实验植物组织水势的测定小液流法

1.了解测定植物组织水势的方法及其优缺了解测定植物组织水势的方法及其优缺点点2.学习用小液流法测定植物组织水势的方学习用小液流法测定植物组织水势的方法法目的要求:植物组织水势的测定第1页/共25页 水势表示水分的化学势，象电流由高电位处流向低电位处一样，水从水势高处流向低处。植物体细胞之间，组织之间以及植物和环境之间的水分移动方向都由水势差决定。植物组织水势的测定第2页/共25页 液相平衡法：小液流法、称重法、质壁分离法液相平衡法：小液流法、称重法、质壁分离法 压力平衡法：压力室法压力平衡法：压力室法气相平衡法：露点法气相平衡法：露点法 植物组织水势和渗透势的测定方法：植物组织水势和渗透势的测定方法：植物组织水势和渗透势的测定方法：植物组织水势和渗透势的测定方法：水水势势测测定定冰点降低法冰点降低法渗渗透透势势蒸气压渗透压计法蒸气压渗透压计法植物组织水势的测定第3页/共25页一、液体交换法测定植物组织水势 小液流法小液流法测定植物组织水势的原理？问题：植物组织水势的测定第4页/共25页（一）原理 1、当植物组织与外液接触时发生水分交换：植物组织的水势低于外液的渗透势（溶质势），组织吸水，外液浓度变大；植物 S 若两者相等，则水分交换保持动态平衡，外液浓度保持不变；植物S植物组织水势的测定第5页/共25页 2、同一种物质浓度不同时其比重不一样，浓度大的比重大，把高浓度的溶液一小液滴放到低浓度溶液中时，液滴下沉；反之则上升。3、根据外液浓度的变化情况即可确定与植物组织相同水势的溶液浓度。根据以下公式计算出溶液的渗透势，即为植物组织的水势。植物组织水势的测定第6页/共25页 【实验原理实验原理】植物材料浸入不同浓度溶液中植物材料水势低于溶液水势植物材料水势等于溶液水势植物材料水势高于溶液水势材料吸水外界溶液浓度变大比重变大外界溶液浓度不变比重不变材料失水外界溶液浓度变小比重变小植物组织水势的测定第7页/共25页浸过材料的溶液滴回同一浓度而未浸过材料的溶液中 比重小的液流上浮 比重不变的液流静止比重大的液流下沉 此溶液的水势即等于所测材料的水势第8页/共25页 溶液渗透势的计算：S=iCRT 式中式中 S S溶液的渗透势，以溶液的渗透势，以MPaMPa为单位；为单位；R R0.008314MPaLmol0.008314MPaLmol1 1KK1 1 T T绝对温度，即绝对温度，即273+t273+t；CC溶液的摩尔浓度，以溶液的摩尔浓度，以molkgmolkg1 1 为单位为单位 i i溶液的等渗系数，溶液的等渗系数，蔗糖蔗糖=1=1。植物组织水势的测定第9页/共25页（二）实验材料（二）实验材料（二）实验材料（二）实验材料 植物组织水势的测定第10页/共25页 【用具用具用具用具】试试试试管管管管架架架架；试试试试管管管管;打打打打孔孔孔孔器器器器;毛毛毛毛细细细细管管管管；镊镊镊镊子子子子;青青青青霉霉霉霉素瓶素瓶素瓶素瓶 【试剂试剂试剂试剂】蔗糖蔗糖蔗糖蔗糖溶液溶液溶液溶液 甲烯蓝粉末甲烯蓝粉末甲烯蓝粉末甲烯蓝粉末植物组织水势的测定第11页/共25页（三）操作步骤（三）操作步骤（三）操作步骤（三）操作步骤1.1.配制不同浓度的蔗糖溶液配制不同浓度的蔗糖溶液2.2.用打孔器在绣球花的不同部位打用打孔器在绣球花的不同部位打100-200100-200片，混匀，每个青霉素片，混匀，每个青霉素瓶各放入瓶各放入15-2015-20片，（打孔要迅速，避开叶脉，选边缘整齐无破片，（打孔要迅速，避开叶脉，选边缘整齐无破损的叶片）损的叶片）3.3.从配制好的试管中各取从配制好的试管中各取2ml2ml（量准确？）到相应的青霉素瓶或称量（量准确？）到相应的青霉素瓶或称量瓶中（瓶中（用一只移液管由低用一只移液管由低 高，不要润洗）高，不要润洗）。放置。放置202030min30min，期间摇动数次，以加速水分平衡。，期间摇动数次，以加速水分平衡。植物组织水势的测定试管试管123456781molL1molL-1-1蔗糖溶液（蔗糖溶液（ml）20406080100120140160蒸馏水（蒸馏水（ml）180160140120100806040浓度浓度0.10.20.30.40.50.60.70.8第12页/共25页4.4.染色：用接种针沾入微量甲烯蓝粉末加入青霉素染色：用接种针沾入微量甲烯蓝粉末加入青霉素瓶中，摇匀，溶液变蓝。（干燥针头先用蒸馏水瓶中，摇匀，溶液变蓝。（干燥针头先用蒸馏水湿润，加入的甲烯蓝量一定少，使各瓶中颜色基湿润，加入的甲烯蓝量一定少，使各瓶中颜色基本一致）本一致）5.5.观察液滴升降：观察液滴升降：用用毛毛细细吸吸管管取取青青霉霉素素瓶瓶有有色色液液 插插入入相相应应试试管管中中部部 缓缓慢慢从从毛毛细细吸吸管管尖尖端端横横向向放放出出一一滴滴蓝蓝色色溶溶液液，轻轻轻轻取取出出滴滴管管，观观察察蓝蓝色色液液滴滴的移动方向并记录的移动方向并记录。（用白纸划一直线置于试管背面，方便观察）（用白纸划一直线置于试管背面，方便观察）植物组织水势的测定第13页/共25页毛细管放置稳定毛细管放置稳定挤出小液滴挤出小液滴取出毛细管取出毛细管观察液滴升降观察液滴升降第14页/共25页静止不动液滴植物材料溶液浓度变大溶液浓度变小溶液浓度不变w Sw=S第15页/共25页6.6.分别测定不同浓度中有色液滴的升降，分别测定不同浓度中有色液滴的升降，找出与组织水分势相当的浓度，根据原理找出与组织水分势相当的浓度，根据原理公式计算出组织的水势公式计算出组织的水势。植物组织水势的测定第16页/共25页试管号 12345678溶液浓度（mol/l液滴移动的方向 植物组织细胞 w与的比较 第17页/共25页溶液浓度溶液浓度0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向液滴移动方向具有平衡浓度结果植物组织水势的测定第18页/共25页溶液浓度溶液浓度0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向液滴移动方向无平衡浓度结果无平衡浓度结果植物组织水势的测定第19页/共25页溶液浓度溶液浓度0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向液滴移动方向错误结果错误结果植物组织水势的测定第20页/共25页溶液浓度溶液浓度0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向液滴移动方向结果是否正确，为什么？结果是否正确，为什么？植物组织水势的测定第21页/共25页结果是否正确，为什么？溶液浓度溶液浓度0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向液滴移动方向植物组织水势的测定第22页/共25页注意事项：注意事项：所取材料在植株上的部位要一致，打取叶圆片要避开主脉和伤口。试管、移液管和毛细管等要洗净烘干，移液管与毛细移液管应从低浓度到高浓度依次吸取溶液。甲烯蓝不宜加得过多（溶液呈稍深的蓝色即可），否则将使实验组各管中溶液的比重均加大。蔗糖溶液用前一定要摇匀，时间放久了的蔗糖溶液会分层，影响结果。叶片打孔及投入青霉素瓶中要快，防止水分蒸发影响实验结果。释放蓝色液滴时要缓慢，防止过急挤压冲力影响液滴移动。第23页/共25页思考题：1试述小液流法测定植物组织水势的原理。2.小液流法测定植物组织水势时，为什么操作时，应强调所用试管、毛细管应保持干燥？打取小圆片并投入到试管中时动作应迅速？加入甲烯蓝时不能太多？植物组织水势的测定第24页/共25页感谢您的观看！第25页/共25页