血红蛋白含量的测定、血型鉴定

血 红 蛋 白 含 量 的 测 定 、 血 型鉴 定 、 人 体 心 电 图 描 记 、 人体 动 脉 血 压 的 测 定本课件参考了国内多个课件，谨此表示感谢！ 实 验 目 的l 掌 握 血 红 蛋 白 的 测 定 方 法 ；l 学 习 鉴 定 血 型 的 基 本 方 法 ， 观 察 红 细 胞 凝 集 现象 ， 掌 握 ABO血 型 和 Rh血 型 鉴 定 的 原 理 ；l 学 习 并 掌 握 人 体 间 接 测 压 法 的 原 理 和 方 法 ；l 学 习 心 电 图 波 形 的 测 量 方 法 ； 了 解 人 体 正 常 心电 图 各 波 的 波 形 及 其 生 理 意 义 。 实 验 原 理 -血 红 蛋 白 含 量 测 定n 红 细 胞 与 盐 酸 作 用 生 成 褐 色 盐 酸 高 铁 血 红 蛋 白 。经 稀 释 与 标 准 色 柱 比 色 ， 即 可 求 得 血 红 蛋 白 含量 。 实 验 原 理 -血 型 鉴 定n 血 型 一 般 指 红 细 胞 的 血 型 ， 是 根 据 红 细 胞 膜 外 表面 存 在 的 特 异 性 抗 原 （ 镶 嵌 于 红 细 胞 膜 上 的 糖 蛋白 和 糖 脂 ） 来 确 定 的 ， 这 种 抗 原 或 凝 集 原 是 由 遗传 决 定 的 。n 抗 体 或 凝 集 素 存 在 于 血 清 中 ， 与 红 细 胞 的 不 同 抗原 起 反 应 ， 产 生 凝 集 ， 最 后 溶 解 ， 由 于 这 种 现 象 ，临 床 上 在 输 血 前 必 须 注 意 鉴 定 血 型 ， 以 确 保 安 全输 血 。 n 通 常 输 血 反 应 中 大 多 数 注 意 ABO血 型 系 统 ， 其 次为 Rh血 型 。 Rh血型系统 n 1940年，landersteiner与wiener用恒河猴RBC免疫学得到一种抗体，发现抗血清不仅能与猴子RBC发生反应，还与纽约85%白人的RBC发生反应。 n因为这类抗原存在于所有恒河猴（rhesus monkey）的红细胞上，故命名为RH因子。将凡能与这种抗RH血清起反应的85%白人称之为RH阳性，不能起反应的15%白人称之为RH阴性。 实 验 原 理 -动 脉 血 压 测 定n 通 常 血 液 在 血 管 内 流 动 时 并 没 有 声 音 ， 但 如 给血 管 以 压 力 而 使 血 管 变 窄 形 成 血 液 涡 流 时 则 可发 生 声 音 （ 血 管 音 ） 。n 测 定 人 体 动 脉 血 压 最 常 用 的 方 法 是 间 接 测 压 法 ，是 使 用 血 压 计 在 动 脉 外 加 压 ， 根 据 血 管 音 的 变化 来 测 量 动 脉 血 压 的 。 n 用 压 脉 带 在 上 臂 给 肱 动 脉 加 压 ， 当 外 加 压 力 超 过 动脉 的 收 缩 压 时 ， 动 脉 血 流 完 全 被 阻 断 ， 此 时 用 听 诊器 在 肱 动 脉 处 听 不 到 任 何 声 音 。n 外 加 压 力 低 于 动 脉 内 的 收 缩 压 而 高 于 舒 张 压 时 ， 则心 脏 收 缩 时 ， 动 脉 内 有 血 流 通 过 ， 舒 张 时 则 无 ， 血液 断 续 地 通 过 血 管 ， 形 成 涡 流 而 发 出 声 音 。n 外 加 压 力 等 于 或 小 于 舒 张 压 时 ， 则 血 管 内 的 血 流 连续 通 过 ， 所 发 出 的 音 调 突 然 降 低 或 声 音 消 失 ， 故 恰好 可 以 完 全 阻 断 血 流 所 必 须 的 最 小 管 外 压 力 （ 即 发生 第 一 次 声 音 时 ） 相 当 于 收 缩 压 。 在 心 舒 张 时 有 少许 血 流 通 过 的 最 大 管 外 压 力 （ 即 音 调 突 然 降 低 时 ）相 当 于 舒 张 压 。 n 心 脏 在 收 缩 之 前 ， 首 先 发 生 电 位 变 化 。 心 电 变 化 由心 脏 的 起 搏 点 窦 房 结 开 始 ， 经 特 殊 传 导 系 统 最后 到 达 心 室 肌 ， 引 起 肌 肉 的 收 缩 。n 心 脏 的 综 合 性 电 位 变 化 可 通 过 体 液 传 播 到 人 体 的 表面 ， 经 体 表 电 极 引 导 并 放 大 而 成 的 波 形 为 心 电 图 。n 心 电 图 可 以 反 映 心 脏 内 综 合 性 电 位 变 化 的 发 生 、 传导 和 消 失 过 程 。实 验 原 理 -心 电 图 的 描 记心 电 图 ： 心 脏 不 同 部 位 之 间 的 电 位 差 实 验 材 料n 0.1mol/L盐 酸 溶 液 ；n 显 微 镜 、 载 玻 片 、 刺 血 针 、 消 毒 牙 签 、 A型 和 B型 标 准 血 清 、 生 理 盐 水 、 酒 精 棉 球 、 抗 D血 清等 ；n 血 压 计 、 听 诊 器 等 ；n 心 电 图 机 、 酒 精 棉 球 等 。 方 法 与 步 骤 -1n 于 测 定 管 内 加 入 0.1mol/L盐 酸 溶 液 至 百 分 刻 度 20处 。n 取 20l被 检 血 液 , 迅 速 将 吸 血 管 插 入 测 定 管 底 部 盐 酸液 中 ， 缓 慢 挤 出 血 液 ， 再 吸 取 上 部 清 液 ， 反 复 冲 洗吸 血 管 23次 ， 并 混 匀 ， 静 置 10min。n 沿 着 管 壁 加 入 蒸 馏 水 ， 逐 步 稀 释 至 与 标 准 色 柱 色 调一 致 后 ， 读 取 重 量 （ 或 百 分 ） 刻 度 值 报 告 结 果 。v 标准制换算：血红蛋白(g/L)=血红蛋白(g/dl)10 n 取 一 清 洁 玻 片 ， 用 蜡 笔 划 上 记 号 ， 左 上 角 写 抗 B字 ， 右 上 角 写 抗 A字 。n 用 小 滴 管 吸 A型 标 准 血 清 （ 抗 B） 一 滴 加 入 左 侧 ， 用 另 一 小 滴 管 吸 B型 标 准 血 清 （ 抗 A） 一 滴 加 入 右 侧 。n 穿 刺 手 指 取 血 ， 玻 片 的 每 侧 各 放 入 一 小 滴 血 ， 用 牙 签 搅 拌 ， 使 每 侧抗 血 清 和 血 液 混 和 。n 静 置 室 温 下 10-15min后 ， 观 察 有 无 凝 集 现 象 ， 假 如 只 是 抗 A侧 发 生 凝集 ， 则 血 型 为 A型 ； 若 只 是 抗 B侧 凝 集 ， 则 为 B型 ； 若 两 边 均 凝 集 ，则 为 AB型 ； 若 两 边 均 未 发 生 凝 集 ， 则 为 O型 。方 法 与 步 骤 -2 Rh血型鉴定 取 干 净 玻 片 1个 ， 滴 入 抗 D血 清 及 受 检 者血 液 各 1滴 ， 混 匀 ， 20 min后 观 察 。 凝 集 者为 Rh阳 性 ， 否 则 为 Rh阴 性 。 n 受 试 者 脱 左 臂 衣 袖 ， 静 坐 5min。n 松 开 打 气 球 上 的 螺 丝 ， 将 压 脉 带 内 的 空 气 完 全 放 出 ，再 将 螺 丝 扭 紧 。n 将 压 脉 带 裹 于 左 上 臂 ， 其 下 缘 应 在 肘 关 节 上 约 3cm处 ，松 紧 应 适 宜 。 受 试 者 手 掌 向 上 平 放 于 台 上 ， 压 脉 带 应与 心 脏 同 一 水 平n 在 肘 窝 部 找 到 动 脉 搏 动 处 ， 左 手 持 听 诊 器 的 胸 具 置 于其 上 。 注 意 ： 不 可 用 力 下 压方 法 与 步 骤 -3 n 听 取 血 管 音 变 化 右 手 持 打 气 球 ， 向 压 脉 带 打 气 加 压 ， 此时 注 意 倾 听 声 音 变 化 ， 在 声 音 消 失 后 再 加 压 30mmHg，然 后 扭 开 打 气 球 之 螺 丝 ， 缓 慢 放 气 （ 切 勿 过 快 ） ， 此 时可 听 到 血 管 音 的 一 系 列 变 化 ， 声 音 从 无 到 有 ， 而 后 由 低而 高 ， 突 然 变 低 ， 最 后 完 全 消 失 。 然 后 扭 紧 打 气 球 螺 丝继 续 打 气 加 压 ， 反 复 听 取 声 音 变 化 2-3次 。n 测 量 动 脉 血 压 重 复 上 一 操 作 ， 同 时 注 意 检 压 计 之 水 银 柱和 声 音 变 化 。 在 徐 徐 放 气 减 压 时 ， 第 一 次 听 到 血 管 音 的水 银 柱 高 度 即 代 表 收 缩 压 。 在 血 管 音 突 然 由 强 变 弱 时 的水 银 柱 高 度 即 代 表 舒 张 压 。 记 下 测 定 数 值 ， 将 压 脉 带 内的 空 气 放 尽 ， 使 压 力 降 至 零 。 方 法 与 步 骤 -4n 受 试 者 安 静 平 卧 ， 全 身 肌 肉 松 弛n 按 要 求 将 心 电 图 机 面 板 上 各 控 制 钮 置 于 适 当 位 置 。 在 心电 图 机 妥 善 接 地 后 接 通 电 源 ， 预 热 5min。n 安 放 电 极 。 把 准 备 安 放 电 极 的 部 位 先 用 酒 精 棉 球 脱 脂 ，再 涂 上 导 电 糊 ， 以 减 小 皮 肤 电 阻 。n 连 接 导 联 线 。 按 所 用 心 电 图 机 之 规 定 ， 正 确 连 接 导 联 线 。一 般 以 5种 不 同 颜 色 的 导 联 线 插 头 与 身 体 相 应 部 位 的 电极 连 接 ， 上 肢 ： 左 黄 、 右 红 ； 下 肢 ： 左 绿 、 右 黑 。 n 调 节 基 线 旋 动 基 线 调 节 钮 ， 使 基 线 位 于 适 当 位 置 。n 输 入 标 准 电 压 。 打 开 输 入 开 关 ， 使 热 笔 预 热 10min后 ，按 动 1mV定 标 电 压 按 钮 ， 再 调 节 灵 敏 度 （ 或 增 益 ） 旋 钮 ，标 准 方 波 上 升 边 为 10mm。 开 动 记 录 开 关 ， 记 下 标 准 电压 曲 线 。n 记 录 心 电 图 。 旋 动 导 联 选 择 开 关 ， 依 次 记 录、等 导 联 的 心 电 图 。 n 记 录 完 毕 ， 应 解 松 电 极 ， 洗 净 擦 干 ， 以 防 腐 蚀 。 将 心 电图 机 面 板 上 的 各 控 制 钮 转 回 原 处 ， 最 后 切 断 电 源 。 n 取 下 记 录 纸 ， 记 下 导 联 、 受 试 者 姓 名 、 年 龄 、 性 别 及 实验 日 期 。n 测 量导 的 P波 、 R波 、 T波 振 幅 ， P-R、 Q-T、 R-R间 期 ，并 计 算 心 率 。 n注意：测量正向波振幅时，从参考水平线的上缘垂直地测量到该波的顶点；测量负向波振幅时，从参考水平线的下缘垂直地测量到该波的最低点。P波振幅的测量以P波起始部的水平线为参考水平线；QRS波群、J点、ST段、T波和U波振幅的测量是以QRS波群起始部的水平线为参考水平线。 心 率 的 测 定 测 定 相 邻 的 两 个 心 动 周 期 中 的 P波 与 P波 或 R波与 R波 的 间 隔 时 间 ， 按 下 列 公 式 进 行 计 算 ， 求 出心 率 。 如 心 动 周 期 的 时 间 间 距 显 著 不 等 时 ， 可 将五 个 心 动 周 期 的 P-P或 R-R间 隔 时 间 加 以 平 均 ，取 得 平 均 值 ， 代 入 下 列 公 式 ： (s)RRPP 60间隔时间或心率(次min)= 注 意 事 项n 测 定 血 红 蛋 白 含 量 时 应 保 持 足 够 光 线 ；n 盐 酸 酸 化 时 间 不 要 低 于 10min;n 血 液 和 盐 酸 混 合 时 不 可 剧 烈 震 荡 ；n 蒸 馏 水 需 逐 滴 加 入 ， 多 做 几 次 比 色 ， 以 免 稀 释 过 量 ；n 比 色 时 将 玻 璃 棒 取 出 。 n 判 断 红 细 胞 凝 集 ， 要 有 足 够 时 间 （ 10-15min)n 载 玻 片 须 清 洗 干 净 ； n 测 压 时 室 内 须 保 持 安 静 ， 以 利 听 诊 。n 戴 听 诊 器 时 ， 务 使 耳 具 的 弯 曲 方 向 与 外 耳 道 一致 ， 即 接 耳 的 弯 曲 端 向 前n 压 脉 带 裹 绕 要 松 紧 适 宜 ， 并 与 心 脏 同 一 水 平 。n 重 复 测 压 时 ， 须 将 压 脉 带 内 空 气 放 尽 ， 使 压 力降 至 零 位 ， 而 后 再 加 压 测 量 。 l 心 电 图 机 必 须 接 地 良 好 ， 以 防 交 流 电 干 扰 。l 电 极 板 和 皮 肤 间 要 接 触 良 好 。l 受 试 者 应 呼 吸 平 稳 、 肌 肉 放 松 ， 以 防 肌 电 干 扰 。 参 考 结 果 -兔 血 红 蛋 白 含 量n 兔 血 红 蛋 白 含 量 ：n 11.9g/100ml血 液 (8-15) 参 考 结 果 -正 常 血 压n 收 缩 压 100-120mmH g， 舒 张 压 60-80mmH g n 记 录 方 式 120/80mmH g 或 ： 16/10.7 kpan WH O 规 定 ， 血 压 超 过 160/95mmH g为 高 血 压 。 正 常 心 电 图 正 常 心 电 图 波 形 特 点 n P波n 振 幅 ： 肢 体 导 联 0.25mV； 胸 导 联 0.20mV。n R波 n 振 幅 ： I导 联 的 R波 1.5mV； V1导 联 的 R波 1.0mV；V5导 联 的 R波 2.5mV； aVR导 联 的 R波 0.5mV； aVL导 联 的 R波 1.2mV； aVF导 联 的 R波 2.0mV。 n T波n 振 幅 ： 一 般 不 应 低 于 同 导 联 R波 的 1/10。 n Q-T间 期q 其 受 心 率 快 慢 影 响 较 大 ， 一 般 心 率 越 快 ， QT间期 越 短 ， 反 之 则 越 长 。 正 常 范 围 为 0.32 0.44s。n P-R间 期q 正 常 范 围 为 0.12 0.20sn QRS波 群q QRS波 时 间 ： 0.06 0.10sn R-R间 期 q 正 常 范 围 为 0.6 1 s， 平 均 0.8s 正 常 心 率n 成 年 人 安 静 时 的 正 常 心 率 有 显 著 的 个 体 差 异 ,平 均在 75次 /分 左 右 (60100次 /分 之 间 )。 正 常 心 率 可因 年 龄 、 性 别 及 其 他 生 理 情 况 而 不 同 。 参 考 实 验 结 果 （ 总 结 ）n兔血红蛋白含量：11.9g/100ml血液(8-15)n血型：ABO血型；Rh血型n血压n一般范围：收缩压90-120mmHg，舒张压60-80mmHgn记录方式120/80mmHg n心电图 n P波 0.25mV；胸导联0.20mVn T波R波的1/10n Q-T间期: 0.320.44sn P-R间期: 0.120.20sn R-R间期: 0.61 s，平均0.8sn心率: 平均在75次/分左右(60100次/分之间) 交 流 电 干 扰在基线上可见规则的细小杂波，其频率每秒50周，系交流电干扰。出现这种情况应检查心电图机和地线是否接好、电极板有无不洁与生锈及缚的是否合适，必要时暂停使用附近的理疗机、X光机等。如不能消除上述因素，则可能是由于心电图机内部故障或导联线的损坏。附：心电图常见问题（参考） n在描记心电图过程中，患者由于手脚或身体移动，可造成基线不稳甚至波形异常。图中高耸的波形颇似异位心室搏动，实际是肢体移动造成的伪差。肢 体 活 动 对 基 线 的 影 响 肌 肉 震 颤图中基线出现一系列快速、不规则的细小芒刺样波动，使心电图波形失真，容易误诊为心房颤动波。这种情况下是由于被检者精神法过分紧张，或因寒冷四肢肌肉未能松弛，或电极与皮肤接触太紧，产生肌肉颤动所致。 n图中呼吸呈有规律的上下起伏，从而影响了心电图的观察与判断。排除这种伪差需要患者配合，保持平稳呼吸或暂时憋住呼吸。呼 吸 对 基 线 的 影 响 导 联 线 连 接 错 误图A：、aVL导联P-QRS-T波群倒置，aVR导联P波直立。肢体导联的图形颇似右位心，但心前导联却与正常一样，R波自右至左逐渐增高，S波逐渐缩小，为心前导联的正常图形，不符合右位心，这是由于左、右上肢导线接错所致。 n图B：左、右上肢导线纠正后的记录：肢体导联出现正常的图形。导联为上图A导联的翻转，导联为上图导联图形，导联图形为上图导联的图形，aVR为上图aVL的图形，aVL为上图aVR的图形。 心 电 图 基 线 不 稳第一段基线位置适宜，P-QRS-T波群的振幅如实地被记录。第二段由于基线位置偏高，R波的振幅没有被充分显示出来，所以较前者降低。S波加深，大概是热笔碰撞当杆后引起的弹性反跳所致。第三段基线位置偏低，致使S波的深度变浅，波形变钝。 停 机 伪 差系、导联的记录。、导联最后一个T波形状变窄，导联最后一个QRS-T波群都变窄，PR段缩短。这是由于变换导联时，机器在行将停止运转时走纸速度减慢所致。 走 纸 不 匀心电图机由于纸轴运转发生故障，走纸速度不均匀，可使波形发生改变。第3个搏动的T波窄而尖，第9个搏动的P波小而尖，与前一P波距离缩短，PR间期与QRS波群时间缩短，这些是由于走纸速度突然减慢所致。 心 电 图 导 联n将电极置于人体的任何两点并用导线与心电图机连接，这种连接方式和装置称为心电图导联 标 准 导 联 n亦称双极肢体导联，反映两个肢体之间的电位差。 n导联：左上肢电极与心电图机的正极端相连，右上肢电极与负极端相连 n导联：左下肢电极与心电图机的正极端相连，右上肢电极与负极端相连 n导联：将左下肢与心电图机的正极端相连，左上肢电极与负极端相联 图形 单 极 肢 体 导 联 n将心电图机的负极与中心电端连接，探查电极在连接在人体的左上肢，右上肢或左下肢，分别得出左上肢单极导联（VL）、右上肢单极导联（VR）和左下肢单极导联（VF） 加 压 单 极 肢 体 导 联n G old-berger提出在描记某一肢体的单极导联心电图时，将该肢体与中心电端相连接的高电阻断开，这样就可使心电图波形的振幅增加50，这种导联方式称为加压单极肢体导联 图形 胸 导 联 n亦是一种单极导联，把探查电极放置在胸前的一定部位，这就是单极胸导联 导 联 位 置n Vl：胸骨右缘第四肋间隙n V2：胸骨左缘第4肋间隙n V3：V2与V4的连线中点n V4：左锁骨中线第五肋间n V5：左腋前线与V4同一水平 n V6：左腋中线与V4同一水平锁骨中线腋前线腋中线V1 V2 V3 V4 V5 V6 图形