南京大学实验报告果蝇的单因子杂交实验

单因子分离规律验证实验目的1. 熟悉以果蝇为材料进行遗传学杂交实验的基本方法;2. 验证遗传的基本规律一一离规律预备知识遗传是自然界极其复杂的生命现象，只有通过少数有相对性状差异的类型之间进行杂交，并 分析这些性状在亲本和杂种子代中的表现，才易于在复杂的遗传现象中找到遗传的基本规律。分 离规律、自由组合规律、连锁规律等都是采用这种杂交实验的方法发现的。在果蝇杂交中，有相对性状的品系之间进行杂交，杂种F1表现为显性，杂种F1形成配子 时，带有显隐杂合等位基因的一对同源染色体对等分离，等位基因也随着分离，产生两种不同配子，因此，不论显性性状还是隐性性状都将在F2中按一定的比例在不同的个体上重新出现。实验原理本实验采用黑体与野生型的交配收集并统计F2代的方式通过验证其后代比例是否为野生:黑体=3:1的比例，来验证单因子的分离定律。实验材料野生型黑腹果蝇、黑体果蝇解剖镜、毛笔、麻醉瓶、白瓷板、标签、吸水纸、培养瓶（4瓶/人）、乙醚、75%乙醇实验步骤亲本果蝇的培养。处女蝇的收集：清除成虫后10小时内进行收集，收集的处女蝇分品系单独培养，如一次收集数量不够，可再作第二、第三次收集。PS：处女蝇的收集非常重要。果蝇交配一次后，雄蝇的精子会贮存在雌蝇体内陆续使雌蝇的卵 受精，如果杂交不用处女蝇，会造成杂交后代的实验结果不准确。选处女蝇分正交（+ +早/bbg）反交（bb$/+ ）两个杂交组合，分别置于新鲜培养瓶中，每瓶56对，贴上标签，注 明亲本类型，实验日期，姓名，学号等，然后置于22C 25C培养箱中培养。一周后，清空亲本果蝇。PS :清空亲本的操作是因为子一代是杂合子，其自交才是杂交实验，测出准确的分离比。 二周后，观察F1果蝇体色，看是否与预期结果相符。 取5-6对F1果蝇放入新鲜培养瓶中，每种组合放两瓶。 三周后，清空F1果蝇。PS :清空F1是因为之后的实验结果需要来自F2的计数，若F1混在其中会影响实验结果。亲本是野生型（显性纯合子），与子一代交配不算杂交，会影响实验结果。 四周后，F2成蝇长出，统计各类果蝇数，23天后再统计一次，统计过的果蝇处死。 在表格中记录实验结果。注意事项（也是影响实验成败的一些关键因素）1 ）进行杂交的亲本必须是纯种，自交不产生分离，这样的个体才能作为杂交的亲本。2 ）必须防止意外的杂交，雌蝇应选用孵化后12小时内的处女蝇。3）正确记录杂交子代每种类型的个体数，并且尽可能获得较大的杂交群体，以正确可靠地 反映出遗传规律。4）保持相对稳定的环境条件，使杂交性状的表现不致因不同的条件影响而改变。实验结果F1代：、观察结果统计日期、灰体（早）X黑体仃）黑体（早）x灰体仃）灰体数黑体数灰体数黑体数4月 日690770由F1代实验结果可知，在黑体与灰体性状中,灰体对黑体为显性。F2代:、逐察结果统计日期灰体（早）X黑体仃）黑体（早）x灰体仃）灰体数黑体数灰体数黑体数4月 日1264813549野生型（正、反交合并）突变型（正、反交合并）总计实际观察数（O）27497371预期数（E）278.2592.75371偏差（O-E ）-4.254.25(O-E0E0.060.200.26自由度df=2-1 = 1P=0.05时查表得X2为3.84，实验所求得的X2值与查表所得的X2相比较时，0.263.84，统计学 上认为在5%显著水准上差异不明显，故野生型与突变型F2代之比为3:1。孟德尔遗传定律得到 验证。