番茄红素论文

海南大学材料与化工学院 2009级应用化学系应用化学系研究实验I （天然方向）论文题目：番茄红素的提取、含量测定与性质检测指导老师：系另牡2009级应用化学组另牡第二组组 员：完成日期：2012年4月28日摘要番茄红素【Lycopene】是类胡萝卜素的一种，是一种很强的抗氧化剂，具 有极强的清除自由基的能力，对防治前列腺癌、肺癌、乳腺癌、子宫癌等有显著 效果，还有预防心脑血管疾病、提高免疫力、延缓衰老等功效，有植物黄金之称， 被誉为“21 世纪保健品的新宠”。通过本实验的提取与含量测定以及性质检测， 我们可以了解番茄红素中的基本成分和结构，以及其各种已被发现的功效，从而 熟悉从天然植物中提取分离色素的直接方法和操作技能，掌握天然色素的简单定 性和定量测量方法。本实验中，我组分析比较不同萃取剂对色素提取的影响，从 而确定提取的最好条件。关键词：番茄红素；提取；含量测定；性质检测AbstractLycopene is a kind of carotenoid, is a strong antioxidant, has a very strong free radical scavenging ability, have a significant effect on the prevention and treatment of prostate cancer, lung cancer, breast cancer, uterine cancer,there is the prevention of cardiovascular disease, enhance immunity, aging and other effects, have known of plant gold, known as the new darling of the 21st century health care products. In this study, the extraction and determination of the nature of detection, we can understand the basic composition and structure of lycopene, as well as its various efficacy have been found, and thus familiar with the direct method of separation of pigments extracted from natural plant and operational skills , master of simple qualitative and quantitative measurement of natural pigments. This experiment, the group analysis comparing different extractants for pigment extraction in order to determine the best conditions for extraction.Keywords: lycopene; extract; Determination of content; nature of the detection番茄红素的提取、含量测定与性质检测1 番茄红素及本实验概述1.1 番茄红素番茄红素属于类胡萝卜素，是由异戊二烯残基为单元组成的长链共轭双键结 构的多烯色素。大多类胡萝卜素可以看作番茄红素的衍生物其分子为 C H ,结 40 56 构如下：1.2 实验概述根据番茄红素不溶于水，难溶于甲醇、乙醇，可溶于石油醚、己烷、丙酮， 易溶于氯仿、苯等有机溶剂的性质，可利用亲油性有机溶剂来提取番茄红素。实 验采取直接打浆，直接打浆的方法提取量最大，提取速度快，提取次数少，提取 效高。2 提取与分离方法2.1 番茄红素的提取方法（溶剂浸提法）2.1.1料与试剂三氯甲烷、石油醚、环己烷、二氯甲烷、乙醇（规格都为 AR） 2.1.2 仪器 色谱仪、分光光度计、搅拌机、抽滤机、电子称、圆底烧瓶、三口瓶、锥形 瓶、烧杯、铁架台、玻璃棒、滴管。2.2 实验步骤回流搅拌法:称取 30g 新鲜番茄，捣碎，放入100 毫升三角瓶中，加入15 毫 升无水乙醇，装上搅拌装置和回流冷凝管，搅拌回流5 分钟，抽滤。残渣中加入 15毫升萃取剂，搅拌回流 5 分钟，抽滤。合并抽滤所得液至于暗处，待用。2.3 结果与分析讨论水浴搅拌过程中，随着搅拌的时间加长，以及水浴的温度升高，加入圆底烧 瓶内的无色萃取剂变成橙黄色，并且不断有气泡产生。不同萃取剂抽滤过程所得 液颜色呈浅黄色到橙红色，程度不等，所得液经过萃取剂润洗倒入分液漏斗，液 面呈现分层，上层为有机层，呈橙色（颜色有差别，有些萃取剂润洗时加入偏多， 该颜色仅作参考），下层为水层，静置一段时间后，颜色逐渐变浅，为淡黄色。 3 番茄红素的含量测定方法3.1原料与试剂正己烷、甲醇、无水乙醇、苏丹I号标准品：分析纯。3.2 仪器TU-1810 紫外可见分光光度计：北京普析通用仪器有限公司3.3 实验步骤由于番茄红素标准品价格昂贵，且见光易分解，而苏丹I与番茄红素有类似 的特征吸收峰，故用苏丹 I 代替番茄红素标准品绘制标准曲线。准确称量 25mg 苏丹I用提取溶剂溶解并定容至50mL，标准溶液浓度为0.5mg/mL。吸取0.26、 0.52、0.78、1.04、1.30mL分别注入50mL的容量瓶中，均用无水乙醇均定容至 刻度，充分混合，它们分别相当于0.5、1.0、1.5、2.0、2.5回mL的番茄红素， 以提取溶剂作为空白，在505nm下测定吸光值并绘制标准曲线。未知样品用提取液定容于500mL容量瓶中，摇匀静置待测。3.4结果与分析讨论3.4.1 标准样品据表格表1。表 1 标准样品数据序号编号类型-浓度Abs波长SDRSD%ug/mL505.00nm10标准样品0.00000.00010.00010.00000.000021标准样品0.50000.12100.12100.00000.000032标准样品1.00000.23720.23720.00000.000043标准样品1.50000.35620.35620.00000.000054标准样品2.00000.46720.46720.00000.000065标准样品2.50000.59300.59300.00000.00003.4.2 未知样品据表格表表2未知样品数据序号编号类型浓度波长AbsSDRSD%ug/mL1 YU5505.00 nm11未知样品2.20830.5215 0.52150.00000.000022未知样品2.21340.5227 0.52270.00000.00003.4.3 测量参数表格表 3。表 3 测量参数光度模式单波长法曲线评估无曲线方程Abs = f(C)方程次数次公式Abs = K1*(C) + K0校正方法浓度法K00.00134K10.23555RA20.9999重复测量无自动切换样品池否质量控制零点插入否3.4.4 扫描光谱图图 4。3.4.5 结果分析与讨论计算结果：未知样品的稀释液平均浓度 w=(2.2083+2.2134)/2=2.21085 ug/mL。未知样品中番茄红素的百分含量x=(2.21085x500)/(106x30) xlOO % =0.0037。采用番茄红素在石油醚或者正己烷溶液中的505nm的吸收峰而不用472nm 的吸收峰，避免了作胡萝卜素等成分对测定的影响，这对于未经结晶纯化的番茄 红素的测定非常重要；在溶剂中加入 2%的二氯甲烷，大大增加了溶剂对番茄红 素的溶解度，避免了由于首次稀释时番茄红素不能全部溶解所带来的测定误差， 这对番茄红素粗提取物或者纯化后番茄红素的测定极为有利；以番茄红素的消光 系数来计算其浓度，避免了番茄红素标准样品的制约。F检验、相关系数检验的 结果表明，该方法可靠性高，不受本底影响。4 番茄红素的性质测定4.1 pH对色素影响取色素浓缩液, 以乙酸乙酯稀释, 分装 8 个 25mL 的容量瓶中, 用盐酸和NaOH调pH值 测吸光度，结果见表5。表 5 pH 值对色素的影响pH 值135791113A0.4450.4430.4520.5730.5820.5840.592由表5 可见,色素在碱性条件下稳定, 适合于碱性环境中使用。4.2色素的热稳定性取色素浓缩液，以乙酸乙酯稀释，分装3个25mL的容量瓶中分别在30C、60工、90C3种不同温度随加热时间的增加，测其A值，观察变化，结果见表6。表 6 温度对色素的影响温度/C加热时间/min01020304050300.3720.3660.3610.3680.3520.352600.3720.3620.3590.3720.3630.354900.3720.3600.3420.3690.3650.352由表 6 可看出色素水溶液随温度变化很小， 说明热稳定性较好，在生产实践 中应用是很理想的。4.3色素光稳定性取2组色素稀释液，调节pH值为7,组置于日光灯光处，一组避光保存。 实验结果见表7。表 7 自然光对色素的影响时间/h0246A （光照）0.3600.3450.3320.321A （避光）0.3600.3540.3500.348由表7可看出番茄红素提取液在日光灯照射后有降低，说明色素对光敏感。