-7 4.盐 水 试 验F 多 采 用 立 即 离 心 法n 正 确 的 操 作 是 ： RBC悬 液 加 到 血 清 后 立 即 离 心 并 观 察 结 果反 应 时 间 过 长 而 延 误 离 心 对 ABO血 型 系 统 的 抗 体 检 出 影 响室 温 2分 钟 后 离 心 可 能 使 3+ 4+的 凝 集 减 弱 为 0+ 1+,并 有 溶 血室 温 5分 钟 后 离 心 原 有 凝 集 可 能 消 失 ,并 有 溶 血有 的 标 本 延 迟 离 心 原 有 凝 集 会 变 为 既 不 凝 也 不 溶 血 ,难 以 发 现 ABO血 型的 不 配 合 。 （ 多 发 生 在 O型 人 的 血 清 抗 体 与 A型 、 B型或 AB型 红 细 胞 反 应 的 试 验 中 ,发 生 率 为 2%-3%.发 生 机制 是 反 应 强 的 抗 A、 抗 B和 抗 原 强 度 强 的 A、 B抗 原 作用 ,补 体 C1在 有 Ca2+存 在 的 条 件 下 ,固 定 到 红 细 胞 膜上 ,妨 碍 了 红 细 胞 的 凝 集 ,进 一 步 可 能 引 起 溶 血 ） 解 决 的 方 法 ： A:血 清 与 红 细 胞 混 合 后 立 即 离 心 。 B:用 血 浆 或 灭 活 的 血 清 做 试 验 C:用 EDTA盐 水 配 制 红 细 胞 悬 液 , D:稀 释 血 清 122021-6-7 F加 样 时 先 加 血 清 再 加 红 细 胞 ， 以 避 免 漏 加 ；F抗 体 和 抗 原 的 比 例 一 般 为 2： 1。F必 须 要 做 正 反 定 型 实 验 才 能 确 定 血 型 。F正 定 型 试 验 有 条 件 可 加 做 抗 AB（ 检 测 弱 A、 弱 B ）F反 定 型 一 定 要 加 做 O细 胞 ,（ 发 现 不 规 则 抗 体 ） 132021-6-7 5.正 反 定 型 结 果 不 一 致F原 因 ： 技 术 、 受 检 红 细 胞 或 血 清 本 身（ 1） 技 术 和 管 理 错 误L 器 材 不 洁 假 阳L 试 剂 污 染 或 不 足 假 阳L 标 本 和 试 剂 搞 错 假 阳 、 假 阴L 离 心 过 度 或 不 足 假 阳 、 假 阴L结 果 记 录 或 判 断 错 误 假 阳 、 假 阴L漏 加 试 剂 假 阴L阳 性 反 应 产 生 溶 血 现 象 未 能 识 别 假 阴 142021-6-7 （ 2） 标 准 血 清 效 价 太 低 、 亲 和 力 不 强 。 如 抗 A血 清 效 价 不 高 ，可 将 A亚 型 误 定 为 O型 ， AB型 误 定 为 B型 。（ 3） 红 细 胞 悬 液 过 浓 或 过 淡 ， 抗 原 抗 体 比 例 不 适 当 ， 使 反 应不 明 显 ， 误 判 为 阴 性 反 应 。（ 4） 血 清 异 常 华 通 胶 或 血 清 蛋 白 异 常 引 起 串 钱 状 形 成 ， 影 响反 定 性 结 果（ 5） 红 细 胞 致 敏 在 含 高 蛋 白 介 质 试 剂 中 可 发 生 凝 集 ， 产 生假 阳 性（ 6） 近 期 曾 异 型 输 血 ， 病 人 血 液 标 本 成 为 不 同 型 别 的 红 细 胞混 合 物 ， 定 型 时 显 示 “ 混 合 外 观 凝 集 ” 现 象 。 （ 7） 疾 病 因 素 导 致 抗 原 减 弱 某 些 白 血 病 病 人 ABO血 型 抗 原可 受 到 抑 制 ， 检 出 困 难 。（ 8） 红 细 胞 多 凝 集 现 象 RBC因 遗 传 或 获 得 性 的 表 面 异 常 ， 发生 多 凝 集 现 象 。 152021-6-7 （ 9） 获 得 性 类 B 由 于 G-杆 菌 作 用 ， RBC可 获 得 “ 类 B” 活 性（ 10） 异 常 血 浆 蛋 白 病 人 血 浆 中 异 常 的 白 蛋 白 、 球 蛋 白 比 例 异常 和 高 浓 度 的 FIB等 能 导 致 缗 钱 状 形 成 ， 造 成 假 凝 集 现 象（ 11） 近 期 内 进 行 大 量 的 血 浆 置 换 治 疗 ， 影 响 抗 体 效 价 ， 造 成 反定 型 困 难 。（ 12） 不 规 则 抗 体 的 产 生 受 检 者 血 浆 中 ， 含 有 ABO血 型 抗 体 以外 的 不 规 则 抗 体 ， 如 自 身 抗 I， 与 试 剂 A、 B细 胞 上 的 相 应 抗 原 起反 应 。（ 13） 低 丙 种 球 蛋 白 血 症 可 能 会 因 免 疫 球 蛋 白 水 平 全 面 下 降 使血 清 定 型 时 不 见 凝 集 或 仅 见 弱 凝 集 反 应 。 （ 14） 药 物 等 因 素 药 物 、 右 旋 糖 酐 等 静 脉 注 射 某 些 造 影 剂 可 引起 红 细 胞 聚 集 而 类 似 凝 集 。 （ 15） 年 龄 因 素 如 新 生 儿 、 老 年 人 等 。 162021-6-7 正 反 定 型 不 一 致 的 处 理 方 法F 首 先 要 重 做 试 验 一 次 。 严 格 执 行 操 作 规 程 ， 使 用 质 量 合 格 的 试 剂 以 及 细 心 观 察 结果 ， 可 解 决 明 显 的 问 题 .F 对 一 些 疑 难 问 题 需 进 一 步 检 查 。 可 初 步 采 取 以 下 措 施 ：1)重 新 抽 样 ， 纠 正 因 污 染 或 搞 错 标 本 造 成 的 不 符 。2)将 红 细 胞 洗 涤 数 次 ， 配 成 5%盐 水 细 胞 悬 液 ， 用 抗 A、 抗 B、 抗 A+B做 实 验 ，可 得 到 其 他 有 用 信 息 。 有 条 件 加 做 抗 H试 验 3)对 受 检 者 作 直 接 抗 人 球 蛋 白 试 验 ， 看 RBC有 没 有 被 致 敏4)如 疑 为 A抗 原 或 B抗 原 减 弱 ， 可 将 受 检 红 细 胞 与 抗 A或 抗 B血 清 作 吸 收 放 散 试验 。5)如 试 验 结 果 红 细 胞 成 缗 钱 状 排 列 ， 加 等 渗 盐 水 1滴 混 匀 ， 往 往 可 使 缗 钱 现象 消 失 。 6)做 反 定 型 试 验 时 需 要 加 做 O细 胞 。 172021-6-7 F 疑 难 血 型 病 例1.白 血 病 血 型 变 异2.血 浆 蛋 白 紊 乱3. 类 B4.多 /全 凝 集5.冷 凝 集6.ABO亚 型 182021-6-7 三 、 不 规 则 抗 体 的 筛 选1.筛 选 目 的2.筛 选 步 骤3.不 规 则 抗 体 筛 选 与 交 叉 配 血 结 果 分 析 192021-6-7 F定 义 ： 抗 A、 抗 B以 外 的 血 型 抗 体 ， 多 为 抗 体 。 主要 是 经 输 血 或 妊 娠 等 免 疫 刺 激 产 生 。F血 型 抗 体 是 体 内 免 疫 系 统 所 产 生 的 针 对 血 型 抗 原 发 生 特异 性 反 应 的 一 类 免 疫 球 蛋 白 类 物 质 。 人 类 血 清 中 有 5种 类型 ： G、 M、 A、 D、 E， 其 中 IgM、 G是 最 重 要 的 2种 抗 体 。F RBC血 型 抗 体 分 为 ：完 全 抗 体 ： 能 在 盐 水 中 凝 集 相 应 RBC，又 称 盐 水 抗 体 。主 要 是 分 子 量 较 大 的 IgM不 完 全 抗 体 ： 能 结 合 RBC上 抗 原 致 敏 RBC ，但 在 盐 水 中 不 能 使 之 凝 集 。 主 要 是 分 子 量 小 的 IgG，需 用 抗 球 蛋 白 202021-6-7 1.筛 选 目 的 ：F 发 现 有 临 床 意 义 的 不 规 则 抗 体 ， 以 确 保 安 全 有 效 用 血 。F 最 好 献 血 者 血 清 也 作 不 规 则 抗 体 的 筛 选 ， 如 有 发 现 不 规 则抗 体 ， 鉴 定 此 抗 体 ， 找 出 能 与 其 相 配 合 的 血 液 ， 不 可 随 便 用于 输 血 。F 不 规 则 抗 体 多 为 IgG抗 体 ， 盐 水 介 质 中 不 能 凝 集 ， 只 能 致 敏相 应 抗 原 的 RBC,必 须 通 过 特 殊 介 质 (酶 、 抗 人 球 蛋 白 、 poly等 )才 能 使 致 敏 RBC出 现 凝 集 反 应 ， 这 些 方 法 的 选 择 可 按 抗 体 的 血清 学 行 为 和 试 验 的 具 体 条 件 来 确 定 。F 临 床 上 通 常 所 称 的 “ 同 型 血 ” 是 指 ABO血 型 系 统 和 Rh血 型 系统 相 同 ,其 它 红 细 胞 血 型 系 统 未 必 相 同 。 如 果 交 叉 配 血 不 仔 细 ,或 只 用 盐 水 介 质 配 血 ,则 可 能 检 查 不 出ABO血 型 系 统 之 外 的 不 规 则 抗 体 ,而 此 抗 体 与 相 应 抗 原 发 生 免 疫 反 应 ,可 导 致 溶 血 性 输 血 反 应 的 发 生 。 212021-6-7 2.筛 选 细 胞 ： 通 常 是 由 2-3个 单 人 份 的 O型 红 细 胞 组 成 一 套 筛选 细 胞 试 剂 ， 包 括 以 下 常 见 的 抗 原 ： Rh系 统 、MNSs系 统 、 P系 统 、 Lewis系 统 、 Duffy系 统 等 。3.抗 体 筛 选 试 验 局 限 性 ： 不 一 定 能 检 出 所 有 有 临 床 意 义 的 不 规 则 抗 体 。一 些 抗 低 频 率 抗 原 的 抗 体 则 可 能 漏 检 。 222021-6-7 不 规 则 抗 体 筛 选 的 操 作 步 骤被 检 血 清 + 抗 体 筛 选 细 胞 盐 水 介 质 或 非 盐 水 介 质 （ 凝 聚 胺 、 抗 球 蛋 白 、 酶 ）病 人 血 清 病 人 血 清 病 人 血 清 病 人 血 清筛 选 细 胞 I 筛 选 II 筛 选 III 病 人 红 细 胞 血 清+病 人 红 细 胞血 清 +筛 选 细 胞 I PolyGram 100ulLIM600ul 血 清 +筛 选 细 胞 II 血 清 +筛 选 细 胞 III Resuspending 100ul非 特 异 性 凝 集无 凝 集 则 重 做 特 异 性 凝 集低 离 子 介 质 中孵 育 ， 促 进 抗体 与 RBC结 合凝 聚 胺 含 多 价 阳离 子 ， 中 和 RBC表 面 负 电 荷 ， 减少 RBC间 距 离 枸 橼 酸 钠 重 悬 液 ， 为负 电 荷 ， 中 和 凝 聚 胺正 电 荷 ， 使 正 常 RBC凝 集 解 散1.2. 3. 4. 对 Kell系 统 抗 体 不 理 想 ， 阴 性 结 果需 做 抗 球 。 中 国 人 群 几 乎 100%为kk型 ， 具 有 K抗 原 的 几 乎 为 0， 至 今未 发 现 Kell系 统 抗 体 232021-6-7 抗 筛 阳 性 ， 交 叉 配 血 相 容自 身 抗 -H抗 -Lebh抗 筛 阳 性 ， 但 献 血 者 红 细 胞 可 能 正 好 不 含 与 相 应 的 抗 原 ，因 此 配 血 可 以 相 合 。 抗 筛 阳 性 ， 交 叉 配 血 不 相 容同 种 异 体 抗 体 存 在 ， 自 身 对 照 成 阴 性同 种 异 体 抗 体 存 在 ， 自 身 对 照 成 阳 性冷 反 应 自 身 抗 体 能 引 起 难 以 确 定 的 阳 性温 反 应 自 身 抗 体 能 引 起 难 以 确 定 的 阳 性“ 钱 串 状 ” 红 细 胞 形 成 引 起 非 真 实 的 阳 性 结 果 抗 筛 阴 性 ， 酶 试 验 、 抗 球 蛋 白 交 叉 配 血 试 验 等 不 相 容 献 血 者 红 细 胞 DAT试 验 为 阳 性受 血 者 血 清 抗 体 活 性 很 弱 ， 则 抗 筛 试 验 成 阴 性抗 体 与 低 频 率 抗 原 反 应 抗 筛 阴 性 ， 盐 水 直 接 离 心 交 叉 配 血 不 相 容献 血 者 红 细 胞 是 ABO血 型 不 相 容存 在 在 室 温 反 应 的 同 种 异 体 抗 体献 血 者 的 红 细 胞 是 多 凝 集 红 细 胞4.抗筛和交叉配血结果分析 242021-6-7 输 血 前 试 验 “三 保 险 ”血 型 、 抗 筛 、 交 叉 配 血相 合 %随 机 64ABO 99.4Rh 99.8抗 筛 99.94交 叉 配 血 99.95自 身 输 血 100 252021-6-7 F 交 叉 配 血 试 验 也 称 配 合 性 试 验 ， 实 际 上 是 检 查不 配 合 性 ， 使 病 人 ， 献 血 者 血 液 之 间 没 有 相 对 应的 抗 原 、 抗 体 成 分 （ 如 ： 患 者 体 内 有 抗 A抗 体 ，献 血 者 RBC上 就 不 能 有 A抗 原 ）F 试 验 应 在 37 下 进 行 。 四 、 交 叉 配 血 262021-6-7 盐 水 法 F用 于 IgM抗 体 的 检 出 、 盐 水 配 血 试 验 、 用 盐 水 抗 体 鉴 定 的 血 型抗 原 ， 如 ABO、 MN、 P等 血 型 系 统 的 抗 原 。F当 IgG抗 A、 抗 B的 浓 度 足 够 大 时 ， 在 盐 水 介 质 里 也 能 与 相 应 的红 细 胞 发 生 凝 集 反 应聚 凝 胺 FPoly是 带 高 价 阳 离 子 的 多 聚 物 ， 溶 解 后 能 产 生 正 电 荷 ， 中 和RBC表 面 负 电 荷 ， 缩 短 RBC间 距 ， 引 起 正 常 RBC可 逆 非 特 异 性 凝集 、 抗 体 致 敏 的 红 细 胞 则 凝 集 不 可 逆酶 技 术 F蛋 白 水 解 酶 能 消 化 破 坏 RBC表 面 唾 液 酸 ， 减 少 RBC表 面 负 电 菏 ，缩 短 RBC间 距 ， IgG抗 体 能 与 有 相 应 抗 原 的 RBC产 生 凝 集 。u适 合 ： 酶 法 能 显 著 增 强 Rh和 Kidd系 统 的 抗 原 抗 体 反 应 ，u不 适 合 ： 蛋 白 酶 破 坏 M、 N、 S、 s、 Fya、 Fyb抗 原AGT抗 人 球 F又 称 Coombs试 验 ,是 检 查 IgG抗 体 的 最 有 效 方 法 。F除 可 测 定 RBC上 IgG抗 体 外 ,还 可 测 定 IgM、 IgA,、 补 体 C3、 C4 u直 接 ： 测 体 内 致 敏 RBC用 于 检 查 红 细 胞 是 否 已 被 不 完 全 抗 体 所 致 敏 ,如 新 生 儿 溶 血 病 、溶 血 性 输 血 反 应 、 自 身 免 疫 性 溶 血 性 贫 血 .u间 接 ： 测 血 清 中 不 完 全 抗 体常 用 于 血 型 鉴 定 、 抗 体 的 检 出 和 鉴 定 、 输 血 前 交 叉 配 血 试 验 等 . 272021-6-7 酶 处 理 细 胞 的 凝 集 试 验 方 法一 期酶 法 也 称 直 接 法 ， 菠 萝 酶 和 木 瓜 酶 适 用 于 一 期 法 。 操作 时 在 已 标 记 好 的 试 管 中 加 入 100ul的 血 清 和 50ul的 红 细 胞 悬 液 ， 再 加 50ul的 酶 溶 液 ， 37 孵 育 15分 钟 ， 1000转 /分 离 心 1分 钟 ， 轻 摇 后 观 察 结 果二 期酶 法 也 称 间 接 法 ， 木 瓜 酶 和 无 花 果 酶 适 用 于 二 期 法 。二 期 分 两 步 ， 第 一 步 是 酶 处 理 红 细 胞 ： 在 1份 洗 涤的 压 积 红 细 胞 中 加 两 份 木 瓜 酶 溶 液 ， 37 孵 育 30分 钟 ， 用 大 量 的 Ph7。 4的 PBS洗 涤 3次 ， 用 生 理 盐水 配 成 5%的 悬 液 备 用 。 第 二 步 是 在 已 标 记 好 的 试管 中 加 受 检 血 清 100ul ,再 加 50ul酶 处 理 过 的 红 细胞 悬 液 ， 37 孵 育 15-30分 钟 观 察 结 果 ， 凝 集 和 溶 血 皆 属 于 阳 性 反 应 。 282021-6-7 n 交 叉 配 血 试 验 通 常 包 括 ：主 侧 （ 受 者 血 清 +供 者 RBC） ： 测 对 供 者 RBC反 应 的 抗 体次 侧 （ 受 者 RBC+供 者 血 清 ） ： 测 对 受 者 RBC反 应 的 抗 体自 身 对 照 （ 受 者 RBC+受 者 血 清 ） ： 显 示 自 身 抗 体 、 DAT阳 性 、 RBC缗 钱 状 假 阳 性 的 存 在F 除 作 盐 水 介 质 外 ， 至 少 还 要 做 聚 凝 胺 法 ， 有 条 件 加 做 抗球 、 酶 法 等 。 在 配 血 的 任 何 步 骤 中 均 不 产 生 溶 血 或 凝 集 献 血者 的 血 液 才 能 给 病 人 输 注主 管 次 管 自 身 292021-6-7 F 实 际 当 中 难 免 有 抗 筛 阴 性 ， 但 交 叉 配 血 不 合 的 情况 ， 应 依 据 实 际 情 况 合 理 解 释 ：v缗 钱 状 形 成 ： 血 清 在 室 温 和 37 中 ， 使 RBC假 凝 集 。 常 见 于多 发 性 骨 髓 瘤 、 巨 球 蛋 白 血 症 、 霍 奇 金 病 、 其 他 表 现 为 血 沉加 快 的 病 例 。v交 叉 配 血 不 相 容 ， 显 示 有 未 捡 明 的 同 种 抗 体 存 在v室 温 反 应 中 显 示 有 自 身 抗 体vAGT 试 验 中 显 示 有 自 身 抗 体v抗 筛 阴 性 ， 交 叉 配 血 阳 性 ， 提 示 可 能 有 未 检 明 的 抗 体 存 在v离 心 力 不 当 ， 造 成 假 阴 性v水 浴 箱 温 度 不 正 确 ， 造 成 错 误 结 果vRBC不 正 确 的 洗 涤 和 悬 浮 ， 使 AGT试 验 假 阴 性v血 清 中 如 含 有 溶 血 性 抗 体 ， 则 相 应 RBC被 溶 解 而 不 是 凝 集 ，交 叉 配 血 应 为 阳 性 。 此 时 应 灭 活 血 清 再 做 试 验 。 302021-6-7 几种交叉配血方法的比较方 法 优 点 缺 点盐 水 法 操 作 方 便 ,费 用 低 廉 只 能 检 出 不 相 配 合 完 全 抗 体 ,不能 检 出 不 相 配 合 的 不 完 全 抗 体 酶 法 增 强 Rh 、 Kidd系 统 破 坏 MNSs、 Fy(a) 、 Fy(b)抗 原 ,易 失 活 ,寿 命 短 ,反 应 时 间 长 聚 凝 胺 法 方 便 、 应 用 最 广 Kell系 统 部 分 抗 体 如 抗 K 、 抗 kp(a) 、 抗 kp(b)检 测 不 出 ,需要 抗 球 蛋 白 试 验 .且 肝 素 对 其 有影 响 ,易 引 起 假 阴 性 .抗 球 蛋 白 法 检 测 不 完 全 抗 体 最 灵 敏 操 作 复 杂 、 不 利 于 急 诊 检 查 和血 库 的 大 批 量 工 作微 柱 凝 胶 法 国 际 推 荐 方 法 ， 灵 敏 度 高 、重 复 性 好 、 特 异 性 好 、 检 测 结 果 可 较 长 时 间 保 存 费 用 高 312021-6-7 谢 谢 ！ 322021-6-7 疑 难 配 血 病 例1. 患 冷 凝 集 素 综 合 征 ,有 自 身 冷 凝 集 抗 体 , “O”,病 人 3+血 清 自 身 抗 体 4+.采用 抗 人 球 蛋 白 法 配 血 可 消 除 此 现 象 ,输 “ O”洗 涤 红 细 胞 .2. 输 血 前 :“A”,输 A型 红 细 胞 4u,无 明 显 反 应 ,仅 见 少 许 Hb尿 ,很 快 消 失 ,但 Hb从 入 院 时 12g降 至 4g,该 院 误 定 血 型 而 输 血 前 没 做 交 叉 配 血 而 造 成 本 次 事 故 . 因 与 抗 A反 应 管 的 细 胞 似 有 二 群 细 胞 ,后 做 唾 液 酸 血 型 物 质 测 定 ,确 定其 血 型 为 “ B”型 ,因 之 前 输 入 大 量 的 “ A”型 血 .本 次 不 适 合 输 “ B”型 血 ,建 议输 注 “ O”洗 涤 红 细 胞 .3. “O”,Rh(+),贫 血 查 因 ,消 化 道 出 血 ,消 化 道 肿 瘤 ,直 接 抗 人 球 蛋 白 试 验 2+,检 出 自 身 抗 体 ,经 吸 收 处 理 后 标 本 可 与 “ O”红 细 胞 配 血 .4.重 度 贫 血 患 者 ,直 接 抗 人 球 蛋 白 试 验 1+,筛 选 试 验 盐 水 法 、 抗 人 球 蛋 白 试 验 均 为 阴 性 ,交 叉 配 血 时 可 采 用 抗 人 球 胆 白 法 ,可 输 注 O型 洗 涤 红 细 胞 .-A -B AC BC正 定 4+ 3+ 反 定 - -