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细胞生物学实验报告题目:细胞凝集反应姓名: 学号: 班级:时间:一、实验目的: 了解细胞膜的表面结构,掌握细胞凝集的原理。二、实验原理:细胞膜双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表 面的分枝状糖外被。目前认为:细胞间的联系,细胞的生长和分化,免疫反 应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。凝集素(lec tin)是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白 质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与 细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的 糖可以抑制细胞的凝集。三、实验用品:1 土豆块茎。2 显微镜、粗天平、双凹载玻片、滴管 2支、离心管 2支、离心机。3. PHS缓冲液称取 NaCl7.2g、NaHPO 1.48g、KH PO 0.43g、加蒸馏水,定容至 lOOOmL 调2424pH值到7.2。4. 1%的红细胞以无菌方法抽取兔子静脉血液(加抗凝剂)lmL,加生理盐水3mL,在1000r/min 的条件下离心5min,重复离心3次,最后按照压积红细胞体积用生理盐水配 成 1%红细胞悬液。四、实验步骤:1. 称取土豆去皮块茎2g,加lOmLPBS缓冲液,浸泡2h,浸出的粗提液中 含有可溶性土豆凝集素。2. 用滴管吸取土豆凝集素和 1%红细胞各一滴,置载玻片上,充分混匀,静 置20min后于低倍显微镜下观察血球凝集现象。3. 以 PBS 液加 1%血细胞液作对照实验。五、实验结果:1加入土豆凝集素的红细胞发生凝集,未加入土豆凝集素的红细胞未发生凝集2实验图片:图1加入土豆凝集素的红细胞(10X4)图2未加土豆凝集素的红细胞(10X4)加入土豆凝集素未加土豆凝集素图3 加土豆凝集素与未加土豆凝集素的红细胞凝集情况对照(肉眼观察)六、实验分析:1. 实验过程中出现了凝集现象不明显,肉眼不可辨别的问题。经分析,原因 是所用红细胞的离心效果不理想,红细胞浓度较低,导致实验效果不理想。 经过对离心过程的优化,成功得到了较明显的实验结果。2. 要讲土豆凝集素和红细胞充分混匀,以加快反应,使现象明显。
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