《骨髓细胞学》PPT课件

骨 髓 细 胞 学 检 查 (Bone Marrow Examination) 主要内容 血细胞的生成与发育 正常血细胞形态 常用血细胞化学染色 骨髓细胞检查的临床意义 常见血液病血细胞特征 急性白血病的 MICM分型 骨髓是主要造血组织（ hemopoietic tissue） 组成：网状组织 （ reticular tissue） 造血细胞 （ hemopoietic cell） 基质 ： 调节造血细胞的增殖与分化 观察骨髓中血细胞数量和质量的变化 对造血系统疾病的诊断和防治都有重要意义 一、血细胞生成与发育 T 淋巴系 祖细胞 B 淋巴系 祖细胞 淋巴系干细胞 红系 祖细胞 粒单系 祖细胞 嗜酸粒 祖细胞 嗜碱粒 祖细胞 巨核系 祖细胞 骨髓系干细胞 全能造血干细胞 T o t i p o t en t i a l H em a t o p o i et i c S t em C el l T H S C 造血干细胞的功能特点 造血组织中一类目前尚无形态学特征描述的功能细胞 具有高度自我更新的能力，可维持干细胞数量的恒定 具有多向分化的能力即可向各系列祖细胞分化，然后 增殖分化为各系血细胞 血细胞发生示意图 血细胞发育规律 (原 始 成 熟 ) 胞 体 大 小 (巨核细胞相反 ,早幼粒较原粒大 ) 胞 浆 量： 少 多 颜 色：深蓝 浅蓝 浅红 颗 粒：无 有 ,非特异性 特异性 胞 核 大 小 (巨核细胞相反 ) 核 型： 规则 不规则 染色质： 细致疏松 粗糙密集 紧缩成块 核 仁： 有 无 核 膜： 不明显 明显 核浆比 大 小 (巨核细胞相反 ) 二、正常血细胞形态 红细胞系 (Erythrocyte Series) 原 红 细 胞 (proerythroblast) 早 幼 红 细 胞 (Basophilic erythroblast) 中 幼 红 细 胞 (Polychromatic erythroblast) 晚 幼 红 细 胞 ( normoblast ) 粒细胞系 (Granulocytic Series) 原粒细胞 （ myeloblast） 早幼粒细胞 (promyelocyte) 中幼粒细胞 (myelocyte) 晚幼粒细胞 (metamyelocyte) 杆状核粒细胞 (stab granulocyte ) 分叶核粒细胞 (segmented granulocyte) 单核细胞系 (Monocytic Series) 原单核细胞 （ monoblast） 幼单核细胞 （ promonocyte） 单核细胞 （ monocyte） 淋巴细胞系 (Lymphocytic Series) 原淋巴细胞 (lymphoblast) 幼淋巴细胞 (prolymphocyte) 淋巴细胞 (lymphocyte) 巨核细胞系 (Megakaryocytic Series) 原巨核细胞 （ megakaryoblast） 幼巨核细胞 （ promegakaryocyte） 颗粒巨核细胞 （ granular megakaryocyte ） 产板巨核细胞 浆细胞系统 (Plasmacytic Series) 原浆细胞 (plasmablast) 幼浆细胞 (proplasmacyte ) 成熟浆细胞 (plasmacyte ) 三、常用血细胞化学染色 血细胞细胞化学染色 以细胞形态学为基础，根据化学反应原理，应用骨髓涂片进行固 定、化学反应显色、复染等程序染色，然后在光镜下观察细胞的 化学成分及其变化的一项检验方法 研究血细胞在生理或病理情况下细胞化学成分的变化，有助于了 解各种血细胞的化学组成及病理生理改变 可用作血细胞类型的鉴别，对某些血液病的诊断和鉴别诊断、疗 效观察、发病机制探讨等均有一定价值 血细胞化学染色 过氧化物酶 ( POX) 非特异性酯酶 ( NSE) 特异性酯酶 (SE) 糖原染色 (PAS) 中性粒细胞碱性磷酶 ( NAP) 过氧化物酶染色 (Peroxidase, POX) 原理： H2O2 H2O O2 POX 联苯胺 联苯胺兰亚硝基铁氰化钠 O2 暗蓝色的颗粒 结果：粒细胞 (+)；单核细胞 ( )； 淋巴细胞 ( ) 非特异性脂酶 (Non specific esterase, NSE) 原理： NSE水解 醋 酸 奈 酚 奈 酚 有色沉淀 重氮染料偶联 临床意义： 单核、巨噬 (+) 特异性脂酶 (Specific esterase, SE) 原理： SE水解 氯醋酸奈酚 AS D 奈酚 AS D 红色沉淀 重氮盐偶联 临床意义： 粒 (+)；单 ( )；淋 ( ) 中性粒细胞碱性磷酸酶染色 Neutrophil alkaline phosphatase, NAP 原理： NAP 甘油磷酸钠 磷酸钠甘油 PH 9.2 磷酸钠氯化钙 磷酸钙 硝酸钴 硫化钴 硫化铵 + 磷酸钴 NAP临床意义 慢粒 NAP，类白 NAP 急粒 NAP，急淋 NAP，急单正常或 再障 NAP， PNH者 NAP 化脓感染 NAP， 病毒感染 NAP 糖原染色 (Periodic-schiff. PAS) 原理： 过碘酸氧化 1.2乙二醇 双 醛 基 Schiff 红色品红 紫红色 临床意义： 淋粗颗粒或团块状阳性 粒弥漫均匀状阳性 单细颗粒状阳性 铁染色：普鲁士兰反应染色法 原理： 细胞 铁 + 亚铁氰化钾 亚铁氢化铁 呈兰色 临床意义： 缺铁性贫血时：细胞外、内铁依次减少 非缺铁性贫血时：细胞外铁多增高 铁粒幼贫血时：铁粒幼细胞增多，出现环铁 内 外 H+ 四、骨髓细胞学检查的临床意义 适 应 症 诊 断 造 血 系 统 疾 病 : 白 血 病 贫 血 血小板减少性紫癜 诊 断 非 造 血 系 统 疾 病： 原 虫 感 染 代 谢 性 疾 病 转 移 性 癌 肿 原因不明： 发热、恶病质 肝、脾、淋巴结肿大 血细胞单项或多项减少、增多 周围血出现幼稚细胞、可疑细胞 禁 忌 症 明显出血倾向：血友病 常用取材部位 髂后上棘（较易掌握分寸） 髂前上棘（较易掌握分寸） 胸骨（对向心性病变阳性率高，有一定危险性） 胫骨粗隆（ 2岁以下小儿） 骨髓涂片检查的内容和方法 低倍镜检查 （ 1) 观察涂片的取材、制片、染色是否满意 （ 2）确定骨髓增生程度 (Hypercellularity ) 有核细胞、巨核细胞 （ 3）注意有无特殊细胞 油镜检查 （ 1）有核细胞分类 ( Normal rate of cells in different series ) (Normal rate of cells at different stages ) （ 2）计算：粒 红 =24 1 （ 3）观察细胞形态有无异常 （ 4）观察有无特殊细胞及寄生虫 骨髓增生程度 增生程度 成熟 RBC/有核细胞 有核细胞 (%) 极度活跃 1 ： 1 50 明显活跃 10 ： 1 10 20 增生活跃 20 ： 1 2 7 增生减低 50 ： 1 1 极度减低 300 ： 1 30 M4 急粒 -单 粒单两系细胞均增生 M5 急单 原幼单 30% M6 红白血病 红系 50且形态异常 原粒 (原单 )早幼粒 (幼单 )30 M7 巨核白 原幼巨 30 急性淋巴细胞白血病 (L1) 急性淋巴细胞白血病 (L2) 急性淋巴细胞白血病 (L3) 急粒未分化型 (M1) 急粒部分分化型（ M2） 急性早幼粒细胞白血病（ M3） 急性粒单细胞白血病（ M4） 急性单核细胞白血病（ M5） 急性红白血病（ M6） 巨核细胞白血病（ M7） 几种常见急性白血病的细胞化学染色 染色方法 ALL AML （ M1、 M2） M3 M4 M5 M6 POX + + + + 视伴随的 血细胞而 异 NAP + 同上 NSE + + + + NaF 同上 PAS + + + + +（幼红 细胞） SE: 粒系阳性 单核阴性 阳性 : 急粒 急单 POX NSE: 粒系阴性 PAS 单核阳性 阴性 : 急淋 (NAP) 急粒 (NAP) 急单 粒 :片状 淋 :粗颗粒 ,环核 单 :细颗粒 免疫学分型 急淋 T细胞 -CD1、 CD2、 CD3、 CD4、 CD7、 CD8 B细胞 -CD9、 CD10、 CD19、 CD20 急髓 CD11b、 CD13、 CD14、 CD15、 CD33、 CD34 细胞免疫分型 （一）急性白血病细胞免疫表型特点 CD19 CD7 CD33 CD13 HLA DR TdT B ALL + + +/ T ALL + /+ + AML +/ + + + （二） ALL的免疫表型特点 系列 亚型 主要的蛋白标记 B系列 早期 B型 CD19+ CD10- 普通型 CD19+ CD10+ 前 B型 CD19+ 胞质 链 + T系列 B细胞型 CD19+ 胞膜 Ig+ 前 T型 CD7+ CD2- T细胞型 CD7+ CD2+ （三） AML的免疫学分类 亚型 典型的蛋白标记 M0 CD34、 33、 13 M1 CD34、 33、 13 M2 CD34、 33、 13、 15 M3 CD34、 13（ HLA Dr阴性） M4 CD34、 33、 15、 14、 13 M5 CD33、 15、 14、 13 M6 CD33 血型糖蛋白 M7 CD33、 41、 42、 61 IMMUNO-PHENOTYPING mab M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 CD13 + + + + + - - CD33 + + + + + - - CD14 - - + + - - CD41 - - - - - - + Ret - - - - - + - Lectoferrin - + - + - - - CD19 CD7 HLA-DR CD2 MPO T - + - + - B + - + - - 细胞遗传学和分子生物学分型 M2 t ( 8 ; 21 ) AML1-ETO M3 t ( 15 ; 17 ) PML-RAR CML t ( 9 ; 22 ) BCR-ABL MECHANISM Ph CHROMOSONE 9 ABL q34 q11 BCR 22 q34 Ph q11 t (9;22) (q34;q11) 复习题 骨髓检查应用于哪些方面？ 血细胞发育演变的一般规律？ 正常骨髓象各系统各阶段的正常范围？ 骨髓增生程度分级？ 粒红比例正常、增高、减少见于哪些情况？ 再障的骨髓象与血象特征？ 急性白血病的分类、骨髓象及血象特征？ 慢粒、慢淋骨髓象及血象特征？ 常用细胞化学染色的鉴别？